立用原生质体融合技术改善双歧杆菌的耐氧性

利用原生质体融合技术将专性厌氧的短双歧杆菌和典型上面发酵的啤酒酵母进行原生质体细胞融合，通过研究两亲本原生质体的形成与再生，并进行跨界融合，成功初筛出兼具两亲本生物学性状、较稳定的融合了BSF1和BSF2，改善了双歧杆菌的耐氧性。     

应用原生质体融合技术改善双歧杆菌的耐氧性

利用原生质体融合技术将专性厌氧的短双歧杆菌和典型上面发酵的啤酒酵母进行原生质体细胞融合,通过研究两亲本原生质体的形成与再生,并进行跨界融合,成功初筛出兼具两亲本生物学性状、较稳定的融合子BSF1和BSF2,改善了双歧杆菌的耐氧性。     

双歧杆菌耐氧菌株的筛选及应用

从婴儿粪便中分离出一株厌氧性无芽孢杆菌，经属和种的鉴定，为长双歧杆菌。经长期耐氧驯化，此菌由厌氧生长驯化成有氧生长良好的菌种，与乳酸菌混合发酵后，可制成口感细腻、气味醇和、酸甜适口，有很好的营养保健功能的双歧杆菌酸奶。     

双歧杆菌的分离鉴定与耐氧驯化

本研究从鸡盲肠内容物中分离出单菌落,经菌落菌体形态观察和生理生化鉴定为双歧杆菌.采用逐级增加氧气含量的方法对筛选出的双歧杆菌进行耐氧驯化,以改善双歧杆菌时氧气的耐受力,经过多次驯化,优选出对氧气有一定耐受力、凝乳能力较好,且在贮藏过程中活菌数能够达到保健功能要求的菌株B05.经二次鉴定该菌株保持了双歧杆菌的形态和生理特征.     

耐氧双歧杆菌生长代谢过程的研究

研究了耐氧双歧杆菌在GAM和PTYG培养基中生长曲线、基质消耗曲线和代谢产物.结果表明,耐氧双歧杆菌培养12h菌数分别达8.4×109cfu/ml和7.2×109cfu/ml;pH由7.6降至4.2培养(培养20h);对糖和蛋白质的消耗率分别为56.4%～56.8%和58.8%～60 0%,代谢产物中乙酸乳酸的克分子数为332.08～4.17.     

双歧杆菌厌氧培养及耐氧驯化的研究

用４种不同驱氧方式的缸内厌氧法培养双歧杆菌，比较其厌氧培养效果。对厌氧的双歧杆菌进行耐氧驯化，耐氧化明显提高，经生理鉴定证明，驯化后的菌株与未经驯化的菌株相比，生理学特性没有发生变化。     

耐氧性双歧杆菌Bifidobacterium animalis subsp. lactis Qq08的生物学特性研究

利用体外试验测定耐氧性双歧杆菌(Bifidobacterium animalis subsp.lactis Qq08)的耐酸、耐胆汁特性;同时测定其对胆固醇的降解能力和对结肠癌腺细胞Caco-2的黏附性能。结果表明,该菌在pH 2.0条件下培养4 h,仍有84.38%的存活率;用1.0%胆汁培养6 h,该菌的存活率在90%以上。该菌对胆固醇的降解力为53.8%,对结肠癌腺细胞Caco-2的黏附数为(8.57±3.74)个/细胞。该菌可作为益生菌制剂和功能性乳制品的潜在菌株。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

本实验通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。在耐氧驯化时,通过增加培养基中的氧气分压的方法进行驯化;在耐酸驯化的过程中,通过降低培养基的初始pH值的方法进行。实验结果表明,在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为42000%,而原始菌的增殖比例仅为8333%,且前者的凝乳时间较后者短,为后者的2/3;再经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高,且耐酸性明显优于未经驯化的菌株;最后再经过胆盐驯化的菌株在胆盐浓度为0.5%时培养后也有较高的活菌数,说明其对胆盐的忍耐力明显增强。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。实验结果表明，在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为41000％，而原始菌的增殖比例仅为8233％，且前者的凝乳时间为后者的2／3；经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高，且耐酸性明显优于未经驯化的菌株；胆盐驯化的菌株经胆盐浓度为0．5％的培养后也有较高的活菌数，其对胆盐的忍耐力明显增强。     

耐氧性双歧杆菌的驯化及其培养条件的研究

通过对一株青春双歧杆菌的耐氧驯化,获得了具一定耐氧能力的双歧杆菌ad,该菌株可在含有一定空气容积的密闭容器中良好生长。并探讨了以大豆为主要原料发酵培养青春双歧杆菌ad的工艺条件,其最佳培养基配方为:豆浆浓度3BX,葡萄糖1%,自制乳肽0.5%,番茄汁2.5%,胡萝卜汁2.5%;pH7.0;接种量2%;培养温度37℃;厌氧培养24～48h。发酵液活菌数可达6.9×109cfu/mL。青春双歧杆菌ad发酵液原液直接冷冻干燥,无须添加其他保护剂;双歧杆菌ad冻干前增加温度前处理环节,可提高菌体成活率;双歧杆菌ad含水冻干粉活菌数达1.0×1010cfu/g;绝干样品活菌数达1.1×1010cfu/g。     

耐氧两歧双歧杆菌高密度培养的研究

讨论了耐氧两歧双歧杆菌在小瓶培养、发酵罐间歇培养、及流加培养的生长及代谢特性,探讨了其高密度培养的途径。在发酵罐流加培养试验中,通过流加碱和流加基质培养,使双歧杆菌生长的OD600值达到1.67,菌体浓度约为6.3×1010个/mL,乳酸浓度达到620mg/100mL,并使双歧杆菌生长的周期明显延长。     

双歧杆菌的耐氧驯化

本文介绍了通过逐步增加长双歧杆菌(HJ9211)培养环境中的氧分压,将双歧杆菌驯化成兼性厌氧菌体的方法。双歧杆菌的生长促进因子(大豆低聚糖、乳酮糖、维生素C)对驯化前后菌体的生长促进作用和最佳使用浓度不变。驯化菌株的耐氧件由专性厌氧变为兼性厌氧,耐酸性由初始酸度pH 5.5时不生长变为pH 4.5时生长受抑制。双歧杆菌的培养条件得到简化,保藏中的存活性也明显得到提高。     

青春双歧杆菌的耐氧驯化及不同低聚糖对其增殖效果的影响

为改善青春双歧杆菌在发酵产品中活菌数低、菌种功效弱的情况,对厌氧青春双歧杆菌进行耐氧驯化,采用无氧有氧交替驯化法,在驯化过程中逐渐增加青春双歧杆菌培养液的氧分压,测定青春双歧杆菌驯化前后生理特性,并对比大豆低聚糖、低聚木糖、低聚麦芽糖对青春双歧杆菌增殖的影响。结果表明,青春双歧杆菌在耐氧驯化后对氧气的敏感程度下降,有氧条件下生长能力达标,产酸能力得到提升,菌体驯化前后形态基本一致,耐氧青春双歧杆菌代谢产生的乙酸与乳酸比值较厌氧青春双歧杆菌更适宜发酵,在3种低聚糖中,低聚木糖对青春双歧杆菌增殖作用明显,可作为青春双歧杆菌良好的双歧因子。耐氧驯化后的青春双歧杆菌有着优良的生理特性,能够作为潜在的益生菌菌种深入研究其功能并可应用于发酵食品中。     

婴儿双歧杆菌的耐氧驯化及应用特性研究

研究婴儿双歧杆菌的生长促进剂,并对活化菌种进行耐氧驯化培养,探讨婴儿双歧杆菌在搅拌花生酸奶加工中的应用。结果表明:酵母浸出液对婴儿双歧杆菌活化影响最大,酪蛋白胨次之,磷酸氢二钾最小,三者最佳水平组合:酵母浸出液0.4%,酪蛋白胨0.2%,磷酸氢二钾0.1%。菌种被连续活化三代后凝乳时间稳定至3.5h。通过对4种因素婴儿双歧杆菌生长的影响研究发现:鲜牛奶与花生乳配比的影响最大,其次是蔗糖,再次是接种量,最后是葡萄糖。当鲜牛奶与花生乳配比1∶1,蔗糖6%,葡萄糖2%,接种量5%,婴儿双歧杆菌达到最佳生长状态,活菌数达到2.5×109 CFU/mL。     

耐氧双歧杆菌对肠道菌群的拮抗作用及对肠毒素的降解作用

通过试管内混合培养和物学试验对耐氧双歧杆菌与肠道致病菌的拮抗作用及对肠毒素的降解作用进行了研究。结果表明,耐氧双歧杆菌对产物毒互大肠杆菌和葡萄球菌等具有较高强的抑制作用,对肠毒素有很强的降解力。     

降胆固醇双歧杆菌的研究进展

双歧杆菌是人体中最有益的益生菌,尤其是降胆固醇双歧杆菌对降低心脑血管疾病具有重要意义。所以综述了降胆固醇双歧杆菌的研究进展。重点探讨了如何有效筛选到降胆固醇双歧杆菌,如何获得耐氧的双歧杆菌,如何对双歧杆菌进行高密度发酵,以及双歧杆菌如何降胆固醇,以期能给从事这方面研究的学者有所启示。可以通过选择合适样品后利用选择性培养基进行培养并结合双歧杆菌形态学特征和降胆固醇试验筛选到降胆固醇双歧杆菌。对于筛选到的降胆固醇双歧杆菌可通过耐氧驯化、微胶囊化技术和双层包埋技术而获得耐氧双歧杆菌。而且,可通过培养基优化和发酵方式控制来获得高浓度的降胆固醇双歧杆菌。关于双歧杆菌的降胆固醇机制主要有共沉淀作用、吸附与结合作用和同化作用等。     

青春双歧杆菌耐氧驯化及培养条件的响应面法优化

对一株青春双歧杆菌进行耐氧驯化,通过有氧、无氧交替驯化法对出发菌株进行耐氧驯化,得到耐氧能力较强的青春双歧杆菌菌株,在有氧静止培养条件下活菌数可达到4.31×1011cfu/mL。对该耐氧菌株通过响应面法进行培养条件优化,确定培养耐氧青春双歧杆菌的最佳条件:接种量5%,玉米糖化液浓度12.1°Bx,初始pH6.48,培养温度37℃,发酵时间24h。在此条件下菌液最大OD值为1.819,此条件下培养的活菌数为3.05×1012cfu/mL。     

耐酸耐氧双歧杆菌突变株的选育与冷冻浓缩发酵剂的制备

应用紫外线、60Co辐照育种,选育出1株耐酸、耐氧的长双歧杆菌突变株GKSW1101.该菌株在pH4.5的液体培养基中,37.5℃培养24h,活菌数达到4.2×108cfu/mL.采用加碱中和保持培养液pH6.0～6.进行发酵,在4℃、6000r/min离心15min收集菌体,添加脱脂奶粉、甘油、蔗糖,L-半胱氨酸盐酸盐为冷冻保护剂,-25℃冷冻保藏,制备成双歧杆菌冷冻浓缩发酵剂,活菌数达到2.4×1010.cfu/g,-25℃贮存3个月后,活菌存活率为50%.     

动物双歧杆菌乳亚种BZ11的耐氧驯化及降胆固醇性能的研究

为了提高动物双歧杆菌乳亚种BZ11对有氧环境的耐受性,采用逐渐增加培养基中的氧分压和有氧、厌氧条件下交替培养两种方案对其进行了耐氧驯化。通过对驯化前后菌株的生长特性进行分析得出逐渐增加培养基中的氧分压的驯化方案取得了更好的效果。经最优方案驯化后的菌株在有氧条件下培养20 h后,活菌数可达到6.30×10~8CFU/m L,是初始菌株的2.24倍。驯化后菌株的降胆固醇率为27.31%±0.80%,与初始菌株相比没有显著性差异(P0.05)。通过鉴定得出,动物双歧杆菌乳亚种BZ11在耐氧驯化前后保持了相似的形态及生理生化特征。因此,驯化后的菌株有望作为1株潜在益生菌被开发利用。     

双歧杆菌酸奶制造的中间试验

应用筛选获得的双歧杆菌耐氧菌株发酵制造酸牛奶的工艺进行了中间试验。结果表明:采用双歧杆菌耐氧菌株进行有氧奶质发酵制造酸牛奶是完全可行的。适当添加一些生长促进物质,可使发酵剂制备时间减少到8小时以内。采用由双歧杆菌和其它辅助菌混合而成的组合发酵剂制造酸奶,发酵周期可缩短到5小时;此种酸奶在保质期内双歧杆菌活菌数含量能保持在10~7个/g以上。应用此工艺,只需采用普通酸奶的生产设备即可进行双歧杆菌酸奶的制造。