玉米中转基因成分的定性PCR检测

利用改良CTAB法提取玉米产品的基因组DNA,应用PCR检测方法,并以玉米特异性内源基因IVR为内参,花椰菜花叶病毒35S启动子（CaMV35S启动子）、农杆菌胭脂碱合成酶终止子（NOS终止子）为靶基因检测玉米中是否存在转基因成分。实验结果表明,有些玉米样品中存在转基因成分,表明市场上存在未经标识的转基因玉米及其加工品。     

多重PCR方法检测食品中转基因成分

根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子（CaMV35S）和根癌农杆菌终止子（NOS）的序列，设计合成了两对不同的引种和相对应的两种荧光双链探针（FDCP），分别建立了多重PCR，应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分35S启动子和NOS终止子的方法，并利用该套方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测，发现13份样品有6份检出35S启动子、NOS终止子，其余7份样品的检测结果为阴性，表明作者建立的多重PCR方法能有效检测出35S和NOS成分，其中多重PCR法具有灵敏度高、特异性好的特点，多重荧光PCR法则更为简便、快速、准确。     

玉米转基因成分的非同源模板竞争定量PCR检测

建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统．竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备．实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增，回收预期DNA片段并将其构建到T-easy载体上．通过调整非同源模板浓度使竞争物PCR产物亮度与1％GMO玉米的亮度相同，从而确定转基因玉米的检出限为1％．然后以确定的内标物浓度与不同含量的GMO玉米样品进行竞争定量PCR反应，以此进一步确定样品中GMO的含量范围．     

玉米转基因成分的非同源模板竞争定量PCR检测

建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统.竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备.实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增,回收预期DNA片段并将其构建到T-easy载体上.通过调整非同源模板浓度使竞争物PCR产物亮度与1%GMO玉米的亮度相同,从而确定转基因玉米的检出限为1%.然后以确定的内标物浓度与不同含量的GMO玉米样品进行竞争定量PCR反应,以此进一步确定样品中GMO的含量范围.     

转基因食品的快速PCR鉴定

用十六烷基-二甲基-乙基-溴化铵(CTAB)法快速高效地从样品中提取了可供分析的基因组DNA，经PCR扩增，鉴定了含有35S启动子和NOS终止子的转基因样品，该方法的灵敏度可达0．1％，并且具有很好的稳定性。     

SEC2在莱茵衣藻中的表达及免疫学活性分析

通过将金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)肠毒素C2(staphylococcal entero-toxin C2,SEC2)基因进行定点突变,获得具有超抗原性的减毒C2基因序列sec2t,把该基因插入含Hsp 70A-RBCS2启动子和RBCS2终止子的pH124载体上,构建莱茵衣藻表达载体pH124sec2t,采用"珠磨法"将该载体转入细胞壁缺陷型莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)CC-849中,经含10μg/mL Zeomy-cin的抗性平板筛选、PCR及RT-PCR分析,获得转基因莱茵衣藻Tran-sec2t.Southern blot和Western blot分析表明,sec2t基因已整合入莱茵衣藻核基因组中,且能表达相对分子质量为26 kDa(1 Da=1 u)的目的蛋白.分别以CC-849和Tran-sec2t两种藻细胞培养液(每毫升106个细胞)喂食Balb/c小鼠,并用流式细胞仪检测分析小鼠CD3+、CD4+和CD8+细胞,结果发现,可表达减毒超抗原SEC2T的转基因莱茵衣藻Tran-sec2t能刺激小鼠T淋巴细胞的产生;与对照相比,CD4+与CD8+细胞数目比值有所降低,但CD3+和CD8+细胞有明显提高.研究结果有助于利用转基因藻生产抗肿瘤制剂和动物免疫增强剂.     

过量表达拟南芥高亲和性磷酸载体蛋白基因提高转基因烟草对磷的吸收（英文）

磷是所有生物生长必需的大量营养元素.酸性土壤占世界可耕地面积30%以上,在酸性土壤中,大部分磷以不溶性形式存在,很难被植物吸收和利用.为了增加植物对酸性土壤不溶性磷的吸收能力,本研究利用CaMV35S启动子在转基因烟草中过量表达拟南芥高亲和性磷酸载体蛋白（AtPTI）基因.研究结果表明在酸性土壤中生长时,转基因烟草叶片磷的含量及其生物量均高于不转基因的野生型（WT）植物（对照）.转基因植物可以正常生长、开花和结实,而WT植物的开花时间提前且不能正常结果.这些结果证实在植物中过量表达AtPTI基因是提高植物吸收酸性土壤中磷及其产量的一个有效策略.     

外源DNA通过花粉管通道法导人玉米的研究

利用花粉管通道技术，以抗虫的胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)为供体，以8个品种玉米为受体，进行外源DNA直接导入，获得了大量的转基因植株，通过对抗性植株的初步分子鉴定，证实外源CpTI基因存在并整合入玉米基因组中。     

外源DNA通过花粉管通道法导入玉米的研究

利用花粉管通道技术,以抗虫的胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)为供体,以8个品种玉米为受体,进行外源DNA直接导入,获得了大量的转基因植株,通过对抗性植株的初步分子鉴定,证实外源CpTI基因存在并整合入玉米基因组中。     

转基因粮食作物的研究进展与PCR法检测

介绍了基因枪法、农杆菌介导法和花粉管通道法等转基因方法。对小麦、水稻、大豆、玉米4种粮食作物的转基因技术研究进展,以及PCR技术对转基因粮食的检测进展进行了综述,