超高压处理对β-伴大豆球蛋白抗原性及结构的影响

探究超高压处理对β-伴大豆球蛋白抗原性及结构的影响,为大豆蛋白的脱敏提供方法。通过等电点冷沉法提取β-伴大豆球蛋白,设置不同的超高压条件对β-伴大豆球蛋白进行处理,利用免疫印迹法(Western-Blot)与ELISA法分析β-伴大豆球蛋白的免疫活性,通过SDS-PAGE、傅里叶变换红外光谱(FTIR)与荧光光谱表征β-伴大豆球蛋白的结构变化。结果表明:超高压处理能够显著改变β-伴大豆球蛋白的抗原性和结构。400 MPa超高压处理能最大程度地降低β-伴大豆球蛋白的免疫活性,且蛋白质二、三级结构发生显著变化,α-螺旋与β-转角含量下降,无规则卷曲和β-折叠含量上升,大量疏水性区域暴露。超高压处理改变了β-伴大豆球蛋白的空间结构,可能破坏或掩盖原有的抗原表位,进而降低抗原性。     

热处理对β-伴大豆球蛋白结构及免疫活性的影响

以脱脂豆粉为原料,利用碱溶酸沉法分离提取β-伴大豆球蛋白,采用间接竞争ELISA法测定不同温度、加热时间、反应浓度下β-伴大豆球蛋白的抗原性变化,并对热处理后产物的溶解度、免疫原性及结构特性进行分析。结果表明:热处理能显著影响β-伴大豆球蛋白的抗原性。热处理后,样品蛋白的溶解度随温度升高呈先上升后下降的趋势。免疫印迹结果显示:热处理后β-伴大豆球蛋白的免疫原性有一定程度的降低,但不能完全消除。傅里叶红外光谱结果表明:热处理之后样品蛋白中的α-螺旋和β-折叠的含量减少,β-转角含量和无规则卷曲含量增加。     

高压均质与酶法联合改性对大豆蛋白抗原性及结构的影响

大豆蛋白营养价值高应用广泛,但是引发的过敏反应会给人体带来危害,高压均质和酶解联合处理是一种比较有效的改性方法。大豆分离蛋白经不同的高压均质条件处理后利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行复合酶解。结果表明:高压均质联合酶解能显著降低大豆主要抗原蛋白的抗原性。ELISA结果表明高压均质联合酶解处理后β-伴大豆球蛋白的抗原抑制率降低了44.38%,大豆球蛋白的抗原抑制率降低了19.93%;傅里叶红外结果表明处理后的样品二级结构中α-螺旋含量减少、无规则卷曲含量增加;表面疏水性结果表明大豆蛋白的空间结构发生改变,蛋白质的三、四级结构被破坏。蛋白质氨基酸序列及空间结构的改变能够引起抗原表位的隐藏或掩盖进而影响抗原性。     

花生蛋白的浓度对其超声改性效果的影响

超声处理可以改变蛋白结构从而改善其功能特性,而蛋白与水的质量体积比(以下简称蛋白浓度)会影响蛋白改性效果,通过改变体系中的花生蛋白浓度(0.005～0.150 g/mL),采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、荧光光谱、傅里叶红外光谱、高效液相色谱分析花生蛋白的亚基组成、表面疏水性、内源荧光发射波长、二级结构和分子量,研究其对花生蛋白分子结构的影响。结果表明：较高浓度(0.1 g/mL)的花生蛋白经超声(400 W,5 min)处理后表面疏水性和暴露游离巯基含量显著增加,内源荧光发射波长发生了明显红移,而且平均粒径增加幅度最大,但超声强度增加后平均粒径降低;较低浓度(0.01 g/mL)的花生蛋白经超声处理后二硫键含量最高,二级结构变化较大,表现在β-折叠含量显著下降,β-转角含量显著增加。因此,为达到某项分子结构的预期改性目标,超声时选择合适的蛋白浓度至关重要。     

pH值对水剂法提取花生蛋白凝胶特性的影响

采用水剂法提取花生蛋白,研究pH值对花生蛋白热致凝胶特性(凝胶硬度、持水性、动态流变性质、凝胶作用力)和部分结构性质(表面疏水性、游离巯基、内源荧光光谱)的影响。结果表明:pH值为3时花生蛋白凝胶具有最大的凝胶硬度、持水性和储能模量;在中性和碱性范围内,pH值为8时花生蛋白凝胶的硬度、持水性和储能模量最高。花生蛋白凝胶溶解度测定结果表明,疏水相互作用在花生蛋白凝胶形成过程中发挥最主要的作用,二硫键其次。分析花生蛋白的结构性质可知,pH值为3时花生蛋白的表面疏水性和游离巯基含量最高,且花生蛋白内源荧光光谱发生了明显的红移;而在中性和碱性范围内,pH值为8时花生蛋白表面疏水性最强,游离巯基含量较高。     

酶解改性对大豆蛋白抗原性的影响研究

大豆蛋白营养价值很高,但其是八大类食物过敏原之一,会对过敏人群造成危害,而酶解是一种较好的蛋白改性方法。选用风味蛋白酶处理大豆分离蛋白,采用间接竞争ELISA法测定酶解产物中β-伴大豆球蛋白的抗原性,并利用响应面法优化最佳酶解条件。结果表明,风味蛋白酶可以显著降低β-伴大豆球蛋白的抗原性,且其抗原性与水解度具有负相关关系。风味蛋白酶在酶解时间30 min、加酶量1 500 U/g、温度60℃、p H 6.5条件下,酶解产物中β-伴大豆球蛋白抗原抑制率达到最低,为21.79%,比大豆分离蛋白降低了76.60%。SDS-PAGE结果表明,风味蛋白酶能够将β-伴大豆球蛋白酶解成低相对分子质量的肽段,从而降低其抗原性。     

冻藏时间对小麦湿面筋蛋白结构和热性能的影响

采用荧光分光光度计、Zeta电位及激光粒度分析仪、扫描电子显微镜(SEM)和差式扫描量热仪(DSC)分别研究了小麦湿面筋蛋白在-18℃下冻藏0~120 d的结构和热性能.结果表明:随着冻藏时间的延长,小麦面筋蛋白的表面疏水性和粒径增加;小麦面筋蛋白中巯基含量增加且二硫键含量减少;小麦面筋蛋白的网络结构遭到破坏,其纤维表面结构变得粗糙且不均匀;小麦面筋蛋白的变性转变温度(Td)和变性焓(ΔH)呈现先降后升趋势.     

小麦受蛀食性害虫侵害后其面筋蛋白结构的变化

以河南产储藏3 a的商用小麦为材料,按不同虫种分组,采用Ellman’s试剂比色法检测不同感染时间小麦面筋蛋白的—SH和—S—S—含量,利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)测定小麦面筋蛋白二级结构的变化.结果表明:随着侵害时间的延长,样品中—SH含量升高,—S—S—含量下降;影响的大小顺序为:谷蠹、米象、玉米象;无论是在相同侵害时间的不同虫口密度,还是相同虫口密度的不同侵害时间条件下,3种害虫侵害小麦后对小麦面筋蛋白的二级结构没有影响.     

脱盐过程中丝素蛋白缔合机理

采用透射电子显微镜(TEM)、X-射线衍射(X-ray)、红外光谱(IR)、圆二色谱(CD)等测定了在脱盐过程中丝素蛋白分子构象的变化、随着丝素蛋白盐溶液脱盐率的增加，丝素蛋白分子从无规线团结构慢慢向β-折叠结构转变，导致丝素蛋白分子间发生缔合．     

响应面法优化β-伴大豆球蛋白超高静压处理条件的研究

β-伴大豆球蛋白是7S球蛋白的主要成分,是重要的大豆抗原蛋白。在单因素试验的基础上对超高静压处理压强、处理时间、β-伴大豆球蛋白质量浓度3个因素进行研究,以β-伴大豆球蛋白抗原抑制率为响应值,采用响应面法优化β-伴大豆球蛋白超高静压处理条件。结果表明:β-伴大豆球蛋白超高静压处理最佳条件为压强455 MPa、时间18 min、蛋白质量浓度15 mg/m L,在此条件下β-伴大豆球蛋白抗原性抑制率为49.59%。验证试验测得此条件下β-伴大豆球蛋白抗原抑制率为51.19%,标准偏差为1.07%,说明利用响应面法分析结果可靠。     

两种纤维素醚类亲水胶体对冷冻面团中面筋蛋白的影响

为改善面团在冷冻过程中的品质劣变,在面粉中添加不同复配比例的羧甲基纤维素钠(CMC)和羟丙基甲基纤维素钠(HPMC)制作面团,分别冻藏0、7、14、21、28 d取出制备面筋蛋白,分析冻藏时间对面筋蛋白结构和特性的影响。结果表明：在冻藏的各阶段,添加不同复配比例的CMC和HPMC能够增加面筋蛋白的弹性模量(G′)、黏性模量(G″)、热变性温度(T_d)、焓(ΔH)以及β-折叠、无规则卷曲的含量,减小面筋蛋白的疏水性、游离巯基含量以及α-螺旋、β-转角的含量;随着冻藏时间的增加,面筋蛋白的G′、G″、T_d、ΔH减小,表面疏水性和游离巯基含量增加;添加不同复配比例的CMC和HPMC能够减缓冻藏过程中面筋蛋白G′、G″、T_d、ΔH的下降及其表面疏水性和游离巯基含量的增加;冻藏28 d,添加CMC和HPMC(复配比例0.7∶0.3)的面筋蛋白的网络结构仍保持完整性和连续性。冻藏0～28 d, CMC和HPMC复配通过提高面筋蛋白的稳定性,可以减缓面团品质的劣变。     

柳叶水甘草碱与牛血清白蛋白的相互作用

利用亲和毛细管电泳法(ACE)研究了柳叶水甘草碱(TAB)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明,柳叶水甘草碱与BSA常温下结合常数为8.00×106 L·mol-1,热力学参数验证两者相互作用力以氢键和范德华力为主.傅立叶变换红外光谱(FT-IR)进一步考察了柳叶水甘草碱对BSA二级结构的影响,其结果是,柳叶水甘草碱使得蛋白的α-螺旋、β-转角含量降低,β-折叠含量上升.在分子水平,利用分子对接技术确定了柳叶水甘草碱和牛血清白蛋白结合的适宜位置.     

超声波处理对酪蛋白-胰蛋白酶体系酶解特性的影响

研究了超声波处理对酪蛋白-胰蛋白酶体系酶解进程中水解度(DH)、酶解产物中可溶性氮、氨基氮及肽氮含量变化规律的影响.结果表明:超声波处理后,体系水解度及酶解产物中氨基氮含量较对照显著提高(p<0.05),但两种超声波处理功率(160 W与400 W)之间无明显差别;400 W超声波处理显著提高了酶解产物中可溶氮含量(p<0.05).     

微波-超声波辅助提取小麦麸皮中酚基木聚糖的研究

以小麦麸皮为原料,研究微波功率、微波时间、超声波功率、超声波时间对小麦麸皮中水溶性酚基木聚糖(SPX)提取率的影响,同时分析了小麦麸皮水溶性酚基木聚糖的基本成分和抗氧化性.利用响应面法优化小麦麸皮水溶性酚基木聚糖的微波-超声波辅助提取工艺.通过响应面分析获得最佳工艺条件为:微波功率595 W,微波时间6 min,超声波功率300 W,超声波时间30min,小麦麸皮中水溶性酚基木聚糖提取率为28.33%.对提取的小麦麸皮水溶性酚基木聚糖的抗氧化性研究表明:水溶性酚基木聚糖对羟自由基有清除作用,对铁离子有还原能力.     

超声波在酶氧退煮漂一浴中的应用

通过正交试验,确定了酶氧退煮漂一浴中超声波处理棉织物的最优工艺,并采用扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、热重分析(TGA)研究了超声波处理对棉纤维的形态结构、结晶形态和热稳定性能的影响.得出:最佳超声波处理工艺为净棉酶用量为4.0 g/L,30%双氧水用量为16 mL/L,温度为70℃,时间为50 min,pH为10~10.5,浴比为1∶30,超声功率密度为0.55 W/cm2;将超声波技术应用于酶氧一浴中,棉纤维的表面结构发生了明显的变化,棉纤维细胞壁出现裂纹和分丝帚化,棉织物的结晶度增加,热稳定性变差.     

超声波对皮革染色中染料扩散系数及上染率的影响

以直接耐晒黑Sella Fast Black BR7及酸性棕Lurazol Brown N3G为对象,研究了无限染浴条件下超声波(频率23.7?kHz,声强1.47?W/cm2)对皮革染色过程的影响,计算出不同染色温度下平衡上染百分率及扩散系数.结果表明超声波有促染作用,可加快上染速率、提高上染百分率.超声波对染料扩散系数的影响是其产生促染作用的原因之一.在45?℃下染色时超声波作用后BR7和N3G的平均扩散系数分别为15.84×10-16?m2/s及 6.77×10-16?m2/s ,比不施加超声波提高40.9%及10.8%;超声波促染作用与染浴温度有关,在45?℃染色时超声波的促染作用最明显.     

超声对小麦湿面筋蛋白粘弹性模量和蠕变恢复性能的影响

利用流变仪研究了超声处理对小麦湿面筋蛋白流变学性质的影响.结果表明:频率为0.1~21.25 Hz的范围内进行频率扫描时,当频率为1 Hz时,采用不同功率(100 W、150 W、200 W、250 W和300 W)超声20 m in后,小麦湿面筋蛋白的弹性模量分别为3 361 Pa、3 976Pa、5 788 Pa、6 954 Pa和3 912 Pa;粘性模量分别为1 212 Pa、1 523 Pa、2 755 Pa、3 036 Pa和1 461 Pa.蠕变-恢复实验过程中,当蠕变进行到110 s时,经过不同功率(100 W、150 W、200W、250 W和300 W)超声后,小麦湿面筋蛋白的形变分别为0.333%、0.331%、0.233%、0.188%和0.296%.这表明,超声功率的大小对小麦湿面筋蛋白的弹性模量、粘性模量和蠕变-恢复时的形变有较大影响.与未经超声的湿面筋蛋白相比,超声功率大于150 W和小于300W时,超声对小麦湿面筋蛋白的弹性模量和粘性模量有正的影响,而当超声功率小于150 W和大于300 W时,超声对小麦湿面筋蛋白的弹性模量和粘性模量有负的影响.     

小麦蛋白多肽螯合钙制备工艺及其功能特性研究

钙肽螯合物是有极大发展潜力的补钙剂,具有结构稳定、吸收效率高及安全等诸多优势。以小麦蛋白为原料,通过超声波预处理及碱性蛋白酶水解,得到超声小麦蛋白多肽(ultrasound wheat protein peptide, UWPP)。将UWPP与Ca²⁺进行螯合,以螯合率为指标,采用单因素试验和响应面试验进行优化并对其结构和功能特性进行表征。结果表明：超声小麦蛋白多肽螯合钙(ultrasound wheat protein peptide Calcium chelate, UWPP-Ca)的最佳制备工艺为对小麦蛋白多肽(wheat protein peptide, WPP)进行60 Hz、20 min、55℃的超声预处理得到UWPP后,肽钙质量比3∶1、pH 9.2、温度60℃、反应时间0.63 h,此条件制备的UWPP-Ca螯合率为83.20%;通过紫外光谱和傅里叶变换红外光谱对UWPP-Ca进行分析,表明UWPP和Ca²⁺形成了结合位点,两者反应产生了螯合物;WPP、UWPP和UWPP-Ca溶解度、乳化性和起泡性均在pH 10的条件下最高,...     

壳聚糖-醋酸改性对小麦面筋蛋白溶解度的影响及蛋白质二级结构的分析研究

以自制的小麦面筋蛋白为原料,采用壳聚糖与醋酸共同作用改善小麦面筋蛋白的溶解性能.确定最佳工艺条件为:醋酸pH值为3、壳聚糖添加量为0.1%(占小麦面筋蛋白干基的质量,W/W)、加热温度为70℃、搅拌时间为50 min.在此奈件下,小麦面筋蛋白的溶解度由原来的0.35 g/L提高到了7.69 g/L.此外,红外光谱分析表明,在壳聚糖添加量为0.1%时,壳聚糖对面筋蛋白产生的仅仅是物理作用而不是化学接枝作用.     

樟树花生根中提取白藜芦醇

以樟树花生植株和花生芽为原料,测定了各组分中白藜芦醇的含量,发现花生根部的白藜芦醇含量较高,确定了花生根作为提取白藜芦醇的原料。以花生根为原料,采用单因素实验法探讨了超声波下提取白藜芦醇的影响因素,以及酶和β-环糊精对于提取白藜芦醇的影响,通过比较白藜芦醇的含量,得到了最佳的工艺条件。最佳工艺条件为:70%乙醇,料液比1:60(g·mL-1),超声温度60℃,超声时间50 min,超声功率80 W,纤维素酶添加量2%,β-环状糊精用量1:0.075(g·mmol-1)时,白藜芦醇的提取率为0.699%。