L-阿拉伯糖异构酶粗酶性质及其生物合成塔格糖的研究

从筛选的一株乳酸菌中得到L-阿拉伯糖异构酶,该酶能把D-半乳糖异构成D-塔格糖。L-阿拉伯糖异构酶粗酶的最适反应温度和pH分别为60℃和7.0;在pH4.0～8.0的范围内和30～60℃下具有较好的稳定性。Mn2 、Li 、Zn2 、Cu2 等离子对该酶有激活作用,而Ba2 、Mg2 、Fe2 几乎完全抑制酶活。用L-阿拉伯糖异构酶的粗酶、10%和40%的湿重细胞转化生成塔格糖,最适半乳糖浓度0.83mol/L,40%的湿重细胞反应72h后,转化率达到38.9%。     

海藻酸钠固定化亚油酸异构酶及其酶学性质初步研究

以海藻酸钠为载体固定化亚油酸异构酶。研究了海藻酸钠浓度、酶用量、CaC12浓度、固定化时间对固定化过程的影响。结果表明,最佳固定化工艺是：以4%的海藻酸钠为载体、应用海藻酸钠溶液用量与酶液量的体积比3：1、3%的CaC12固定化5h。固定化酶的最适pH值为7.0,与游离酶相比,提高了0.5个pH单位;固定化酶和游离酶最适温度分别为35℃和30℃;固定化酶比游离酶具有更好的温度和pH值适应性。     

葡糖异构酶菌株筛选及固定化研究

目的筛选高产葡糖异构酶的嗜热放线菌优良菌种,并将其固定化。方法分离、诱变育种筛选出高产葡糖异构酶放线菌优良菌种,用离子交换树脂作载体进行葡糖异构酶固定化的研究。结果筛选出葡糖异构酶放线菌高产优良菌种,用离子交换树脂进行葡糖异构酶的固定化,其固定化酶活性为18000～20000U/g(干)。结论筛选到葡糖异构酶放线菌高产优良菌种,用离子交换树脂作载体进行固定化,所得到的葡糖异构酶酶活性较高。     

产亚油酸异构酶的乳酸菌的筛选

对16株乳酸菌产亚油酸异构酶(linoleate isomerase)的能力进行分析,紫外分光光度法和气相色谱法分析发酵液中的共轭亚油酸(CLA),筛选出产亚油酸异构酶的乳酸菌,PCR扩增筛选出菌株的亚油酸异构酶基因,并对其进行序列分析.结果显示,通过紫外分光光度法检测16株乳酸菌中有9株菌可将亚油酸(LA)转化为共轭亚油酸(CLA);气相检测6株乳酸菌的发酵液中存在cis-9,trans-11 CLA和trans-10,cis-12 CLA两种同分异构体(各占CLA总产量的50％);成功扩增出鼠李糖乳杆菌与亚油酸异构酶密切相关的肌球蛋白交叉反应抗原(MCRA)基因片段.     

超声波破碎提取D-甘露糖异构酶条件的研究

利用超声波对假单胞菌属No.2120(Pseudomonas SP.No.2120)细胞进行破碎,研究了利用超声波法破碎时输出功率(W)、每次辐射时间(s)、工作总时间(min)、每克细胞的缓冲液加入量(mL/g)等因素对D-甘露糖异构酶酶活的影响.通过单因素实验和正交实验得出超声波破碎的最佳工艺条件为:输出功率450W,每次辐射时间5s(间歇时间5s),工作总时间5.5min,每克细胞的缓冲液加入量为5mL/g.     

嗜酸乳杆菌亚酸异构酶提取方式的研究

共轭亚油酸是一种具有多种生理活性的天然脂肪酸,亚油酸异构酶能特异性地转化合成CLA,克服了化学合成法的诸多缺点,但系统全面地研究胞内亚油酸异构酶破壁提取方式的很少.通过正交试验、方差分析等方法研究了嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的提取方式,确定了超声波法、化学法和溶茵酶法等的最佳提取条件和各影响因素的显著性,并对3种方法及复合法进行了比较.结果表明,溶茵酶法 超声波法破壁提取亚油酸异构酶效果最佳,酶活力最高可达82.6U.     

利用木质纤维素生产燃料酒精的研究进展

利用木质纤维素生产燃料酒精可改善能源保障，实现能源供应的可持续发展，同时拉动农业及其他相关行业的经济发展。木质纤维素中含有丰富的可发酵生成乙醇的纤维素和半纤维素，利用产纤维素酶的微生物或纤维素酶（Cx酶、C1酶、β0葡萄糖苷酶）将纤维素水解成可发酵性糖，再通过酵母发酵生成乙醇。常用菌株有热纤梭菌（Clostridium thermocellum)，能分解纤维素，但乙醇产率较低（50%)；热硫化氢梭菌（Clostridium thermohydrosulphaircum)，不能利用纤维素，但乙醇产率相当高，将两株菌混合发酵，产率可达70％。发酵方法有直接发酵法、间接发酵法、混合菌种发酵法，同时糖化发酵法（Simultaneous saccharification and Fermentation)和非等温同时糖化发酵法（Nonisothermal simultaneous saccharification and Fermentation)以及固定化细胞发酵法等。（庞晓）     

葡萄糖淀粉酶和异构酶共固定化的改进

Ｔａｋｅｄａ和Ｈｉｚｕｋｕｒｉ（淀粉科学，３６，１６９～１７６（１９８９）曾报道过，葡萄糖淀粉酶（ＧＡ）与菌丝体葡萄糖异构酶（ＧＩ）共同固定化以改善异构糖浆的产率，共同固定化酶是在ＧＡ／ＧＩ＝１：１（Ｗ／Ｗ）的高比率条件下，将适当纯化了ＧＡ与ＧＩ相互变联制备而成的，使用该酶，在５５℃，ｐＨ７．３空间速率（ＳＶ），０．３ｈ＾－１的最适条件下，由３０％的液化淀粉（平均聚合度（Ｄ．ｐ．）＝３．８）连续生     

磁性壳聚糖复合微球固定化葡萄糖异构酶制备及性能研究

通过化学共沉淀法合成纳米级Fe3O4粒子,并将其作为磁核,采用乳化交联法制备磁性壳聚糖复合微球,用SEM、FT-IR及激光粒度仪对微球结构进行表征。以磁性复合微球为载体,对葡萄糖异构酶进行固定化,并对固定化酶的参数、性质以及动力学参数进行研究。试验结果表明:磁性复合微球呈圆球形,具有较好的磁性。在加酶量12 mg/mL、戊二醛体积分数2%、交联时间2 h、振荡时间6 h条件下可以得到较佳的固定化效果,其酶活回收率达84.7%。对固定化酶性质的测定结果显示,最适Mg2+浓度0.01 mol/L,最适Co2+浓度0.003 mol/L,最适pH 7.2,最适温度75℃。通过计算其半衰期为40 d。对动力学参数的测定结果是:固定化酶的米氏常数为9.720,游离酶的米氏常数为8.190。     

共轭亚油酸生物合成的研究

共轭亚油酸是80年代末才被发现的一种具有多种生理功能的天然不饱和脂肪酸，具有抗癌、抗动脉粥样硬化、减肥、促进生长、缓和免疫反应副作用等许多重要生理功能，在医药、食品、保健品、化妆品等中具有广阔的应用前景。目前，工业化生产共轭亚油酸的方法是碱并构化法，但共轭亚油酸的生物合成法是未来的发展趋势。本文对近年来共轭亚油酸生物合成方面的研究进展进行了综述。     

固定化葡萄糖异构酶活化条件对其酶活的影响

固定化葡萄糖异构酶在使用前需先进行活化,从而使酶发挥其最佳催化功效。本文从糖液浓度、温度、pH、活化时间和金属离子五个方面研究了活化条件对GENSWEETTMIGI-SA固定化葡萄糖异构酶酶活的影响。该酶的最适活化条件为:葡萄糖液浓度60%、温度55℃、pH7.5、时间4h。经此条件活化之后,其酶活达815U/g,与常规活化条件相比,酶活提高了40%以上。固定化葡萄糖异构酶活化时不宜加入Mg2+、Co2+、Mn2+和Zn2+。     

木糖异构酶酿酒酵母孢子“微胶囊”的构建及酶学性质分析

将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus HB8的木糖异构酶(XI)基因xyl A与SPR1信号肽序列(ss)融合后连接到p RS424-TEFpr表达载体上,将重组质粒p RS424-TEFpr-ss-xyl A转化酿酒酵母AN120野生型菌株、osw2Δ缺陷型菌株以及dit1Δ缺陷型菌株并进行产孢。通过荧光定位、蛋白免疫印迹分析以及酶活测定,表明酿酒酵母孢子"微胶囊"固定化酶系统构建成功。由于该固定化酶的最佳反应温度为85℃,避免了酿酒酵母孢子在D-葡萄糖为底物条件下萌发的弊端。同时,根据蛋白免疫印迹分析和重复利用性结果,表明二酪氨酸层的存在对于酶的包埋,对高温的耐受性都表现出了较好的特性。此外对野生型和osw2Δ孢子固定的XI的酶学性质进行了研究,相对于游离酶,孢子固定化酶更加稳定。在p H为6的酸性条件或p H为9的碱性条件下,固定化酶相对酶活能达到60%以上,同时在温度95℃时,固定化的酶相对酶活也能达到60%以上。与野生型孢子相比,osw2Δ孢子展现出了潜在的优势,既可以有效阻止酶的释放,又提高了底物分子的通透性。     

植物乳杆菌亚油酸异构酶的分离纯化及其性质研究

经硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤,由植物乳杆菌(LactobacillusplantarumL 2 9)分离纯化得到亚油酸异构酶,分子量为4 3ku。对其酶学性质进行研究,结果表明,温度37℃、pH 6 0时酶活性较高;Co2 + 、Fe2 + 可提高酶的活性,Cu2 + 、Zn2 + 则对酶活力有抑制作用;该酶作用于亚油酸的Km=2 5 3×10 -5mol/L ,Vmax=2 5 7×10 -8mol/ (min·mg)。     

亚油酸异构酶研究进展

亚油酸异构酶可催化亚油酸异构化为共轭亚油酸.随着共轭亚油酸的应用日益广泛,人们对亚油酸异构酶的研究也日益深入.在查阅大量文献的基础上,对亚油酸异构酶国内外的研究情况进行了综述.     

吸附交联法固定化蔗糖异构酶及其在异麦芽酮糖制备中的应用

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂,采用吸附交联法对重组短小芽孢杆菌来源的蔗糖异构酶进行固定化。以表观酶活力回收率为指标,对壳聚糖浓度、戊二醛加量、游离酶加量、固定化时间等条件进行了优化;并考察了温度、pH、固定化酶加量、反应时间以及底物浓度等因素对固定化蔗糖异构酶转化生产异麦芽酮糖的影响。结果表明,最佳固定化条件为：壳聚糖质量浓度3 g/dL、戊二醛加量（体积分数）0.75%、酶加量50 U/g、固定化时间16 h,此时固定化酶活力回收率达到70.3%;最佳转化条件为：温度30 ℃、初始pH 4.5、酶用量15 U/g,转化10 h,蔗糖质量浓度600 g/L,异麦芽酮糖最大产物得率达到87.8%。在最佳的转化条件下连续转化16次,产物得率仍保持在87.52%,显示该固定化酶具有良好的操作稳定性及较高的异麦芽酮糖合成能力。