响应面法优化海藻酸钠固定α-淀粉酶的研究

利用海藻酸钠为载体包埋制备固定化α-淀粉酶,在海藻酸钠浓度,氯化钙浓度和游离酶添加量的单因素实验基础上,采用响应曲面设计对三因素进行优化确定固定化的最优条件。得到的最佳条件为:海藻酸钠浓度为2.48%、氯化钙浓度为2.04%、游离酶浓度为0.23%,在该条件下进行验证实验得到固定化酶的回收率为74%,达到了较高的固定化酶的回收率。     

琼脂包埋法固定化α-淀粉酶特性的研究

以琼脂作为载体材料,采用包埋法固定化α-淀粉酶,并对其特性进行了研究.结果表明,该固定化酶最适pH 值为7.5、最适温度为55～ 58℃,具有较好的贮存稳定性和反应稳定性,18 d后该固定化酶的残余活力仍保留原酶活的71.6%左右,重复使用7次,酶活力下降不大,其酶活回收率达到78.8%.     

多孔玻璃微珠的制作及其固定α-淀粉酶的研究

用分相法和填充法分别制作了两种载体多孔玻璃微珠FXBL和TCBL,用共价偶联法分别固定α-淀粉酶,确定了其最佳固定条件和最佳应用条件,并研究了固定化酶的性质。主要结论如下:①最佳固定条件为:温度10℃;pH=6.2;给酶量TCBL 2.6 g/LF、XBL 2.4 g/L;时间12 h;②最佳应用条件为:温度75℃,比自由酶高5℃;pH值TCBL固定化酶为5.2、FXBL固定化酶为5.4,分别比自由酶的最适pH值6.0低0.8和0.6个pH值单位;③固定化酶的主要性质为:在80℃受热1 h,固定化酶的活力下降小于7%,而自由酶活力则下降至63%;FXBL固定化酶和TCBL固定化酶分别使用5次和8次还可以保持60%的活力。     

溶胶-凝胶法固定化α-淀粉酶的研究

采用溶胶-凝胶过程,以正硅酸乙酯为前驱物,对α-淀粉酶进行了固定化。考察了两种水解催化剂盐酸、醋酸对固定化酶活性的影响,并对固定化酶的耐热性、重复使用次数等进行了测试。     

乙基纤维素固定化α-淀粉酶的研究

对乙基纤维素固定化α-淀粉酶进行了研究,优化了α-淀粉酶的固定化工艺条件,并比较了游离酶和固定化酶的特性。结果表明,在α-淀粉酶浓度为4g·L-1、乙基纤维素质量分数为0.50%、4℃的条件下,固定化α-淀粉酶的重复操作稳定性最好;固定化α-淀粉酶的最适反应pH值为7.0、最适反应温度为60℃,具有良好的热稳定性、重复使用性和储存稳定性;该固定化方法操作简便,减少了酶变性的可能,最大程度保留了酶的活力。     

多孔玻璃微珠的制作过程对固定α-淀粉酶的影响

用分相法制作了载体多孔玻璃微珠FXBL,用物理吸附法、共价偶联法和重氮法分别固定α-淀粉酶,比较了它们的固定效果,选择了共价偶联法作为研究多孔玻璃微珠的制作过程对固定α-淀粉酶的影响的实验方法.得出结论:580℃分相玻璃优于560℃,分相时间到36h后,分相对固定化酶活力影响不大;多孔玻璃用0.3 mol/L的KOH溶液扩孔3h最理想;当盐酸的浓度为0.3mol/L时侵蚀成孔,固定化α-淀粉酶活力达到最大值.     

天然矿物埃洛石为载体固定α-淀粉酶的工艺和性能

以天然纳米材料埃洛石为载体,通过物理吸附法对α-淀粉酶进行固定.利用红外光谱、扫描电镜、透射电镜等对埃洛石的结构和形貌特征进行测试与表征,同时对埃洛石纳米管固定化α-淀粉酶的条件及固定化酶的酶学性能进行了研究,并与游离酶进行了比较.结果表明:这种具有管状结构的埃洛石硅酸盐矿物是理想的酶载体,酶的固定化效率平均达到37.38%;所得的固定化α-淀粉酶4℃下保存15d后,酶活力仍保持90%以上;固定化α-淀粉酶的热稳定性也明显优于游离酶,连续7批次操作后仍保持56.2%的酶活力.     

溶胶-凝胶法固定化α-淀粉酶及其固定床运行研究

以正硅酸乙酯为硅源、醋酸为水解催化剂,采用溶胶-凝胶法,室温下制得包埋α-淀粉酶的二氧化硅凝胶颗粒.模拟固定床的条件,测定了固定化α-淀粉酶的重复使用回收活性及米氏常数,结果表明其重复使用40次后仍保留30%以上的初始活性.     

α-淀粉酶在MCM-41介孔分子筛上的固定化研究

采用浸渍法将α-淀粉酶固定在介孔分子筛MCM-41上。考察了吸附时间、给酶量和pH对α-淀粉酶固定化性能的影响,并对固定化酶的活性、稳定性和载体结构等进行了研究。结果表明,在固定化时间为11 h,给酶量为70 mg.g-1,pH=5.9的条件下,固定化酶活性回收率可达48%。与游离酶相比,固定化酶的耐热能力增强,温度达到70℃时,固定化酶相对活性可达到75%,而游离酶只有14%;在pH=3.3～8.0的内,固定化酶相对活性为62%～100%,而游离酶的相对活性为5%～100%,固定化酶具有更宽的pH适应性;此外,固定化酶储存稳定性明显增强,并具有一定的可重复操作性,且固定后载体仍然保持了良好的介孔结构。     

磁性聚乙烯醇缩丁醛微球固定化α-淀粉酶

制备出磁性聚乙烯醇缩丁醛微球,并用该微球做载体,采用共价交联法固定α 淀粉酶。最佳固定化工艺条件为:pH=6 07,激活和交联时戊二醛的质量分数分别为4%和0 025%。在最佳固定化条件下所制磁性固定化酶的活力为25426 3U/g微球,蛋白载量为187 2mg/g微球,比活为135 8U/mg蛋白,活性回收率为36 9%。磁性固定化酶的理化性质为:磁性固定化酶的最适温度(60℃)比自由酶(50℃)高,最适pH(6 97)与自由酶相同,磁性固定化酶Km(米氏常数)值(5 7×10-4kg/L)较自由酶Km值(5 0×10-4kg/L)大,热稳定性、pH稳定性及操作稳定性均比自由酶有所提高。     

α-淀粉酶降解淀粉性能研究

主要研究玉米淀粉在α-淀粉酶作用下,在不同反应条件下所得到的变性淀粉分子的微观结构变化、性能变化.实验结果表明:玉米淀粉的生物降解并未生成新的官能团,酶解淀粉的分子结构没有变化.在70℃,pH值为4,α-淀粉酶用量0.2 g的反应条件下的降解效果最理想,黏度变化率达到71.35%.     

染色淀粉膜法测定α-淀粉酶的研究

采用染色淀粉膜法测定血清α-淀粉酶,介绍了染色淀粉膜法反应机理及制备工艺,建立了该试剂的测定方法。并通过稳定性、重复性、抗干扰性、相关性等实验进行了方法学评价。实验结果显示:染色淀粉膜法重复性及稳定性良好,批内最大变异系数c．V≤4．48,批问C．V≤5．28;胆红素和血色素对测定无明显干扰;与碘淀粉法相关性良好(R2=0．9857); 216例正常人血清参考值范围33-137 Udl-1。     

α-淀粉酶的研究与应用进展

α-淀粉酶是一种重要的淀粉水解酶,它能够切断淀粉内部的糖苷键,产生糊精、低聚糖和葡萄糖等。α-淀粉酶可以从植物、动物或微生物中获得,但工业应用中的α-淀粉酶绝大多数来自细菌和真菌。不同来源的淀粉酶活力和热稳定性有很大差异,其中嗜热淀粉酶在实际应用中非常重要和广泛。α-淀粉酶的制备工艺可以采用深层发酵或固态发酵的方法。目前α-淀粉酶已广泛应用于食品、纺织、造纸、洗涤剂工业,用于生产麦芽糊精,淀粉改性,葡萄糖、果糖的制备,燃料乙醇的生产等等。主要阐释α-淀粉酶的性质、制备、纯化、表征以及在工业中的应用。     

液-固萃取法提取α-淀粉酶的研究

以聚乙烯吡咯啉酮(PVP)/(NH4)2SO4液-固萃取体系,研究了耐高温α 淀粉酶在PVP固相中的萃取分配行为。萃取的适宜条件为7%PVP(K30)、1 67mol·L-1(NH4)2SO4、pH=6 0,α 淀粉酶在固相中的一次萃取率为94 5%。实验结果表明:高酸度和高碱度都会导致酶活力的丧失,而使萃取酶活力降低,此外,酶浓度也是影响耐高温α 淀粉酶在固-液两相中分配的最重要因素之一。     

α-淀粉酶的固定化及其在邻硝基对甲基苯酚还原反应中的应用

以尼龙作为酶固定化载体材料,采用化学键合法固定α-淀粉酶,并对固定化前后酶的特性进行了研究。结果表明,与游离酶相比,固定化酶最适pH值从6．3提高到7．2,并且在较宽的pH值范围内显出较高的酶活性;固定化α-淀粉酶的最适温度为70℃,比游离酶的最适温度60℃高10℃,显示出较高的热稳定性;将固定化α-淀粉酶应用于邻硝基对甲基苯酚的还原反应,产率为37．09％;将固定化酶在4℃的水溶液中保存14d仍保留79．89％的酶活。     

酵母菌与糖化酶的共固定化研究

以海藻酸铝为载体,用包埋法共固定酵母菌和糖化酶,探讨了此双酶体系的储存稳定性和重复使用稳定性,研究了共固定化酶的双酶比例及pH和温度对酒精发酵的影响,结果表明,酵母菌和糖化酶的最佳加入量分别为2.5 g和300 U/g;固定化酶重复使用10次后,残余活力仍能保持最初活力的83.47%;共固定化酶的半衰期可达205.1 d;pH为4.0~4.5、温度为37℃时,其活性可达最高。     

类黄酮和α-淀粉酶相互作用特性及机理的研究概述

类黄酮是自然界中广泛存在的一大类多酚化合物,其与α-淀粉酶相互作用后,能影响α-淀粉酶的催化活性及类黄酮的抗氧化活性。因此,文章简要总结了类黄酮的结构、分类、生理活性及构效关系,概述了类黄酮和α-淀粉酶间相互作用后对两者生理活性的影响,及两者作用机理的研究方法。     

海藻酸钠-硅藻土包埋石油脱硫菌Rhodococcus sp.H-412

生物菌固定化研究对生物脱硫技术的推广应用具有重要的意义。本文以实验室筛选的、符合4S脱硫代谢途径的Rhodococcus sp．H．412为研究对象,二苯并噻吩（DBT）为生物催化脱硫模拟化舍物,考察了脱硫菌Rhodococcus sp．H．412的固定化操作条件和使用条件。试验结果表明：在交联温度为4℃,交联剂氯化钙溶液浓度为0．10mmol／L,海藻酸钠质量分数为3．0％,添加剂硅藻土质量分数为1．0％,菌胶比（菌体湿重：胶体体积）为1：20的条件下,用8号医用针头造粒,可以得到具有较高的脱硫活性、较好的机械强度和传质性能的固定化细胞颗粒。固定化细胞相对游离细菌而言,具有较高的温度适应能力和较宽的pH适应范围。     

可见分光光度法测定α-淀粉酶活力

利用I~-_3与淀粉络合所呈现的蓝色在一定波长下有特征吸收这一特性,采用可见分光光度法,通过测定添加α-淀粉酶前后发生水解的淀粉量的变化测定α-淀粉酶活力。结果表明,淀粉与I~-_3在pH值6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中显色良好,并在580 nm处具有最大吸光度。加入一定量的淀粉,α-淀粉酶浓度(x)在0.001～0.008 mg·mL~(-1)范围内与酶活力(y)线性关系良好,标准曲线方程为y=375.75x+0.1208(R~2=0.9939)。因此,可以利用碘与淀粉的显色反应对α-淀粉酶活力进行测定。     

α-淀粉酶酶催化淀粉制备低聚糖

随着色谱法的发展,反应色谱在工业生产上已成为越来越重要的制备分离手段。反应色谱是一种耦合技术,在同一色谱单元内,反应与分离同时进行,因此可以突破化学平衡限制。在制备与分离领域,反应色谱技术可以提高产品的产率,大大地节省下游处理过程。以稳态α-淀粉酶酶催化水解淀粉反应的条件为参照,探索了反应色谱的实验条件。