泥鳅病原菌Shewanella oneidensis P6的分离鉴定及防治药物筛选

为确定连云港灌南某泥鳅养殖场泥鳅病原菌的种类及耐药情况,从患病泥鳅的肠道、鳃、体表取样进行分离筛选和回归感染试验,确定编号为P6的菌株为致病菌株.通过对菌株P6进行形态特征观察、生理生化鉴定和16S rDNA基因序列分析,将该致病菌株鉴定为奥奈达希瓦氏菌.应用9种市售渔药进行药敏试验,结果表明,杜菌康及健恒杆菌肠泰对菌株P6有较强的抑制作用,其最小抑菌浓度分别为6×10~(-3) g/L和5×10~(-3) g/L.4种中草药的药敏试验显示,黄连和大黄对菌株P6有抑制作用,其最小抑菌浓度分别为25g/L和100g/L.6种抗生素的药敏试验表明,菌株P6对头孢曲松钠、酒石酸吉他霉素、青霉素钠高度敏感,对硫酸庆大霉素、新氟康(氟苯尼考)中度敏感,对盐酸林可霉素低度敏感.     

生物除磷工艺中高效聚磷菌的快速筛选和鉴定

通过厌氧/好氧交替平板迭代法培养活性污泥,采用5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐(BCIP)蓝白斑筛选法、PHB染色、异染颗粒染色进行高效聚磷菌的快速筛选,并基于16 S rDNA对各菌株进行高通量测序和鉴定。结果表明,4株菌可以分解BCIP产生蓝绿色菌落且厌氧PHB和好氧异染颗粒染色为蓝黑色,除磷率分别为1号菌85.51%,2号菌91.06%,3号菌95.51%,4号菌89.13%。高通量测序结果表明,1号菌为Exiguobacterium sp.ZWU0009(微小杆菌属),2号菌为Bacillus sp. C10(芽孢杆菌属),3号菌为Exiguobacteriumacetylicum strain SI17(乙酰杆菌属),4号菌为Exiguobacteriumacetylicum strain BGSLP4(乙酰杆菌属)。     

高效芘降解细菌的筛选、鉴定及其基本特性研究

以多环芳烃为唯一碳源梯度驯化,从焦化废水底泥中分离筛选出2株疏水性高效芘降解细菌CY4和HY7.通过16SrDNA基因序列分析,初步鉴定CY4为杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida),HY7为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri).降解性能试验结果表明,这两株菌可利用底物谱较为广泛,包括水杨酸等多环芳烃转化产物,吲哚等杂化芳烃,多环芳烃和葡萄糖;其中CY4菌对芘的5d降解率达35.40%,HY7菌对芘的5d降解率达36.32%.     

高效絮凝菌的鉴定及絮凝特性研究

从含油废水曝气池活性污泥中筛选6株具有絮凝特性的菌株,命名为:F1、F2、F3、F4、F5、F6.为了研究絮凝菌的分类及絮凝特性,采用16SrDNA序列方法对6株絮凝菌进行鉴定分类;利用紫外扫描光谱与红外光谱扫描光谱分析絮凝活性成分.鉴定结果表明:6株絮凝菌分别与芽孢杆菌属、农杆菌属、库克菌属聚为一类,特征基本一致,具有99%同源性;絮凝测定结果显示,絮凝率在69%以上,其中F2、F3、F5、F6的絮凝率高于80%.将上述4株絮凝菌进行双菌混合培养试验,结果显示:F2和F6组合絮凝活性最佳,均优于各单菌,絮凝剂的有效成分为多糖类物质.     

链霉菌S1-5菌株鉴定及抗菌性能研究

对一株自行筛选的生防链霉菌S1-5进行了种的鉴定、拮抗活性测定以及抗菌性能的研究.通过对菌株的形态特征、培养性状和生理生化特征进行综合试验分析,鉴定该菌株为灰色链霉菌(Streptomyces griseus).采用平板对峙培养法测定S1-5抑菌活性、抑菌谱,结果表明S1-5具有广谱的抗菌活性,对蕃茄叶霉病菌(Fulria fulva)、烟草疫霉菌(Phyto phthora nicotianae)、烟草赤星病菌(Alternaria alternata)以及水稻纹枯病菌(Rhizotonia solani)四种植物病原菌菌丝生长、孢子萌发均具有一定的抑制作用;杀螨试验结果显示S1-5产生物活性物质还对棉花红蜘蛛有一定的杀伤力,是一株值得开发的抗菌杀螨放线菌菌株.     

一株产酯酵母的鉴定及发酵性能研究

从食品样品中分离到一株产酯酵母菌株5-1Y,进行形态观察、26S r DNA D1/D2区域序列比对分析,鉴定其为酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).对其进行糖发酵试验、凝聚性试验和发酵力试验,结果表明:该菌株能利用葡萄糖、蔗糖和果糖,不能利用乳糖、麦芽糖和D-木糖;该菌株凝聚性弱,发酵速度快;用12°Brix的麦芽汁培养基于28℃对该菌进行10 d的培养后,测得其表观发酵度为48.33%,真正发酵度为56.67%,发酵率为32.34%.同时,试验还进一步考察了初始p H、温度、培养基的酒精度等对不同条件下培养了3 d的该酵母的生长和产酯量的影响.     

三七内生菌的分离及其产皂苷发酵条件的优化

从三七的种子和根等部位分离三七内生菌,分离纯化后共获得三七内生菌11株。用薄层层析法对发酵液中皂苷类活性物质进行定性检测,并采用香草醛-硫酸显色法定量分析发酵液中皂苷的含量,筛选出一株可以产皂苷的内生菌株N3。生理生化鉴定和16SrDNA基因序列同源性比对分析结果表明,此株菌为肠杆菌属(Enterobacter)。通过单因素试验,确定内生菌株N3最适发酵条件为以蔗糖为碳源,牛肉膏为氮源,pH 7.0,温度28℃。     

两株抗氧化活性酵母的鉴定及对乳成分的影响

为获得有抗氧化活性的工业用酵母菌株,对2株来源于原料乳中有较强抗氧化活性的酵母菌进行鉴定.根据菌株的表型、生理生化特征和基因型的特性,初步将这2株菌鉴定为毕赤氏发酵酵母(Pichia fermentans).将这2株酵母菌在高温灭菌(UHT)牛乳中培养以研究其对牛乳主要成分的影响,结果表明:这2株酵母能在UHT牛乳中产乙醇,具有促进蛋白水解活性与脂肪水解活性的能力,能有效提高乳中的游离氨基酸和脂肪酸的含量.     

含油废水中筛选的两种石油降解菌的鉴定及降解效果

采用9项生理生化试验以及16S r DNA技术对从含油废水中筛选的2株菌L2、L3进行鉴定,并对L2、L3菌株降解石油烃效果进行了研究.结果表明:2种菌株分别为:L2-Ochrobactrum ciceri sp.苍白杆菌和L3-Serratia marcescens sp.粘质沙雷氏菌.2株单菌对石油烃的降解效果非常高效,初始浓度为4 000 mg/L的石油烃,分别加入菌株L2、L3,120 r/min、30℃下振荡培养6 d后,总石油烃降解率分别高达97.37%、98.98%.两种菌在前3 d对石油降解速率较快,随后进入稳定期生长速率平缓直至趋于零.     

高效反硝化聚磷菌株的筛选及其生物学特性

为研究反硝化聚磷菌的生物学特性,通过吸磷试验、硝酸盐还原产气试验及异染颗粒和PHB颗粒染色辅助检验,从稳定运行的厌氧/缺氧SBR反应器中分离筛选出4株高效反硝化聚磷菌H16、H19、H24和Xg.经鉴定,前3者属于假单胞菌属(Pseudomonas),后者属于肠杆菌属(Enterobacter).测定了这4株菌的生长曲线,研究了温度和pH值对这4株菌的生长及除磷效能的影响,结果表明,菌株的生长最适温度均在35℃左右,除磷反应的最适温度均在25℃左右;在中温条件下,H16、H19和H24生长的最适pH为6～8,菌株Xg生长的最适pH值为7～9;4株菌除磷反应的最佳pH值均为中性偏碱.     

一株产漆酶真菌的筛选、鉴定及发酵研究

采用愈创木酚显色法筛得一株产漆酶周期较短的丝状真菌.通过形态学观察和分子生物学序列分析,鉴定其为棘孢木霉(Trichodermaasperellum),并对所获菌株进行了发酵条件优化.通过单因素试验和正交试验获得该菌的最佳发酵条件为:蔗糖25g/L、麸皮汁80g/L、酒石酸铵10g/L和豆粕18g/L,KH2PO4 2,MgSO4·7H2O 0.6,CaCl2·2H2O 0.8,Cu2+0.25(1mM),pH 5.5~6.5,其漆酶最高酶活水平为571.32U/L.     

庆大霉素生物合成基因genB4的研究

以庆大霉素生物合成基因簇为模版,构建了genB4基因阻断质粒pGB403.经接合转移导入绛红色小单孢菌G1008,得到一株genB4基因缺失工程菌GB4408.对菌株GB4408的发酵产物进行了TLC、HPLC和MS分析,结果表明GB4408不再合成庆大霉素C族组分,而是积累中间代谢产物G418、西索霉素和威大霉素,阻断了从西索霉素到庆大霉素C1a的转化以及从威大霉素到庆大霉素C2的转化,这可能是genB4基因参与了庆大霉素绛红糖胺C4′和C5′的双脱氢作用.据此推论,在菌株GbK(△genK)基础上敲除了genB4基因,并成功获得一株主产西索霉素的工程菌GbKB4,进一步验证了genB4的功能.     

仿刺参体表微生物的菌相分析

采用3种培养基对大连仿刺参体表微生物进行分离,并通过细菌形态、生理生化特性和16SrD-NA分子生物学相结合的方法对分离纯化的细菌进行鉴定,从而了解大连仿刺参体表的菌群组成。结果表明,从仿刺参体表分离纯化了105株细菌,鉴定出10种不同的菌属分别为交替假单胞菌属(Pseud-oalteromonas)、希瓦氏菌属(Shewanella)、假单胞菌属(Pseudomonas)、弧菌属(Vibrio)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),变形菌属(Proteobacterium)、Alteromonadacea、不动杆菌属(Acinetobacter)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloiquefaciens),腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus),其中交替假单胞菌属和弧菌属分别占分离菌株的23.8%和22.9%。     

反硝化聚磷菌株分离筛选方法的研究

为建立一种快速、有效的反硝化聚磷菌菌种分离筛选方法,将吸磷试验、硝酸盐还原产气试验及异染颗粒和PHB颗粒染色辅助检验组合为一种新的筛选手段,并筛选出四株高效反硝化聚磷菌H 16,H 19,H 24和Xg.经鉴定,前三者属于假单胞菌属(Pseudomonas),后者属于肠杆菌属(Enterobacter).     

产表面活性剂石油降解菌株的筛选及鉴定

从长期受油污的土壤中分离得到了7株降解石油类菌株,其编号分别为菌2-1、菌7-1、菌1-2、菌5-2、菌7-2、菌油3及菌油5.经形态观察、Biolog鉴定和16SrDNA基因序列分析,可鉴定菌2-1和菌7-1为粘质沙雷氏菌,菌1-2为居植物柔武氏菌,菌5-2、菌油3和菌油5都为克雷伯氏菌属,菌7-2为蜡状芽孢杆菌.其中,菌1-2、菌5-2和菌7-2能使发酵液的表面张力从36.10mN/m降低至20.20mN/m、20.74mN/m、21.78mN/m,表明这些菌所产生的表面活性剂能具有较强的乳化原油的能力,展现了较大的应用前景.     

A/O工艺中水解段污泥中菌的分离及鉴定

为了深入了解印染废水的水解酸化-好氧活性污泥处理工艺,需要对水解酸化段污泥中分离得到的菌株,进行菌属鉴定.本文对两种印染废水进水时的水解酸化段污泥进行菌属的鉴定,在蒽醌染料废水进水时,有两株菌株为链球菌属,其余3株分别为奈瑟氏球菌属、杆状菌属、假单胞菌属;在偶氮染料废水进水时,有两株为假单胞菌属,其余4株分别为甲基单胞菌属、葡萄球菌属、副球菌属、诺卡氏菌属.     

一种新型生物絮凝剂来提高水中铜离子的去除

从吉林污水处理厂活性污泥中筛选出一株高效絮凝铜离子的菌株,通过16S rDNA扩增和菌株鉴定.鉴定其为植生乌拉尔菌(Raoultella planticola),研究了生物絮凝剂对铜离子(0.2 ppm)的絮凝条件.结果表明,絮凝效率达到80％以上.影响絮凝效率的主要因素和变量为pH、絮凝时间.在pH=5、1.62 h...     

利用常规鉴定方法和Biolog快速鉴定方法鉴定产脂肪酶菌株

用常规鉴定和Biolog快速鉴定2种方法对分离得到的3株产脂肪酶菌株进行了分类鉴定。根据其菌落、菌体及生理生化特征,3株产脂肪酶菌株中CDCH110、CDCH111属于不动杆菌属,CDCH112属于假单胞菌属。Biolog快速鉴定结果显示:CDCH110为溶血不动杆菌;CDCH111为醋酸不动杆菌;CDCH112为产碱假单胞菌。通过对比分析,结果表明:2种方法得到的结果一致,但常规方法只能鉴定到属,Biolog快速鉴定可以鉴定到种;Biolog快速鉴定法具有快速、准确等优点。     

连云港市赣榆县水产养殖环境中哈氏弧菌耐药性研究

为了了解连云港市赣榆县水产养殖环境中哈氏弧菌的耐药性,从3个典型的水产养殖区采集样品进行菌种筛选、药敏检测及耐药基因研究。实验共筛选耐氨苄青霉素菌66株,经生理生化及PCR鉴定得到17株哈氏弧菌。药敏实验显示全部哈氏弧菌均具有多重耐药性,至少对3种以上的抗生素产生明显抗性,对头孢类抗生素耐药率高,对喹诺酮及酰胺醇类抗生素较为敏感。被检测的全部哈氏弧菌均携带TEM型β-内酰胺酶。     

反硝化聚磷菌菌种筛分与除磷特性分析

目的 研究反硝化聚磷菌除磷特性,筛分同时具有反硝化和吸磷能力的菌种.方法 采用平板分离和DGGE技术相结合,对实验室反硝化除磷系统菌种进行分纯和菌种鉴定,并对富集培养后的每株单菌分别进行反硝化吸磷效果试验.结果 最终共得到15株单菌.结果 表明有ll株菌均具有不同程度反硝化吸磷能力,其中假单胞菌属的JB2和产碱菌属的JB3脱氮除磷效果最好,8 h后磷的去除量分别为13.76 mg/L和11.85 mg/L.DGGE试验结果表明,系统中反硝化聚磷菌优势种群可主要分为7个群,分别是Anaerolineae,Actinobacteria,Bacte-midetes,TM7,α-proteobactenia,δ-proteobacteria和γ-proteobacteria菌群.结论 Actinobacte-ria中的LB9号菌和γ-proteobacteria中的JB2号菌为反硝化除磷系统中占优势的反硝化聚磷菌.试验结果同时证明同一菌种可以同步完成反硝化和吸磷任务.