明党参中游离氨基酸与核苷类成分的同时测定及品质评价

建立同时测定11种游离氨基酸与11种核苷类成分含量的超快速液相色谱-四极杆离子阱质谱联用方法,并分析明党参原植物和组织培养样品中游离氨基酸及核苷类含量。采用Waters XBridge Amide (2.1 mm×100 mm,3.5 μm)色谱柱,柱温30℃,0.2%甲酸-0.2%甲酸乙腈溶液以0.6 mL·min^-1流速梯度洗脱,以多反应监测模式进行正离子检测,结合主成分分析法和逼近理想点排序法探讨不同样品品质差异。结果表明,精密度、重复性、稳定性和回收率考察结果相对标准偏差均小于5%,加样回收率在98.62%~100.64%之间,被测成分线性关系良好,表明该检测方法准确、可行;明党参样品中游离氨基酸与核苷类成分差异较大,柄悬浮细胞测得游离氨基酸总含量(3682.01 μg·g^-1)与核苷总含量(6241.90 μg·g^-1)均为最高;分别以氨基酸和核苷为指标,主成分分析最高评分分属原植物根和柄悬浮细胞,逼近理想点排序表明柄悬浮细胞综合品质最优。本实验所建方法可用于明党参中22种游离氨基酸与核苷含量的同时快速测定,品质评价结果提示明党参根、叶、柄悬浮细胞和再生叶具开发利用价值,可为合理利用明党参资源提供参考。     

HPLC分析测定不同茶叶中的游离氨基酸

分析检测不同茶叶(绿茶,红茶,乌龙茶)中游离氨基酸的组成。称取0.25 g的茶叶于10mL 90℃纯净水中浸提20 min后过0.45μm纤维素膜,滤液通过固相萃取(solid phase extraction cartridges,SPE)柱预处理后得到茶汤样品。取70μL的样品与10μL的邻苯二甲醛(OPA)衍生液在25℃水浴中反应2 min后通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定,色谱条件为C18柱,DAD检测器,338 nm检测波长,流动相A为甲醇-乙腈-水溶液,流动相B为磷酸盐缓冲液。试验表明:通过SPE柱能有效去除影响色谱出峰的杂质,HPLC方法能有效地分离测定茶叶中的17种不同氨基酸,绿茶中的氨基酸含量要比发酵茶高,尤其是天冬氨酸、谷氨酸,而茶氨酸在3种茶叶中的含量显著不同。     

全自动氨基酸分析仪法测定4种贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量

建立一种测定贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸的全自动氨基酸分析仪法,以4种常见贝类为研究对象,采用0.02 mol/L盐酸溶液作为提取剂,体积分数5%磺基水杨酸溶液为蛋白沉淀剂,同时优化了缓冲溶液的组成及洗脱程序,并对该方法的线性范围、检出限、精密度以及回收率进行测定。结果表明:贝类肌肉中的谷胱甘肽和游离氨基酸有着较好的分离效果,线性关系良好,相关系数为0.999 1~0.999 9,检出限(RSN=3)为0.07~0.27μmol/L,加标平均回收率为86.40%~102.42%,日内和日间相对标准偏差分别为0.31%~0.73%和1.14%~2.60%。4种贝类肌肉组织中的游离氨基酸含量比较丰富,总游离氨基酸含量分别为1 396.39、1 016.04、911.15、287.01 mg/100 g,文蛤青蛤缢蛏牡蛎,主要的游离氨基酸为牛磺酸(Tau)、谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg);谷胱甘肽含量分别为103.20、82.53、61.77、33.37 mg/100 g,青蛤文蛤缢蛏牡蛎。该方法适用于贝类肌肉中谷胱甘肽和游离氨基酸含量的测定与分析。     

不同泌乳期人乳与牛乳中游离氨基酸的对比

利用同位素标记相对和绝对定量技术结合高效液相色谱-串联质谱技术对不同泌乳期人乳与牛乳中游离氨基酸的种类及含量进行检测及对比分析。结果表明,人乳中游离氨基酸种类较牛乳更为丰富,含量也高于牛乳,且随着泌乳时间的延长其总量呈下降趋势。牛初乳、牛常乳、人初乳和人常乳中游离氨基酸总量分别为0.32、0.16、0.63?g/L和0.37?g/L。实验测定的42?种游离氨基酸中,人常乳中检出35?种,牛常乳中测得31?种,其中人常乳中有25?种游离氨基酸的含量高于牛常乳,人乳中组氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸等含量显著高于牛乳（P＜0.05）,游离谷氨酸在人初乳、人常乳、牛常乳中含量均为最高,而牛初乳中游离牛磺酸含量最高。本研究分析了人乳、牛乳中游离氨基酸种类和含量的差异,可为详细的研究母乳氨基酸功能和氨基酸代谢组学提供了一定的理论依据,也可为生产婴幼儿奶粉和功能性乳制品提供参考。     

Determination of the Free Amino Acid,Organic Acid,and Nucleotide in Commercial Vinegars

The selected taste‐active compounds in several kinds of commercial vinegar including amino acids, organic acids, and nucleotides were determined by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The results showed that glutamine and alanine, which contribute the umami and sweet taste to the flavor of vinegar, are high in Taste Activity Value (TAV). Acetic acid is the major organic acid in vinegar, making up as much as 91.4% of the total organic acid composition. Nucleotides, which were only detected in 5 brands of commercial vinegar and are both low in TAV, contribute less taste in vinegar. Our research provides a multiple chemical compositional characterization of vinegar and proposes a possibility of classification of different kinds of vinegar.     

不同条件对纳豆菌发酵蛤蜊产物中游离氨基酸态氮含量及纳豆激酶活性的影响

利用纳豆菌发酵蛤蜊,研究发酵产物中游离氨基酸态氮的含量及纳豆激酶活性,并以二者为评价指标,探索其最佳发酵条件。经单因素和正交设计试验结果表明：发酵温度为43 ℃、接种量为0.6%、发酵时间为48 h、料水比为1∶2（m/V）时发酵产物中游离氨基酸态氮含量最高（转化率可达71.10%）;发酵温度为41 ℃、接种量为 0.8%、发酵时间为48 h、料水比为1∶3（m/V）时发酵产物中纳豆激酶活性最高。     

HPLC Determination of Amino Acids in Musts and Port Wine Using OPA/FMOC Derivatives

ABSTRACT: Musts and port wines pose specific problems for amino acid analysis because of high sugar content. An HPLC technique was applied to the simultaneous quantification of primary and secondary amino acids in these matrices as their OPA-FMOC derivatives. This method enabled the fully automated analysis of 21 amino acids in 20 minutes. The average detection limit was 1.3 mmole/L, precision was 5%-12% for wine samples and accuracy by the standard addition method was 108.3 % (recovery value). Ten port wine and 43 must samples were analyzed for free amino acid contents. Proline represented 73% of the total for wine samples.     

安福火腿游离脂肪酸、风味物质及氨基酸分析

为揭示安福火腿的品质特性及其主体挥发性风味物质成分,采用气相色谱-质谱联用、固相微萃取-气相色谱-质谱联用等对其肌内脂肪和皮下脂肪中游离脂肪酸、挥发性风味物质进行对比分析及肌肉中氨基酸的组分含量进行定量检测。结果表明,从肌内脂肪和皮下脂肪中分别检测出19、29种游离脂肪酸（皮下脂肪的总游离脂肪酸含量是肌内脂肪的7.992倍）,29、31种挥发性风味物质。采用气味活性值分析法分别得到7、14种主体挥发性风味物质,其中己醛、辛醛、壬醛、（E, E）-2, 4-癸二烯醛和双戊烯是肌内脂肪和皮下脂肪中共同呈现的关键挥发性风味物质,3-甲硫基丙醛和癸醛仅存在于肌内脂肪中。肌肉中检测出17种氨基酸,且必需氨基酸的含量丰富,占氨基酸总量的41.98%,天冬氨酸和谷氨酸两种鲜味氨基酸的含量最高,它们对安福火腿的鲜美度有着重要的贡献。此研究可为后期分析加工工艺对安福火腿品质的影响提供借鉴。     

奶粉中游离氨基酸的提取工艺参数优化及同时测定

根据单因素试验与响应面分析法中的Box-Behnken试验设计原理对影响奶粉游离氨基酸提取量的料液比、硫酸锌质量分数和离心时间3 个因素进行优化,并采用偏最小二乘法对以上游离氨基酸的模拟混合试样进行同时测定。结果表明,奶粉游离氨基酸的最佳提取条件为料液比1∶3.02（g/mL）、沉淀剂中硫酸锌质量分数10.23%、离心时间6.79 min,在此条件下,提取量为170 μg/g。硫酸铜与甘氨酸、谷氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸反应生成的络合物,由于吸收光谱重叠严重,用光度法难以对单一组分进行同时测定。偏最小二乘法对游离氨基酸的模拟混合试样进行同时测定的结果显示,回收率98.2%～99.2%;相对预报误差为1.7%～2.9%。     

毛细管气相色谱法测定卷烟中的游离氨基酸

本试验描述了一种用于烟草中游离氨基酸测定的毛细管气相色谱方法,这种方法基于氯甲酸乙酯衍生化。1g烟样用75%乙醇经超声波振荡提取后,游离氨基酸用阳离子交换树脂纯化,然后在水溶液中用氯甲酸乙酯(ECF)衍生化。该方法简单、衍生化可在水溶液中进行且速度快(常温下仅需5秒)、衍生物较稳定、重现性和回收率实验结果均令人满意。用该法对加料前后的烟草和卷烟中的游离氨基酸进行了分析,结果发现,加料后游离氨基酸尤其是脯氨酸含量呈减少趋势。23个品牌的国内外卷烟分析表明,云南产的卷烟中游离氨基酸平均含量最高,国外卷烟略低,安徽、上海等华东地区生产的卷烟含量最低。其中云南卷烟所含脯氨酸比其它卷烟要高得多,而国外卷烟的天冬氨酸、天冬酰氨含量较高。      

普洱茶晒青样游离氨基酸和色泽差异研究

为探讨游离氨基酸和色值在普洱茶晒青样产地及古树茶和台地茶中的差异,分析了来自云南西双版纳州、临沧市普洱茶晒青样中18 种游离氨基酸组分含量,用色差仪测定茶汤色值（L*、a*、b*）,并进行方差分析、主成分分析。结果表明：晒青样中游离氨基酸组分含量在两地间有明显差异,西双版纳样品中茶氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸等主要鲜味氨基酸含量高于临沧样品。氨基酸主成分分析对西双版纳和临沧晒青样可以很好区分。台地茶游离氨基酸总量、天冬氨酸、谷氨酸、茶氨酸、组氨酸含量均比古树茶高,精氨酸含量比古树茶低,其中氨基酸总量、谷氨酸、精氨酸、组氨酸差异显著,二者也是在主要鲜味氨基酸上存在差异。两地晒青样汤色存在差异,西双版纳样品L*、b*值较临沧大,a*值较小。古树茶与台地茶汤色差异不明显。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测蜂蜜中的内源性酚酸和黄酮类物质

本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中18种内源性酚酸、黄酮类物质检测方法。样品经盐酸水溶液提取,HLB固相萃取柱净化,采用Acquity UPLC HSS T3(2.1*100 mm,1.8μm)色谱柱进行分离,以乙腈-10 mmol/L醋酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾电离,负离子多反应监测模式检测,外标法定量。实验结果表明,所建立的方法线性范围宽,能适用于各类蜂蜜中酚酸、黄酮类物质的定量分析。各物质线性关系良好,相关系数(r2)≥0.991;各分析物检出限在20~200μg/kg之间,加标回收率范围为69.2%~94.1%,RSD为0.9%~9.5%。通过对150批次天然成熟蜂蜜、市售洋槐蜜及以不同比例(20%、40%、60%、80%)糖浆混合的洋槐蜜进行检测,发现不同蜜源蜂蜜中,酚酸、黄酮的种类与含量差异较大。其中,枣花蜜中阿魏酸平均含量最高,为550μg/kg;洋槐蜜中芹菜素平均含量最高,含量为3910μg/kg;咖啡酸在荆条蜜含量最高,为1721μg/kg;糖浆掺假蜂蜜中目标物含量明显低于真正蜂蜜。该方法前处理操作简便、分析速度快、准确度高,可用于蜂蜜中多种内源性酚酸、黄酮类物质的同时测定。该方法为通过检测不同蜜源中酚酸及黄酮类物质含量建立蜂蜜指纹图谱,提供技术参考。     

猪骨汤中的游离氨基酸及其呈味特征分析

为了研究猪骨汤中的游离氨基酸及其呈味贡献,采用氨基酸分析仪对肋排汤、棒骨汤、脊骨汤、扇骨汤4种猪骨汤的游离氨基酸进行测定,并用电子舌分析其滋味轮廓,进行对比分析。结果表明:4种猪骨汤中均分离出17种游离氨基酸,其中有7种必需氨基酸。棒骨汤中总游离氨基酸的含量最高(24.65 mg/g),肋排汤中最低(12.61 mg/g)。4种猪骨汤中鲜味氨基酸种类最少(2种),但其中谷氨酸的相对质量分数均为16.69%~19.96%,TAV值为6.84~16.02,远高于其他游离氨基酸,对猪骨汤滋味贡献程度最大。电子舌检测分析得出,棒骨汤滋味轮廓和其他3种有差异,而其他3种差异不明显。     

湖南常见辣椒品种游离氨基酸主成分分析及综合评价

游离氨基酸参与辣椒中风味物质的合成,其种类及含量与辣椒品种密切相关.采用高效液相色谱-串联质谱法对湖南常见大红椒、青尖椒、螺丝椒、小米椒、小红椒、大青椒6种辣椒的游离氨基酸进行分析,明确不同辣椒品种游离氨基酸组成差异,以期为合理开发和利用辣椒资源提供理论依据.结果表明:6种辣椒中共检出24种游离氨基酸,其中青尖椒、螺丝...     

HPLC法测定茶树花中可溶性糖、儿茶素和游离氨基酸

采用高效液相色谱法测定茶树(Camellia sinensis)花中可溶性糖、儿茶素和游离氨基酸的含量。结果表明：茶树花中含有216.85mg/g可溶性糖,其花冠、雄蕊群和雌蕊群部分(F-1)及花托、萼片和花梗部分(F-2)的含量分别为250.945mg/g和112.65mg/g;茶树花中总儿茶素含量为37.03mg/g,且F-2中的含量(46.90mg/g)高于F-1(30.88mg/g);茶树花中含有包括茶氨酸在内的16种游离氨基酸,含量为10.87mg/g,虽然F-2中游离氨基酸的种类较少,但其含量(16.47mg/g)显著高于F-1(10.59mg/g)。     

不同发酵工艺糙米酵素中游离氨基酸、γ-氨基丁酸及挥发性香气成分分析

为比较不同发酵工艺下糙米酵素的营养价值,分别取优化后发酵样品与优化前发酵样品、传统酵母单菌发酵样品及未发酵原料作对比,通过氨基酸自动分析仪测定游离氨基酸及γ-氨基丁酸含量,并分析比较了优化前后样品的挥发性成分。结果表明:以T-AOC为指标优化的发酵样品中游离氨基酸总含量较高,可达7.139 mg/mL,γ-氨基丁酸含量最高可达2.596 mg/mL;同时采用顶空固相微萃取-气质联用技术分析样品的香气成分,优化后的混菌(酿酒酵母与植物乳杆菌)发酵比优化前香气成分种类及含量均有提高,挥发性香气成分增加11种,并产生了新的酯类、吡嗪类和酮类化合物,证明混菌发酵相比于酿酒酵母单菌发酵的糙米酵素营养价值及风味得到明显提升。     

不同生产工艺酿造的黄酒中氨基酸含量的检测与对比

采用高效液相色谱,通过PITC柱前衍生法,针对传统酿造工艺与现代酿造工艺、原料经浸米处理与烘焙处理等不同生产工艺酿造的黄酒进行氨基酸含量的检测,了解不同工艺对氨基酸含量产生的影响。     

液相色谱-串联质谱法检测药食两用杂交天麻及其亲本品种中的氨基酸、核苷类成分

实验采用超高效液相色谱与质谱联用技术精确检测金寨红乌杂交天麻及其亲本云南乌天麻、金寨红天麻中的氨基酸、核苷类成分,结合统计学方法阐明三个品种天麻之间的氨基酸、核苷类成分组成与含量差异并综合评价,为后续金寨杂交天麻的资源利用与食品开发提供科学依据。C₁₈柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,流动相用0.2%甲酸水（A）-乙腈（B）,体积流量为0.2 mL/min,柱温30 ℃,梯度洗脱;电喷雾离子源以多反应监测（MRM）模式测定,喷雾电压5500 V;离子化温度550 ℃;离子源气压（Gas）为241.3 kPa,雾化气（GS1）为379.2 kPa,辅助气（GS2）为379.2 kPa。实验结果运用主成分分析（PCA）和优劣解距离法（TOPSIS）进行分析并综合评价。结果显示,31种成分在0~144.58 μg/mL范围内线性关系良好,决定系数R2均大于0.999,精密度、稳定性、重复性峰面积RSD均不大于3.0%,平均回收率92.69%~99.5%,回收率RSD 1.3%~2.9%。天麻内含有丰富的氨基酸与核苷类成分,其中谷氨酸与天门冬氨酸为主要成分,杂交天麻总氨基酸、总核苷含量较亲代天麻更高,且总氨基酸呈显著性差异（P<0.05）,PCA与TOPSIS法评价结果也以S1、S2杂交天麻品质最优。该实验为天麻的质量评价建立了新方法,并为金寨杂交品种的推广提供了科学依据。     

中国主要牧区特色干制发酵乳制品细菌多样性和游离氨基酸及脂肪酸特征性分析

为研究我国主要牧区特色干制发酵乳制品中细菌、游离氨基酸、脂肪酸组成及其相关性,通过高通量测序技术对新疆酸奶疙瘩、西藏曲拉、内蒙古奶渣子和云南乳扇中细菌16S rDNA V4-V5区测序,利用气相色谱-质谱联用技术和液相色谱技术分别测定脂肪酸和游离氨基酸含量,最后再利用冗余分析研究细菌群落与α多样性、脂肪酸和游离氨基酸的相关性。高通量测序结果表明,干制发酵乳制品样本共获得2 421 338条reads,其中clean reads为1 871 524条,云南乳扇中细菌Chao1指数和Shannon指数均明显高于其他3个地区的干制乳制品样品。细菌群落组成分析发现,不同干制乳制品样品的菌群组成差异较大,4个地区的干制乳制品中的菌群均以Firmicutes为主,其中新疆酸奶疙瘩的Firmicutes相对最高,西藏曲拉的Proteobacteria相对于其他地区的干制乳制品占比最高。在属水平上,不同地区的干制乳品主要以Lactococcus或Lactobacillus为主。脂肪酸分析发现,云南乳扇中的16种脂肪酸均高于其他3个地区。对游离氨基酸进行分析,共检出24种游离氨基酸,其中新疆酸奶疙瘩的游...     

不同果桑品种成熟桑椹的游离氨基酸主成分分析和综合评价

为研究不同果桑品种成熟桑椹之间游离氨基酸综合质量的差异,利用氨基酸全自动分析仪测定10 种成熟桑椹的游离氨基酸种类及含量,并采用主成分分析法对10 种桑椹的游离氨基酸成分进行分析及综合评价。结果表明,10 种成熟桑椹中均含有17 种氨基酸,总氨基酸含量最高的是台湾一号,含量为270.073 mg/100 g;含量最低的是射阳3号,含量为38.718 mg/100 g。通过主成分分析法得出,第1、2、3主成分的贡献率分别为50.845%、27.912%、10.078%,这3 个主成分的累积贡献率达到88.835%,可代表桑椹中游离氨基酸的主要趋势,综合评价得分顺序由高到低分别为台湾一号、镇椹一号、大十、丰果桑、选100号、选20号、育721、中椹1号、镇9106、射阳3号。