RS4型抗性淀粉对齐口裂腹鱼生长、脂肪代谢及相关基因表达的影响

目的：研究RS4型抗性淀粉对齐口裂腹鱼生长性能、脂肪代谢以及相关基因表达量的影响。方法：将体质量75 g左右的齐口裂腹鱼随机分为RS4型抗性淀粉添加量为0%（对照组）、3.5%、7%、14%、28% 5 组。饲喂60 d,测定生长性能指标、血脂水平,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测各组肌肉及肝脏中过氧化物酶增殖体激活受体α（peroxisome proliferators activated receptors-alpha,PPARα）、脂肪酸结合蛋白（fatty acid-binding protein,FABP）mRNA表达水平。结果：添加RS4型抗性淀粉剂量为7%和14%时与对照组相比能显著增加齐口裂腹鱼的体质量、摄食率、特定生长率（P＜0.05）,添加剂量为28%时能够显著增加摄食率,但是对体质量和特定生长率没有显著的影响。添加剂量到达14%及以上时与对照组相比能够显著降低血脂水平及肌肉中心型脂肪酸结合蛋白（heart-fattyacid-binding protein,H-FABP mRNA）表达水平,且H-FABP与肌内脂肪呈正相关性。添加剂量达7%及以上时能够显著升高肌肉和肝脏中PPARα mRNA表达水平,降低肝脏中FABP mRNA表达水平。结论：适当的添加RS4型抗性淀粉能够促进齐口裂腹鱼的生长、并且调节脂质代谢相关基因的表达,降低了肠系脂肪及肌内脂肪沉积。     

氧化魔芋葡甘露聚糖对齐口裂腹鱼品质和脂肪代谢相关基因表达的影响

目的：研究日粮氧化魔芋葡甘露聚糖（oxidized konjac glucomannan,OKGM）对齐口裂腹鱼的品质和脂肪代谢相关基因表达的影响。方法：将初始体质量为80 g的齐口裂腹鱼随机分成5 组,分别饲喂质量分数为0（对照组）、0.4%、0.8%、1.6%、3.2% OKGM,养殖60 d后,考察OKGM对齐口裂腹鱼的品质和脂肪代谢相关基因表达的影响。结果：与对照组相比,日粮OKGM添加量为1.6%和3.2%能显著增加齐口裂腹鱼腹肌中蛋白质含量（P＜0.05）,添加量为0.8%时,会显著降低腹肌粗脂肪含量（P＜0.05）,OKGM添加量对齐口裂腹鱼肌肉中水分和粗灰分无显著影响（P＞0.05）;添加量对齐口裂腹鱼肌肉的pH值、失水率、羟脯氨酸含量、胶原蛋白含量的影响均无显著性差异（P＞0.05）;添加量为1.6%时能显著升高肌肉中过氧化物酶体增殖物激活受体-α（peroxisomeproliferator activated receptor-α,PPAR-α）mRNA 表达水平（P＜0.05）,添加量为0.8%能显著升高肝胰脏中PPAR-αmRNA表达水平（P＜0.05）;添加量为0.8%能极显著降低齐口裂腹鱼肌肉中脂肪酸结合蛋白（fatty acid bindingprotein,FABP）mRNA表达水平（P＜0.01）,添加量对肝胰脏中FABP mRNA表达水平的影响差异均不显著（P＞0.05）。结论：日粮中添加适量OKGM能改善齐口裂腹鱼的品质,调节脂肪代谢相关基因表达。     

两种多糖对齐口裂腹鱼生长、体组成及血清生化指标的影响

目的：研究水溶性氧化魔芋葡甘露聚糖（oxidized konjac glucomannan,OKGM）及水不溶性抗性淀粉（resistant starch,RS）RS4对齐口裂腹鱼生长性能、体组成及血清生化指标的影响。方法：选取平均体质量为（87.58±5.16） g的健康齐口裂腹鱼450 尾,随机分为5 组,每组3 个重复,每个重复30 尾。各组分别饲喂在基础饲料中添加0%（质量分数,下同）的OKGM及RS4型抗性淀粉（C组）、1.6%的OKGM（OKGM1.6组）、3.2%的OKGM（OKGM3.2组）、1.6%的RS4型抗性淀粉（RS41.6组）、3.2%的RS4型抗性淀粉（RS43.2组）的饲料,饲喂60 d后,测定齐口裂腹鱼的生长指标、体组成及血清生化指标。结果：与C组相比,OKGM1.6组齐口裂腹鱼的体质量增加率、特定生长率、蛋白质效率最高,饵料系数最低（P＜0.05）,RS41.6组和RS43.2组齐口裂腹鱼的体质量增加率、特定生长率、蛋白质效率变化不大,RS43.2组饵料系数降低（P＜0.05）;OKGM组肌肉粗蛋白含量增加（P＞0.05）,OKGM3.2组齐口裂腹鱼的肌肉和肝胰脏粗脂肪含量最低（P＜0.05）,鱼体肌肉水分、粗灰分含量不受OKGM及RS4添加量的影响（P＞0.05）;OKGM1.6组齐口裂腹鱼的血清甘油三酯水平显著降低（P＜0.05）,高密度脂蛋白胆固醇水平升高（P＜0.05）;RS43.2组齐口裂腹鱼的血清总胆固醇、甘油三酯水平均降低（P＜0.05）,高密度脂蛋白胆固醇含量升高（P＜0.05）。结论：当OKGM添加量为1.6%时,能改善齐口裂腹鱼生长状况,提高蛋白质效率,降低肌肉及肝胰脏粗脂肪含量,调节血脂水平。     

日粮氧化魔芋葡甘露聚糖对齐口裂腹鱼生长、血脂和脂肪代谢酶活性的影响

目的：研究日粮氧化魔芋葡甘露聚糖（oxidized konjac glucomannan,OKGM）对齐口裂腹鱼生长、血脂以及脂肪代谢酶活性的影响。方法：选用初始体质量为（79.54±8.12）g的齐口裂腹鱼300 尾,随机分成5 组,每组3 个重复,每重复20 尾鱼,分别饲喂OKGM添加量为0（对照组D1）、4、8、16、32 g/kg,养殖60 d后,考察OKGM对齐口裂腹鱼生长性能、血脂水平及脂肪代谢酶活性的影响。结果：与对照组D1相比,日粮添加8～16 g/kgOKGM可显著提高鱼体增重率（P＜0.05）、特定生长率（P＜0.05）,添加16 g/kg OKGM能够显著提高蛋白质效率（P＜0.05）,降低饵料系数（P＜0.05）,会显著降低肌肉水分含量（P＜0.05）,添加8 g/kg OKGM可显著降低肌肉和肝胰脏脂肪含量（P＜0.05）,添加4～16 g/kg OKGM能够显著提高鱼体肠脂比（P＜0.05）;在血脂方面,日粮中OKGM添加量对齐口裂腹鱼总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白没有明显的剂量效应,添加4～8 g/kg OKGM能够显著降低血清中游离脂肪酸含量（P＜0.05）;在脂肪代谢酶方面,添加16 g/kg OKGM显著提高脂蛋白酯酶、肝脂酶和总脂酶活性（P＜0.05）,在肠道消化酶方面,添加8～32 g/kg OKGM能显著提高齐口裂腹鱼肠道脂肪酶活性（P＜0.05）。结论：日粮中添加适量OKGM能改善齐口裂腹鱼生长性能,提高饲料利用率,降低肌肉脂肪含量,提高脂肪代谢酶和脂肪酶活性。建议齐口裂腹鱼饲料中OKGM添加量为4～16 g/kg。     

齐口裂腹鱼生长、肌肉品质和脂蛋白脂酶及脂肪酸合成酶基因表达的研究

目的：研究不同生长阶段齐口裂腹鱼的生长状况、肌肉品质和脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）及脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）的基因表达。方法：分别选取齐口裂腹鱼幼鱼（137.8±1.7） g（S组）、亚成鱼（312.4±11.8） g（M组）、成鱼（500.9±31.4） g（L组）,测定形体指标、脏器指数和肌肉主要营养成分含量,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定LPL及FAS的基因表达水平。结果：与S组相比,M组、L组肥满度、肝体比、肠脂比、水分含量均有所降低（P＜0.05）,粗蛋白、粗灰分含量变化不大;L组肌间脂肪（intermuscular fat,IMF）含量最低（P＜0.05）;而S组、M组与L组肝胰脏中LPL mRNA及FAS mRNA表达水平均基本高于肌肉（P＜0.05）,且L组肝胰脏中LPL mRNA及FAS mRNA表达水平均最低（P＜0.05）,M组肌肉中LPL mRNA及FAS mRNA表达水平最高（P＜0.05）。结论：齐口裂腹鱼的肌肉主要营养成分含量在成鱼阶段有所降低,且IMF含量与LPL mRNA及FAS mRNA表达水平呈一定正相关。     

柠檬酸甘薯淀粉酯对齐口裂腹鱼肉品质的影响

目的：研究柠檬酸甘薯淀粉酯（citric acid-modified sweet potato starch,CSPS）对齐口裂腹鱼肉品质的影响。方法：将240 条体质量75 g左右的齐口裂腹鱼随机分为5 组,每组48 条。饲喂60 d,随机取每个池中8 条鱼测定齐口裂腹鱼鱼肉的品质指标。结果：齐口裂腹鱼饲料中CSPS添加量为14%和28%时能显著降低肌肉中脂肪含量（P＜0.05）;CSPS添加量为3.5%时能显著提高肌肉pH值,添加量为14%时可显著降低肌肉pH值（P＜0.05）;齐口裂腹鱼饲料中添加CSPS对鱼肌肉的蛋白质、灰分、水分、羟脯氨酸和胶原蛋白含量及失水率无显著影响（P＞0.05）;饲料中CSPS添加量为7%和14%时能够显著提高齐口裂腹鱼肌肉的硬度（P＜0.05）;CSPS添加量为28%时能够显著增加肌肉的黏附性（P＜0.05）;与对照组相比,CSPS添加量为14%时能够显著提高肌肉的胶着度（P＜0.05）;CSPS添加量为7%和14%能显著提高肌肉的咀嚼性（P＜0.05）;CSPS对齐口裂腹鱼肌肉的弹性、凝聚性和回复性无显著影响（P＞0.05）。结论：饲料中添加14%的CSPS能够降低齐口裂腹鱼肌肉中脂肪含量,提高肌肉的硬度、黏附性、胶着度和咀嚼性和肉质紧实度,改善鱼肉品质。     

余甘子对胰岛素抵抗大鼠过氧化物酶体增生物激活受体γ表达的影响

目的：观察余甘子提取物对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)mRNA 表达的影响。方法：Wistar 大鼠30 只,随机分为正常对照组10 只,给予基础饲料;模型组20 只,给予高脂饲料。模型组大鼠给予高脂喂养6w 后,随机分为两个亚组：胰岛抵抗组(继续高脂饮食)和余甘子组(给予高脂饲料同时进行2ml 剂量3.5g/kg bw 余甘子提取物灌胃)。干预6w 后,利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)分别检测三组大鼠脂肪中PPAR γ表达的差异。结果：高脂饮食成功诱导了胰岛素抵抗,余甘子提取物显著改善了胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠的脂肪中PPARγ表达稍高于对照组,但显著低于余甘子组。结论：余甘子提取物明显改善胰岛素抵抗,可能与其提高PPARγmRNA 表达有关。     

两种多糖对齐口裂腹鱼免疫性能的影响

探讨OKGM、OKGMS两种多糖对齐口裂腹鱼免疫性能的影响,将齐口裂腹鱼随机分为7组,两种多糖添加剂量分别为质量分数0.4%、0.8%、1.6%,饲喂60 d,测定齐口裂腹鱼血清免疫及抗氧化指标,并采用RT-PCR技术检测组织MyD88、IRF7基因相对表达量。结果表明,OKGMS1.6组能显著提高齐口裂腹鱼血清IgM活性、ACH50含量;OKGMS0.4、OKGMS0.8、OKGM0.4、OKGM0.8组均能显著降低血清MDA的含量;OKGMS与OKGM均能提高血清SOD活性;OKGMS能上调齐口裂腹鱼肠道MyD88基因mRNA相对表达量及肝脏、脾脏、中肾IRF7基因mRNA相对表达量;OKGM能上调肠道、头肾、中肾MyD88基因mRNA相对表达量及肠道、肝脏、脾脏、中肾IRF7基因mRNA相对表达量。结果表明：适量添加OKGM、OKGMS能提高齐口裂腹鱼抗氧化活性及免疫性能。     

齐口裂腹鱼肌肉品质及其PPARγ、PGC-1α相对表达量分析

通过对不同质量的齐口裂腹鱼肌肉品质的相关指标进行分析,并采用实时荧光定量PCR技术对其组织中过氧化物酶体增殖物激活受体辅激活子1α(PGC-1α)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的相对表达量开展研究。结果表明:不同质量的齐口裂腹鱼肌肉中蛋白质、粗脂肪含量存在显著性差异(p0.05),其水分、灰分含量差异不显著(p0.05);肌肉的pH没有差异,大鱼的失水率高于中鱼与小鱼,小鱼与中鱼肌肉中氨基酸总量、必需氨基酸和鲜味氨基酸的含量均高于大鱼;中、小鱼的肌肉品质高于大鱼。在不同质量齐口裂腹鱼的头肾、肝脏、肌肉中,PPARγ的相对表达量均存在显著性差异(p0.05);PGC-1α在头肾中相对表达量存在显著性差异(p0.05),在肝脏、肌肉中差异不显著(p0.05);PPARγ、PGC-1α在组织中的相对表达量与肌肉中粗脂肪含量有一定关联。     

海参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制的研究

目的：研究海参对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法： 采用一次性腹腔注射STZ的方法建立糖尿病大鼠模型,在长期高血糖环境下造成对肾脏的损伤。灌胃海参(800mg/(kg·d)8周后,分别检测大鼠空腹血糖值、尿糖含量、肾脏指数和尿总蛋白、微量白蛋白(mAlb)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)排泄率;采用RT-PCR方法测定大鼠肾脏中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF) mRNA的表达水平。结果：海参能显著降低STZ诱导的糖尿病大鼠空腹血糖值、尿糖含量、肾脏指数以及尿总蛋白、mAlb和NAG排泄率(P＜0.05或P＜0.01),并且能显著上调糖尿病大鼠PPARγmRNA,下调TGF-β1和CTGF(P＜0.05) mRNA的表达。结论：海参对糖尿病大鼠具有良好的降血糖及改善肾脏滤过功能的作用,其机制可能与促进肾脏中PPARγmRNA的表达,抑制TGF-β1和CTGF mRNA的表达有关,最终实现对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

柠檬酸甘薯淀粉对齐口裂腹鱼生长及肠道菌群的影响

目的：探讨饲料中添加柠檬酸甘薯淀粉（citrate sweet potato starch,CSPS）对齐口裂腹鱼生长及肠道微环境的影响。方法：选用平均体质量为（75.47±5.43） g的齐口裂腹鱼共180 尾,随机分为5 组,每组3 个重复,每个重复12 尾鱼。对照组饲喂基础日粮,实验组分别饲喂添加3.5%、7%、14%及28%的CSPS的日粮,连续饲喂60 d后解剖齐口裂腹鱼,称质量后计算饵料系数、摄食率、特定生长率,取出肠管测定肠道黏膜皱褶高度,并对肠道菌群进行聚合酶链式反应变性梯度凝胶电泳（polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE）分析。结果：7%及14%的剂量组的末质量、摄食率、特定生长率显著高于对照组（P＜0.05）;14%、28%剂量组前肠黏膜皱褶高度显著低于对照组（P＜0.05）。在中肠,对照组中肠道菌群与3.5%剂量组相似度最高。在前后肠,对照组与其他各剂量组肠道菌群相似度均较低,但50.0≤q＜75.0（中度相似）。结论：低剂量（7%）的CSPS能够促进生长,而高剂量（28%）会抑制生长,CSPS能影响齐口裂腹鱼的肠道菌群。     

异牛肝菌素通过阻断SM22α泛素化降解抑制血管平滑肌细胞表型转化

从黄乳粘盖牛肝菌(Suillus flavus)中分离得到的异牛肝菌素(iso-suillin)具有显著的抗肿瘤活性,但其在心血管系统的功效尚不明确。本研究用不同浓度的异牛肝菌素预处理原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)24 h或48 h后,再采用血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)-BB处理细胞,细胞计数法检测VSMC增殖活性;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot分析检测蛋白表达情况;免疫沉淀检测平滑肌22 alpha(smooth muscle 22 alpha,SM22α)磷酸化和泛素化水平。结果显示,异牛肝菌素显著抑制PDGF-BB引发的VSMC增殖;上调分化标志蛋白SM22α表达,下调增殖相关蛋白PCNA表达;抑制SM22α磷酸化及其泛素化降解,且该过程可能与其阻断蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)δ的活性有关。通过以上结果推测,异牛肝菌素通过抑制PKCδ的活性,降低SM22α磷酸化水平,阻止SM22α泛素化降解,进而抑制VSMC表型转化,发挥血管保护的功能。     

具有α-淀粉酶抑制活性的白芸豆多肽的制备及其热稳定性研究

以白芸豆为原料,酶法制备多肽。以α-淀粉酶抑制率为指标,比较酸性、中性和碱性蛋白酶的酶解效果。结果表明:3.350酸性蛋白酶的酶解效果最好。通过加酶量、酶解p H值、酶解温度和酶解时间的单因素试验和正交试验,得到制备白芸豆多肽的最佳工艺条件为:加酶量3 200 U/g、酶解p H 2.2、酶解温度55℃、酶解时间60 min,此条件下白芸豆多肽α-淀粉酶抑制率为80.82%。热稳定性研究表明,白芸豆多肽的热稳定性高于α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor,α-AI)粗提液,该多肽在85、90℃条件下的α-淀粉酶抑制活性能保持更长时间。凝胶电泳分析表明白芸豆多肽的分子质量为7.53~9.09 ku。     

α-1,3-葡聚糖的精制、鉴定及其系列寡糖的制备与序列表征

目的:提取α-1,3-葡聚糖并获得系列α-1,3-葡聚寡糖。方法:以香菇子实体粗提粉为原材料,依次经生理盐水(0.9%Na Cl)和水溶解提取,然后用质量分数5%Na OH和质量分数0.05%Na BH4溶解,调节p H值至中性再分离提取的分级沉淀策略,获得了依次命名为LFⅠ、LFⅡ、LFⅣ、PⅢ和PⅣ的5个不同组分,再利用红外光谱(infrared spectroscopy,IR)和核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)对PⅣ结构进行鉴定,然后利用酸解法对PⅣ进行寡聚化,并利用常压色谱Bio-Gel P4柱进行分离,同时对每个组分利用基质辅助激光解吸-电离质谱(matrix assisted laser desorption ionization mass spectrometry,MALDI-MS)或电喷雾离子化质谱法(electrospray ionization mass spectrometry,ESI-MS)进行表征。结果:结构分析表明PⅣ为线性α-1,3-葡聚糖,10 mmol/L三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)中,100℃处理2 h为较佳的水解条件,经过Bio-Gel P4柱分离获得的各个组分被依次鉴定为α-1,3-2~α-1,3-13糖。结论:实现α-1,3-葡聚糖的分级精制与结构鉴定,成功获得结构确定的系列α-1,3-葡聚寡糖。