Vergleich verschiedener Methoden zur Bestimmung von Tryptophan in Proteinen

Zusammenfassung Untersuchungen überFreisetzung und Abbauvon Tryptophan bei der alkalischen Hydrolyse, sowie über die Anwendbarkeit verschiedener Bestimmungsmethoden, führten zu folgender Schlußfolgerung: Die Art der zur alkalischen Hydrolyse benutzten Alkalien ist von sekundärer Bedeutung im Vergleich zur Hydrolysedauer. Der Freisetzung des Tryptophans folgt schon bald ein Abbau, der die Tryptophan-Bestimmung in verschiedenen Proteinen in unterschiedlichem Maße beeinflußt. Für jede Hydrolyse von Proteinen zur Tryptophanbestimmung sollte daher zunächst die richtige Hydrolysezeit ermittelt Werden.Als Methoden zur Tryptophanbestimmung in alkalischen Hydrolysaten sind die Glyoxylsäure-Methode und PDAB-Methode geeignet. In bestimmten Fällen ist die Vorschaltung einer Papain-Hydrolyse angebracht, insbesondere bei Leguminosen, da hier die alkalische Hydrolyse zur Bildung gefärbter Nebenprodukte führen kann. Für die Bestimmung von freiem Tryptophan in biologischen Flüssigkeiten und allgemein dann, wenn sehr geringe Konzentrationen zu erwarten sind, ist die fluorimetrische Messung der Norharman-Bildung bei Kondensation mit Formaldehyd zu empfehlen.

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Comparison of different methods for determination of tryptophan in proteins

Summary Attempts have been made to establish suitable conditions for the liberation of trytophan from proteins, particularly legumeproteins. The hydrolyses were carried out With 3.5% HClO₄, 4N-Ba(OH)₂, 4N-KOH and papain. Photometric methods With glyoxylic acid or p-dimethylaminobenzaldehyde and one fluorometric method have been used in determining the tryptophan in hydrolysates as Well as in biological fluids.It Was found that the type of alkali used in hydrolysing proteins is of secondary importance to the duration of hydrolysis. Partial decomposition of tryptophan follows soon after its liberation, which may influence the amount of tryptophan found in different proteins to a different extent. Therefore, the proper time for alkaline hydrolysis of proteins for the determination of tryptophan should be evaluated individually and cannot be given as a general rule, Which is valid for all proteins.The glyoxylic acid and p-dimethylaminobenzaldehyde methods Were both found to be suitable for the estimation of tryptophan in alkaline hydrolysates. In some cases, especially With legumes, hydrolysis With papain lead to better results, because during alkaline hydrolysis coloured by products Were formed, which interfered With the photometric measurements. The fluorometric method of measuring the fluorescenz of norharman, Which is formed by the condensation of tryptophan with formaldehyde, followed by oxidation and decarboxylation, has been found to be applicable for the measurement of free tryptophan in biological fluids as Well as in hydrolysates, if very low concentrations of tryptophan have to be determined.

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Diese Arbeit Wurde unterstützt aus Mitteln des Forschungskreises der Ernährungsindustrie im Rahmen des Forschungsvorhabens 1049.

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Auszug aus der Dissertation vonR. R. Vangala: Die Eignung verschiedener Hydrolyseverfahren zur Ermittlung der Aminosäurezusammensetzung und der verfügbaren Aminosäuren in Nahrungsproteinen. Gießen 1968.     

Neuere Methoden zur Bestimmung der Honigfarben

Ohne Zusammenfassungbedeutet mit Abbildungen.     

Methoden zur Bestimmung der Chinolizidinalkaloide in Lupinus mutabilis

Zusammenfassung Es werden Schnellmethoden zur Bestimmung der Gesamtalkaloide (photometrisch, titrimetrisch) und zur semi-quantitativen Bestimmung der Einzelalkaloide (dünnschichtchromatographisch) im Samen vonLupinus mutabilis beschrieben. Für die drei Schnellbestimmungsmethoden wird ein verbessertes Extraktionsverfahren dargestellt. Die Alkaloide werden in ihre Basen überführt, das Material wird mit basischem Aluminiumoxyd getrocknet und die Alkaloide mit Chloroform extrahiert.Bei der photometrischen Bestimmung der Gesamtalkaloide dient Bromkresolpurpur als Farbreagens. Zu ihrer titrimetrischen Bestimmung wird Tetrabromphenolphthaleinäthylester als Indikator benutzt. Die Einzelalkaloide werden semi-quantitativ, nach ihrer dünnschichtchromatographischen Trennung nach Anfärbung mit Dragendorffs Reagens bestimmt.Die drei Schnellmethoden sind für die Auslese alkaloidarmer Lupinen und zur Überwachung von technologischen Entbitterungsverfahren geeignet.

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Methods for the determination of quinolizidine alkaloide in lupinus mutabilisI. Screening Tests

Summary In this paper rapid procedures for the determination of total alkaloids (photometric, titrimetric) and for the semiquantitative determination of individual alkaloids (TLC) in the seeds ofLupinus mutabilis are presented. For all three methods an improved extraction procedure is employed. After transforming the alkaloids into their bases, the resulting material is dried with basic alumina and the alkaloids are extracted with chloroform.For the photometric determination of total alkaloids bromocresol purple is used as color reagent. The indicator for the titrimetric determination is tetrabromophenolphthalein ethyl ester. The individual alkaloids are evaluated semiquantitatively after Separation on TLC-plates and staining with Draggendorff reagent.All three screening tests are useful for the selection of low alkaloid Lupin strains and for the control of debittering processes.

     

Zur Sterilisierung von Konserven

Ohne ZusammenfassungMitteilung aus den Reichsgesundheitsamte, Zweigstätte Scharnhorststraße (frühere Kaiser Wilhelms-Akademie).bedeutet mit Abbildungen.     

Beurteilung der Methoden zur Bestimmung freier Fettsauren in Gewebehpiden

Zusammenfassung Zur Bestimmung freier Fettsduren in Gewebeextrakten wurden these entweder an Silikagel dünnschichtchromatographisch zweistufig oder saulenchromatographisch getrennt, eluiert und photometrisch in Form der Kupfersalze mit Natriumdiäthyldithiocarbaminat bestimmt. Die säulenchromatographische Methode an Silikagel ist wegen größerer Genauigkeit und kleinerem Zeitaufwand vorzuziehen; she ist geeignet, hydrolytische Veränderungen im Fettanteil des Muskelgewebes während der Fleischlagerung im gefrorenen oder gekühlten Zustand festzustellen.

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Evaluation of methods for determination of free fatty acids in muscle tissues

Summary Two methods for the determination of free fatty acids in muscle tissues were compared. The first one is based on thin-layer-chromatographic separation of fatty acids and their elution from Silica Gel. The second one is based on their column chromatographic separation on Silica Gel. For the determination of separated fatty acid Duncombe methods was used. Results proved that column chromatography separation is more suitable, due to its better reproducibility.

     

Moderne Methoden zur Analyse von Harnstoff-Formaldehyd-Harzen

Ohne Zusammenfassung Die Untersuchungen wurden wesentlich von der Methanol Chemie Nederland v.o.f. unterstützt.     

Zur Sterilisierung von Konserven

Ohne Zusammenfassung     

Bestimmung von Mikrogramm-Mengen Zinn in tierischem und pflanzlichem Material nach der Dithiolmethode

Zusammenfassung Es wird eine Apparatur und eine modifizierte Arbeitsweise der bekannten Dithiolmethode zur Bestimmung von Mikrogramm-Mengen Zinn in biogenen Materialien genau beschrieben. Die Modifikation ist besonders dadurch gekennzeichnet, daß das Zinn nach dem Naßaufschluß mit Hilfe von HBr/HCI als Zinntetrachlorid von den anderen Reaktionspartnern abdestilliert und gesondert bestimmt wird. Zinnmengen in der Größenordnung von 5–50 Mikrogramm sind auf diese Weise mit einer Genauigkeit von 10% bestimmbar.