改性双歧杆菌胞外多糖体外免疫活性研究

对双歧杆菌胞外多糖进行乙酰化、羧甲基化、多羟基化、主链降解修饰,并测定修饰前后多糖对IL-2、IFNγ细胞因子的影响。试验表明,与对照组相比,除主链降解修饰外,其他3种改性产品均能显著提高IL-2、IFNγ细胞因子的浓度,表现出体外免疫活性。其中,羧甲基化和多羟基化改性多糖的体外免疫活性高于未改性多糖。     

长双歧杆菌A17胞外多糖合成基因簇的分析

为探究长双歧杆菌A17胞外多糖（exopolysaccharides,EPS）生物合成途径,作者依托全基因组测序,利用eggNOG-mapper、KEGG、GO数据注释和局部序列比对等方法对EPS合成相关的基因进行注释与同源性分析。根据同源性分析得到一个长度约为20 kb由19个基因组成的A17 eps基因簇,预测到EPS前体糖核苷酸合成途径,同时发现该途径中的关键基因pgm并进行了异源表达。eps基因簇负责eps单体重复单元合成以及输出相关的EPS合成过程,在EPS前体糖核苷酸合成途径中双歧杆菌A17利用葡萄糖、乳糖形成UDP-Gal、UDP-Glc两种前体糖核苷酸。其中,pgm 编码1→6葡萄糖磷酸变位酶,该酶的产量和活性与EPS合成有关。     

双歧杆菌胞外多糖的特性及与宿主关系的研究进展

双歧杆菌是人类肠道菌群中的主要菌群之一,该菌属中的特定菌株能够对人类产生益生作用。双歧杆菌产生的胞外多糖(bifidobacterial exopolysaccharides,B-EPS)和特定菌株的多种益生作用密切相关,对理解菌株与宿主间的共生关系具有十分重要的作用。B-EPS的合成基因和结构在种内/种间存在高度差异性,能够影响双歧杆菌的肠道耐受和定殖能力,特异性调节宿主肠道菌群和免疫应答功能。因此,该文总结了B-EPS的来源、组成及结构特点,并重点分析了B-EPS与宿主关系的研究进展,以期为菌株筛选和B-EPS在功能食品领域中的应用提供理论指导。     

双歧杆菌BB12胞外多糖发酵条件优化及抗氧化活性研究

为提高双歧杆菌BB12胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的产量,并探究其抗氧化活性,该文通过单因素试验分析初始p H值、培养温度和培养时间对胞外多糖产量的影响,在此基础上通过响应面法进一步优化发酵工艺参数,并对胞外多糖的还原能力、·OH和·O_2~-的清除作用进行了研究。结果表明,最优发酵条件修正后为:初始p H值8、培养温度37℃、培养时间101 h。在此条件下进行发酵验证,得到的胞外多糖产量为(131. 6±0. 82) mg/L。体外抗氧化性试验表明双歧杆菌胞外多糖具有还原能力,对·OH和·O_2~-的50%清除浓度(IC_(50))均低于抗坏血酸(Vc)。为双歧杆菌胞外多糖的大规模生产及抗氧化机制的研究提供了可靠的理论依据。     

双歧杆菌胞外多糖对酸豆乳品质的影响

为探索益生菌及其胞外多糖对酸豆乳的影响,利用产胞外多糖双歧杆菌及其活性多糖与传统发酵剂共同发酵豆浆,研究其对酸豆乳理化、感官及质构特性的作用。结果表明：添加双歧杆菌（107 CFU/mL）和其活性胞外多糖（质量分数0.3%,下同）均对酸豆乳凝乳速度及后酸化无显著影响（P＞0.05）。添加0.3%胞外多糖能显著提高酸豆乳的黏度、持水力和质构特性（P＜0.05）。添加产胞外多糖双歧杆菌107 CFU/mL,对发酵期间酸豆乳发酵速率及凝胶特性影响不大;在后酵期间产生86 mg/L 胞外多糖,显著提高酸豆乳的黏度和质构特性（P＜0.05）,但对产品持水力的影响并不显著（P＞0.05）。双歧杆菌胞外多糖可有效改善酸豆乳凝胶特性,提高产品品质。     

五株双歧杆菌胞外多糖功能特性的差异分析

该研究旨在分析比较5株双歧杆菌(假小链双歧杆菌BP-1、长双歧杆菌BL-3、动物双歧杆菌BA-5、动物双歧杆菌BA-6和婴儿双歧杆菌BI-38)胞外多糖(exopolysaccharides, EPS)理化性质的差异。通过水提醇沉法提取了5株双歧杆菌的EPS,分析比较了其抗氧化活性、抑菌特性、表观形态、官能团种类和流变特性等。结果表明,BA-5的产量为(552.69±3.38) mg/L,显著高于其他菌株(P<0.05);体外抗氧化试验结果表明,5种EPS对DPPH自由基和羟自由基均具有较强的清除能力,其中BA-6 EPS对超氧阴离子自由基的清除率达到(67.78±0.68)%,显著高于其他EPS。抑菌试验结果发现,5种EPS对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌均有抑菌活性,其中BA-6 EPS对单增李斯特菌抑菌率高达(94.96±1.43)%。扫描电子显微镜(scanning electron microscope, SEM)观察发现5种EPS的表观形态存在差异,傅里叶中远变换红外光谱(Fourier middle far transform infrared spectr...     

双歧杆菌RH胞外多糖提取纯化及体外抗凝血活性评价

为得到高纯度双歧杆菌RH胞外多糖,并探讨其抗凝血功效,采用正交试验优化酶解提取工艺。优化最佳酶解条件为：蛋白酶添加量2 g/L,中性蛋白酶与胰蛋白酶质量比例为1∶2,在pH 7.5的条件下酶解120 min。再经凝胶Sepharose CL-6B柱层析纯化,得到胞外多糖纯品。利用凝胶色谱结合多角度激光散射仪测得该胞外多糖分子质量为5.946×104 D。进一步对其抗凝血活性进行评价,不同质量浓度胞外多糖可以显著延长活化部分凝血活酶时间和凝血酶时间,且具有剂量依赖效应。纯化后胞外多糖纯度可以达到97%以上,纯多糖具有较好的体外抗凝血活性,主要参与内源凝血途径。     

高效阴离子交换色谱检测双歧杆菌胞外多糖的单糖组成

利用离子交换色谱柱(DEAE-Sepharose Fast Flow,2.6×20cm)和凝胶过滤色谱柱(SepharoseCL-6B,1.6×80cm)对双歧杆菌RH所产EPS进行分离纯化,得到EPSa和EPSb两个组分。然后,采用高效阴离子交换-脉冲安培检测色谱法(high-performance anion-exchange chromatography withpulsed amperometric detection,HPAEC-PAD)分别对2个组分的单糖组成进行了定性和定量测定。结果表明,用20%H2SO4于100℃水解2.5h,可将多糖完全水解。HPAEC-PAD检测结果表明EPSa和EPSb均为杂多糖,EPSa含有Rha(1.00%),Ara(3.54%),Gal(18.13%),Glc(42.84%),Man(33.47%)和Fru(1.03%),而EPSb含有Rha(9.41%),Ara(7.88%),Gal(34.82%),Glc(17.82%),Man(27.83%)和Fru(2.24%)。     

动物双歧杆菌乳亚种M8胞外多糖的分离纯化和分子特征

动物双歧杆菌是一种高产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的益生菌,在食品工业中应用广泛.该研究以动物双歧杆菌亚种M8为研究对象,发酵提取EPS,分别选用乙醇分级沉淀(ethanol gradient precipitation,EGP)法和阴离子交换色谱(anion-exchange chromat...     

双歧杆菌生长因素的初步研究

本文建立了菌体计数的简便快速方法,对双歧杆菌的生长曲线、凝乳产酸能力及生长因素进行了研究,结果表明:双歧杆菌在脱脂乳的最佳生长时间是60h,在 SQ 培养基则为74h;双歧杆菌的最适环境是37℃,PH 值7.0,厌氧培养。      

母乳、牛乳及山羊乳脂肪酸组成的差异分析

采用气质联用法(GC-MS)测定东北区域不同泌乳期的母乳及牛乳和山羊乳常乳脂肪酸组成,并对其组成和含量进行差异分析,旨在为母乳脂质组学及以牛羊乳为基质的婴儿配方食品提供一定的理论基础。结果表明:母乳中主要脂肪酸为棕榈酸、油酸、亚油酸等,其中油酸含量最为丰富。饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)含量在不同泌乳期存在差异,其中SFA差异显著(p<0.05),初乳、过渡乳和成熟乳SFA含量分别为36.16%、37.89%、38.10%。牛乳和山羊乳主要以SFA为主,山羊乳SFA含量最高(69.07%),SFA中辛酸和癸酸是羊乳的特征脂肪酸,其含量显著高于母乳和牛乳(p<0.05)。山羊乳中中链脂肪酸(MCFA)含量最高(21.03%),是牛乳的1.5倍。其中,母乳SFA:MUFA:PUFA的比例为1.41:1.29:1,牛乳为19.12:9.98:1,山羊乳为11.14:3.98:1,山羊乳脂肪酸组成在比例上更加接近母乳。山羊乳在婴儿配方食品开发方面有更高的优势和开发空间。     

果胶对真空冷冻干燥重组苹果块质构和吸湿特性的影响

通过添加果胶或果胶酶调节重组苹果块中果胶含量,探讨果胶对真空冷冻干燥重组苹果块的硬度、脆度、孔隙特征和吸湿动力学等核心品质的影响。结果表明,与对照组相比,当果胶添加量为0.5%～4%时,果块出现了典型的蜂窝状多孔结构,硬度提高到2.01～5.41?倍,脆度增加到1.17～1.27?倍,振荡破损率下降38.97%～55.78%;与此相反的是,经果胶酶处理的果块呈现杂乱的大孔隙结构,其硬度下降34.03%,脆度增加到1.13?倍,振荡破损率增加到1.24?倍。此外,添加果胶的果块吸湿性显著下降,相对湿度在70%～90%之间发生解吸迟滞现象,而经果胶酶处理的果块在吸附平衡时具有更大的质量,吸湿性增强。综上,通过改变果浆基质中果胶含量可实现对重组苹果块质构和吸湿特性的有效调控,可为改善真空冷冻干燥果蔬食品质构品质提供理论参考。     

母乳和牛乳中乳脂肪球膜蛋白质的差异分析

为比较乳脂肪球膜（milk fat globule membrane,MFGM）蛋白在母乳和牛乳中的差异,采用有机试剂提取法,从母乳和牛乳中提取分离出MFGM蛋白,经皮尔斯TM去垢小柱去除十二烷基硫酸钠后,通过液相色谱-质谱联用技术检测分析,检测结果根据特异性肽段匹配数不小于1筛选后,在母乳和牛乳中分别检测到863 种和454 种蛋白,其中二者共有175 种,分别独有688 种和279 种。将母乳中差异表达的688 种蛋白质按PANTHER数据库进行蛋白质的Gene Ontology（GO）功能注释,这些蛋白主要是细胞部分、细胞器、细胞膜等组分,参与的生物途径有新陈代谢过程、生物调节、刺激性反应、免疫系统过程、再生作用等,具有催化、黏合、转运、酶调节等多种分子功能。另外,母乳中的这些差异蛋白参与氨酰tRNA生物合成、致病性大肠杆菌感染、脂肪酸代谢、丙酸代谢、甾体合成、酸降解等都是牛乳中的乳脂肪球膜蛋白不具有的功能。通过分析得出母乳和牛乳中的MFGM蛋白具有明显差异,虽然有部分组成和功能的重叠,但在丰度和代谢路径上,牛乳MFGM蛋白不能替代母乳MFGM蛋白。     

Effects of milk products fermented by Bifidobacterium longum on blood lipids in rats and healthy adult male volunteers

The effects of milk products fermented by Bifidobacterium longum strain BL1, a probiotic strain, on blood lipids in rats and humans were studied. Rats were fed a cholesterol-enriched experimental diet, supplemented with lyophilized powders of 1) acid milk (control), 2) milk fermented with a mixed culture of ordinary yogurt starters composed of Streptococcus thermophilus and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (SL), and 3) bifidobacterium milk fermented with the probiotic B. longum strain BL1, respectively. The bifidobacterium milk feeding brought about significant lowering of the serum concentrations of total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol, and triglycerides, in comparison with the control, while no change in high-density lipoprotein cholesterol concentration was observed. On the other hand, supplementation with SL milk resulted in only slight, nonsignificant decreases in serum lipid concentrations in comparison with the control. In the human study, 32 subjects with serum total cholesterol ranging from 220 to 280 mg/dl were randomly assigned to two treatments: 1) intake of a low-fat drinking yogurt prepared with ordinary yogurt starters composed of S. thermophilus and L. delbrueckii subsp. bulgaricus (P-group) and 2) intake of a low-fat drinking yogurt prepared with the two ordinary yogurt starters plus B. longum strain BL1 (B-group). After intake for 4 wk at 3 x 100 ml/day, reduction of serum total cholesterol was observed in approximately half of the B-group subjects; a particularly significant decrease in serum total cholesterol was found among subjects with moderate hypercholesterolemia (serum total cholesterol > 240 mg/dl). However, the serum lipid concentrations in the P-group subjects were almost stable during the experimental periods. The present results indicate the potential of the probiotic B. longum strain BL1 in serum lipid improvement.     

Improved viability of bifidobacteria in fermented milk by cocultivation with Lactococcus lactis subspecies lactis

The poor survival of probiotic bacteria in commercial yogurts may limit their potential to exert health benefits in humans. The objective was to improve the survival of bifidobacteria in fermented milk. Cocultivation with some strains of Lactococcus lactis ssp. lactis improved the survival of bifidobacteria in fermented milk during refrigerated storage. Studies on one strain, Lc. lactis ssp. lactis MCC866, showed that the concentrations of dissolved oxygen were kept lower in the cocultivated fermented milk during storage compared with monocultured Bifidobacterium longum BB536 or samples cocultured with another noneffective Lc. lactis ssp. lactis strain. Degradation of genomic DNA was suppressed in the cocultivating system with Lc. lactis ssp. lactis MCC866. Several genes that participated in protection from active oxygen species (e.g., genes coding for alkyl hydroperoxide reductase and Fe²⁺ transport system) were expressed at higher levels during refrigerated storage in Lc. lactis ssp. lactis MCC 866 compared with another noneffective Lc. lactis ssp. lactis strain. Concentration of free iron ion was also lower in supernatants of fermented milk cocultivated with B. longum BB536 and Lc. lactis ssp. lactis MCC866. These results suggest that Lc. lactis ssp. lactis MCC 866 is potentially superior in reducing oxygen damage and consequently improves the survival of bifidobacteria in the cocultivating system. This cocultivation system is of industrial interest for producing fermented milk containing viable bifidobacteria with long shelf life.     

母乳、配方乳渗透压及对婴儿健康影响研究进展

母乳是婴儿的最佳食物,不但能为婴儿提供全面营养,而且其独特的生理特性还有助于婴儿的健康成长.相关研究显示,母乳渗透压一般为300?mOsm/kg?H2O,且不受人种、泌乳时间的影响,而目前市售配方乳的渗透压大多高于母乳.婴儿(特别是早产儿)因其自身胃肠道及肾脏发育不成熟,高渗透压喂养(以下简称高渗喂养)一直被认为与婴儿...     

新疆喀什地区维吾尔族母乳源双歧杆菌分离筛选及其益生特性分析

采用多重聚合酶链式反应指纹图谱结合16S rRNA基因测序技术对新疆喀什地区维吾尔族母乳分离的双歧杆菌进行鉴定和遗传差异分析,并检测常规生理生化和糖代谢表型特征,同时测试菌株对6 种常见病原菌和3 种母乳源条件致病菌的抑菌性能和对胃肠液的耐受性。结果显示,15 份母乳样品中共分离15 株双歧杆菌,测序结果将菌株归属于3 个种以及2 个亚种,包括8 株假小链双歧杆菌（Bifidobacterium pseudocatenulatum）、2 株短双歧杆菌（B. breve）、2 株长双歧杆菌长亚种（B. longum subsp. longum）和3 株长双歧杆菌婴儿亚种（B. longum subsp. infantis）。抑菌实验表明,15 株测试菌株中,隶属于B. pseudocatenulatum的4 株菌MY92、MY75-1、MY72、MY81的抑菌谱更广,抑菌能力更强;胃肠液耐受性实验表明菌株MY92无论在模拟胃液还是模拟肠液中存活率均最高,分别达到20.37%和0.302%。基于以上描述特性,MY92作为一株有效的益生菌株,具有潜在的利用价值,为后期进一步作为防止婴幼儿腹泻辅助制剂的开发提供参考。