白腐菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化

在静置和振荡两种培养条件下研究营养条件对白腐菌合成木素过氧化物酶(1igninperoxidase，LiP)的影响。静置培养时，LiP在碳氮比(C／N)低的培养基中显示较高的酶活力，碳源以葡萄糖(0．02％)和糊精(0．18％)同时存在及分段加入要比单一葡萄糖作为碳源时获得更高的酶活；振荡培养时，在碳氮比高的培养基中LiP酶活最高，而类似于静置培养的氮源组合及分段模式却明显地抑制了LiP的合成。优化后，静置培养在第6天可获得7560U／L的酶活；振荡培养在第8天获得6500U／L的酶活。发酵液中LiP酶活力与菌体分泌的其同功酶的数量成一定的对应关系。     

球毛壳菌(Chaetomium globosum)cDNA文库的构建

以质粒pBluesciptIIsk( +)为载体,以E. coliDH5α为受体菌,通过加接头定向克隆的方法构建了球毛壳菌的cDNA文库. 该文库的滴度为 2. 25×l04pfu/ml, 重组率为 96. 4%.     

球毛壳菌原生质体形成与再生研究

采用酶解法制备球毛壳原生质体，确定酶解条件为，菌龄2.5d，渗稳剂为S／C，采用5，15，15mg/mL的Novozym234，蜗牛酶，溶壁酶混合酶液，30℃下酶解1.5h，再生率可达29．11％，研究了渗稳剂对原生质体制制备与再生的影响，并对球毛壳原生质体的释放和再生过程进行了观察，结果表明：山梨醇可促进原生质体的释放和再生，Ca^2 对原生质体的再生有促进作用，葡萄糖对再生菌株生长的促进作用优于山梨醇。     

黑曲霉产纤维素酶液体发酵条件的研究

以黑曲霉(Aspergillus niger)菌株为实验材料,采用液体深层发酵方法,研究了其所产纤维素酶各组分的条件.结果表明:纤维素粉3%、硝酸钾3%、聚乙二醇0.1%,初始pH6.5,250mL三角瓶装25 mL液体培养基、接种种龄为1d的种子培养液10%、32℃培养5 d,纤维素酶各组分活力达到最高.经过对液体发酵培养基及发酵条件的优化,黑曲霉达到产酶高峰的时间由6 d缩短为5 d,在最佳培养条件下,黑曲霉所产纤维素酶各组分酶活力分别为:羧甲基纤维素酶活力为24.52 u/mL,滤纸分解酶(FPA)活力为6.89 u/mL,β-葡萄糖苷酶活力为20.63u/mL.     

影响球毛壳菌原生质体转化的因素

采用 PEG 介导的原生质体转化法研究了含有多菌灵抗性基因的质粒 pRB129转化球毛壳菌的影响因素.结果表明,最佳转化条件为:以1.0 mol/L 山梨醇作为渗透压稳定剂,20 mmol/L Ca~(2+)和终质量分数为50%的 PEG4000作为转化介质,于25℃转化10 min,采用缓慢逐步稀释的方法,转化后1.5 d 筛选转化子,此时,转化率最高,且有较高的重复性,DNA 平均转化率为5.6个/μg.该结果对球毛壳菌其他性状的改进及其他丝状真菌的遗传转化具有重要参考价值.     

纤维素酶的固体发酵研究

对五种纤维素酶产生菌进行了酶系分析。在稻划粉;麸皮＝７：３,加水比１：３,硫酸铵添加量３％,初始ＰＨ６．０,培养温度２８－３０℃的优化条件下,培养康氏木霉ｈ５,发酵８４小时,可使ＣＭＣ酶活力达到１８６０ｕ／ｇ干曲。     

康宁木霉产纤维素酶固态发酵条件研究

对康宁木霉产纤维素酶的最佳固体发酵条件进行了优化,研究表明：最佳氮源为硫酸铵或磷酸氢二铵,最佳碳源为小麦秸秆：麦麸=3：2,添加0.1％的Tween80、含水量为300％,28℃条件下培养4d产酶活力最高．初始pH值对CMC酶活影响较大,当pH=3.0时CMC酶活最高,初始pH值对滤纸酶活影响较小,pH=5时酶活最高．     

绿色木霉3.3744产纤维素酶固态发酵条件研究

采用固态发酵研究了绿色木霉3.3744菌株产纤维素酶的最佳培养条件.结果表明:最佳碳源为小麦秸粉∶麦麸(4∶6),料∶水=1∶2.5,加入1%(NH4)2SO4,0.1%Tween80,初始pH值为5.0(滤纸酶活)或为3.0(CMC酶活),28℃下培养96 h时其产纤维素酶活力最高.     

影响球毛壳菌原生质体转化的因素

采用PEG介导的原生质体转化法研究了含有多菌灵抗性基因的质粒pRBl29转化球毛壳菌的影响因素．结果表明，最佳转化条件为：以1．0mol／L山梨醇作为渗透压稳定剂，20mmol／L Ca^2 和终质量分数为50％的PEG4000作为转化介质，于25℃转化10min，采用缓慢逐步稀释的方法，转化后l.5d筛选转化子，此时，转化率最高，且有较高的重复性，DNA平均转化率为5．6个／μg．该结果对球毛壳菌其他性状的改进及其他丝状真菌的遗传转化具有重要参考价值．     

一株里氏木霉产纤维素酶的条件及酶系的优化

对一株里氏木霉突变株液体发酵产纤维素酶的培养条件进行了优化,确定培养基的最适碳源和氮源种类及添加量(g/L)分别为:小麦秸秆15,小麦麸皮5,尿素10～15,(NH4)2SO412,NH4NO35;最适培养条件为:接种种龄72h,接种孢子悬液浓度2×107个/mL,培养温度30～32℃,pH值5 0,培养时间144h,摇瓶转速180r/min,装液量75mL/250mL三角瓶.在培养里氏木霉的培养基中同时接种黑曲霉(二者孢子数比为60∶1)进行混合培养,β 葡萄糖苷酶的产量是对照试验的2 9倍,明显改善了纤维素酶系的比例,提高了它们之间的协同作用效果,在最适培养条件下,粗酶液的β 葡萄糖苷糖活和FPA酶活分别达到127 6U/mL和84 8U/mL.     

香菇风味物质的酶法提取工艺研究

以香菇为原料用纤维素酶酶解处理后提取香菇风味物质.以提取率和游离氨基酸含量为指标研究了加酶量、酶解时间、料液比、pH值、酶解温度等因素对酶解法提取工艺的影响;以提取率为指标通过正交试验对提取工艺进行了初步优化.结果表明:当体系pH值为6.2、酶解温度为50℃、加酶量为12 U/g、酶解时间为3h、料液比为1∶30时香菇风味物质的粗提取率较高,可达17.48％,此时游离氨基酸含量为0.48％.     

里氏木霉R3液体深层发酵产纤维素酶工艺优化研究

研究了温度、pH值、溶氧对里氏木霉R3液体深层发酵产纤维素酶的影响,并进行了工艺优化.用50 L全自动通气机械搅拌发酵罐,接种量10%,发酵过程采取分段控制pH值、温度和溶氧的工艺,发酵120 h酶活力最高,FPA和CMC酶活力分别达到48.9 FPIU/mL和321.68IU/mL,FPA酶活比工艺优化前提高了221%.     

响应面法优化磁性固定化纤维素酶的制备

以磁性固定化纤维素酶的酶活力为响应值,应用响应面分析法（Response Surface Methodology,RSM）对制备磁性固定化纤维素酶的主要工艺参数（固定化时间、pH值、离子浓度和酶用量）进行了优化,并且采用二次回归方程拟合了4种因素和酶活力之间的数学模型,决定系数（R2）为0.9024,失拟性分析表明,无失拟因素存在.数学模型得出的最优工艺参数为：固定化时间11.98 h、pH值5.2、离子浓度0.066 moL·L^-1和酶用量202.7 mL,最优条件下得到的最大酶活力为28.45744 IU·g^-1.     

纤维素酶预处理对交联纤维素织物性能的影响

研究了纤维素酶预处理对纤维素织物抗皱性能如断裂强度和撕裂强度、耐磨性、外观平整度和手感的作用。用纤维素酶 ( Cellusoft Ultra L)在试验型转鼓式洗衣机中对经过染色的纯棉织物进行预处理 ,然后在通常条件下用树脂 Fixapret ECO进行抗皱整理。用标准方法对所有试样进行测试分析表明 ,纤维素酶预处理能够有效提高抗皱整理后织物的耐磨性、外观平整度和手感 ,但同时也会使整理后织物的断裂强度和撕裂度有少许下降     

产纤维素酶细菌的选育研究

以产黄纤维单胞菌ＣＬ１和芽孢杆菌ｘｘ－０１为出发株，经诱变处理后，在含葡萄糖的产酶培养基平板上筛选到能形成较大透明圈的抗分解代谢物阻遏突变株．其中ＣＬ１的突变株ＣＭＣ酶活可提高２．１倍（６０．１Ｕ／ｍｌ），微晶纤维素酶可提高３～４倍（３９．５Ｕ／ｍｌ），芽孢杆菌ｘｘ－０１的ＣＭＣ酶活可提高５．０倍（７８０Ｕ／ｍｌ），并对ＣＬ１的组成型突变株分解天然纤维素的情况进行了研究     

水酶法提取青稞淀粉工艺研究

以纤维素酶作为水解酶,采用水酶法从青稞米籽粒中提取淀粉.通过单因素试验和正交试验,得到青稞淀粉的最佳提取条件:加酶量20 EGU/g、酶解时间8 h、酶解温度45℃、酶解pH值6.5.在最佳条件下青稞淀粉的提取率为60.2%.     

纤维素酶酶解法提高海藻脂质抽提率的研究

以纤维素酶处理碾磨后的海藻粉,合理控制酶解条件,能显著提高海藻脂质的得率。经优化实验获得酶解最适条件为：加酶量０．７２７％、温度５５℃、ｐＨ值４．４、酶反应时间４ｈ。     

果胶酶与纤维素酶复合制剂的研制

对兼产果胶酶和纤维素酶的黑曲霉 (Aspergillusniger) 40 7进行固体发酵条件优选 .结果表明 ,在最佳条件下固体曲果胶酶活力达 1 62 0单位 /g干曲、纤维素酶活力为 1 51 2单位 /g干曲 ) .