青蒿素对CpG DNA 攻击小鼠保护作用的实验研究

目的:观察青蒿素对CpG DNA 攻击小鼠的保护作用及对CpG DNA 诱导小鼠单核 巨噬细胞RAW264.7 释放促炎细胞因子的影响。方法:清洁级昆明小鼠60 只, 随机分为CpG DNA、青蒿素(200mg°kg^-1)、CpG DNA+青蒿素(50、100、200 mg°kg^-1)及生理盐水对照组, 每组动物10 只。CpG DNA 及CpG DNA+青蒿素组小鼠提前1 h 腹腔注射D-氨基半乳糖溶液(600 mg°kg^-1)进行敏化。CpG DNA 组尾静脉给予4 mg°kg^-1的CpG DNA 敏化;青蒿素组,灌胃给予200 mg°kg^-1的青蒿素;CpG DNA+青蒿素组在给予不同剂量的青蒿素后, 立即给予40mg°kg^-1的CpG DNA 敏化;生理盐水对照组仅给予相同量的生理盐水。体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7, 加入不同浓度的青蒿素, 观察其对CpG DNA刺激细胞分泌TNF-α及IL-6 的拮抗作用及其量效、时效关系。结果:青蒿素可降低CpG DNA 引起的小鼠死亡, 死亡率由80% 降至10% (P<0.01)。青蒿素在20 g°ml-1 时显著抑制CpG DNA 诱导RAW264.7 释放TNF-α和IL-6(P<0.01)。提前给予青蒿素, 其拮抗CpG DNA 诱导细胞因子释放的作用非常显著(P<0.01), 但青蒿素在刺激物CpG DNA 给予后再加入, 也能观察到显著拮抗作用(P<0.05)。结论:青蒿素对CpG DNA 攻击小鼠具有显著保护作用, 该保护作用可能与其明显抑制CpG DNA 诱导的促炎细胞因子释放有关。     

胆碱对小鼠炎性疼痛影响的实验研究

目的:研究胆碱对炎性疼痛的影响。方法:福尔马林实验和小鼠热板实验, 观察单独给予胆碱及胆碱与阿司匹林或吗啡联合用药时, 对小鼠在福尔马林模型中的舔足时间和热板实验中的疼痛潜伏期的影响。结果:胆碱(4、8、16、32、64 mg°kg^-1, i.v.)可显著抑制福尔马林所致的Ⅱ相痛反应;尾静脉给予胆碱2 mg°kg^-1 或阿司匹林9.4 mg°kg^-1, 对福尔马林模型的Ⅰ 相和Ⅱ相痛反应均无显著的抑制作用, 二者联合应用可显著抑制Ⅱ相反应;联合给予吗啡0.165 mg°kg^-1 和胆碱2 mg°kg^-1对福尔马林模型的Ⅱ 相反应的抑制作用比单独应用吗啡0.165mg°kg^-1好。结论:胆碱对炎症性疼痛镇痛效果显著, 胆碱和阿司匹林、吗啡有协同镇痛作用。     

内毒素耐受状态小鼠对大肠埃希菌敏感性及促炎细胞因子水平变化的研究

目的: 研究内毒素耐受状态对大肠埃希菌的敏感性及促炎细胞因子水平的变化。方法: 采用小剂量LPS(1 mg/kg)连续腹腔注射 5 d 并在第6天尾静脉注射大剂量LPS(50 mg/kg)建立小鼠内毒素耐受模型。观察小鼠 7 d 存活率或采用ELISA法检测注射大剂量LPS后6、12 h 血清中TNF-α、IL-6水平。然后,采用不同浓度的大肠埃希菌攻击耐受小鼠,观察小鼠 7 d 存活率;或采用血培养方法检测血液中细菌数量,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6水平。结果: 大剂量LPS攻击组(攻击组)小鼠存活率为0 %,LPS耐受组(耐受组)小鼠存活率为100%;耐受组小鼠血清TNF-α、IL-6水平较攻击组显著降低(P＜0.01)。5.0×10⁸ CFU/kg 大肠埃希菌可导致正常小鼠100%死亡,但是仅 1.0×10⁷ CFU/kg大肠埃希菌就可导致耐受组小鼠100%死亡;耐受组给予大肠埃希菌低、高剂量组小鼠血液中细菌数量远远高于相应的正常小鼠大肠埃希菌低或高剂量组(P＜0.01),而血清中TNF-α、IL-6水平则远远低于相应的大肠埃希菌低或高剂量组(P<0.01)。结论: 连续腹腔注射小剂量LPS 5 d 后并在第6天尾静脉注射大剂量LPS可成功建立LPS耐受模型;与正常对照组小鼠比较,较低数量的大肠埃希菌就可导致耐受组小鼠死亡,说明内毒素耐受小鼠对大肠埃希菌的敏感性较正常小鼠明显增高,其机制可能与内毒素耐受后促炎细胞因子水平降低、机体抵抗力降低有关。     

人参茎叶皂甙对5-氟脲嘧啶抗肿瘤的增强作用

目的: 观察人参茎叶皂甙(GSL) 促进氟脲嘧啶( 5-FU) 对小鼠S180 实体瘤的抑瘤作用。方法: 采用昆明种小鼠, 随机分组进行实验, 分别给予不同剂量人参茎叶皂甙与氟脲嘧啶配伍使用, 观察其对小鼠S180 实体瘤抑瘤率的差别。结果: 低剂量人参茎叶皂甙( 15 mg·kg^-1) 与氟脲嘧啶( 1. 5 mg·kg^-1) 组方对小鼠S180 实体瘤有显著的抑瘤作用( 抑瘤率达26. 90 %, P <0. 05), 对胸腺无抑制作用;阳性对照药5-FU( 25 mg·kg^-1) 的抑瘤率为36. 61 %, 但其对胸腺有显著抑制作用;而人参茎叶皂甙( 100 mg·kg^-1) 单用对小鼠S180 实体瘤抑瘤率为27. 44 %。结论: 低剂量人参茎叶皂甙( 15 mg·kg^-1) 显著促进5-FU( 1. 5mg·kg^-1) 对小鼠S180 实体瘤的抑瘤作用而无胸腺抑制作用, 可并减少5-FU 的毒副作用。     

CpG 基序的寡脱氧核苷酸对人轮状病毒乳鼠腹泻模型的保护作用

目的:探讨含CpG 基序的寡脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)干预对人轮状病毒(human rotavirus,HRV)感染乳鼠的保护作用机制。方法:64 只ICR 乳鼠随母鼠按窝随机均分为4 组:正常对照组、HRV 感染组、CpG ODN 预处理组、CpG ODN 治疗组。观察各组乳鼠的治疗反应和排毒情况;免疫组化法检测小肠组织Toll 样受体9(Toll-like receptor 9, TLR9)、IFN-γ的表达。结果:HRV 感染组乳鼠的腹泻天数、排毒时间及重型腹泻发病率均高于CpG ODN 预处理组和CpG ODN 治疗组(P<0.05);CpG ODN 预处理组、CpG ODN 治疗组TLR9、IFN-γ表达水平明显高于正常对照组和HRV 感染组(P<0.01), 并且两者存在正相关(P<0.05)。结论:CpG ODN 预处理和治疗都能提高HRV 感染乳鼠小肠组织TLR9、IFN-γ的表达, 对HRV 感染乳鼠有保护作用。     

阿糖胞苷诱发小鼠血小板减少模型的研究

目的: 建立阿糖胞苷诱发时间更快和更稳定的小鼠血小板减少模型。方法: 小鼠腹腔分别注射200 和100mg°kg^-1 阿糖胞苷, 造成血小板减少, 观察两组动物外周血象 、骨髓涂片和脾脏、肾上腺、胸腺重量的变化。结果: 两种剂量的阿糖胞苷都能成功造成小鼠血小板减少模型, 在诱发时间和稳定性方面200 mg°kg^-1 阿糖胞苷组优于 100 mg°kg^-1 阿糖胞苷组, 除血小板数之外,两剂量组的其它观察指标无明显区别。结论: 200 mg°kg^-1 阿糖胞苷组造成的小鼠血小板减少模型诱发时间更快、稳定性更好。     

新型重组人肿瘤坏死因子-α对四氯化碳及刀豆蛋白A 诱导小鼠肝损伤的影响

目的:研究不同剂量的新型重组人肿瘤坏死因子(nrhTNFα)对肝功能及肝脏组织形态学的影响。方法:用四氯化碳(CCl4)或刀豆蛋白A(Con A)诱导小鼠肝损伤, nrhTNFα低、中、高剂量(5×10⁴, 5×10⁵, 5×10⁶ IU°kg^-1)im, 测血清中ALT、AST、LDH、IFN-α、IL-2 和NO 浓度变化, 检查肝脏组织形态学变化。结果:3 个剂量的nrhTNFαim 对正常小鼠肝功能及肝脏组织形态学无影响;低、中剂量nrhTNFα对CCl4 诱导肝损伤小鼠的肝功能及肝脏组织形态学无影响, 高剂量nrhTNFα加重肝损伤;3 个剂量的nrhTNFα降低Con A 诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST、LDH 和IFN-γ浓度增加, 且nrhTNFα低剂量作用明显, 能明显减轻肝脏病理学改变。结论:nrhTNFα低、中、高剂量im 对正常小鼠无肝毒性;nrhTNFα低、中剂量im 不影响CCl4 诱导的肝损伤,高剂量则加重之;3 个剂量的nrhTNFαim 抑制Con A诱导的肝损伤, 其作用机理与抑制Con A 诱导的小鼠IFN-γ产生有关。     

匹格列酮抑制小鼠肝切除术后肝脏再生

目的: 探讨匹格列酮在小鼠肝切除术后肝脏再生中的作用。方法: 对C57BL/6J小鼠实施2/3肝切除,建立小鼠肝再生模型。实验组小鼠按体重给予匹格列酮 20 mg·kg^-1·d^-1口服,对照组给予安慰剂口服,在术后不同时间点收集小鼠残余肝脏和血清,计算肝脏体重比;监测术后肝功能和血糖变化;H&E染色观察肝脏形态学变化,免疫组化染色观察肝细胞增殖情况。结果: 匹格列酮 20 mg·kg^-1·d^-1 对小鼠术后肝功能和血糖无明显影响。与对照组相比,匹格列酮组小鼠术后肝脏生长缓慢,肝细胞增殖受到抑制(P＜0.05)。结论: 匹格列酮抑制小鼠肝切除术后肝脏再生。     

孕酮和孕烯醇酮硫酸盐对东莨菪碱引起的小鼠记忆损伤的保护作用

目的: 观察孕酮和孕烯醇酮硫酸盐对东莨菪碱引起的小鼠记忆损伤的保护作用。方法: 用东莨菪碱造成小鼠记忆损伤的模型, 应用被动避暗试验测定潜伏期以评价记忆成绩。结果: 小鼠给予东莨菪碱(1 mg·kg^-1, ip) 后, 其潜伏期显著减少, 表明造成了明显的记忆损伤。孕酮(1, 10 mg·kg^-1, sc) 和孕烯醇酮硫酸盐(1 mg·kg^-1, sc) 均可以在被动避暗试验中减轻东莨菪碱引起的记忆损伤。结论: 孕酮和孕烯醇酮硫酸盐可改善记忆损伤。     

阿莫西林、甲硝唑和胶体次枸橼酸铋三种药物联用对大鼠胃溃疡模型的影响

目的: 观察阿莫西林、甲硝唑和胶体次枸橼酸 铋联合使用对3 种大鼠胃溃疡模型的影响, 为临床 合理选用药物治疗消化道溃疡提供参考。方法: 用 大鼠做成水浸应激性胃溃疡、幽门结扎型胃溃疡及 乙酸烧灼型胃溃疡3 种模型, 试验组给予阿莫西林 (225 mg·kg^-1) 、甲硝唑(112 mg·kg^-1) 和胶体次枸橼 酸铋(56 mg·kg^-1) 混合物;阳性对照组给予西咪替 丁(112 mg·kg^-1); 阴性对照组给予2 %羧甲基纤维 素钠(CMC-Na) 。结果: 试验组呈剂量依赖性保护大 鼠水浸应激性胃溃疡形成, 有效剂量为 112 mg·kg^-1;呈剂量依赖性保护大鼠幽门结扎型溃 疡形成, 有效剂量为56 mg·kg^-1;呈剂量依赖性促进 大鼠乙酸烧灼溃疡的愈合, 有效剂量为 112 mg·kg^-1。结论: 试验组呈剂量依赖性对大鼠水 浸应激性胃溃疡显示保护作用;呈剂量依赖性减少 大鼠幽门结扎型胃溃疡的程度;呈剂量依赖性促进 乙酸烧灼溃疡的愈合, 但作用均弱于西咪替丁。     

以 CpG ODN 为靶点应用生物传感器技术筛选抗炎中药

目的: 筛选具有拮抗CpGODN作用的抗炎中药。方法: 将CpGODN包被于生物传感器的生物素化样品池上,测定78种中药水煎液与CpGODN的亲和力;选择具有较高亲和力的中药水煎液,与CpGODN(33μg·ml^-1)37℃孵育30min后,再次测定与CpGODN的亲和力。结果: 78种中药中,地榆、大黄、藏果等14种中药含有结合CpGODN的活性成分;鸦胆子、赤芍、地榆等9种中药活性成分含量较高。结论: 筛选得到9种活性含量较高的中药,为下一步分离提纯有效成分/单体提供了实验依据。     

刺五加对急性胰腺炎模型大鼠体内炎性介质的影响

目的:观察刺五加对急性胰腺炎模型大鼠体内炎性介质的影响。方法:经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备急性胰腺炎模型,术后定时取血,测定血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)以及淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LIP)、磷脂酶A₂(PLA₂)等的变化。结果:刺五加能降低血清中TNF-α、IL-1、IL-6的水平,降低血清中AMY、LIP、PLA₂的活性。结论:刺五加对血清中TNF-α等多种细胞因子和AMY、PLA₂的影响,可能是其治疗急性胰腺炎的作用基础。     

原子力显微镜观察头孢美唑抗生素后效应期间大肠埃希菌形态学特征

目的: 通过应用原子力显微镜对头孢美唑体外抗生素后效应(PAE) 期间E. coliATCC25922 的形态学观察, 深入探讨其抗生素后效应形成机制。方法: 采用菌落计数法测定头孢美唑对E. coli 的PAE的同时, 应用原子力显微镜观察体外PAE 期间4MIC 、128 MIC 的头孢美唑不同时间点E. coli. ATCC25922 的形态学变化。结果: 菌落计数法测定4MIC 、128 MIC 头孢美唑的体外PAE 分别为-0. 03 h和3. 65 h 。原子力显微镜结果表明低浓度(4 MIC)时细菌呈丝状体, 高浓度(128 MIC) 时细菌呈球状体, 而且在菌落计数法所测定的PAE 之后仍有细菌形态学改变。结论: 不同浓度的头孢美唑PAE 期间E. coli 菌体形态呈现不同的变化, 从而显示了不同浓度的头孢美唑PAE 期间对E. coli 具有不同的作用靶位。     

阿司匹林对多囊卵巢综合征大鼠炎症反应的影响

目的: 探讨阿司匹林对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)大鼠炎症反应的影响及其机制。方法: 采用人绒毛膜促性腺激素和胰岛素皮下注射建立PCOS模型,观察阿司匹林对PCOS大鼠体质量、卵巢重量和病理、血清TNF-α、IL-6、胰岛素水平及卵巢TNF-α、IL-6 mRNA表达的影响。结果: 阿司匹林可剂量依赖性降低PCOS大鼠体质量和卵巢重量,减轻卵巢病理改变,血清TNF-α、IL-6、胰岛素含量和卵巢TNF-α、IL-6表达水平亦明显降低。结论: 阿司匹林可通过其抗炎作用对PCOS大鼠产生保护作用。     

加替沙星和环丙沙星体外抗生素后效应期间大肠埃希菌形态学观察及膜电位和膜通透性变化

目的: 通过对加替沙星和环丙沙星体外抗生素后效应(PAE) 期间E.coliATCC25922 的形态学观察以及膜电位、膜通透性变化的研究, 以期为探讨PAE 形成机制提供实验依据。方法: 在不同时间点吸取加替沙星和环丙沙星抗PAE 期间的大肠埃希菌培养液, 用荧光探针碘化丙啶和DiBAC4(3) 进行染色, 应用荧光显微镜观察E.coliATCC25922 的形态学变化, 并采用流式细胞仪分析其膜电位、膜通透性变化。结果: 荧光显微镜结果表明:菌落计数法所测定的PAE 之后仍有丝状体存在, 但流式细胞仪结果表明加替沙星和环丙沙星PAE 期间E.coliATCC25922 膜电位及膜通透性与空白对照组比较无显著性差异。结论: 加替沙星和环丙沙星PAE 期间E.coli 菌体显著延长, 呈丝状体, 而其膜电位及膜通透性比较则无显著性变化, 提示丝状体形成与细胞膜变化不直接相关。     

赤芍拮抗内毒素活性的实验研究

目的:提取分离中药赤芍中拮抗内毒素(LPS)的有效成分并进行药理学活性检测。方法:通过生物传感器, 结合常规的中药分离技术, 分离提取出赤芍拮抗LPS 的有效成分, 应用鲎实验和ELISA 法检测该有效成分对LPS 的中和作用。结果:赤芍中的有效成分与LPS 具有较高的结合作用, 该结合作用具有较强的中和LPS 活性, 在体外能够显著抑制由LPS 介导小鼠RAW 264.7 细胞释放TNF-α。结论:以LPS 为靶点, 应用生物传感器技术, 可快速、有效地提取分离赤芍中具有较强的中和LPS 活性的有效成分。     

温郁金二萜类化合物C对脂多糖所致人胃腺癌SGC7901细胞NF-κB活化和炎症因子分泌的影响

目的: 研究温郁金二萜类化合物对脂多糖(LPS)诱导的人胃腺癌SGC7901细胞中炎症因子(TNF-α、IL-1β)分泌影响,并探讨其可能分子机制。方法: 以 10 mg/L 的LPS刺激体外培养的SGC7901细胞为炎症模型。酶联免疫法测上清中TNF-α、IL-1β分泌量,蛋白质印迹法检测P65、NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达,细胞免疫荧光法检测NF-κB P65蛋白核易位。结果: LPS明显诱导人胃腺癌SGC7901细胞TNF-α、IL-1β分泌,P65蛋白生成增多,并大量易位于细胞核;IκBα蛋白降解增多。温郁金化合物抑制LPS诱导的IκBα蛋白降解及P65核易位。结论: 温郁金二萜类化合物可能通过抑制NF-κB活化来实现抗炎作用。