PEG/(NH4)2SO4双水相萃取法提取果胶酶的研究

对PEG（聚乙二醇）／（NH4）2SO4。双水相提取果胶酶进行了研究，考察了PEG分子量、pH、成相物质浓度、NaCl浓度、温度等因素对果胶酶分配系数的影响，结果表明：双水相最佳提取条件为PEG 100027％，（NH4）2SO419％，Na-Cl0．002％，pH5．0，温度50℃，在此条件果胶酶分配系数可达到14．0。     

PEG/（NH4）2SO4双水相体系萃取果胶酶

采用PEG/(NH4)2SO4双水相系统对果胶酶进行萃取分离,研究了PEG分子量、pH、成相物质浓度、NaCl浓度、温度等因素对果胶酶分配系数的影响,结果表明:双水相体系质量组成为PEG100027%,(NH4)2SO419%,NaCl0.002%,pH5.0时果胶酶的萃取效率较好,实验中分配系数最高可达为14.0。     

PEG/(NH4)2SO4双水相相图制作新方法的研究

以PEG4000/(NH4)2SO4和PEG6000/(NH4)2SO4双水相系统为研究对象,研究了双水相相图制作的新方法--用直接电导法测出双水相体系上下两相中(NH4)2SO4的质量分数,用碘沉淀法测出上下两相中PEG的含量,并对改进方法的准确度进行了考察.结果表明,PEG4000和PEG6000的最大吸收峰分别为517.6nm和515.8nm.经可行性实验验证,(NH4)2SO4理论值-检测值与PEG理论值-检测值之间无显著性差异.     

双水相体系萃取分离葡萄籽多糖

采用Plackett-Burman (PB)试验、最陡爬坡试验、响应面设计法对双水相萃取分离葡萄籽多糖的条件进行优化.首先,采用Plackett-Burman设计从影响萃取率的5因素中筛选出PEG质量分数、硫酸铵质量分数和萃取温度3个显著影响因素.在此基础上,通过最陡爬坡试验逼近最大萃取率区域,然后通过响应面组合试验对显著因素进行优化.得到最佳萃取条件为:PEG2000质量分数为8.92％、(NH4)2SO4质量分数为16.41％、萃取温度为38℃,萃取率可达55.1％,与预测值56.075％接近.     

苯酚-硫酸法测定杏鲍菇多糖方法的研究

本实验研究了苯酚-硫酸法测定杏鲍菇多糖含量时各因素对结果的影响,并对这些因素进行了优化。通过实验发现,波长为485nm、苯酚用量1.4ml、反应温度40℃、反应时间15min,在10.00～70.00μg/ml范围内吸光度与被测物含量呈良好的线性关系,相关系数r为0.9996,平均回收率99.2%,相对标准偏差(RSD)为1.16%。     

PEG/(NH4)2SO4双水相体系提取和纯化糖化酶

用PEG／（NH4）2SO4双水相体系提取，纯化糖化酶，研究了影响体系分配系数，回收率和纯化因子的因素从而确定了萃取糖化酶的最佳条件。在WPEG为0．24，W（NH4）2SO4为0．08条件下，分配系数最小，达0．022，回收率为95．6％。     

双水相体系萃取蓝莓多糖的分配平衡研究

采用超声水提法提取蓝莓多糖,再用双水相法进行纯化。以药液百分数、K₂HPO₄浓度、PEG6000浓度为单因素,以下相多糖的萃取率为指标,应用响应面法优化蓝莓多糖的双水相萃取工艺。结果表明,当药液百分数60%,PEG6000 16%,K₂HPO₄ 16.9%,下相蓝莓多糖得率最高,可达95.03%;且多糖纯度明显高于传统的水提醇沉法。所得到模型高度显著（R²=0.9920）,拟合性好,可用于蓝莓多糖的萃取。      

PEG/(NH4)2SO4双水相相平衡数据的关联及木瓜蛋白酶在该体系中分配模型的建立

为了研究木瓜蛋白酶在双水相中的分配行为,用浊点法测定了聚乙二醇(2000、4000、6000)/硫酸铵双水相体系在298.15K下的双节线和液液相平衡数据,采用Merchuk方程、Othmer-Tobisa方程和Bancroft方程对双节线数据、液液相平衡数据进行了关联,并建立了木瓜蛋白酶在PEG/(NH4)2SO4双水相体系中的分配模型。通过相关系数考察双水相各组分浓度与分配系数的相关度,得到分配系数的对数与上下相组分的浓度差相关度较高,提出了木瓜蛋白酶分配系数与双水相成相组分浓度差的经验关系式,木瓜蛋白酶分配系数的计算值与实验值之间的相对偏差小于10%且小于其他同类模型,表明实验建立的模型对木瓜蛋白酶在聚乙二醇(2000、4000、6000)/硫酸铵双水相体系中关联效果较好,可用于木瓜蛋白酶分配系数的计算,为双水相体系中木瓜蛋白酶酶活分配系数的工程计算和双水相萃取过程的设计提供参考。     

PEG/盐双水相体系萃取小麦酯酶的研究

采用PEG/NaH2PO4双水相体系分离提取小麦中的植物酯酶,对构成双水相体系中的PEG分子量、浓度、pH、无机盐类型及浓度对萃取效果的影响进行了分析.确定了双水相组成体系为:23%PEG1000(质量比)和16%NaH2PO4(质量比),pH=4,在此体系中小麦的植物酯酶主要分布在上相,分配系数K=4.33,纯化倍数达到2.85,回收率95%.     

乙醇/(NH_4)_2SO_4双水相体系提取红景天多糖及抑菌抗氧化活性研究

利用乙醇/(NH_4)_2SO_4在水溶液中形成的分相体系作为多糖提取试剂,采用响应曲面结合BBD中心组合试验设计软件,选择优化多糖提取率与响应因素之间的最佳提取模型参数;以琼脂法结合滤纸片扩散半径作为抑菌活性考察指标;采用硫酸亚铁-过氧化氢-水杨酸氧化法和邻苯三酚(焦性没食子酸)自氧化化法考察红景天多糖对活性自由基的清除能力。试验结果表明,在最佳提取条件下[1∶22.5(g∶mL),50℃,37.5 min],红景天多糖提取率16.64%;抑菌试验结果表明,红景天多糖对金黄色葡萄球菌的抑菌直径(21.1±0.09)mm,属于抑菌极敏感型,对大肠杆菌的抑制直径(16.4±0.02)mm,属于抑菌高敏感度型,对枯草芽孢杆菌的抑菌直径为(12.6±0.04)mm,属于抑制中度敏感型;红景天多糖对3种菌的抑制作用说明,多糖具有一定的抑菌活性,且对于不同的菌种的抑制作用具有特异选择性。抗氧化活性研究结果表明,红景天多糖具有清除自由基的能力,参考VC阳性对照组的清除率,红景天多糖对羟基自由基(·OH)及过氧负离子自由基(O_2~-·)的相对清除率分别为65.1%和51.2%,对应的极限浓度分别为2.0 mg/mL和2.5 mg/mL。以上试验结果说明,通过响应曲面优化结合BBD试验设计,能够确定红景天多糖提取因素与提取率之间的二次函数模型,为多糖的人工提取提供了定性与定量评价指标;同时红景天的体外抑菌抗氧化活性结果表明,开发具有抑菌抗氧化活性的食品及药品防腐剂具有一定的实际应用价值,为红景植物资源的合理配置及相关产品的多元化应用提供技术指导与试验数据参考。     

无花果蛋白酶在双水相体系中分配行为

双水相萃取(ATPS)是近年来发展起来的新型、廉价酶纯化方法。为了扩展该方法应用领域,对PEG(polyethylene glycol)/(NH4)2SO4 双水相体系萃取无花果叶中无花果蛋白酶的实验条件进行研究,考察PEG 相对分子质量、成相物质量分数、pH 值、温度对无花果蛋白酶在两相体系中分配系数(K 值)的影响。结果表明：当两相体系中PEG 相对分子质量为1000、PEG 质量分数为20%、(NH4)2SO4 质量分数为19%、pH 值为6、温度室温(25℃)时蛋白酶在两相体系中分配系数最高可达3.6。     

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系萃取α-葡聚糖酶

采用聚乙二醇-硫酸铵(PEG-(NH4)2SO4)双水相体系对α-葡聚糖酶进行萃取,以两相比、酶活、蛋白浓度、比活力以及萃取率为参数进行比较,探讨了使用不同分子量的PEG、不同的PEG浓度以及不同(NH4)2SO4浓度下对酶分配行为的影响。实验结果表明,α-葡聚糖酶在质量分数13%的PEG4000以及13%的(NH4)2SO4的双水相系统中,可获得较高的比活力2364.97 U/mg以及萃取率99.94%。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。     

响应面试验优化超声-真空提取杏鲍菇多糖工艺

以杏鲍菇为原料,利用超声波和真空技术结合提取杏鲍菇多糖,研究料液比、超声功率、提取时间、提取温度及真空度等工艺条件对多糖提取效果的影响,并在单因素试验的基础上,通过响应面法优化超声-真空提取杏鲍菇多糖的最佳工艺条件。结果表明,超声-真空提取杏鲍菇多糖的最佳工艺条件为：料液比1∶30（g/mL）、超声功率420 W、提取时间28 min、提取温度65 ℃、真空度0.05 MPa。在此条件下,杏鲍菇多糖的得率为9.33%。同时,在相同条件下,对比分析了超声法和超声-真空法两种方式的提取效果,结果表明,当超声法提取多糖的得率为9.31%时,所需的提取时间为40 min,比超声-真空法的时间长了12 min。超声-真空技术结合提高了杏鲍菇多糖的提取效率。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相萃取猪胃蛋白酶工艺研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/（NH4）2SO4]建立稳定的双水相体系以分离猪胃蛋白酶。通过上下相体积比（VR）、比活力（SA）、纯化因子（PF）、酶活回收率（η）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析测定萃取效果。结果表明,萃取猪胃蛋白酶的最佳配比体系为25%PEG1000:18%（NH4）2SO4,所萃取的猪胃蛋白酶酶活回收率为91.5%,SDS-PAGE结果显示,萃取的蛋白质和猪胃蛋白酶对照品分子量大小一致。      

超声波辅助提取杏鲍菇黄酮研究

以杏鲍菇为原料,以乙醇溶液为提取溶剂,采用超声波辅助提取杏鲍菇黄酮。共考察液料比、乙醇浓度、超声功率和超声时间对黄酮提取率的影响。采用正交设计确定黄酮提取的最佳工艺,即液料比为30 mL/g、乙醇浓度为70%、超声功率为360 W、超声时间为30 min,在此条件下黄酮提取率可达到2.33%。利用SPSS13.0软件对正交试验结果进行数据建模分析,模型相关系数高,模型计算值和正交试验值接近,模型可用于杏鲍菇黄酮提取分析。     

微波辅助提取杏鲍菇中多糖工艺条件研究

以苯酚-浓硫酸法测定多糖,研究了采用微波辅助提取杏鲍菇子实体粗多糖工艺条件。结果表明:在单因素实验基础上,获得杏鲍菇子实体多糖提取的较佳工艺条件为:颗粒过100目筛、提取温度75℃、提取时间12 min、p H值7、料液比1∶35、微波功率400 W、提取2次。在此最佳工艺条件下,杏鲍菇多糖的得率高达7.348%。