典型中性蛋白酶制剂的活性酶蛋白组分的分离及其对胶原蛋白的作用性能

用Superdex 75 prep grade凝胶过滤色谱对三种典型中性蛋白酶制剂进行了分离纯化,得到了具有不同相对分子质量的蛋白组分;用SDS-PAGE电泳测定了活性酶蛋白的相对分子质量,并对其酪蛋白、胶原蛋白和弹性蛋白的作用性能进行了评价;考察了三种酶活力组分的脱毛效果及其对皮粒面的作用程度。结果表明,三种中性蛋白酶制剂中的活性酶蛋白的相对分子质量不同,均无弹性蛋白水解活力,但对胶原蛋白的作用性能存在较大差异;酶的脱毛效果随其胶原活力的增加而加强,但皮革粒面的损伤程度随蛋白酶的胶原水解活力和相对分子质量的增加而加剧。     

胃蛋白酶胰蛋白酶水解酪蛋白的研究

主要研究胃蛋白酶、胰蛋白酶水解酪蛋白的过程.首先通过正交试验研究了胃蛋白和胰蛋白酶水解酪蛋白的最佳条件,分别为酶浓度0.15%、温度55℃、pH7.5、底物浓度6%和酶浓度1%、温度55℃、pH=1.6、底物浓度1%.然后对于胃蛋白酶胰蛋白酶组合水解进行研究,最后通过层析分离和液相色谱初步验证了水解产物含有β-啡肽-7等生物活性多肤.     

硅胶固定化胰蛋白酶的工艺及特性研究

以硅胶为载体,戊二醛为交联剂,进行了胰蛋白酶固定化的研究.以光度比色法测定蛋白酶活力为指标,优化了戊二醛浓度、pH和酶用量等固定化参数,研究了固定化酶的基本特性、最适作用温度和pH及其对酪蛋白的酶解.结果表明:经优化,制备功能化载体的戊二醛最适浓度为1%,固定化pH为8.0,酶与载体比例为50mg/g.固定化胰蛋白酶比活力为4.89×105U/g,最适作用温度和pH范围分别为60℃和6.0～10.0.50℃水解酪蛋白,水解60min,重复使用8次,回收酶活力约为90%.     

用蛋白质组学方法确定制备高品质羔羊皮革的最佳条件

了解羔羊皮在初期加工过程中发生的变化很有必要,因为这些变化会影响皮革产品的最终品质。胶原的种类及其宏观与微观结构,除胶原外其他蛋白质的存在,蛋白多糖的数量和种类,都对皮革质量有着深远的影响。用二维凝胶电泳和质谱分析,从未经处理的原皮和浸酸皮（用硫化钠和石灰处理,酶软化,再用氯化钠与硫酸保存的皮）中分离出的蛋白质具有明显的区别。用含有敏感着色程序的琼脂糖凝胶电泳,来鉴定存在于未经处理和处理过的皮中的氨基葡聚糖以及它们对皮革质量的影响。结果显示,有效去除作为胶原原纤维间黏接剂的蛋白多糖可以提高皮革的质量。这些分子的去除,不仅打开了皮的纤维结构,同时对脱出羊毛也很重要。赋予原皮弹性的弹性蛋白,对制革具有重大意义。定量分析弹性蛋白中的锁链（赖氨）素和异锁链（赖氨）素,可以评估弹性蛋白在皮革质量中的作用。     

苦荞麦浸提液对胰蛋白酶和淀粉酶抑制作用的研究

以酪蛋白为底物测定胰蛋白酶活性,结果发现高浓度的芦丁和苦荞麦浸提液对胰蛋白酶有明显的抑制作用,表明苦荞麦对胰蛋白酶的抑制作用中,芦丁可能起主要作用。对淀粉酶活性的研究还发现,苦荞麦浸提液对α-淀粉酶和β-淀粉酶都有明显的抑制作用,其中对α-淀粉酶起主要抑制作用的物质可能是芦丁,对β-淀粉酶的抑制作用可能是非芦丁物质所致。     

骨胶原蛋白的酶解工艺条件

采用胰蛋白酶酶解骨胶原蛋白制备胶原多肽,通过单因素和响应面试验,以水解度为指标,确定胰蛋白酶酶解胶原蛋白的最佳工艺条件。结果表明：最优工艺条件为pH6.91、反应温度60℃、酶添加量200mg/g 胶原蛋白、底物水平0.1/61.5(g/mL)、水解时间为4h;此条件下的胶原蛋白水解度达到29.36%。酶解后胶原蛋白的溶解性及乳化性均显著提高。     

响应曲面法优化酶解条件制备乳源ACE抑制肽

采用响应曲面法优化胰蛋白酶(PTN6.0S)酶解酪蛋白酸钠的工艺条件,制备高活性的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽。利用准确度更高的RP-HPLC法测定酶解产物的ACE抑制率,通过单因素和响应面试验设计,分别考察pH值、温度、时间、底物质量浓度、酶与底物比等因素对ACE抑制肽活性的影响。结果显示：响应曲面法优化酶解条件得到数学模型为：抑制率/%＝－11.21347＋4.32902A－1.45953B＋3.42928C－0.20303D＋0.050303AB＋0.047422AD＋0.14955BC＋0.12486BD－0.054526A2－0.079754B2－0.53587C2－0.28096D2,确定最佳工艺条件为pH7.0、温度52.31℃、时间19.44h、底物质量浓度5.91g/100mL、酶与底物比8.37‰,此时ACE抑制率达97.11%。     

微波法高效制备固定化胰蛋白酶

为探讨高效制备固定化酶的方法,研究采用微波固定化的方法来提高共价固定化过程的效率。以D151树脂为载体,采用中心组合设计响应面法优化制备固定化胰蛋白酶的条件。通过二次多项式回归方程的拟合,最终确定了制备固定化胰蛋白酶的最佳条件为:吸附时间1.5 h、戊二醛质量分数1.0%、加酶量8.2 mg/mL、pH 5.0、交联温度29.0℃及交联时间3.5 min。制备的固定化胰蛋白酶在25～45℃的温度范围内、pH在4.0～5.0和9.0～10.0范围内具有良好的稳定性;重复使用8次后,酶活力保留了初始酶活力的73.1%;储藏5周后酶活力仍保留了71.1%。进一步使用固定化胰蛋白酶水解酪蛋白,其效率比使用游离胰蛋白酶的水解效率更高。结果表明,采用微波辅助固定化胰蛋白酶是一种值得尝试的高效方法,制备的固定化胰蛋白酶也具有良好的催化性能。     

特定致腐菌对冷却猪肉的致腐作用机制

为研究特定致腐菌在冷却猪肉中的致腐作用机制,将韩国假单胞菌PS1（Pseudomonas koreensis PS1）和梭状芽孢杆菌J4（Bacillus fusiformis J4）分别接种到新鲜冷却猪肉中进行致腐实验,以不接种致腐菌的猪肉为对照,于4℃条件下贮藏,每隔1 d测定各组肉样的细菌总数、总挥发性盐基氮（total volatile basic nitrogen,TVB-N）含量、蛋白质含量以及脂肪酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶活力。结果表明：各组肉样细菌总数均呈现先上升后稳定的趋势,贮藏第5天,接种P. koreensis PS1、B. fusiformis J4的肉样细菌总数均超过8.0（lg（CFU/g））,明显大于对照组;接种特定致腐菌的2组肉样脂肪酶、弹性蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶活力均高于对照组,且呈现先上升后降低趋势,至贮藏第7天,弹性蛋白酶、胰蛋白酶和胶原蛋白酶活力均达到峰值,而脂肪酶活力在贮藏第5天达到峰值;同时,各组肉样蛋白质含量不断降低,产物TVB-N含量明显增加,贮藏第5天,接种特定致腐菌的2组肉样TVB-N含量均超出15mg/100g,明显高于对照组。     

响应面法优化酪蛋白磷酸肽生产工艺

在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken的中心组合实验设计原理,采用3因素3水平的响应曲面分析法,建立了胰蛋白酶水解酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽的二次多项数学模型,并以水解度为响应值作响应面和等高线,得到酶水解酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽的优化工艺条件为:水解时间为6 h,酶底比为2‰,温度50℃,底物质量分数为4%,pH值为8.4,旋转振荡速度120 r/min,在此条件下实际水解度为62.84%。     

Anionic Trypsins from Crayfish Hepatopancreas: Effects on Protein Degradation of Tail Meat

Four anionic trypsins, tentatively labeled trypsin A, B, C, and D, isolated from crayfish hepatopancreas, had high casein activity between pH 5.5 and 10.0. Temperature optima for hydrolysis of casein were 45°C for A and B, and 50°C for C and D. Trypsin D had the highest substrate turnover number (V_max) for casein reaction compared with the other trypsins at pH 6.8. Trypsins A and D had higher activities against myofibrilla and sarcoplasmic proteins from crayfish tail meat than did B and C. Results suggested that trypsins A and D are important in development of mushiness in crayfish tail meat compared with other trypsins present.     

酸性酶软化蓝湿皮的研究

用酸性蛋白酶和酸性脂肪酶对绵羊服装革蓝湿皮进行了软化研究,结果表明酸性酶处理蓝湿皮,作为软化的补充手段,对弥补前工序处理的不一致,减轻表面缺陷,提高产品质量,具有明显的效果.     

胰酶和2709混合酶助浸水的研究

将胰酶和2 70 9混合酶应用于生皮浸水,研究其在相同温度、不同时间、不同pH值条件下的应用效果。测定了浸水后皮的含水量、浸水液中蛋白质含量和羟脯氨酸含量,并对浸水皮进行了感观评定。结果表明:胰酶和2 70 9混合酶作为黄牛盐湿皮浸水助剂,不仅可以缩短浸水时间,去除绝大部分污物和部分纤维间质、少量油脂,还可以减轻颈部皱纹,提高得革率,使浸水皮更柔软、丰满。通过探索性试验,确定了胰酶和2 70 9蛋白酶作为黄牛盐湿皮浸水助剂的使用条件为:常温,液比为3 ,pH值为9.5 ,胰酶和2 70 9蛋白酶各占5 0 % (以酶的使用量为0 .0 1 6%皮质量计) ,浸水时间为9h。     

酪蛋白酶解物中抗菌肽的抑菌性及稳定性研究

对酪蛋白胰蛋白酶酶解物中抗菌肽的抗菌性及稳定性进行研究。实验通过以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌为指示菌,验证了抗菌肽的抑菌性,并以大肠杆菌为指示菌,研究了酶解物中抗菌肽在不同温度、不同pH值、不同储藏时间条件下的抑菌稳定性。结果表明:此抗菌肽能有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡样芽胞杆菌的生长,具有广谱抗菌活性;碱性及中性条件下,此抗菌肽对大肠杆菌抑菌活性稳定,酸性条件下,抑菌活性随pH值下降而增强;此抗菌肽冻干样品在室温下可长期储藏。     

酶在制革清洁生产中的应用

本文论述了酶在制革清洁生产中的作用，以及酶制剂在浸水、软化、脱脂和蓝湿革处理中的应用，展望了酶在制革清洁生产中的应用前景。     

Inhibitor activities of chickpeas (Cicer arietinum L) against bovine,pocine and human trypsin and chymotrypsin

Twenty-two chickpea samples (7 genotypes, 4 desi and 3 kabuli) representing three different sites of cultivation and three years of harvest were examined for their inhibitory activities against bovine, porcine and human trypsin/chymotrypsin, and compared for their isoinhibitor patterns. No significant difference in inhibitor activity between the desi and kabuli seed types was found for any of the enzymes used, when data from different locations and years were averaged. However, some significant differences were observed between individual cultivars when compared at the same location and in the same year. Inhibitor activities against the three trypsins and three chymotrypsins were statistically different with activities against bovine (5.46 ± 1.21) > porcine (5.24 ± 1.18) > human (4.45 ± 0.93) trypsin and those against bovine (4.89 ± 1.27) < porcine (8.91 ± 2.14) < human (10.54 ± 2.50) chymotrypsin (means ± standard deviation, expressed as mg active enzyme completely inhibited per g seed meal). Levels of activity of both trypsin and chymotrypsin inhibitor were influenced by the location and year of cultivation. Isoelectric focusing yielded identical inhibitor patterns for all samples, indicating seven isoinhibitors acting against trypsin and chymotrypsin. Results are discussed in relation to nutritional significance of these inhibitors and perspectives for breeding genotypes low in protcase inhibitors.     

水牛皮沙发革加工工艺探讨

本文对水牛沙发革加工工艺进行了探讨，要达到模仿黄牛皮沙发革的特点，认为在浸水、浸灰、软化、浸酸以及复鞣加脂工艺的化料选择及控制上，对成革的质量有很大的影响。     

涂饰剂对皮革阻燃性的影响

在优化阻燃皮革工艺的基础上，选用了四种成膜剂：丙烯酸树脂、聚氨酯、硝化纤维、乳酪素涂饰于皮革中，研究其对皮革阻燃性的影响。结果发现，综合垂直燃烧指标和氧指数指标发现，四种成膜剂中，硝化纤维和酪素的皮革抗燃性好，其中，硝化纤维抗燃性最好，但是相比较空白样，都有降低皮革的抗燃性的性质，聚氨酯和丙烯酸分别排列其后；而经聚氨酯涂饰的皮革，其在燃烧过程中，伴随着大量烟雾的放出，所以其烟密度很大。而硝化纤维有焰燃烧时间长，但发烟量小，酪素与丙烯酸树脂的烟密度基本上差不多。综合三个指标来看，硝化纤维、酪素、丙烯酸树脂和聚氨酯依次显示抗燃性。     

酪蛋白的胰蛋白酶水解物分离及其抗氧化性研究

采用胰蛋白酶水解酪蛋白,使用D201阴离子交换树脂对酪蛋白酶解液进行分离,并收集5个多肽片段（P1、P2、P3、P4、P5）,评价酪蛋白酶解液及分离所获得的酪蛋白多肽的抗氧化性。结果表明,酪蛋白多肽的还原力和DPPH自由基清除力均显著高于酪蛋白酶解液（P＜0.05）;多肽P2的还原力最高,为0.234,然后是多肽P3,为0.057;多肽P4的DPPH自由基清除活力最高,达到（23.8±0.18）%,然后是多肽P3,为（4.5±0.16）%;多肽P5的Fe2+螯合率最高,为（99.80±0.12）%,多肽P3的Fe2+螯合率最低,为（2.50±0.14）%,而酶解液的Fe2+螯合率为（31.27±5.80）%;多肽P2和P3不具备脂质过氧化抑制力。多肽P1、P4、P5具有较好的抗氧化性。     

酶制剂在制革清洁生产中的应用

本文论述了酶制剂在制革清洁生产中的应用,包括酶浸水,酶脱毛,酶浸灰,酶脱脂,酶软化及制革废弃物的酶处理,提出了酶制剂在制革生产中的应用新途径。