电离辐射诱发HL-60细胞凋亡及Bcl-2基因对细胞凋亡的影响

本实验采用＾６０Ｃｏγ射线（剂量分别为０、２、４、６、８、１０Ｇｙ）照射人早幼粒白血病ＨＬ－６０细胞,研究了辐射诱发的细胞凋亡,并对ＨＬ－６０细胞和转染的反义Ｂｃｌ－２基因的ＨＬ－６０细胞（ＨＬ－６０ａｓＢｃｌ－２）的凋亡情况进行了比较。结果表明,＾６０Ｃｏγ射线照射可抑制两种细胞的增殖,并可诱导细胞凋亡,细胞凋亡率与受照剂量呈正相关,随照后时间的延长细胞凋亡率也逐渐增加;比较照后不同时间的凋亡率     

放射性核素153Sm诱导不同肿瘤细胞凋亡及相关基因表达研究

采用细胞抑制率实验、光镜、电镜、流式细胞仪和免疫组化方法研究了^153Sm作用于前列腺癌PC—3细胞、乳腺癌ER—75—30细胞和肺癌A549细胞后对细胞的抑制作用，诱导肿田细胞凋亡的时间剂量效应关系和周期依赖性以及凋亡相关基因bcl—2和bax蛋白在其中的表达情况。结果显示，^153Sm对3种肿田细胞有明显的杀伤作用，能诱导肿田细胞产生凋亡的形态学变化，并且随着浓度的增大和时间的延长，凋亡率增加，且呈时间剂量和周期依赖性。比1—2表达减弱，bax表达增强，细胞阻滞于G2／M期，bcl—2和bax基因均参与^153Sm诱导细胞凋亡过程。3种细胞对^153Sm的敏感性由高到低依次为PC—3细胞、ER—75—30细胞和A549细胞。     

^188Re—硫化铼混悬液药盒的研制

研制了一种药盒,能简单、快速、有效地制备     

188Re间接标记单克隆抗体的研究

采用先标记后偶联的方法,以NHS－MAG3为双功能连接剂,研究了用^188Re标记单克隆抗体的各种实验条件,得到了最佳标记方法和偶联方法。标记抗体^188Re-NHS-MAG3-IgG体外稳定性良好。完成了^188Re-NHS-MAG3-GL3在小鼠体内的生物分布实验,结果表明该配合物在体内稳定性良好。     

188Re标记抗CEA单克隆抗体及荷瘤裸鼠治疗实验研究

为建立18 8Re标记抗癌胚抗原 (CEA)单克隆抗体 (McAb )C50 的直接标记方法 ,探讨其标记条件 ,用抗坏血酸还原McAb ,并以葡萄糖酸钠为中间螯合剂 ,以氯化亚锡作还原剂 ,用188Re标记C50 。观察188Re标记McAb的体外稳定性 ,探讨还原剂SnCl2 浓度、螯合剂葡萄糖酸钠浓度、抗体浓度、加入抗体间隔的时间对标记物放化纯度的影响。SPECT显像观察荷瘤裸鼠瘤内注射188Re-C50 后放射性分布 ,对治疗后的瘤体行病理观察。实验结果显示 ,188Re标记C50 的合适条件为 :2 .2— 4 .0g/LSnCl2 、0 .3mol/L葡萄糖酸钠溶液、2 .5× 10 5— 5 .0× 10 5mol/LMcAb ,反应 2h后放化纯度可达 90 %。荷瘤裸鼠瘤内注射188Re -C50 后 ,放射性集中在瘤内 ,2周后瘤体明显缩小 ,镜下观察到肿瘤细胞破裂 ,坏死。     

切连科夫计数法测量^188Re活度的研究

利用液体闪烁测量装置，采用切连科夫计数法测定＾１８８Ｒｅ放射性活度。确定了＾１８８Ｒｅ的从本底到１０＾６Ｂｑ活度范围的放射性活度刻度曲线，用于＾１８８Ｒｅ放射性活度的准确测量。并且对一些影响测量效率的因素，如样品体积、测量瓶类型、样品溶液的介质等进行了观察。结果表明：在水溶液中，不加入波长转移剂，＾１８６Ｒｅ切连科夫计数效率达５８％。     

188Re直接法标记抗人结肠癌单克隆抗体CL-3的研究

本工作对＾１８８Ｒｅ直接标记抗人结肠癌单克隆抗体ＣＬ－３的方法进行了详细的研究。以抗坏血酸作为抗体的还原剂,以ＳｎＣｌ２－柠檬酸还原＾１８８ＲｅＯ＾－４溶液,进行抗体的直接标记。本方法操作简单、方便：标记率高（＞９５％）胶体含量小（＜５％）;标记完后不需纯化分离;标记物有良好的体外稳定性和较高的免疫活性,具有药盒化的前景。     

P53基因、Bcl-XL基因表达对淋巴性肿瘤细胞株辐射敏感性的影响

本文运用PCR－SSCP银染法检测人淋巴细胞恶性肿瘤株8226、U266、Raji、Jurkat、Daudi p53基因状态,RT－PCR半定量检测了Bcx-xL的mRNA的相对表达,DNA片段释放法检测细胞受照后24h的细胞DNA链断裂量,探讨了p53基因功能状态及Bcl-xL基因表达对细胞株8226、U266、Raji、Jurkat、Dsaudi辐射敏感性的影响。结果表明,淋巴细胞恶性肿瘤株8226、U266、Raji、Jurkat、Daudi均存在p53基因突变,高表达Bcl-xL基因的细胞株较低表达细胞株有较强的辐射耐性。     

凝聚法和分散法制备^188Re—硫化铼混悬液的比较研究

对聚法和分散法备＾１８８Ｒｅ－硫化铼混悬液的条件进行了比较。条件试验结果表明，凝聚法的最佳条件为Ｎａ２Ｓ２Ｏ３和ＫＲｅＯ４的摩尔比３５：１，反应时间７－８ｍｉｎ；而分散法分别为７０：１和３０ｍｉｎ。随着超声时间的加长，硫化铼的颗粒逐渐变小。从而得出结论：聚凝法虽然比较简单，但标记率不高（约７０％），颗粒小，稳定性差：而分散法的标记率大于９６％，颗粒较大，且７２ｈ内均十分稳定。     

^188Re—AEDP的标记条件研究

用^188W/^188Re发生器淋洗得到的^188Re研制具有潜在临床应用价值的骨疼痛治疗剂^188Re-AEDP。研究了在不同配体用量、亚锡含量和pH条件下,载体用量对标记率和稳定性的影响。实验结果表明：在最佳条件（pH1.10,AEDP20mg/mL,氯化亚锡2mg/mL,抗坏血酸3mg/mL)下,用无载体^188Re标记的^188Re-AEDP的标记率为９０％－９３％;标记后调pH为6,24h后放化纯度为70％;而用含一定量载体的^188Re标记的标记率为95％－98％,标记24h后放化纯度为93％。     

^188W—^188Re发生器的研制

以酸性氧化铝为吸附剂，制备了一个１１８ＭＢｑ的１８８Ｗ－１８８Ｒｅ发生器，并对发生器性能进行了为期４个月的检测。结果表明，１８８Ｒｅ的淋洗产额在８０％—９０％之间，１８８Ｗ的穿透率约为１．０×１０－４％。由于采用了较大高径比的交换柱，使１８８Ｒｅ的放射性比活度较高，能满足用于放射免疫治疗研究的抗肿瘤单克隆抗体标记的要求。     

188Re直接标记抗体方法研究

以2-巯基乙醇作为抗体的还原剂,葡萄糖酸钠作为中间弱配体,在pH5．0的条件下,以SnCl2快速还原”。ReO4^-,进行了单克隆抗体IgG的直接标记。探讨了影响标记率的因素。结果显示,优化后的标记条件为pH5．0,室温下标记3h,SnCl2用量2．66μmol,葡萄糖酸钠用量80μmol。该方法操作步骤简单方便,标记率较高,为94．4％±0．7％,标记物不需分离纯化,且有良好的体外稳定性,室温下可稳定保存8h。     

医用^188W—^188Re发生器的制备

采用酸性Ａｌ２Ｏ３为吸附剂制成医用＾１８８Ｗ－＾１８８Ｒｅ发生器，以生理盐水或生理盐水添加抗坏血酸为淋洗剂，并以真空快速淋洗，发生器在３个月使用期内，淋洗效率达７０％以上，＾１８８Ｗ的穿透率小于１０＾－４％，＾１８８Ｒｅ放射性核纯度和放射化学纯度均大于９９％。     

188Re标记生物分子研究进展

^188Re半衰期只有16．9h，最大p射线能量为2．11MeV，同时伴随有适于显像能量为155keV的γ射线。因此是一种理想的治疗用放射性核素，本文综述了堪。Re生物标记的各种方法及研究进展，^188Re标记放射性药物用于肿瘤核医学治疗的前景十分令人鼓舞。     

含RGD序列多肽的~(188)Re标记及其生物分布

以fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+为前体标记了含RGD的环状多肽H-c(RGDyK)(Pc1):75℃下反应30 min即可得到标记率和放化产率大于90%的目标产物188Re(CO)3-Pc1。此标记物在小牛血清及磷酸缓冲液(pH=7.4)中稳定性良好,Pc1对U87 MG细胞有良好的亲和力,半抑制常数(IC50)为84.9 nmol/L。生物分布数据显示,188Re-Pc1在血液内清除较快,且通过肝胆和肾代谢排出体外;在肿瘤内有一定的摄取。     

188Re直接标记抗人肝癌单克隆抗体片段HAb18的研究

本工作采用两步法进行＾１８８Ｒｅ直接标记抗人肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８片段的研究。用ＳｎＣｌ２作为＾１８８ＲｅＯ＾－４的还原剂,ＮａＨＳＯ３作为单抗片段双硫键的还原剂,观察了＾１８８ＲｅＯ＾－４、抗体中双硫键的还原条件及抗体标记对还原率、标记率的影响。标记率为８５％￣９３％,还原抗体片段巯基数为２．４个／分子,免疫活性分数为０．９１。实验结果表明：标记物体外稳定性良好;标记物在小白鼠和荷瘤裸鼠体内血     

188Re标记锡硫混悬液的制备及初步动物实验

＾１８８Ｒｅ标记锡硫混悬液经两步制备得到。先用＾１８８Ｒｅ的高铼酸盐与硫代硫酸钠溶液在明胶及酸性条件下加入氯化亚锡得到酸性的＾１８８Ｒｅ标记混悬液,然后调ｐＨ至中性而制得＾１８８Ｒｅ标记锡硫混悬液。混悬液的颗粒度主要为２－５μｍ,放化纯度大于９５％,体内、体外稳定性良好。动物实验表明,该混悬液对荷人脑胶质瘤裸鼠的抑瘤率达９０％。     

188W-188Re发生器的制备和质量控制

为了优化^188W-^188Re发生器的制备工艺，对^188W-^188Re发生器的制备及质量控制进行了研究，并测定了^188W在Al2O3上的吸附容量。结果表明：发生器淋洗效率大于85％，^188W漏穿率小于10^-6，^188Re放射性核纯度大于99.90％，放化纯度大于99％，洗脱液细菌、细菌内毒素含量合格。