响应面法优化腺苷脱氨酶法快速检测发酵液中的腺苷含量

通过腺苷脱氨酶(ADA)与靛酚蓝方法结合建立一种高通量快速检测腺苷的新方法。通过单因素、响应面方法优化氢氧化钠、水杨酸、亚硝基铁氰化钠和次氯酸钠的用量,并进行了验证,以最优试剂用量建立腺苷的标准曲线。确定了检测腺苷的最优试剂用量氢氧化钠25.85g/L、水杨酸68.05g/L、亚硝基铁氰化钠2.19g/L和次氯酸钠40.9m L/L,该方法线性范围为0.01~10mmol/L,加标回收率在95.5%~103.8%之间,RSD精准度在0.9%~3.3%之间。本方法与HPLC法检测发酵液中的腺苷含量结果一致。本方法可以用来快速、高通量的检测发酵液中的腺苷含量。      

离子交换法分离测定发酵液中腺苷和肌苷

腺苷发酵液中腺苷与副产物肌苷的分离对腺苷发酵生产具有重要意义。对腺苷和肌苷的分离条件进行研究，得到最佳分离条件：采用HD-8，树脂床高度为5cm，前160mL采用0．05m01／L盐酸洗脱收集肌苷，后160mL用pH5．0，0．74mol／L的醋酸钠洗脱液洗脱收集腺苷，在对发酵液进行分离时获得较好的效果。     

反相液相色谱法测定发酵虫草菌粉腺苷含量

通过样品处理及检测条件的优化,建立发酵虫草菌粉腺苷含量的RP-HPLC检测方法.结果表明:Agilent-C18柱(4.6mm×300mm,5μm),乙腈+甲醇+水=5+5+90(体积比)作为流动相,检测波长260nm,流速为1.2mL/min,柱温35℃,进样量为20μL,腺苷浓度在10μg/mL～50μg/mL时,浓度与峰面积呈线性关系,最低检出浓度为1.2μg/mL,定量限为4.0μg/mL,加标回收率为95.30％～105.20％,相对标准偏差为2.32％～5.70％.     

高效液相色谱法检测蜜环菌发酵液中腺苷含量

采用高效液相色谱法对蜜环菌发酵液中腺苷含量进行检测。色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水(10:90,V/V);检测波长259nm、柱温30℃、流速0.5mL/min。结果表明:线性范围为0.05～0.25mg/mL相关系数r为0.99964,精密度RSD为1.26%(n=5),稳定性RSD为1.29%(n=7),重现性实验RSD为1.76%(n=5),平均回收率99.82%。该方法准确、可靠,可以快速准确的对蜜环菌发酵液中的腺苷进行定性定量分析。     

RP-HPLC法测定冬虫夏草发酵液冻干粉中虫草素和腺苷含量

目的 有效地控制冬虫夏草发酵液冻干粉的质量.方法 建立了测定虫草素和腺苷含量的反相高效液相色谱法（RP-HPLC）.色谱条件：C18柱（250 mm × 4.6mm ,5μm）;流动相为乙腈＋水＋甲醇（2＋85＋2）;流速为1.0 ml/min;紫外检洲波长260 nm.结果 虫草素浓度在0.45～18.00 μg/ml范围内与峰面积呈线性相关,r=0.999 3,平均回收率为96.5%,RSD为2.3%.腺苷浓度在1.76-17.60μmg/ml范围内与峰面积呈现性相关,r=0.9990,平均回收率为97.3%,RSD为1.0%.结论 该方法样品处理简便,结果可靠,重现性好,可有效地控制冬虫夏草发酵液冻干粉的质量.     

高通量密闭微波消解-ICP-MS测定食品中的锗含量

建立高通量密闭微波消解样品-电感耦合等离子体质谱仪(inductively coupled plasma mass spectrometer,ICP-MS)测定食品中锗含量的检测方法。试验研究高通量密闭微波消解样品和高压密闭罐消解样品测试结果比对试验、锗的干扰试验、方法的检出限、精密度和准确度试验、加标回收试验,结果表明:方法检出限为:0.9 μg/kg;相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为5.1 %~17.8 %之间;相对误差(relative error,RE)为2.7 %~12.6 %之间;加标回收率在94.0 %~105 %之间,满足DD2005-03《区域生态地球化学调查评价样品分析技术要求》中的质量控制要求。对不同种类食品标准物质进行测定验证方法的准确度,测定结果与标准值相吻合。     

高效液相色谱法测定竹茹提取物及其不同部位中的腺苷含量

建立一种反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定竹茹提取物及其不同部位的腺苷含量的方法。采用RP-HPLC法;Luna C18 ODS柱(4.6?250mm,5 μm),乙腈-0.01 mol/L磷酸缓冲溶液(pH=6.5);体积流量：1.0 mL/min;进样量：10 μL;柱温：40 ℃;检测波长：257 nm。结果 采用RP-HPLC法竹茹提取物及其不同部位的腺苷含量,在0.121–124 μg/mL范围内线性关系良好(R2= 0.9999),平均回收率为98.3%,RSD为3.11%。本方法简便、灵敏、准确,可普遍应用于竹茹提取物的质量研究和品质控制。     

高效液相色谱法测定保健食品中腺苷的含量

目的建立反相高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定保健食品中功效成分腺苷。方法样品中腺苷经85%的甲醇溶液加热回流提取,C18反相柱分离,在波长260 nm处进样检测。结果在5.045~252.250μg/m L范围内具有良好的线性关系,回归方程是Y=27281X-57639,相关系数r=0.9999,检出限为0.5μg/m L(S/N=3),此方法的回收率为91.5%~97.7%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.5%~2.8%。结论此方法简便快速,准确可靠,可用于各类保健食品中腺苷含量的测定。     

高效液相色谱法测定马齿苋中腺苷的含量

目的建立高效液相色谱法检测分析马齿苋中腺苷含量的分析方法。方法比较纯水、不同体积分数的乙醇、不同体积分数的甲醇为提取溶剂时,马齿苋中腺苷提取量差异,优选最佳的提取方式。采用安捷伦ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以乙腈:0.1%乙酸=7:93(V/V)为流动相,流速0.5 mL/min,检测波长260 nm,柱温40℃,对马齿苋中的腺苷进行测定。结果纯水提取得到的腺苷含量高于不同体积分数的乙醇和甲醇提取。腺苷在1.71～171.0mg/L范围内线性关系良好,相关系数r~2=0.9999,加样平均回收率为92.65%。结论该方法结果可靠,操作简单,可以准确的测定马齿苋中的腺苷含量,可以作为马齿苋质量控制的方法之一。     

微波- 超声波联合提取枣中环磷酸腺苷的工艺研究

研究料液比、微波时间、微波功率、超声时间及超声温度对新郑灰枣环磷酸腺苷提取率的影响,采用中心组合设计的方法,建立二次多项式回归方程的预测模型,优化微波超声提取环磷酸腺苷工艺参数为料液比0.07g/ml、微波功率450W、微波时间97s、超声时间28min、超声温度60℃。在此条件下,枣中cAMP 的提取率为64.33μg/g。     

发酵液中红霉素的含量测定

建立了红霉素的含量测定方法-初筛用紫外分光光度法(UV),复筛用高效液相色谱法(HPLC).UV法确定磷酸浓度10mol/L,反应温度80℃,反应时间3min,测定波长485nm;确定HPLC法柱温50℃,检测波长210nm.此种方法针对性好,适用于大批量的红霉素发酵液的检测.     

谷氨酸母液的脱盐研究

介绍除菌后的等电母液,改变pH下脱盐,确定了脱盐最佳工艺流程。蒸发的冷凝水可以回用,脱除的硫酸铵经干燥处理后可制得无机肥料,实现味精清洁生产。     

豌豆发酵液中抗褐变成分的初步研究

研究了豌豆发酵液对马铃薯多酚氧化酶（PPO）的抑制效果。通过试管法和圆形滤纸层析法对发酵液的成分进行了定性分析。考察了不同温度和pH对豌豆发酵液抗褐变活性的影响并对其有效成分的分子质量大小和分子极性大小作了预估。结果表明,豌豆发酵液对马铃薯PPO的抑制效果显著,浓度为90mg/mL时,对马铃薯PPO的抑制率达到了100%。豌豆发酵液的成分主要有肽类、有机酸、酚类、黄酮类等物质,其中的抗褐变成分具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,分子质量小于1000 u,为极性较大的物质。     

发酵液中植酸酶活性测定方法的研究

以钒钼法对发酵液中植酸酶活性进行了测定,并对影响酶活性测定结果的因素进行了研究.实验结果表明,钒钒法测磷的灵敏度和线性范围分别为0.025mmol/L和0.025mmol/L～0.6mmol/L;为减小植酸酶活性的测定误差,结果测定必须在颜色反应结束后的4h以内完成.研究中同时发现,发酵液含有的无机磷远远大于酶活测定产生的无机磷含量,直接用发酵液测得的植酸酶酶活是不可靠的.通过对透析2h的发酵液进行植酸酶酶活的测定,实验结果的最大相对偏差仅为7.1%.     

发酵液中L-精氨酸定量检测方法的研究

确立了用甲萘酚-双乙酰法定量检测发酵液中L-精氨酸 的最佳条件:40g/LNaOH溶液、80g/L甲萘酚正丙醇溶 液、0.5mL／L双乙酰正丙醇溶液各1mL作为显色液,再加 入1μL适当稀释的发酵液,30℃水浴加热15min后测其 OD540值。对显色反应的稳定性及检测方法的重现性也进 行了研究。     

发酵液中植酸酶活力测定方法的改进

采用钼蓝-Vc显色法对产植酸酶菌株发酵液的植酸酶活性进行测定,并同AOAC无机磷分析方法进行比较。针对可能存在的植酸钠水解问题,空白样测定仍然采用三氯乙酸（TCA）为植酸酶灭活剂,改进了分析程序,减少了TCA在高温下对植酸钠的水解作用,分析结果更为准确。      

絮凝法处理苯乳酸发酵液的研究

对絮凝法处理苯乳酸发酵液进行了研究。以絮凝率和苯乳酸回收率为指标,研究了7种絮凝剂对苯乳酸发酵液絮凝效果的影响,并通过单因素实验和正交实验对絮凝条件进行优化。Al2(SO4)3作为适宜的絮凝剂,其最佳絮凝条件为:pH为3.0,温度为30℃,絮凝剂用量为8g/L,以100r/min振荡35min。在此条件下发酵液脱色率达到60.88%,苯乳酸回收率达到88.13%。     

柠檬酸发酵液脱色工艺的研究

介绍了粉末活性炭、颗粒活性炭、001 ×7阳离子交换树脂、颗粒活性炭001 ×7阳离子交换树脂对柠檬酸发酵液的脱色效果以及损耗程度,确定了适合柠檬酸发酵液的脱色剂及脱色工艺.该工艺的研究不仅降低了柠檬酸的生产成本而且对整个有机酸以及氨基酸行业的脱色工序都有重要的实际意义.     

分光光度法快速测定发酵液中杆菌肽效价

建立使用分光光度法测定发酵液中杆菌肽的方法,发酵液经预处理后使用杆菌肽敏感菌(藤黄微球菌)浊度测定杆菌肽效价.藤黄微球菌液体培养3h后,加入待测样品,再培养3h后600nm下测定吸光度,通过杆菌肽浓度与液体培养基浊度之间的线性关系测定杆菌肽效价.此方法检测准确、操作简单,可快速测定发酵液中杆菌肽效价.