宇佐美曲霉酸性蛋白酶摇瓶发酵工艺条件的优化

采用正交试验，对宇佐美曲霉酸性蛋白酶摇瓶发酵工艺条件进行了优化，最佳发酵培养基的组成为；玉米粉1.5g，豆饼粉6.0g，蛋白胨0.7g，氯化铵1.0g，氯化钙0.5g，磷酸氢二钠0.4g；最优培养条件是：pH值为5.5，培养温度为32℃，摇床转速为220r/min。采用优化工艺，酸性蛋白酶的酶活由7200U/ml左右提高到8400U/ml。     

酒用酸性蛋白酶在酒精生产中应用技术的研究：I.酒用酸性蛋白酶的特性

探讨了酒用酸性蛋白酶的特性.试验结果表明,酒用酸性蛋白酶的适宜作用温度为30～55℃,适宜作用pH为2.0～6.0,适合于在酒精生产中应用.     

黑曲霉酸性蛋白酶稳定性研究

通过黑曲霉固体发酵生产酸性蛋白酶，对此酸性蛋白酶的部分酶学稳定性（耐热、耐酸性、金属离子稳定性等）进行实验探讨。实验表明：该酸性蛋白酶制剂具有良好的热稳定性与较强的耐酸性，还是有良好的金属离子稳定性，完全适合作为饲料酶制剂。     

宇佐美曲零酸性β-甘露聚糖酶的纯化及性质研究

采用硫酸铵分部盐析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析、DEAE Sepharose fast flow阴离子交换层析等分离技术,从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)YL-01-78菌株固态曲浸出液中分离出1种SDS-PAGE电泳纯和HPLC色谱纯的酸性β-甘露聚糖酶组分,其最终回收率为12.6%,纯化倍数为32.3.经SDS-PAGE和凝胶过滤层析测得该纯化酶的分子质量分别为42 ku和40 ku,表明该酶以单体形式存在;其等电点pI为4.2;含糖量为23.2%.以角豆胶半乳甘露聚糖为底物,测得该酶的Km值和Vmax值分别为6.3 mg /mL和1 667 μmol/(min·mg).     

酸性蛋白酶高产菌选育的研究

以宇佐美曲霉2461为出发菌株,经分离纯化获得菌株UV-14-3,其摇瓶活力为7040.1u/mL.通过工艺优化和正交实验,确实了最佳培养基组成为(g/L)豆饼粉75、玉米粉11.3、磷酸氢二钠7.5、氯化钙7.5、氯化铵3、硫酸镁2.4.在起始pH5.0-5.5,摇床转速200r/min,温度30℃±0.2℃,装液量为500mL三角瓶装50mL培养液(v/v)发酵周期为84h的条件下摇瓶产酶达到7869.2u/mL.     

黑曲霉酸性蛋白酶EXPA的克隆表达与酶学性质解析

酸性蛋白酶在食品、酿造、饲料和皮革等行业具有重要的应用价值。然而,现有的酸性蛋白酶在50℃以上或pH 3. 0时不稳定,限制了其应用范围。该研究通过分子克隆技术将黑曲霉CICIM F0510的酸性蛋白酶基因exp A在毕赤酵母中进行了克隆表达,构建获得了重组菌GS115 (p PIC-expA)。摇瓶发酵条件下,重组酶EXPA的酶活为257 380 RFU/h。生物信息学分析的结果显示,该酶属于天冬氨酸蛋白酶A1A家族。酶学性质的研究表明,该重组酶的最适反应温度和pH分别为50℃和3. 0;分别在40～50℃或pH 2. 5～3. 5孵育1 h后,仍能保留80%左右的活力。Zn~(2+)、Ca~(2+)、Fe~(2+)和Mn~(2+)对其活性有一定的促进作用;而Cu~(2+)、Co~(2+)、Fe~(3+)、EDTA和SDS则对其活性有显著的抑制作用。此外,重组酶EXPA对大豆分离蛋白、水溶性玉米蛋白和小麦水解蛋白均具有较好的水解作用。较好的耐热性和pH稳定性为EXPA在食品、饲料等领域的应用奠定了基础。     

白酒生产与酸性蛋白酶

白酒生产与酒精不同,酒精生产除乙醇外都称杂质,对白酒不可缺少的高级醇却称之谓杂醇油。白酒则不然,除一定量乙醇外,还需有一定的香味物质。否则,就不成为饮料酒,更不具有白酒风格了。因此,白酒生产就不能只用淀粉糖化成糖、糖发酵成乙醇和二氧化碳这个简单的公式予以概括了。微生物的生育及酶的生成,都需要有蛋白质,白酒中许多香味物质也来自蛋白质。所以在白酒生产过程中,绝不能忽视蛋白质及其酶的作用。所以说,只有解开白酒生产中蛋白质发酵的途径,并掌握它,才能有效地提高白酒质量。     

酸性蛋白酶高产菌株选育

以黑曲霉ＪＷ３０３９为出发菌株，通过ＥＭＳ多次诱变处理及最适培养和发酵条件的摸索，使其酸性蛋白酶产量从１８００～２０００ｕ／ｍｌ提高到３３００ｕ／ｍｌ。     

黑曲霉HU53菌株产酸性蛋白酶的条件和酶学性质

本文报道了黑曲霉（Aspergillus niger)HU53菌株产酸性蛋白酶的固体发酵条件优化和酶学特性的研究结果。适合该菌株的最佳固体发酵培养基为麦麸38．8％，豆粕9．7％，NH4NO31．5％和水50．0％，最佳起始pH5．5。在28℃下发酵50h后酸性蛋白酶的比活力达到93．8U／g，且在52h发酵期内基本不产孢子。该酸性蛋白酶的最佳反应酸碱度为pH3．0，最佳反应温度为50℃，对酪蛋白的Km为2．8016mg／ml，在40℃下保温180min后相对酶活力为93．50％。2．0mmol／L的Cu^2 和Mn^2 对该酸性蛋白酶具有极其显著的激活作用，相对酶活力分别为对照的171．9％和121．1％；而相同浓度的Fe^3 和Ca^2 则对其表现出强烈的抑制作用，相对酶活力分别仅为对照的62．5％和44．6％。     

酸性蛋白酶在浓香型酒小(米查)发酵中的应用研究

为将现代生物技术与传统工艺结合,增加酿酒企业效益,对酸性蛋白酶在浓香型酒小米查发酵中的应用进行了研究。采用5u/g原料、10u/g原料和15u/g原料不同添加量,发酵期60天,并以空白作对照。结果表明,基酒中总酸总酯明显提高,己酸乙酯、乙酸乙酯、丁酸乙酯增加,乳酸乙酯下降,香味物质增加,提高出酒率1.5%～2%。认为酸性蛋白酶有促进糖化作用,加速蛋白质降解和促进微生物生长等作用。(庞晓)     

甲壳质清洁生产中酸性蛋白酶脱蛋白的研究

甲壳质开发应用领域异常广阔,国内外需求量大。我国目前多采用化学法,即酸碱法来生产虾壳甲壳质,生产中产生大量难以处理的污染物。用宇佐美曲霉酸性蛋白酶脱蛋白来生产甲壳质基本上不产生污染,水洗废液还可以进行回收利用。采用宇佐美曲霉酸性蛋白酶进行了甲壳质清洁生产中脱蛋白的研究,比较了温度、加酶量和pH等因素对脱蛋白的影响。结果表明:当温度为40℃、加酶量为0.4%、pH3.0时,脱蛋白率达到60%,蛋白与虾壳可以完全分离。     

合理使用酸性蛋白酶降低玉米普通白酒杂醇油含量

以玉米为原料,玉米秸为辅料,糖化酶为糖化剂生产的普通白酒杂醇油含量偏高。入池时按10u/g原料添加酸性蛋白酶能降低杂醇油含量19.1%～24.7%,提高出酒率2个百分点,并能改善风味。过量使用酸性蛋白酶反而促使杂醇油含量增加。     

霉菌酸性蛋白酶高产突变菌株9169的选育

对一株宇佐美曲霉进行紫外光、微波和60Co的逐级诱变育种,使酸性蛋白酶产量从2800U/mL提高到7200U/mL.突变株传代多次,产酶性能保持稳定;对突变株与出发株的发酵过程进行了比较研究,发现突变株最大产酶时间提前10h以上,而培养基pH值对产酶有一定影响.     

高效酒精发酵剂的研制

介绍了在以淀粉为原料进行酒精发酵时,通过添加酸性蛋白酶使原料中蛋白质分解,并促使酵母生长,缩短发酵周期,从而为制造高效酒精发酵剂创造条件。选择宇佐美曲霉M90的突变株537为出发株,采用固体培养法实验,优化筛选出的M90—537—42酸性蛋白酶活力达15000～17000u／g(干物),并含有较高活性的木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶和糖化酶等水解酶。通过酒精发酵试验,确定添加0．1％复合酸性蛋白酶麸曲可使酒精产量增加2％,加入等量的活性干酵母混合即构成高效酒精发酵剂,与对照相比,发酵醪酒浓度可提高约2％,原料出酒率可提高5％,经济效益十分明显。     

酸性蛋白酶ARS的应用性能研究

通过测定酶液的活力探讨软化工艺条件对酶活力的影响规律，通过测定毛皮的抗张强度和感官评价与国外公司的同类软化酶进行对比，详细地研究了酸性蛋白酶ARS的应用性能。结果表明较优的软化工艺参数为：ARS酶用量1g／L，浴液温度35℃左右，浴液pH值为3．5左右，软化时间为16h。在软化效果方面ARS酶与国外同类酶性能相近。而其性价比高于国外同类产品。     

白酒窖泥中蛋白酶产生菌的筛选及复配

从优质白酒窖泥中分离筛选出8 株高产蛋白酶的兼性厌氧细菌,通过测定内肽酶、氨肽酶、羧肽酶酶活力,最终筛选出3 株3 种蛋白酶活力相对较高的菌株HDS4、HDS6、HDS8,并对其进行形态观察、生理生化和16S rDNA鉴定,确定3 株菌分别为枯草芽孢杆菌（Baci l lus subt i l i s）、解淀粉芽孢杆菌（Baci l lusamyloliquefaciens）、苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）。以接种量为基础,对3 株目的菌株进行复配,得到的复配菌系3 种蛋白酶活力均比单一菌株高,3 种酶活力分别提高了8.907%、6.181%、8.781%。     

酸性蛋白酶在酒精生产中的应用

酒精是一种引人瞩目的能源,其生产规模也日益壮大。降低成本,提高产率已成为企业所追求的目标,生产过程的酶制剂应用的深度探索也就成为了技术工作者所探究的重点。将酸性蛋白酶在酒精生产的应用、原理和实践数据提供给读者以作为参考和分析。     

宇佐美曲霉L-336酸性蛋白酶2m~3罐中试发酵研究报告

宇佐美曲霉栗色变种Ｌ－３３６是分泌高单位酸性蛋白酶的生产菌，在摇瓶小试工艺基础上进行２ｍ３罐发酵中试，结果表明：较优发酵培养基（％）为黄豆粉４．３，玉米粉１．０，鱼粉０．７，蚕蛹水解液１０，Ｎａ２ＨＰＯ４０．２，ＣａＣｌ２０．５，ＮＨ４Ｃｌ１．０，豆油１．６；风量为０～２５ｈ时１∶０．４ｖ／ｖ／ｍ，２５～５０ｈ时１∶１．０ｖ／ｖ／ｍ，５０ｈ后１∶１．３ｖ／ｖ／ｍ；接种量１０％，温度３１℃，搅拌转速２００ｒ／ｍｉｎ，发酵周期７５ｈ。在上述条件下，发酵酶活力稳定在５５００ｕ／ｍｌ左右。