蛋黄卵磷脂的分离提纯及鉴定研究

主要阐述了分离提纯高纯度蛋黄卵磷脂的常用方法及近几年的最新研究成果，对适合于大量制备和实验室少量制备的溶剂分离技术、无机盐复合沉淀法、半透膜分离法、柱层析法、乙酰化法、超临界二氧化碳萃取法等进行了探讨；同时也简要概述了分析、鉴定卵磷脂的高效液相色谱、薄层层析、紫外光谱、红外光谱分析等技术。     

氧化铝柱层析纯化蛋黄多不饱和脂肪酸卵磷脂及其脂肪酸组成分析

以实验室自制蛋黄卵磷脂(PC)粗品为原料,采用中性氧化铝柱层析分离技术,制备高纯度蛋黄多不饱和脂肪酸卵磷脂(PC≥90%)。分别考察固定相粒径、洗脱液浓度、上样浓度、洗脱液流速、上样量等对氧化铝层析柱纯化蛋黄卵磷脂过程中的影响,同时采用薄层层析定性和高效液相色谱定量跟踪分析,采用气相色谱对所得样品脂肪酸种类及组成进行分析。最佳工艺条件:氧化铝粒径为100～200目、95%乙醇洗脱液、上样浓度1∶4(m/V)、洗脱流速8 mL/min、色谱柱负载量0.0222 g/g氧化铝;在最优条件下,高纯度蛋黄卵磷脂(PC≥90%)得率可达84.43%,一段PC产品的DHA含量高达13.35%。本试验可为工业化制备高纯度多不饱和脂肪酸卵磷脂提供技术参考。     

薄层色谱法和硅胶柱层析法分离新疆紫花苜蓿中黄酮类化合物的研究

使用薄层色谱法和硅胶柱层析法对新疆紫花苜蓿中黄酮类化合物进行分离分析,利用薄层层析法分离得到的4条黄酮类化合物谱带对硅胶柱层析分离效果进行检测,最终选择以硅胶G为固定相,配置展开剂V蒸馏水:V冰乙酸:V正丁醇=5:1:4,混匀静置后,用展开剂的上层液做为淋洗剂,单向一次性进行色谱分离,可以获得较好的分离效果。     

配位吸附柱层析法对卵磷脂分离纯化的研究

采用配位吸附柱层析法分离纯化市售粉末大豆磷脂(磷脂酰胆碱含量40%),得到高纯度卵磷脂产品(磷脂酰胆碱含量96.2%)。重点建立了Cu2+型配体交换树脂柱,并优化了分离纯化条件。结果表明,该方法能简便有效地分离出高纯度卵磷脂。     

磷脂分离、纯化和检测方法的研究进展

综述了磷脂分离提纯方法如溶剂萃取法、柱层析法、超临界流体萃取法、金属沉淀法、酶催化法和膜分离法等,以及磷脂化合物的分析检测方法如薄层层析法、高效液相色谱法和新兴的核磁共振法等的发展研究现状.分析了各种分离检测方法的优缺点,展望了磷脂组分分离检测方法的发展方向.     

测定麦芽糖浆中麦芽糖含量的新方法

本文着重研究了采用层析法(纸上层析、薄层层析)分离麦芽糖浆中的麦芽糖,洗脱后用蒽酮比色法测定其含量的新方法。     

从蛋黄中提取及纯化卵磷脂

本文以鸡蛋的卵黄为原料,采用含水乙醇与乙醚提取,通过丙酮脱水去油,得到粗品卵磷脂;进一步以氯仿/甲醇为洗脱液,硅胶柱层析法分离纯化自制的粗品卵磷脂,得到高纯度的纯白色固体卵磷脂,由薄层色谱定性检测,仅含一个斑点;用薄层扫描仪定量检测纯度大于97.4%。     

蛋黄卵磷脂的提取方法研究

为探讨从蛋黄中提取蛋黄卵磷脂的方法。试验以蛋黄为原料,采用有机溶剂和酶解法从蛋黄中提取卵磷脂粗品,然后分别经柱硅胶层析和金属离子沉淀法纯化获得卵磷脂精品,通过测定卵磷脂的含磷量,判断其纯度高低。结果显示:采用有机溶剂法获得蛋黄卵磷脂粗品,然后经柱硅胶层析纯化可获得高纯度蛋黄卵磷脂精品,总得率为8.38%,卵磷脂的含磷量为15.33%。是一种高效、经济的蛋黄卵磷脂提取方法。     

中性氧化铝柱层析分离纯化鲨肝醇制品及其组成分析

为分离纯化鲨肝醇制品,以鲨鱼肝油中不皂化物为原料,以鲨肝醇纯度为评价指标,通过响应面法优化中性氧化铝柱层析富集鲨肝醇制品的工艺参数,采用薄层层析法（TLC）与气相色谱（GC）对其纯度及组成进行定性与定量分析。结果表明：最优工艺条件是：洗脱液比例（V二氯甲烷 ∶ V无水甲醇）为9 ∶ 1,上样量3 g,色谱柱负载量0.012 g/g氧化铝,洗脱流速为2 mL/min,所得鲨肝醇制品纯度达18.23%,得率为38.70%。经TLC与GC综合分析可知,鲨肝醇制品中主要含有鲨肝醇与角鲨烯两大类活性物质。中性氧化铝柱层析富集鲨肝醇的同时,会造成不皂化物中角鲨烯的损失。根据角鲨烯标准曲线计算,角鲨烯纯度由54.21%减至49.18%。通过精密度与回收率试验证明GC具有良好的稳定性与精密度。本研究结果为高纯度鲨肝醇制品的工业化制备提供一定的理论基础。     

柱色谱法制备大豆脑磷脂和肌醇磷脂

采用溶剂萃取法和柱色谱法相结合的工艺,从大豆油脚中制备肌醇磷脂,研究了不同洗脱剂对柱色谱分离脑磷脂和肌醇磷脂效果的影响.结果表明,大豆油脚先经脱水、脱油,再经95%乙醇浸提后粗分为粗卵磷脂和粗脑磷脂.以硅胶为吸附介质,以粗脑磷脂为原料用V(氯仿):V(甲醇)=2:1的混合溶剂等度洗脱,可获得纯度为80.1%的大豆脑磷脂和90.6%的肌醇磷脂产品.     

基于高效薄层色谱法的胡麻卵磷脂质量分析

目的：建立胡麻卵磷脂的高效薄层色谱质量分析方法。方法：将卵磷脂供试品及磷脂酰胆碱标准品溶于氯仿-甲醇（3∶2,V/V）,以氯仿-甲醇-水（65∶25∶4,V/V）为展开系统,考察不同显色剂、展开系统、点样量、薄层板、检视方式、温度、相对湿度对卵磷脂供试品中不同组分分离的影响,进行高效薄层色谱定性分析;在确定的色谱条件下,将卵磷脂供试品及磷脂酰胆碱标准品进行展开,扫描磷脂酰胆碱峰面积,绘制标准曲线,外标法测定卵磷脂供试品中磷脂酰胆碱的含量。结果：卵磷脂供试品各组分分离情况良好,适于定性分析;卵磷脂供试品中磷脂酰胆碱的含量为63.33%,板间、板内精密度实验相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）分别为1.82%和3.73%,稳定性实验RSD为1.60%,加标平均回收率为98.5%。结论：建立的方法快速准确、重复性好,可为卵磷脂质量分析提供新的技术参考。     

灯笼果中噻菌灵的RP-HPLC-PDA 残留分析

目的：建立反相高效液相色谱-二极管阵列检测器测定灯笼果中杀菌剂噻菌灵残留的分析法。方法：色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150mm×4.6mm),检测波长为299nm,流动相为pH6.8的乙腈-0.02mol/L磷酸缓冲溶液(70:30,V/V),流速为0.6mL/min,进样量20μL。结果：噻菌灵在0.10～90.0μg/mL范围内与峰面积成良好线性关系(r＝0.9995),检测限为0.05μg/mL,噻菌灵的回收率为87.9%～102.6%,相对标准偏差为0.98%～2.79%。结论：该方法操作简便快速,可作为灯笼果中噻菌灵含量监测的控制方法。     

奶粉中三聚氰胺HPLC-IC分析方法的比对

采用反相离子对色谱法、亲水相互作用色谱法及阳离子交换色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量。奶粉样品前处理采用水- 乙酸提取后过RP柱和甲酸提取后乙腈沉淀两种方法,反相离子对色谱法采用C18 柱和10mmol/L庚烷磺酸钠与10mmol/L 柠檬酸的缓冲溶液- 乙腈(85:15,V/V)的流动相;亲水相互作用色谱法采用HILIC 柱和20mmol/L甲酸胺- 乙腈(10:90,V/V)的流动相;阳离子交换色谱法采用IonPac CS17 阳离子交换柱和6mmol/L 硫酸的流动相。流速1.0mL/min,检测波长240nm。结果表明,3 种方法测定三聚氰胺在0.1～25.0mg/L 范围内线性均很好(r=1.0000),样品加标回收率在93.91%～99.96% 范围内。3 种方法中,反相离子对色谱法对三聚氰胺的响应值最高,阳离子交换色谱法则能用最短的时间检测出三聚氰胺,而亲水相互作用色谱法在假阳性的判断上可作为其他两种方法的补充。     

离子色谱法测定海带中甘露醇的含量

目的 建立测定海带中甘露醇含量的离子色谱法.方法 通过对色谱柱、流动相等色谱条件优化,考察对海带中甘露醇及其他组分的分离效果.结果 采用DIONEX CarboPac PA10(4 mm×250 mm)色谱柱,以H2O:NaOH溶液(c=250 mmol/L)(90:10,V:V)为流动相,流速为0.80 mL/min...     

鲜切慈菇酶促褐变底物的分析确定

鲜切慈菇在贮藏过程中极易发生酶促褐变。为进一步研究其褐变机理,分析测定了慈菇对不同酚类底物的亲和性,利用薄层层析、紫外吸收光谱及高效液相色谱法鉴定鲜切慈菇酶促褐变的主要底物。结果表明,慈菇中的酚类物质主要为愈创木酚和儿茶酚,慈菇中 POD 对不同底物的结合能力依次为愈创木酚＞焦性没食子酸＞绿原酸＞L-酪氨酸＞儿茶酚,引起酶促褐变的主要底物是愈创木酚。     

鸭肝谷氨酸脱氢酶的纯化与酶学性质研究

目的：获得鸭肝谷氨酸脱氢酶纯品并对其酶学性质进行研究。方法：采用丙酮脱脂、重金属离子沉淀、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose 离子交换层析和Sephacryl S-200 凝胶层析方法,分离纯化鸭肝谷氨酸脱氢酶,用SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定和酶相对分子质量测定。结果：从鸭肝中分离纯化获得电泳纯的谷氨酸脱氢酶,纯化倍数为60.93 倍,酶活力回收率为11.02%,比活力达24.37U/mg。酶相对分子质量为371.41,亚基相对分子质量为61.60。推测该酶由6 个相同亚基构成。该酶对NADH 的Km 为53.19μmol/L,最适pH 值为10.0,最适反应温度为35℃。该酶在pH8.0 左右较稳定;在40℃以下酶活力保持稳定。Zn2+、Li+ 和Cu2+ 对该酶具有显著的抑制作用。结论：分离纯化获得谷氨酸脱氢酶,该酶具有较高应用价值。     

制备乳脂肪球膜磷脂-维生素A脂质体的工艺优化

目的:制备可添加于婴儿液态配方乳的乳脂肪球膜磷脂-维生素A脂质体,并优化其制备参数。方法:本实验采用薄膜水合-高压均质法,应用乳脂肪球膜磷脂为膜材,制备维生素A脂质体,在单因素实验基础之上,探讨制备脂质体过程中磷脂浓度、主药与磷脂比例、胆固醇与磷脂比例、维生素E占磷脂百分比浓度、反应温度等制备因素对形成脂质体后包封率的影响规律。采用二次旋转正交组合实验方法设计实验,经SAS软件与Matlab软件处理数据得到配方原料指标和反应温度对脂质体包封率的影响。结果:优化得到制备脂质体工艺参数:磷脂浓度7.43%,磷脂与主药比例28.95∶1,磷脂与胆固醇比例为6.53∶1,维生素E占磷脂百分比浓度为0.83%,反应温度59.58℃,得到优化后最高包封率为88.77%,脂质体在扫描电子显微镜下观察,其超微结构为球状囊泡。结论:本实验首次以乳脂肪球膜磷脂作为膜材包埋维生素A制备脂质体,将传统的薄膜水合法与高压均质法相结合,成功制备出可添加于婴儿食品的可食性脂质体。     

A new selective liquid membrane extraction method for the determination of basic herbicides in agro-processed fruit juices and Ethiopian honey wine (Tej) samples

Supported liquid membrane (SLM) extraction was optimised for trace extraction and enrichment of selected triazine herbicides from a variety of agro-processed fruit juices and Ethiopian honey wine (Tej) samples. In the extraction process, a 1:1 mixture of n-undecane and di-n-hexylether was immobilised in a thin porous PTFE membrane that forms a barrier between two aqueous phases (the donor and acceptor phases) in a flow system. The extracts constitute the selectively enriched analytes collected from the acceptor phase and were analysed by transferring to a HPLC-UV system using a diode array detector at 235?nm. High enrichment factors were obtained with very good repeatability of results, and the detection limit was lower than 3.00?µg l^?1 for ametryn in apple juice. The optimised method showed very good linearity of over 50–500?µg l^?1 with a correlation coefficient of >0.990 or better for triplicate analysis. All chromatograms gave well resolved peaks with no interfering peaks at the retention times of the selected triazines, showing high selectivity of the SLM extraction method in combination with HPLC-UV for the selected matrices. The optimised method can be used as an alternative solventless extraction method for microgram-level extraction of other triazine herbicides and a variety of pesticides from liquid and semi-liquid environmental, biological and food matrices.     

超声波协同纤维素酶提取山药多糖的工艺及组分测定研究

选用食用山药为原料,采用超声波协同纤维素酶酶解法分别研究了超声波功率、提取温度、提取时间、酶量对多糖提取量的影响;并且通过正交试验得出山药多糖提取最佳工艺。结果表明：各因素对山药多糖提取量影响的主次顺序为：时间、功率、温度,其最佳提取参数是：在固液比为1g：15ml,酶量为2%,pH为4.72的条件下：提取温度为50℃,提取时间为100min,功率为：450W。在此工艺条件下,多糖提取量为24.8mg/g。所得多糖通过薄层层析法,可知其由木糖、葡糖糖、半乳糖所组成。