对羟基苯甲醇对灰树花产胞外多糖的影响及其发酵动力学

通过向灰树花发酵液中添加不同质量浓度梯度的对羟基苯甲醇,分析其对灰树花菌体生长和胞外多糖合成的影响,并且进一步研究了添加对羟基苯甲醇后发酵液中菌丝体生长、残糖（还原糖）含量、胞外多糖产量、pH值、对羟基苯甲醇和天麻素含量的变化情况,并做动力学分析。结果表明：当对羟基苯甲醇添加量为200 mg/L时效果最佳,相比于空白组（未添加对羟基苯甲醇）使菌丝体生物量提高了22.73%,胞外多糖产量提高了10.24%,均显著高于空白组（P＜0.05）。动力学研究结果表明：在整个发酵过程中,灰树花生长从第8天趋于稳定,葡萄糖作为碳源不断被消耗并且胞外多糖逐渐合成,到第10天二者趋于稳定。此外,对羟基苯甲醇含量减少,部分转化为天麻素。     

海藻糖在灰树花深层发酵中的积累及多糖的提取

探索了灰树花深层发酵与多糖提取的工艺 ,并对海藻糖与多糖产生的规律进行了研究。结果表明 ,以土豆 6 %、麸皮浸汁 2 %、葡萄糖 1%为培养基 ,在 2 5℃下培养为灰树花适宜的培养条件 ;灰树花多糖提取的最佳工艺参数是 :加水倍数 2 5,醇沉浓度 90 % ;海藻糖累积于快速生长期之后的稳定期 ,用 37 5℃处理灰树花菌丝体可获较高的产量 ;灰树花胞内多糖含量与海藻糖含量同时在稳定期达到最大值。     

对羟基苯甲醇对灰树花深层发酵的影响

通过向灰树花深层发酵体系中添加天麻单一成分对羟基苯甲醇（HA）,考察对羟基苯甲醇对发酵液的菌丝生物量、胞外多糖产量以及抗氧化活性的影响。结果表明,灰树花发酵体系中对羟基苯甲醇最佳添加量为0.2 g/L,最佳发酵时间不10 d。与对照组相比,对羟基苯甲醇添加组的发酵液生物量和胞外多糖产量分别提高了65.2%和164.2%（P＜0.05）;发酵液还原力、DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基、过氧化氢清除率均显著提高（P＜0.05）,分别提高了37%、13.02%、41.1%、22.3%、528%,其添加可对灰树花发酵产物抗氧化活性起增效作用。发酵过程中对羟基苯甲醇的利用率达到97.27%,其几乎被完全转化。     

莲花菌菌株Sd的液态发酵特性研究

莲花菌是一种珍贵的药、食两用真菌。目前,国内外对于莲花菌的研究多以固态栽培及其多糖的提取为主,而不受自然气候等条件限制的可大规模工业化生产的莲花菌液态深层发酵技术国内外还未见有成功的报道。本研究采用固态栽培上广泛使用的莲花菌菌株Sd,用8L全自动机械通风搅拌发酵罐探讨其液态深层培养特性,并结合发酵生产实际施行了中间补料动态调控,通过观测和综合分析其pH、残糖浓度、溶氧及菌丝量的动态变化过程,可以确定菌株Sd的发酵前40h为发酵的适应期对数生长期在接种后94～104h之间,104～200h之间为稳定期;200h后菌丝开始自溶,处于衰落期,应该放罐。此结果对于指导莲花菌菌株Sd的发酵生产具有重要意义,也将为莲花菌的生理生化及遗传特性的研究奠定基础。     

天麻和苦荞复配液对灰树花胞外多糖合成的影响及其发酵动力学研究

通过向灰树花发酵体系中单一添加天麻醇提物、苦荞醇提物及两种提取物的复配液,研究其对灰树花菌体生长和胞外多糖合成的影响,同时对添加复配液后发酵体系中的残糖(还原糖)含量、pH值的动态变化进行研究。结果表明:当复配液中天麻醇提物添加量为7 g/L、苦荞醇提物添加量为5 g/L时效果较佳,相比空白组(未添加提取物)和单一添加组(天麻、苦荞),胞外多糖产量分别增加了49.08%、13.76%、33.88%,菌丝体生物量分别增加了51.10%、11.35%、26.69%,均显著地高于空白组(P<0.01)和单一添加组(P<0.05)。发酵动力学研究表明,灰树花菌体生长和胞外多糖产量在第7天达到峰值,复配组相对于空白组能消耗更多的碳源物质促进胞外多糖的合成。因此,天麻和苦荞中的有效成分能够显著促进灰树花菌体生长与胞外多糖的合成。     

对羟基苯甲醛等3 种天麻成分对灰树花胞外多糖生物合成的影响

在灰树花液体发酵体系中,分别添加不同量的天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛3 种天麻成分,分析这3 种成分对灰树花菌体生长和胞外多糖（exopolysaccharide,EPS）合成的影响,采用苯酚-硫酸法测定胞外多糖含量。结果表明：适宜质量浓度的这3 种天麻成分均能促进灰树花菌体生长和胞外多糖的生物合成,其中对羟基苯甲醛添加量为0.15 g/L时效果最佳,并且略低于体积分数7%天麻醇提取物。动态分析0.15 g/L对羟基苯甲醛和7%天麻醇提取物对灰树花EPS合成促进作用的结果表明：在整个发酵过程中,二者促进灰树花EPS生物合成的效果基本一样,并且从发酵第7天开始,二者的EPS产量均显著高于空白组（P＜0.05）。采用高效液相色谱法动态测定发酵期间对羟基苯甲醛含量变化,结果表明：在发酵的第5天,对羟基苯甲醛基本被完全吸收,而此时灰树花EPS开始大量积累。因此,灰树花可利用对羟基苯甲醛来促进EPS的生物合成。     

灰树花发酵过程天麻成分变化的HPLC检测方法研究

建立HPLC方法对天麻醇提取物成分及灰树花发酵液进行分析.色谱柱为Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为A:0.1％磷酸水和B:乙腈,以梯度洗脱:0min～35min,B:3％～30％(V/V);35min～45min,B:30％～70％ (Ⅴ/Ⅴ).流速1mL/min,柱温30℃,检测波长221nm.在此条件下,天麻提取液及灰树花发酵液中3种己确定的天麻成分具有良好的分离度,且线性关系良好;精密度高(RSD＜5％);回收率在96％～102％之间,同时检测到经过6d发酵后发酵液中天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛质量浓度与发酵第0d相比分别下降了46.38％、11.85％和36.75％.该方法可以用于灰树花发酵过程中天麻成分变化情况的跟踪检测,为进一步探明天麻成分与灰树花代谢相互作用打下基础,同时也初步探明了灰树花对于天麻成分的利用情况.     

营养条件对灰树花产胞外多糖产量的影响

灰树花是一种营养丰富的食、药两用真菌 .灰树花胞外多糖是一种具有生理活性的真菌多糖 .作者研究了营养条件对灰树花产胞外多糖的影响 ,确定了合理的初始碳源、氮源、无机离子、生长因子的质量浓度 .进一步的正交试验表明 ,灰树花产胞外多糖较佳的培养基组合为 :葡萄糖 4 0g/L ,蛋白胨 5g/L、磷酸二氢钾 4 g/L ,硫酸镁 2 g/L、玉米浆 2 0 g/L .     

硫酸酯化灰树花多糖的制备与分析

利用碱提酸沉淀法从灰树花(Grifola frondosa)发酵菌丝体中获得碱提水不溶性多糖GAP,氯磺酸-吡啶法对GAP进行硫酸化修饰后,即制得能溶于水的硫酸化灰树花多糖.通过DEAE-Sepharose F.F.离子交换柱层析精制为一种相对分子量为2.8×10~4,硫酸基质量分数为16.4％的硫酸酯化灰树花多糖(S-GAP).琼脂糖电泳显示,S-GAP可被甲苯胺蓝染色且着色较深.S-GAP的紫外光谱和红外光谱分析表明,在波长208,264,268,286 nm以及波数1 230 cm-1、810 cm-1处有硫酸酯键的特征吸收峰.     

灰树花深层发酵培养基优化研究

灰树花是药食两用真菌，富含多糖，氨基酸和矿物元素，可用液体深层发酵大规模生产。本试验研究分析了文献报导的营养因子对灰树花发酵的影响，并选择得到各因子及水平。以菌丝干重作为试验指标，通过四因素四水平的正交试验得到优化培养基的组成为：马铃薯250g／葡萄糖30g，麸皮20－35g，酵母膏1.0-2.5g，磷酸二氢钾取2－5g，硫酸镁取0.5-2g，水1L，菌丝生物量干重为19．7g／L。方差分析表明混合碳源的浓度比对试验指标有显著影响。与文献结论进行了对比，得到不同结论。     

灰树花液态深层发酵条件研究

以菌丝体生物量和多糖含量为评价指标,通过单因素试验研究了灰树花的液态深层发酵条件,并考察不同发酵罐类型对灰 树花生长的影响,在此基础上利用50 L发酵罐进行了扩大培养。 结果表明,利用7 L搅拌式发酵罐,灰树花的最优液体深层发酵条件为培 养温度23 ℃,搅拌速度120 r/min,通气量3 L/min。 在此优化条件下,菌丝体生物量和发酵液中多糖含量分别为11.659 g/L和3.658 g/L, 且高于气升式发酵罐。 在50 L搅拌式发酵罐中成功实现了扩大培养,其菌丝体生物量和多糖含量分别为13.238 g/L和3.178 g/L。     

天麻提取物对灰树花深层发酵胞外蛋白合成的影响

在灰树花深层发酵系统中加入天麻提取物,以灰树花生物量和胞外蛋白合成量为指标,对天麻提取物添加量进行优选;利用HPLC对天麻提取物成分进行分析,研究天麻提取物灭菌前后主要成分(天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛及巴利森甙)含量的变化,并研究其促进灰树花生物量和胞外蛋白合成的关键成分在灰树花发酵体系中的含量变化。结果发现,7%(体积分数)天麻提取物可以促进灰树花菌丝体生长和胞外蛋白的合成,生物量和胞外蛋白合成量在发酵第11天时达到最大值;在天麻提取物灭菌后,巴利森甙含量明显减少,天麻素含量明显增加;天麻提取物加入灰树花发酵体系14d后,天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛含量均降低,但巴利森甙含量增加了161.11%。     

天麻提取物及其3 种主要成分对灰树花产胞外漆酶和菌丝体的影响

以天麻提取物为外源添加物,加至灰树花液体深层发酵体系中,通过外源诱导实验,考察天麻提取物对灰树花液体发酵产菌丝体及胞外漆酶的影响,并进一步重点研究起显著影响作用的关键成分。研究表明,天麻提取物及单一成分天麻素（gastrodin,GA）、对羟基苯甲醛（p-hydroxylbenzaldehyde,HBA）、对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol,HA）均对灰树花菌丝体和胞外漆酶活力有显著的促进作用。结果显示,当添加3?g/L的天麻醇提物时,对灰树花菌丝体生物量和胞外漆酶活力有最大的促进作用,与对照组相比,分别提高了1.62?倍和7.41?倍（P＜0.05）。同时,利用高效液相色谱对3?g/L天麻醇提物中的GA、HBA、HA含量进行分析,以相应量添加到灰树花发酵体系中。结果表明,HA和HBA均能显著提高灰树花漆酶活力和菌丝体生物量,与添加3?g/L天麻醇提物实验组相比,添加HA使酶活力提高10.25%,生物量增加9.17%。本研究可为中药提取物及成分促进真菌生长和产漆酶提供理论依据。     

灰树花多糖深层发酵pH值及溶氧条件控制研究

对灰树花真菌发酵工艺参数pH值和溶氧进行优化研究表明,pH值及溶氧对灰树花菌体及胞内外多糖产量影响较大,优化的工艺参数为:溶氧75%,pH值为5.1(0h～96h),pH值为4.2(96h～160h),此条件下菌体、胞内外多糖产量分别提高23.02%、28.95%、25.95%,表明该优化设计工艺切实可行。     

灰树花液体培养过程中底物利用与菌丝超微结构的变化

研究了灰树花深层发酵过程中底物利用与菌丝超微结构的关系。发酵的不同时期菌丝利用的底物不同,菌丝的超微结构也呈现出相应的变化。发酵早期的菌丝主要利用碳水化合物,结构上表现为线粒体丰富,液泡化程度低。发酵中期,菌丝开始分化,液泡增多增大,并通过内吞作用积累了一些脂质物质。这一时期超微结构上最大的特征是菌丝分化出顶囊以及膜边体,细胞内的膜系统分化出圆球体、初级溶酶体、次级溶酶体等结构,其中溶酶体内的各种水解酶负责水解蛋白质、脂肪等大分子;发酵后期菌丝高度液泡化,积累并利用脂质体,主要通过脂类分解代谢维持生命活动。     

山药、苦荞对灰树花深层发酵产胞外多糖的影响

灰树花是一种药食两用真菌,可用液体深层发酵大规模生产灰树花胞外多糖。试验采用现代化的液体深层发酵技术,添加山药和苦荞,可分别使灰树花胞外多糖产量较传统液体深层发酵技术提高1．2g／L和0．5g／L左右。同时,对碳源、氮源作了进一步优化,为今后深入研究如何提高灰树花胞外多糖产量奠定了基础。     

灰树花多糖调节脂肪代谢作用的研究进展

灰树花是一种食、药兼用的蕈菌,含有多种对人类有益活性成分,其多糖是一种功能性多糖,具有独特的结构和多种生理活性,可以改善高热量饮食所造成的脂肪代谢异常,在调节脂肪代谢作用中具有毒性小、作用广和靶点多等特点。脂肪代谢紊乱是血液和组织中脂质及其代谢产物发生异常,由高脂饮食、缺乏运动以及代谢综合症等因素诱发其发生和发展,严重危害人类健康。脂肪代谢障碍会导致血脂异常、动脉硬化和肥胖等代谢相关疾病,严重影响身体健康甚至危及生命。近年来,许多天然多糖可以作为益生元,通过调控关键基因的表达以及肠道微生物群来预防代谢紊乱。灰树花多糖可以作为功能性食品用于治疗或预防高脂血症、动脉硬化以及肥胖等疾病。该研究将从调节甘油三酯和脂肪酸、胆固醇以及肠道菌群结构等方面探讨灰树花多糖对脂肪代谢的影响。     

千佛菌抗衰老作用实验研究

目的:观察千佛菌对衰老小鼠血清、脑、肝脏组织抗氧化系统的影响,探讨千佛菌抗衰老的作用机理。方法:采用腹腔注射D-半乳糖制备衰老小鼠模型,并以千佛菌100%浓度（大剂量）、50%（小剂量）浓度给小鼠灌胃治疗,六周后,处死动物。检测血清、脑、肝组织中SOD、GSH-Px、CAT的活性及MDA的含量。结果:千佛菌能显著提高血清、脑及肝组织中SOD、GSH-Px、CAT（p<0.05）活性,降低血清、肝脏和脑组织中MDA（p<0.01）含量。结论:千佛菌通过提高抗氧化酶活性,显著提高衰老小鼠的抗氧化能力,以大剂量疗效显著。      

灰树花水提物的提取及其抑菌功能

为研究水溶液提取灰树花营养成分,采用水溶液对灰树花多糖进行了单因素及正交实验提取,用苯酚-硫酸法对多糖进行了测定。并用滤纸片法研究了灰树花水提物的抑菌能力。正交实验结果表明,影响灰树花多糖提取率的因素大小顺序依次是:温度、液料比、提取时间。灰树花多糖的提取最优条件为:温度80℃、液料比60∶1（mL∶g）、提取时间2.0h。灰树花水提物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有不同程度的抑制作用,抑菌圈直径分别为8.74、10.23、12.42mm。