电镜核酸分子原位杂交技术的探索

显微水平的核酸分子原位杂交技术已广泛地应用于基因在染色体上的定位,发育过程中的基因表达等方面,但电镜水平的原位杂交技术却仍在探索之中,主要因为剧烈的核酸分子杂交条件与样品精细结构的保存之间存在着矛盾,为此,我们分别在分级抽提的整装细胞,L-K_4包埋或Epon812包埋的超薄切片样品以及DGD包埋-去包埋样品中对进行电镜分子原位杂交研究的可行性和杂交条件进行了一些探索,目前在整装细胞样品中已取得初步的结果。     

电镜生物样品制备与观察中污染问题的探讨

电镜生物样品制备与观察中污染问题的探讨陈文列陈莲云钟秀容（福建医科大学电子显微镜室，福州３５０００４）在生物医学样品的透射电镜观察中，一般见到的污染物常被认为是超薄切片染醋酸铀、柠檬酸铅未洗净而产生的沉淀，但实际上污染源可来自于固定至观察全过程，本文...     

诊断电镜样品的快速制备方法

电镜作为生物科学研究和某些疾病病理检查的基本工具 ,已为科研工作者所熟知。但由于电镜样品制备的周期较长 ,影响了科研和检查的进度 ,特别对病理检查来说时间太长。近年来 ,随着诊断电镜学的发展 ,诊断电镜样品的快速制备方法受到国内外电镜工作者的关注。本文通过大量实验 ,摸索出一套比较满意的诊断电镜样品的快速制备方法。1 .材料和方法病人的肾穿标本 ,切成 0 .6～ 0 .8mm3大小的组织块。 4%多聚甲醛固定 30 min,用 0 .1 mol/LPBS(p H7.30 )漂洗 3次 ,每次 1 0 min。 1 % Os O4 后固定 30 min。依次用 5 0 % ,70 % ,90 %的乙醇各…     

电镜低剂量技术的仪器改装

应用高分辨电镜技术研究生物大分子结构的主要障碍是未染色的样品对辐射损伤的高度敏感性。1e/A~2·S)的电子剂量,就会损伤样品。低剂量技术是防止辐射损伤的主要方法。低剂量技术要求电镜应能探测极低剂量的束流(如<0.01e/A~2·S),并能进行轴外聚焦。目前多数商品电镜达不到要求,因而需要改装。我们对JEM-100CX/Ⅱ电镜进行了三处改装: 1,改装电子束流检测系统。用改装原电镜曝光表线路的办法,将束流表的量程向小的方向扩展100倍,以实现低剂量的测定。在Exposure Meter PB线路中的IC_1后串入运算放大器F007B,(图1示),当测量低剂量时,K合上,F007B串入电路,放大电路增益提高,检测灵敏度改善,选配合适的反馈电阻,     

胸腹水快速电镜样品制备技术的探讨

随着病理电镜诊断工作的不断深入和发展，各类标本的快速制样工作成为首位重要的工作，我们在胸腹水电镜样品制备工作中，采用快速制样技术，改进工作流程，特介绍如下。     

微波照射技术用于电镜植物样品的制备

电镜已作为研究生物科学的基本检测工具。但由于超薄切片制样周期长,影响检测速度。自八十年代末,在国内开始应用微波照射样品制备技术,但在农业科学中,有关植物样品的微波制备方法,未见报导。作者尝试了微波照射技术应用于电镜植物样品制备的全过程中。采用烟草花叶病毒感染的心叶烟叶片,在制备的每一步用不同时间、不同功率进行处理,切片经电镜观察与常规制样相比较,较好地保存了细胞结构,同时也大大缩短了制样时间。     

微波技术在诊断电镜标本制备中的应用

电镜作为某些疾病的病理检查手段 ,已为广大医务工作者所熟知。但电镜样品的常规制备方法周期较长 ,影响及时诊断。近年来 ,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备 ,进行了大量的工作。结果表明 ,该方法不仅大大缩短了样品制备时间 ,而且用这种方法制备的样品的超微结构完全可以满足电镜诊断要求 ,现已成为本室诊断样品的常规技术。材　　料选用 National NN- 6 80型微波炉 ,分 HI,DEF,MEDHI,MED档 ,样品包括各种肿瘤组织 ,肝 ,肾 ,肺 ,软骨 ,及游离细胞 (血细胞 ,培养细胞 )。1 .标本固定固定液用 4%多聚甲醛 ,或 3%戊二醛 …     

诊断电镜方法学标本制备程序

诊断电镜方法学标本制备程序＠夏愿耀￥上海第二军医大学生物物理所诊断电镜方法学标本制备程序夏愿耀（上海第二军医大学生物物理所，上海２００４３３）有关生物医学的电镜标本制备技术，在专业书籍和杂志上已有很多介绍。各单位电镜室也有很多宝贵经验和自己实用的技术方法。...     

磷钨酸乙醇染色法在嗜铬颗粒电镜X射线显微分析中的应用

通过比较常规透射电镜制样法、快速冷冻固定－冷冻超薄切片法及磷钨酸乙醇（EPTA）染色法在嗜铬颗粒透射电镜X射线显微分析中的应用，发现磷钨酸乙醇染色法能使嗜铬颗粒电子着色，从而较好地显示嗜铬颗粒的超微结构。同时磷钨酸乙醇染色法也以在一定程度上原位保留生物样品中元素，可以应用于检测样品元素含量的变化或比较样品元素含量的组间差别，提示磷钨酸乙醇染色法是一种可应用于透射电镜X射线显微分析的经济简便的生物样品制备方法。     

一种简单的电镜样品平板包埋法

本文介绍一种用投影仪胶片进行平板包埋的方法。此法简便,无需硅化,胶片与包埋剂分离容易,清晰透明,便于定位取材。     

肝细胞HBV原位核酸杂交及电镜观察

电镜原位分子杂交技术,对病毒性疾病的诊断,肿瘤的基础研究及临床诊断以及核酸的细胞定位有重要意义。它是利用已知序列的DNA或RNA片段为探针,按碱基配对的原则去识别与之互补的靶DNA或RNA,形成DNA-DNA或DNA-RNA的杂交。通过生物素化的探针与胶金的络合物以及同位素化的探针显示结果,从而达到检测和分析的目的。该技术具有特异性强,灵敏度高,定位准确的特点。例如可利用已知的病毒癌基因及细胞中的癌基因,采用原位杂交的方法在电镜水平进行肿瘤学的研究。也可测定病毒基因的位置和特定基因在染色体上的定位。我们利用生物素化的HBV-DNA探针与胶金的络合物(HBV-DNA-G prob)对肿癌病人肝细胞内HBV进行了检测。     

电镜样品自动真空抽气系统

在植物电镜样品制备过程中，由于植物细胞有较厚的细胞壁和丰富的液泡，而且植物组织内还含有大量空气，因此在植物样品固定的时侯通常都要用真空泵抽气，使样品与固定液充分接触，从而保证固定及以后的制样措施都有良好的效果。为此我们设计了一个紧凑的自动真空抽气设备，它扳大地提高了抽气系统操作的方便性。     

电镜样品制备方法对非晶合金结构的影响

非晶合金，特别是大块非晶合金，以其优异的性能而引起人们广泛的关注。通常情况下，人们普遍采用X射线衍射技术（XRD）来反映非晶合金的非晶态结构特征。然而当晶粒尺寸非常小时（如小于10nm），X射线衍射技术无法将非晶态和晶态严格地区分开。     

电镜分析在精细陶瓷粉体制备中的应用

精细陶瓷在当代材料技术发展中占有非常重要的地位。与金属材料、有机高分子材料相比,它具有更多实用价值的功能,并具有热稳定性和化学稳定性的特点,所以可用它制作各种功能陶瓷产品。此外,在高温条件下具有高强度和耐腐蚀性,因而也可作为高温结构材料来使用。具有广泛的应用前景。然而,以原料到瓷体制备工艺中每一环节都会影响到瓷体的性能,其中理想粉体的制备是获得优质陶瓷的关键。本文则用电子显微镜来分析粉体性能与制备工艺条件之间的关系,这对粉体的制备工艺将会有实际的指导意义。     

一种新的冷冻标本电镜样品制备方法-固定液解冻法

传统的冷冻标本处理过程中 ,为了防止冰晶出现首先要加入冷冻保护剂 ,如 :二甲亚风、甘油等化学溶剂 ,再进行液氮冷冻保存。复温过程更加复杂 ,根据组织不同 ,复温方法以及时间都不一样[1,2 ] 。这种方法操作起来较为繁琐且不好掌握 ,不利于临床冷冻穿刺材料的电镜观察。通过长期的实践 ,我们探索出了一种简便易行的冷冻标本快速解冻固定法 ,现介绍如下。材料与方法1 .取材冷冻 :取大鼠肾脏组织 ,切成 2ｃｍ3小块 ,直接进入 -75℃的低温冰箱 3个月。2 .解冻固定 :采用两种不同的解冻方法。第一种方法 :标本经不同的温度自然溶解后 ,用 4%戊…     

琼脂铸模法制备透射电镜样品

本文介绍用琼脂铸模法制备透射电镜样品，如悬浮培养细胞、细菌、蓝藻、原生动物和花粉等细小分散的生物样品。该技术不但能将这类样品高度浓缩在一个微小的空间内，而且可简化样品制备步骤，减少样品损失，提高可观察样品的信息量。     

动物病毒疫苗研制及其产品的电镜检测

应用电镜技术检查了某些原代和传代细胞，并且跟踪检查了疱疹病毒、痘病毒、腺病毒、细小病毒、冠病毒、RNA反录病毒、呼肠病毒、动脉炎病毒、小RNA病毒、弹状病毒、杯状病毒、黄病毒、双RNA病毒、正粘病毒、副粘病毒等某些成员的驯化、培育及筛选的目的毒。结果发现了部分培养细胞有支原体污染，有的还有细菌污染；同时在某些培养的原毒、基础种毒、生产种毒及其产品中也发现了一些病毒的污染和联苗中互相感染现象。如此证明了电镜技术能够及时发现问题，及时解决问题，使之科研少走弯路，提高产品质量。