北虫草体外抗病毒、抗肿瘤活性部位的筛选

目的：采用系统溶剂法对北虫草子实体提取分离,并对各提取部位进行抗病毒和抗肿瘤活性研究。方法：采用CPE法进行体外抗病毒(抗流感甲型病毒和抗疱疹病毒)实验,按Reed-Muench法计算各提取部位的药物半数有毒质量浓度(TC50)、半数抑制浓度(IC50)和选择指数(SI),观察各提取部位的抗病毒活性;用Alamar Blue法,采用体外肿瘤细胞株K562和MCF-7的增殖抑制实验模型,研究北虫草子实体的抗肿瘤活性。结果：抗病毒实验结果表明,氯仿相(CMCl)具有抗疱疹病毒HSV-Ⅰ和 HSV-Ⅱ的活性,CMCl对HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ病毒的半数抑制质量浓度(IC50)分别为194.01μg/mL和173.34μg/mL,选择指数(SI)分别为：＞1.29和 ＞1.44;3个部位均没有抗流感甲型病毒活性。抗肿瘤实验结果表明,北虫草3个部位提取物,在中、高质量浓度(50、200μg/mL)时,对抑制K562的增殖都有一定的活性,活性高低为：乙醇相(CMEtOH)＞氯仿相(CMCl)＞乙酸乙酯相(CMEtOAc);3个部位相比较,仅CMCl对人乳腺癌细胞株MCF-7具有抑制活性,在10、50、200μg/mL的抑制率分别为(9.6±3.0)%、(46.1±8.9)%和(68.5±9.2)%,呈现明显的质量浓度依赖性。结论： 在北虫草3个部位中,CMCl是抗肿瘤和抗病毒活性较高的活性部位,值得进一步开发利用。     

酸浆五种部位醇提物的活性比较研究

目的:探讨酸浆根、茎、叶、宿萼和浆果醇提物的抑菌、抗氧化、抗肿瘤和抑炎活性。方法:采用牛津杯法检测酸浆五种部位醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性;DPPH清除法检测其抗氧化活性;Alamar Blue法检测其对人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231和肝癌细胞株Bel7402的抑制效果;一氧化氮检测试剂盒测定其抗炎活性。结果:浆果对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果最好,叶对枯草芽胞杆菌抑菌活性较明显,抑菌圈分别为(16.63±0.49)、(14.97±0.37)、(15.83±0.29)mm。宿萼的抗氧化活性最高,浓度为5 mg/m L时对DPPH的清除率为96.79%±2.09%,基本和同剂量的VC效果相当。酸浆各部位醇提物对肿瘤细胞的抑制作用呈现浓度依赖性,其中根对MCF-7的抑制活性较强,宿萼对MDA-MB-231和Bel7402的活性较强,IC50分别为(31.46±1.49)、(48.84±1.69)、(65.48±1.82)μg/m L。叶的抗炎效果最佳,茎抗炎效果较弱,10μg/m L时NO产生量分别为11.01、27.73μmol/L。结论:酸浆具有一定的抑菌、抗氧化、抗肿瘤和抗炎活性,为酸浆的功能开发及活性成分分离提供一定的理论依据。     

灵芝子实体超临界CO2萃取物与醇提物生物活性的比较

采用超临界CO2萃取法和醇提法对灵芝子实体进行提取,利用体外抗肿瘤、抗神经细胞损伤和抗氧化模型比较了两种方法获得的萃取物生物活性的差异.在100μg/mL时,灵芝子实体超临界CO2萃取物(SFE-CO2E)对肿瘤细胞LNCaP、K562、HepG2增殖的抑制率分别为78.37％、87.09％、78.85％,均高于灵芝子实体醇提物(EtOHE)的60.65％、82.29％、66.15％;在体外抗神经细胞损伤模型中,在200μg/mL时SFE-CO2E对PC12的修复率为59.29％,优于EtOHE的17.77％;然而在清除羟基自由基、H2O2和DPPH自由基的实验中,在800μg/mL时,EtOHE的清除率分别为61.90％、67.33％、52.07％,均高于SFE-CO2E的29.24％、39.43％、17.05％.可见,超临界CO2萃取法和醇提法在提取灵芝子实体的不同的活性物质上各有优势.     

柳叶蜡梅醇提物酚类成分及其抗氧化活性研究

采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定酚类成分,并研究柳叶蜡梅醇提物的体外抗氧化活性。结果表明,柳叶蜡梅醇提物的总酚含量为169.18±2.49 mg/g。柳叶蜡梅醇提物的酚类成分以表儿茶素、杨梅黄素、儿茶素、芦丁和绿原酸含量较高。柳叶蜡梅醇提物对2, 2-二氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)铵盐(ABTS)自由基、羟自由基、1, 1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基和超氧阴离子自由基的半数清除浓度(IC₅₀)分别是8.98μg/m L, 16.21 mg/mL, 46.10μg/mL和2.85 mg/mL,并且具有一定还原能力。柳叶蜡梅是开发天然食品抗氧化剂的良好来源。     

桑黄黄酮高产菌株筛选及菌丝体提取物生物活性研究

以菌丝生长速度、总黄酮含量及产量为主要指标,筛选桑黄菌株,获得了桑黄黄酮高产菌株;运用HPLC对菌丝体醇提物黄酮类化合物的种类及含量进行了比较,并进一步考察了菌丝体醇提物对L1210肿瘤细胞的抑制作用及对超氧阴离子自由基的清除作用。结果表明,PB-10菌株醇提物黄酮类化合物的种类及含量明显多于其他菌株,适宜作为桑黄黄酮发酵用菌株。PB-10菌株醇提物在250μg/mL浓度下,对L1210细胞抑制率可达82%;对超氧阴离子自由基清除的IC50值为2.3μg/mL,清除作用与总黄酮含量存在明显的量效关系。     

壶瓶枣提取物抗氧化性研究

以水和乙醇为提取剂,运用超声强化方法提取了壶瓶枣中水溶性及醇溶性成份。采用DPPH·、HO·、O2-·、还原能力及金属螯合能力方法研究了提取物的抗氧化活性,并对提取物中的总黄酮含量进行了测定。结果表明:两种提取物均具有一定的抗氧化活性,水提取物的抗氧化能力为:O2-·(IC501.80μg/mL)DPPH·(IC504.13μg/mL)HO·(IC5061.04μg/mL),醇提取物的抗氧化能力为:DPPH·(IC500.58μg/mL)O2-·(IC501.70μg/mL)HO·(IC5060.03μg/mL),醇提物的金属螯合能力和还原能力均高于水提物。提取物的抗氧化活性与其总黄酮含量具有一定的相关性。     

水生蔬菜提取物的抗氧化活性分析及其对菜籽油的抗氧化作用

研究七种常见水生蔬菜不同部位提取物的抗氧化活性以及对油脂抗氧化的效果。采用ABTS自由基清除法、DPPH自由基清除法检测菱角、芡实、莲藕、水芋头、茭白、荸荠和慈姑不同部位的醇提物、水提物的抗氧化活性,烘箱法测定对菜籽油过氧化值的影响。在30种提取物中DPPH自由基清除能力较强的三种提取物IC50值分别为:芡实壳醇提物(0.03 mg/mL)芡实壳水提物(0.04mg/m L)=菱角壳醇提物(0.04mg/m L);ABTS自由基清除能力较强的三种提取物Trolox含量分别为芡实壳醇提物(1.42g/g)芡实壳水提物(1.41 g/g)菱角壳醇提物(1.15 g/g);添加0.1%浓度的五种提取物第7 d的POV值分别为23.86 meq/kg、24.06 meq/kg、23.53meq/kg、24.43 meq/kg、22.40 meq/kg,五种提取物的油脂抗氧化效果均不如0.1%浓度的BHA。30种水生蔬菜提取物中,芡实壳和菱角壳的醇提物、水提物DPPH自由基清除能力最强,芡实壳醇提物、水提物ABTS自由基清除能力最强;芡实壳水提物、芡实壳醇提物、菱角壳水提物、菱角壳醇提物以及藕节醇提物对菜籽油有一定抗氧化的效果,但效果弱于相同剂量的BHA。     

普洱茶水提物抗肿瘤的实验研究

应用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测普洱茶水提物对6种不同肿瘤细胞株生长抑制作用以及流式细胞仪分析普洱茶水提物对Hela细胞凋亡的影响;采用裸鼠移植瘤模型,观察普洱茶水提物对宫颈癌的治疗作用。体外细胞毒活性检测显示,普洱茶水提物对人肝癌BEL-7402、胃癌MGC-823、乳腺癌MCF-7、子宫颈癌He La及结肠癌HT-29均有抗肿瘤作用,其中普洱茶水提物200μg/m L浓度下肿瘤细胞生长抑制率可达79%以上。普洱茶水提物能诱导Hela细胞发生凋亡,当浓度为100μg/m L,细胞凋亡率为(50.92±5.38)%。荷瘤鼠实验结果显示:连续给药28 d,普洱茶水提物1.0 g/kg剂量组、0.5 g/kg剂量组对人宫颈癌Hela移植瘤抑制率分别为40.3%、22.4%。普洱茶水提物在体外和体内均具有一定的抗肿瘤作用。     

15种药食同源中药提取物抗氧化及抗骨质疏松活性研究

通过评价15种药食同源中药提取物的抗氧化及抗骨质疏松活性,筛选获得具有抗骨质疏松活性的中药。以15种药食同源中药的醇提物和水提物为对象,通过测定提取物的氧自由基吸收能力、还原能力及细胞内抗氧化能力,评价其抗氧化活性。用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色及活性检测方法评价其抗骨质疏松活性。研究结果表明,3种药食同源中药的5个提取物表现出良好的抗氧化作用,可明显地抑制TRAP活性,包括花椒醇提物、薄荷醇提物及水提物、青果醇提物及水提物,且均以剂量依赖的方式抑制破骨细胞增殖及TRAP活性,当质量浓度为1μg/m L时,薄荷水提物(93%,308%)、青果醇提物(87%,292%)和水提物(83%,297%)对破骨细胞增殖及TRAP活性的抑制效果较好,具有较强的抗骨质疏松活性。本文可为药食同源中药抗骨质疏松保健功能的开发提供理论基础。     

高良姜醇提物的抗氧化、酶抑制活性及其与活性成分的相关性

以新鲜高良姜为原料,制备甲醇提取物,分别采用Folin-Ciocalteu法和AlCl3比色法测定多酚和总黄酮含量,并利用DPPH法、ABTS法和FRAP法评价抗氧化功能,同时检测对胰脂肪酶和α-葡萄糖苷酶的抑制功能。结果显示,高良姜醇提物中多酚和总黄酮分别为62.91mg GAE/g DW和13.12mg QE/g DW。当醇提物浓度达到50mg/mL时,对DPPH自由基的清除率达到95.78%,半抑制浓度IC_(50)为6.37mg/mL;对ABTS自由基的清除率达到99.03%,IC_(50)为2.24mg/mL。FRAP值为428.92μmol Fe~(2+)/g DW。醇提物对胰脂肪酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC_(50)值分别为205.87,1.32mg/mL。表明高良姜醇提物含有丰富的多酚和黄酮,具有较强的体外抗氧化活性、胰脂肪酶和α-葡萄糖苷酶抑制功能,在降脂降糖药品与功能性食品的开发与应用方面具有很好的前景。     

生姜与醋泡姜抗氧化、抑菌和抗肿瘤活性比较研究

本文研究了生姜和醋泡姜的姜油和姜乙醇提取物的抗氧化、抑菌和抗肿瘤作用的活性差异。以抗坏血酸为对照,评价两类姜提取物的抗氧化活性(DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基(·OH)清除能力和总还原能力);以96孔板微量稀释法比较了两类姜提取物对几种常见致病菌的抑菌活性;同时研究了两类姜提取物对HCT116(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、Skov3(卵巢癌细胞)等肿瘤细胞的抗癌效果。结果表明:醋泡姜的抗氧化活性总体上好于生姜,其中醋姜油对羟自由基(·OH)的清除能力(IC₅₀为0.28 mg/mL)明显强于生姜油(IC₅₀为0.42 mg/mL);生姜和醋泡生姜提取物都有一定的抑菌作用,醋姜油的抑菌效果稍好于生姜油,其中最好的是醋姜油对金黄色葡萄球菌的抑制作用(156.25 μg/mL);抗肿瘤活性基本相当。本研究结果表明,醋泡姜在抗氧化、抑菌功能上一定程度优于生姜。     

HPLC法同时测定红油豆瓣酱中的7种非食用色素

建立了红油豆瓣酱中碱性嫩黄O、碱性橙Ⅱ、罗丹明B和苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ同时测定的高效液相色谱法.样品用乙腈/水(7:3,V/V)超声提取后冷冻离心去油,以甲醇和乙酸铵缓冲溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为435 nm、510nm和547 nm.上述7种色素组分在其质量浓度为0.1～10 μg/mL时有良好的线性关系,...     

超高效液相色谱-质谱联用法(UPLC-MS/MS)测定辣椒制品中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的含量

建立简便快速的测定辣椒制品中4种苏丹红染料的检测方法,以乙腈为提取溶剂,采用乙腈-0.1%水溶液的流动相体系和正离子电离模式,用UPLC-MS/MS测定4种苏丹红染料;苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ线性范围为0～200ng/mL,R2大于0.9911,检出限分别为1.0、2.0、2.0、4.0μg/kg,加标回收率均大于75%,RSD小于10%。该方法简便灵敏,准确快速,可用于辣椒制品中4种苏丹红染料的测定及确证。     

Short communication: Antiviral activity of subcritical water extract of Brassica juncea against influenza virus A/H1N1 in nonfat milk

Subcritical water extract (SWE) of Brassica juncea was studied for antiviral effects against influenza virus A/H1N1 and for the possibility of application as a nonfat milk supplement for use as an “antiviral food.” At maximum nontoxic concentrations, SWE had higher antiviral activity against influenza virus A/H1N1 than n-hexane, ethanol, or hot water (80°C) extracts. Addition of 0.5 mg/mL of B. juncea SWE to culture medium led to 50.35% cell viability (% antiviral activity) for Madin-Darby canine kidney cells infected with influenza virus A/H1N1. Nonfat milk supplemented with 0.28 mg/mL of B. juncea SWE showed 39.62% antiviral activity against influenza virus A/H1N1. Thus, the use of B. juncea SWE as a food supplement might aid in protection from influenza viral infection.     

Evaluation of the Antioxidant Properties of the Brazilian Cerrado Fruit Annona crassiflora (Araticum)

Annona crassiflora, known commonly as araticum, is an exotic tropical fruit consumed mainly by native people of the Brazilian Cerrado (2nd biggest biome of Brazil). In this study, pulp, seed, and peel of slight ripe and overripe fruits were extracted using ethanol and water. The extracts showed high content of total phenols and were screening for their potential as antioxidants using the in vitro model 1,1‐ dipheniyl‐2‐picryl hydrazyl (DPPH). The ethanol extracts of peel and seeds showed IC50 of 48.82 μg/mL and 31.14 μg/mL, respectively, for the slightly ripe fruits. As the ethanolic fractions of araticum showed the highest antioxidant activity, they were selected for testing of its effect on lipid peroxidation. The ethanolic extracts of slightly ripe fruits showed IC₅₀ of 4.44 μg/mL, 1.72 μg/mL, and 8.62 μg/mL for the peel, seed, and pulp, respectively. This is the 1st report on the antioxidant properties of the extracts of araticum. Owing to these properties, the studies can be further extending to exploit them for their possible application as natural antioxidant for cosmetic, supplements, and functional ingredients for food products.     

皱瘤海鞘抗人肺癌A549细胞组分的分离纯化及化学成分分析

采用四氮甲唑蓝比色法检测皱瘤海鞘（Styela plicata）被囊及内脏团甲醇提取物对体外培养的人肺癌A549细胞增殖的抑制作用,利用倒置显微镜、流式细胞仪及荧光显微镜观察,分析其对A549细胞的形态和细胞凋亡的影响,并且用气相色谱-质谱联用（gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）技术分析高活性组分6号内脏团柱层析组分（column eluted fraction 6 from visceral methanol extract,VCEF-6）的化学成分。结果表明：在低质量浓度（25～75 μg/mL）范围内,被囊及内脏团醇提物对A549细胞生长没有抑制作用,当质量浓度增大到100 μg/mL以上时,被囊及内脏团醇提物表现出对A549细胞明显的生长抑制作用。醇提物柱层析组分的体外抗肿瘤检测表明,共有8 个组分在100 μg/mL时对A549细胞表现出明显的生长抑制作用,其中VCEF-6抑制A549细胞生长活性最强,24 h时半数抑制浓度为168.7 μg/mL。通过流式细胞术以及荧光显微镜观察表明,VCEF-6抑制肿瘤细胞生长与诱导细胞凋亡有关。GC-MS分析VCEF-6的化学成分结果表明,VCEF-6含有22 种已知物质,其中甾醇类6 种、烷烃类6 种、脂肪酸酯类6 种、芳香族化合物4 种。综上所述,在体外实验中VCEF-6能够抑制A549细胞生长并诱导其凋亡。     

多糖中金属离子对其抗氧化活性及抗肿瘤活性的影响

采用水提醇沉法制备香菇、海带、枸杞多糖粗品,Sevage法除蛋白制得初级纯化多糖。利用EDTA-2Na去除多糖粗品和纯品中的金属离子,比较去除前、后多糖抗氧化活性及抗肿瘤活性的变化。结果表明:3种多糖均含有Al、Ca、Mn等多种金属元素,只是含量各不相同。去除金属离子后,多糖对ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力均下降,对羟自由基的清除能力变化不一。其中枸杞多糖质量浓度为600μg/mL时抗氧化活性变化最为显著,ABTS自由基清除率由26.31%降至17.25%,DPPH自由基清除率由59.80%降至38.40%。枸杞多糖纯品在去除金属后对人乳腺癌细胞MCF-7的体外抑制活性呈下降趋势。结论:多糖中的金属元素是多糖活性中心构成的一部分,对其活性具有重要影响。     

In vitro activity on human gut bacteria of murta leaf extracts (Ugni molinae turcz.), a native plant from southern Chile

Despite the fact that murta infusions have been used to treat gut/urinary infections by native Chileans for centuries, the mechanisms promoting such effects still remain unclear. As a first attempt to unravel these mechanisms, human fecal samples were incubated in a medium containing water extract of murta leaves (ML) and the growth of different bacterial groups was evaluated. Control incubations were made in media containing fructooligosaccharides (FOS) and glucose as a carbon source. Phenolic compounds in the ML extract, likely promoters of bioactivity, were identified by HPLC-DAD-MS(n) . Concentrations (log(10) CFU/mL) of bifidobacteria and lactobacilli in media containing the extract and FOS were 7.33 ± 0.05/4.95 ± 0.20 and 6.44 ± 0.22/6.05 ± 0.06, respectively. Clostridia, anaerobes and Enterobacteriaceae grew to a similar extent in media containing murta extract and FOS. In vitro tests (disk diffusion) showed that Gram-positive (Bacillus and Paenibacillaceae) and Gram-negative (Enterobacteriaceae) bacteria isolated from fecal samples were sensitive to both water and 50/50 ethanol/water extracts of ML (28.4 μg gallic acid equivalents). At this concentration, the antimicrobial activity of ML extracts was significantly (P < 0.05) lower than that of penicillin (10 U), whereas the difference between activity of ML extracts and gentamicine (10 μg) was no significant (P > 0.05). No evidence of dependency between the antimicrobial activity of ML extracts and the enzymatic capability of the sensitive strains was found.     

蛹拟青霉不同菌株液体发酵代谢产物的抑菌活性研究

以大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,黑曲霉为指示菌,采用杯碟法对蛹拟青霉不同菌株的液体发酵液及菌丝体甲醇提取物进行抑菌试验。结果表明:蛹拟青霉各菌株液体发酵菌丝体的甲醇提取物对4种指示菌均无抑制活性。当各菌株发酵液甲醇提取物样品浓度为5 mg/mL时,PM27菌株的发酵液样品对大肠杆菌抑制效果最好,PM38菌株发酵液样品对金黄色葡萄球菌抑制效果最好,PM33菌株发酵液样品对枯草芽孢杆菌抑制效果最好,PM27菌株发酵液样品对黑曲霉抑制效果最好,其最小抑菌浓度MIC分别为0.32 mg/mL,0.32 mg/mL,0.64 mg/mL,0.16 mg/mL。