盐酸法脱酰胺结合酶解制备高携钙能力鸭蛋蛋清肽

为了利用食品工业下脚料咸鸭蛋蛋清,以鸭蛋蛋清蛋白为原料,通过盐酸脱酰胺、蛋白酶酶解后,得到具有高携钙能力的蛋清肽。结果显示,温度和盐酸浓度对脱酰胺度影响显著(P 0. 05),优化后的脱酰胺条件为:温度95℃,反应时间4 h,盐酸浓度0. 5 mol/L,在此条件下蛋清蛋白的脱酰胺度达72. 67%。从5种常用的商业用酶中筛选出木瓜蛋白酶为实验用酶,就可溶性钙结合量而言,酶解时间和料液比对酶解效果影响显著(P 0. 05),而酶的质量分数对酶解效果有极显著影响(P 0. 01)。经优化后,得到最佳酶解工艺为:温度50℃、pH 6. 5、料液比5%、酶的质量分数0. 3%、酶解时间3 h。在此条件下,得到的脱酰胺鸭蛋蛋清肽的可溶性钙结合量为14. 42 mg Ca/g肽。经过超滤分级后,发现分子质量较小的级分具有更强的钙结合能力。     

酶解絮凝耦联对咸蛋清脱盐及理化性质的影响

为明确酶解耦联絮凝处理对蛋清粉理化性质的影响,以咸鸭蛋蛋清酶解液为原料,结合絮凝脱盐得到蛋清粉,测定其理化性质。结果表明:壳聚糖絮凝脱盐最优工艺: pH=6、絮凝温度40 ℃、搅拌时间5.5 min、添加量0.27 g/L,所得蛋清粉含盐量1.44 g/100 g,脱盐率96%。当样品质量浓度达4 g/100 mL时,起泡性能提高2.95倍,泡沫稳定性88%,乳化活性0.62,乳化稳定性392,热稳定性提高,粒径变小。蛋清粉的氨基酸比例与鲜鸭蛋清的相似,无明显颜色。研究结果为提高咸鸭蛋清利用率提供了试验依据,有利于后续产品开发。     

大鲵多肽制备工艺的研究

以人工养殖大鲵为原料,酶解大鲵肌肉粉制备大鲵肽。结果表明,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、Flavourzyme、Protamex、Alcalase 5种酶,在各酶最适pH和温度下,按照加酶量2000U/g、料液比1:25对大鲵肌肉粉酶解5 h,以肽得率为指标,Protamex酶解产物的肽得率最高;采用L9(33)正交试验进行Protamex水解大鲵肌肉粉的水解工艺研究,获得最佳工艺参数为:温度50℃、酶解时间7 h、料液比1:35。     

复合动物蛋白酶水解蛋清蛋白最优工艺的研究

生物活性肽具有免疫调节、激素调节、酶抑制、抗菌等多种生理功能。文章研究以蛋清为原料,采用复合动物蛋白酶水解制备蛋清活性肽。通过单因素实验及L16(45)正交实验对制备蛋清活性肽的可控酶解条件进行了优化。实验结果表明,复合动物蛋白酶最适水解条件为:pH7.5,水解温度55℃,底物浓度3%,酶浓度4%,水解时间6h。     

双酶分步酶解谷朊粉制备短肽的研究

本文通过比较酶种类、加酶量、底物浓度、酶解温度、酶解时间对短肽得率和水解度的影响,采用二次回归正交旋转组合设计优化分步酶解制备谷朊粉短肽的最佳工艺。在复合蛋白酶(Protamex)水解谷朊粉91.50 min后加入中性蛋白酶(Neutrase)继续酶解121.50 min,Protamex添加量为665.00 U/g底物,Neutrase添加量为5 290.00 U/g底物,水解温度50℃,质量浓度12%,在此条件下,短肽得率为69.88%,水解度25.74%。经高效液相色谱测定,分子质量小于1 000 Da的水解产物占100%。采用Protamex与Neutrase分步酶解谷朊粉制备谷朊粉短肽,与现有制备谷朊粉短肽方法相比,避免了后续脱盐步骤,简化工艺,且具有制备条件温和,TCA-NSI和DH高,纯度高,分子量集中分布于1 000 Da以下等特点。     

金枪鱼红肉抗氧化肽制备及功能性肽饮料配方优化

目的 制备金枪鱼红肉抗氧化肽,并以此抗氧化肽为原料开发一款功能性肽饮料。方法 以金枪鱼红肉为原料,选用复合蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶5种蛋白酶对其进行水解,以水解度为指标筛选适合的蛋白酶,对水解度最高的酶解产物进行抗氧化活性分析,并使用还原糖、柠檬酸、乙基麦芽酚、β-环状糊精对金枪鱼酶解液进行风味调配,并通过正交优化其配方。结果 复合蛋白酶酶解物的水解度最高为16.73%,酶解液具有良好的抗氧化活性。通过正交实验获得的金枪鱼肽饮料最佳配方为还原糖添加量10%、柠檬酸添加量0.6%、β-环状糊精添加量0.5 mg/mL、乙基麦芽酚添加量0.06%,该饮料理化指标和微生物指标符合国家标准,饮料总氨基酸含量为5.264 g/100 g,必需氨基酸/总氨基酸和必需氨基酸/非必需氨基酸均接近蛋白质理想模式,抗氧化氨基酸占总氨基酸含量的50.03%,表明产品具有良好的抗氧化能力。结论 本研究通过复合蛋白酶酶解获得了金枪鱼红肉抗氧化肽,并以此为原料开发了一款抗氧化功能肽饮料,可为金枪鱼红肉功能肽的制备及功能肽产品的开发提供参考。     

脱盐咸蛋清蛋白质的单因素酶解条件研究

本试验以脱盐率达84.88 %的咸鸭蛋蛋清蛋白质为原料,通过对胰蛋白酶、复合风味蛋白酶及木瓜蛋白酶进行筛选,并在确定了以胰蛋白酶和复合风味蛋白酶作为水解酶的条件下,通过对酶解时间、复合风味蛋白酶的添加时间、底物浓度、不同酶用量复配、pH值和酶解温度等影响酶解效果的条件进行单因素试验,得到的结果是:利用胰蛋白酶和复合风味蛋白酶对脱盐咸蛋清蛋白质进行酶解时,应该在添加胰蛋白酶酶解处理1 h后,再添加复合风味蛋白酶,复合酶解效果最理想;其它理想的酶解条件为:底物浓度5.0 %,胰蛋白酶酶用量4000 U/g(sub),复合风味蛋白酶用量700 U/g(sub),pH值8.5,酶解温度50 ℃.     

不同蛋白酶酶解大豆蛋白的过程变化规律研究

选择6种蛋白酶(Alcalase、胰蛋白酶、Protex.7L、Protamex、Flavourzyme和木瓜蛋白酶),对酶解大豆蛋白制备大豆蛋白水解液的过程变化规律进行了研究.以水解度、可溶性蛋白得率、多肽得率、寡肽得率及游离氨基酸得率为指标对酶解过程进行分析.结果表明,Alcalase水解大豆蛋白的能力最强,生成的多肽、寡肽以及游离氨基酸的量最多;胰蛋白酶酶解产物的分子量偏大;Flavourzyme水解出的游离氨基酸含量占可溶性蛋白的比例较高.     

蛋清肽及肽钙配合物的制备

为获得高生物效价的补钙制剂及提高蛋清蛋白的附加值,首先对鸡蛋清进行酶法改性,筛选实验用酶,采用正交试验,分别对酶解条件及肽钙反应条件进行优化,并采用红外光谱法比较反应前后图谱的变化。结果表明：选择先碱性蛋白酶后中性蛋白酶进行双酶酶解,酶解条件为底物质量分数6%、碱性酶酶底比1:100、pH8.0、酶解时间3h;中性酶酶底比1:25、pH7.0、酶解时间3h。制备肽钙配合物最优反应条件为肽钙(CaCl2)质量比2.5:1、pH9.5、底物质量分数4%、温度55℃,在此条件下,可溶性钙含量为21.15mg/L,水解度为8.66%。制备蛋清肽时,使用双酶的水解效果优于单酶,蛋清肽与钙形成了双单齿配合物,其钙质量分数为8.75%。     

罗非鱼肉的酶法水解控制和复合研究

利用Flavourzyme、Protamex、Alcalase2 4L、Trypsin、Kojizyme、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和虾头蛋白酶对罗非鱼肉进行水解 ,以游离氨基酸态氮含量、TCA可溶性蛋白 (短肽 )含量和水解度为指标对酶解过程进行分析 ,研究了酶法水解的控制条件以及不同酶水解生成产物的特点 ,在此基础上选择控制酶解的方法以得到较高的TCA可溶性蛋白 (短肽 )含量 ,并进行了复合酶解的比较研究。     

鸡蛋清卵白蛋白酶解工艺优化及其结构性质

研究鸡蛋清卵白蛋白的酶解工艺及其结构性质,以水解度为指标,确定最佳酶源为碱性蛋白酶,其水解度为26.55%,显著优于其他蛋白酶（P＜0.05）。以碱性蛋白酶酶解鸡蛋清卵白蛋白,采用单因素和五元二次正交旋转试验研究酶解工艺;针对酶解前后卵白蛋白的功能特性进行分析,并采用紫外扫描、傅里叶红外变换光谱、差示扫描量热针对卵白蛋白及其酶解产物进行结构表征。结果发现,碱性蛋白酶酶解鸡蛋清卵白蛋白最佳工艺条件为反应温度52.5 ℃、反应时间5 h、pH 8.25、酶用量5 500 U/g、底物添加量5%,此条件下水解度为27.88%。酶解后产物表面巯基含量降低了3.6 mol/（L·g）,溶解度大幅度提高,起泡性降低了18.18%,泡沫稳定性降低了20.24%,乳化活性指数升高了13.56 m2/g,乳化稳定性提高了10.46%。同时,酶解后的卵白蛋白肽链发生了裂解,有序的二级结构被破坏,暴露出更多氨基酸残基,α-螺旋略有减少,β-转角相应增加,亲水基团也相应的增加。     

响应面法优化草鱼内脏蛋白质酶解工艺

为实现草鱼内脏蛋白质的高值化利用,本研究在单因素试验基础上应用响应面试验优化了木瓜蛋白酶水解脱脂草鱼内脏蛋白质的条件,响应面法分析得出4 个影响因素的最佳组合为加酶量33 015 U/g、酶解温度62.35 ℃、酶解时间5.37 h、酶解pH 7.9,此时水解度为44.48%,肽得率为19.68%,水解液鲜味较明显。     

几种酶对鸭蛋蛋清水解效果的比较研究

为筛选利用鸭蛋蛋清酶解制备功能性多肽的条件,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味酶4种酶对新鲜鸭蛋蛋清进行了水解。对每种酶分别进行单因素试验及正交试验,以水解度为指标确定每种酶的最佳水解条件。结果表明,在各自的最佳水解条件下,木瓜蛋白酶的水解效果最好,其最佳水解条件为pH为9.5,水解温度为50℃,底物浓度为25%,酶底比为8.0%,在此条件下水解度为29.01%。     

Alcalase酶解狼山鸡肉蛋白规律

以狼山鸡为实验材料,分析Alcalase酶解鸡肉蛋白规律。结果表明：酶解鸡肉蛋白的最适酶解温度为45 ℃、酶添加量为2.0 U/g、酶解时间为4 h;酶解过程中肌浆蛋白和肌原纤维蛋白有较多的氨基酸释放,并且可溶性氮也有大量的累积,酶解产物的分子质量主要集中在30～50 kD之间;在酶解产物中含量最高的氨基酸分别为天冬氨酸和谷氨酸,并且在酶解产物中亲水性氨基酸（hydrophilic amino acid,HLAA）与疏水性氨基酸（hydrophobicamino acid,HBAA）比值在1.41～1.52之间;通过对酶解产物游离氨基酸营养价值的分析,在不同酶解时间的酶解产物中含有丰富的必需氨基酸,该必需氨基酸指数与联合国粮食及农业组织/世界卫生组织（Food AgricultureOrganization/World Health Organization,FAO/WHO）推荐的成人理想氨基酸模式相类似。     

鸭肉蛋白源抗氧化肽的酶法制备工艺

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,采用响应曲面法（response surface methodology,RSM）优化胃蛋白酶制备鸭肉抗氧化肽的最佳酶解工艺条件。结果表明：以底物质量浓度、酶与底物质量比和酶解时间为自变量,以DPPH自由基清除率为响应值,得到的回归方程拟合度高（R2=0.995 7,R2Adj=0.992 7）。其中酶与底物质量比对DPPH自由基清除率的影响最大,其次是酶解时间,底物质量浓度的影响最小。胃蛋白酶的最优酶解工艺条件为底物质量浓度10.89 g/100 mL、酶与底物质量比0.013%、酶解时间3.54 h,此时DPPH自由基清除率的理论值可达84.23%,通过优化验证实验测得,在最优酶解条件下,DPPH自由基清除率的实际值为（83.57±0.20）%。     

鸭蛋清蛋白凝胶质构特性影响因素研究

以冻干鸭蛋清蛋白粉为原料,以凝胶硬度和弹性为指标,在探究鸭蛋清蛋白凝胶形成条件的基础上,考察金属离子对凝胶质构特性的影响。结果表明,鸭蛋清蛋白凝胶形成的最佳条件为：蛋清蛋白质量分数12.0%、pH 8.0、80 ℃加热40 min。不同浓度钠离子和钙离子对凝胶弹性的提高均有显著作用,高浓度钾离子作用不显著,镁离子、锌离子和亚铁离子的浓度较大时反而有抑制作用。镁离子对凝胶硬度增加有显著作用,钾离子无显著影响,钠离子和钙离子为先促进后稳定的趋势,锌离子和亚铁离子对凝胶硬度增加有抑制作用。     

花生肽钙复合物钙结合特性及氨基酸组成研究

利用花生分离蛋白通过酶解法制备花生肽,将花生肽脱酰胺处理,制备花生肽钙复合物。研究脱酰胺处理对花生肽钙结合量的影响,并分析花生肽钙复合物钙结合特性及氨基酸组成。结果表明:脱酰胺处理240 min后花生肽的钙结合量由82. 05 mg/g显著增加到135. 26 mg/g,表明脱酰胺处理可以显著提高花生肽的钙结合量;扫描电镜分析结果表明加钙反应后花生肽微观结构发生明显变化,由疏松片状结构聚合为颗粒状结构;傅里叶红外光谱分析结果表明花生肽肽链上的氨基及羧基是钙离子的主要结合位点,经脱酰胺处理羧基伸缩振动带进一步发生移动,表明脱酰胺后羧基上的氧原子与钙的配位作用得到增强,促进了花生肽钙结合量的提高;花生肽钙复合物中天冬氨酸含量为10. 76%,谷氨酸含量为23. 49%,表明酸性氨基酸含量是花生肽具有高钙结合量的重要因素。     

液压压榨澳洲坚果粕酶解制备多肽工艺优化

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,分析了其常规营养成分含量与氨基酸组成。采用碱性蛋白酶与中性蛋白酶催化酶解澳洲坚果粕蛋白制备多肽。以水解度为指标,利用单因素试验与正交试验考察了各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响。结果表明：液压压榨澳洲坚果粕中含有32.25%的蛋白质,17 种氨基酸,含量为25.05%。碱性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度影响的主次顺序为：酶解时间＞酶解温度＞加酶量＞酶解pH值＞底物质量浓度,最佳工艺条件为：酶解温度60 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度110 g/L、酶解pH 8.0、加酶量2 400 U/g,在此条件下水解度达到了22.83%。中性蛋白酶各因素影响水解度的主次顺序为：加酶量＞酶解时间＞底物质量浓度＞酶解温度＞酶解pH值,最佳工艺条件为酶解温度55 ℃、酶解时间3.5 h、底物质量浓度100 g/L、酶解pH 7.0、加酶量3 200 U/g,水解度达到了22.78%。碱性蛋白酶与中性蛋白酶各因素对澳洲坚果粕蛋白水解度的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）。在最佳工艺条件下,碱性蛋白酶酶解液压压榨澳洲坚果粕制备多肽的效果优于中性蛋白酶。     

Investigation of the peptides with calcium chelating capacity in hydrolysate derived from spent hen meat

Calcium peptide chelates are developed as efficient supplements for preventing calcium deficiency. Spent hen meat (SHM) contains a high percentage of proteins but is generally wasted due to the disadvantages such as hard texture. We chose the underutilized SHM to produce peptides to bind calcium by proteolysis and aimed to investigate chelation between calcium and peptides in hydrolysate for a sustainable purpose. The optimized proteolysis conditions calculated from the result of response surface methodology for two-step hydrolysis were 0.30% (w_enzyme/w_meat) for papain with a hydrolysis time of 3.5 h and 0.18% (w_enzyme/w_meat) for flavourzyme with a hydrolysis time of 2.8 h. The enzymatic hydrolysate (EH) showed a binding capacity of 63.8 ± 1.8 mg calcium/g protein. Ethanol separation for EH improved the capacity up to a higher value of 68.6 ± 0.6 mg calcium/g protein with a high association constant of 420 M⁻¹ (25°C) indicating high stability. The separated fraction with a higher amount of Glu, Asp, Lys, and Arg had higher calcium-binding capacity, which was related to the number of ─COOH and ─NH₂ groups in peptide side chains according to the result from amino acid analysis and Fourier transform infrared spectroscopy. Two-step enzymatic hydrolysis and ethanol separation were an efficient combination to produce peptide mixtures derived from SHM with high calcium-binding capacity. The high percentage of hydrophilic amino acids in the separated fraction was concluded to increase calcium-binding capacity. This work provides foundations for increasing spent hen utilization and developing calcium peptide chelates based on underutilized meat.     

自然乳酸发酵猪肉蛋白质降解与血管紧张素转化酶抑制肽的分离纯化

对猪肉发酵过程中蛋白质及其降解产物进行分析。结果表明：猪肉在发酵过程中蛋白氮含量随发酵时间延长呈下降趋势,非蛋白氮和氨态氮含量随发酵时间的延长而增加,多肽氮含量呈先升高后降低趋势,在发酵20 d时达最大值（0.227%）;发酵20 d酸肉多肽具有最强的体外血管紧张素转化酶（angiotensin I-converting enzyme,ACE）抑制活性,ACE抑制率达74.35%,IC50为2.75 mg/mL;采用超滤、D101型大孔树脂、葡聚糖凝胶对发酵20 d的酸肉多肽进行分离纯化,分离得到的F3组分有较强的ACE抑制活性,IC50为0.90 mg/mL,肽含量为86.54%,氨基酸组成分析显示水解后增加最多的氨基酸是脯氨酸（7.08 倍）和酪氨酸（3.26 倍）,谷氨酸、组氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸和丙氨酸占全部肽中氨基酸总量的49.09%,构成肽的疏水性氨基酸、芳香族氨基酸和支链氨基酸分别占39.35%、10.69%和13.65%;反相高效液相色谱显示F3组分主要由9 个峰组成,有待进一步的纯化。