α-半乳糖苷酶的液体发酵条件和酶学性质研究

研究了臭曲霉ZU-G1液体发酵产α-半乳糖苷酶的最佳生产条件及其酶学性质.试验结果表明,最适发酵条件为温度28℃.转速200 r/min,装液量30 mL(250 mL三角瓶),接种量6.6%,种子培养18 h后接种,发酵144 h后α-乳糖苷酶酶活达到最大值.在此发酵条件下α-半乳糖苷酶最适pH 5.0,于28℃放王7 h,在pH 3.5～6.0内稳定性较好;该酶的最适温度为60℃,在50℃以下存放稳定性较好.Ag 可强烈抑制该酶的活性,Ca2 、Mg2 、Mn2 和Zn2 的激活效果随浓度而变.1mmol/L甘露醇、抗坏血酸和2mmol/L蜜二糖对酶的热稳定性保护效果好.     

贻贝油膏多酶协同水解工艺研究

采用酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶对贻贝油膏生产中的酶解条件进行研究。探讨了酶解温度、酶解时间、酶添加量和酶解pH对原料水解度的影响。结果表明:酸性蛋白酶的最适作用条件为温度55℃、时间2h、添加量2.5%、pH 2.5;中性蛋白酶为温度50℃、时间3h、添加量2.5%、pH 7.5;碱性蛋白酶为温度50℃、时间3h、添加量1.5%、pH 8.5。原料经三种酶协同水解后,水解度可以达到71.7%。     

地衣芽孢杆菌2709 蛋白酶分离纯化研究

对产自地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)2709 的碱性蛋白酶通过乙醇沉淀、盐析、DEAE 阴离子交换层析、凝胶层析4 步纯化,最终获得电泳纯的酶。以去酰胺度及酶比活力为指标,对碱性蛋白酶分离纯化条件进行优化。结果发现：提纯酶的比活力达61069U/mg,纯化倍数为38.7,活性回收率为19.3%,去酰胺度为20.9%。并研究该酶的基本酶学特性,结果发现：该酶最适作用pH 值为10.0,最适反应温度为50℃。40℃保温2h 后该酶保持80% 以上的活力,在pH8～11 之间有较高的pH 值稳定性。     

酶改性蛋白制备水溶性蜂王浆的研究

以胃蛋白酶和碱性蛋白酶为实验用酶,对蜂王浆蛋白的最佳水解条件及两种酶解液的特性进行了研究。结果表明:胃蛋白酶的最佳水解条件为pH=2,温度为37℃,料液比为1:3,酶浓度7‰,反应时间为8h;碱性蛋白酶的最佳水解条件为pH=8,温度为50℃,料液比为1:4,酶浓度7‰,反应时间为8h。碱性蛋白酶其酶解产物的澄清度、苦味值及氮溶解指数均优于胃蛋白酶酶解产物,可用于制备水溶性蜂王浆。      

降解铬革屑微生物发酵条件的优化研究

对一株能粗降解铬革屑菌株的发酵条件进行优化,通过Folin试剂法测定了不同发酵条件下发酵液的蛋白酶活性,确定了菌株W_(1-1)的最适产酶条件。研究表明:菌株的最适产酶条件为葡萄糖9.0%,酵母膏0.5%,CaCl_20.3%,K_2HPO_40.3%,MgSO_4 0.2%,初始pH 8.5,装液量90mL(90/250mL三角瓶),接种量4.0%,种龄14h,发酵温度37℃,发酵时间36h。在此条件下,测得发酵液的蛋白酶活力为37.36u/mL,比优化前的产酶量提高了35.4%;最后,采用该菌株在最适产酶条件下对铬革屑进行降解,降解率达到71.38%。     

嗜碱性芽孢杆菌产高碱碱性蛋白酶发酵培养基及发酵条件的研究

对一株高产高碱碱性蛋白酶的嗜碱性芽孢杆菌的发酵培养基及发酵工艺进行了优化。确定了发酵培养基所采用的棉籽饼粉最适粒度为 80目 ,麦芽糊精的最佳DE值为 3 0 %。并确定了该菌株的最适发酵培养基配方为 ( g/1 0 0mL) :棉籽饼粉 3 ,酵母浸粉 1 75 ,麦芽糊精 1 0 ,柠檬酸钠 0 3 ,CaCl2 0 3。K2 HPO4 1 ;最适摇瓶发酵条件为 :种龄 1 2h ,接种量 2 %,装液量 5 0mL/2 5 0mL ,摇床转速 2 0 0r/min ,3 4℃ ,发酵 5 4h ,碱性蛋白酶的发酵单位可达 3 3 985u/mL ,比优化前提高了5 4 48%。此外 ,还进行了 5L罐放大实验 ,在 5L罐所确定的最适工艺条件下 ,发酵单位可达3 65 79u/mL。     

罗非鱼下脚料双酶法提取呈味物质的研究

研究了胰蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶对罗非鱼下脚料的水解条件;并且研究了复合蛋白酶-风味酶双酶法的水解条件.研究结果表明:复合蛋白酶的最佳水解条件为:加酶量为3%,pH值为7.5,时间为2 h,温度为50℃;在最佳水解条件下,复合蛋白酶水解罗非鱼下脚料所得的水解液的水解度最高.风味酶的二次酶解的最佳水解条件是:加酶量为1%,pH值为7,时间为1 h,温度为50℃,此条件下的双酶解的水解度可以达到25.9%.     

额尔齐斯河野生丁(鐬)肠道产蛋白酶菌株的初步鉴定及产酶条件的研究

采用酪素培养基和脱脂乳培养基筛选额尔齐斯河野生丁(鐬)肠道内产蛋白酶菌株,共获得40株蛋白酶产生菌,其中8株蛋白水解圈较大,菌株编号为P1～P8.选取水解圈直径最大的P15为出发菌株,进行生理生化鉴定,同时摇瓶发酵探讨最佳产酶条件.结果:生理生化反应将P5初步鉴定为芽孢杆菌;蛋白酶最适产酶条件为:40℃、初始pH7.0、接种量3%、15mL/250mL的装液量、180r/min、培养时间35h,最大产酶量168.3U/L;添加微量Mg2 、Mn2 、Ca2 有稳定酶活的作用.     

油菜蜂花粉蛋白酶解条件的研究

通过单因素试验,以水解度为标准对中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶的最佳反应条件和对花粉蛋白的酶解能力进行了研究.碱性蛋白酶对于油菜蜂花粉的水解作用最强,依次减弱为中性蛋白酶和木瓜蛋白酶.碱性蛋白酶的最适条件为pH9、50℃下加入3000U/g的酶量水解3h.     

蛋白酶酶解罗非鱼糜的工艺研究

用风味蛋白酶、复合蛋白酶和碱性蛋白酶对罗非鱼肉进行水解,以酶解液中氨基态氮含量为指标,选择出风味蛋白酶为水解罗非鱼蛋白的最适蛋白酶.单因素实验确定风味蛋白酶水解的最佳条件为:固液比为1:4、温度为50℃、未调节初始pH值(初始pH为6.9)、加酶量为0.6%(g/g,相对于鱼糜质量),酶解8h后酶解液中氨基态氮含量为1...