多非替利衍生物CPU228(V03) 对大鼠心室肌细胞钙瞬变的调节

目的:在β-受体激动情况下, 研究多非替利衍生物CPU 228 对电刺激触发心肌细胞的胞浆Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i) 变化及钙瞬变动力学参数的影响。方法:游离单个大鼠心室肌细胞, Fluo-3/AM 负载, 电刺激诱发心室肌细胞钙瞬变, 定量测定心室肌细胞内Ca²⁺浓度变化, 异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO) 100 nmol°L^-1激动β-受体, 观察CPU 228 1 μmol°L^-1对钙瞬变动力学参数、[Ca²⁺]_i 及钙负荷水平的影响。结果:CPU228 1 μmol°L^-1对大鼠心室肌细胞[Ca²⁺]_i 的影响不明显(P>0.05);ISO 100 nmol°L^-1显著升高大鼠心室肌细胞[Ca²⁺]_i 和细胞内钙负荷水平, 缩短钙瞬变时程, 并且增加钙瞬变的消除速率。CPU 2281 μmol°L^-1显著抑制ISO 的上述作用。结论:在β-受体激动情况下, CPU 228 可以降低心肌细胞[Ca²⁺]_i,使ISO 改变的钙瞬变动力学参数恢复到正常水平。     

葛根素抑制大鼠离体胃肠平滑肌收缩活动及机制探讨

目的: 观察葛根素对大鼠离体胃肠平滑肌收缩活动的影响,并探讨其作用机制。方法: 取大鼠胃肠平滑肌条,安置在恒温灌流肌槽中,记录胃肠平滑肌条的收缩活动。结果: 葛根素能降低胃肠平滑肌条的张力,减小其收缩波平均振幅,并有剂量依赖关系,以胃体收缩幅度为指标,用Logistic法计算IC₅₀为 82.590 μmol/L(r=0.498)。酚妥拉明、L-NG-硝基精氨酸和格列本脲可部分阻断葛根素对大鼠胃体收缩活动的抑制作用,用Logistic法计算IC₅₀分别为 222.408 μmol/L(r=0.495)、166.945 μmol/L(r=0.446)、149.902 μmol/L(r=0.596)。结论: 葛根素对大鼠胃肠平滑肌条收缩活动具有抑制作用,这种抑制作用部分经由肾上腺素能α受体、NO途径及K_ATP通道所介导。     

过氧化氢对大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流的影响

目的: 研究过氧化氢(H₂O₂)对单个大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(Ica,L)的影响。方法: 用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流,观察5mmol·L^-1H₂O₂引起单个大鼠心室肌细胞Ica,L改变。结果: 在5mmol·L^-1H₂O₂作用下,大鼠心室肌细胞Ica,L峰值电流密度从4.89±0.52pApF增加至9.80±0.65pApF(P<0.05,n=10),电流-电压曲线下移,但激活电位、峰电位和翻转电位无明显改变;H₂O₂对Ica,L激活时间常数-电压曲线无明显影响,但可使其灭活时间常数-电压曲线明显向上移;H₂O₂对Ica,L稳态激活曲线无明显改变,但可使其稳态失活曲线明显左移,V0.5从(-26.85±5.3)mV左移至(-37.20±4.5)mV(P<0.05,n=5)。结论: H₂O₂可以增加大鼠心肌细胞Ica,L,且使其失活明显减慢。     

银杏叶提取物对豚鼠心室肌细胞动作电位及L 型钙离子通道的影响

目的:观察银杏叶提取物(EGB)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙通道的影响。方法:采用全细胞膜片钳技术的电流钳记录动作电位和电压钳记录L-型钙离子通道电流(I_Ca-L)。结果:银杏叶提取物(原液含银杏黄酮甙0.804 g·L^-1, 银杏内酯0.06 g·L^-1)明显缩短心室肌细胞动作电位时程(APD), 1 ∶800 稀释液致APD₉₀ 缩短13 %(P <0.05), 1 ∶200 稀释液致APD₉₀缩短23 %(P <0.05);银杏叶提取物对心肌细胞L-型钙离子通道的开放有抑制作用, 在1 ∶800 时I_Ca-L 峰值降低15 %(P <0.05), 1 ∶200 时I_Ca-L 峰值降低42 %(P <0.05), 均呈浓度依赖性, 随着药物浓度的增加, I-V 关系曲线逐渐上移, 但出现电流峰值的电压不变。结论:银杏叶提取物能明显缩短APD, 抑制心肌细胞钙离子通道的开放, 具有明显的浓度依赖关系, 可能是其抗心律失常的分子基础。     

缺氧-复氧对心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用1

目的 观察缺氧-复氧对大鼠心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用 。方法 在缺氧-复氧条件下,测量对照组和不同浓度川芎嗪组对杆形心肌细胞百分比、心肌细胞内 K⁺/Na⁺浓度比及Ca²⁺浓度的影响。结果 缺氧-复氧对大鼠心室肌细胞有损伤作用,浓度为 4μmol·L^-1的川芎嗪对缺氧-复氧损伤细胞有保护作用,它能抑制损伤细胞挛缩,提高损伤细胞生存率,抑制心肌细胞内 K⁺/Na⁺浓度比的降低 、增加细胞内 Ca²⁺浓度,且剂量越大,保护作用越好,即川芎嗪对缺氧-复氧损伤细胞的保护呈剂量依赖性 。结论 川芎嗪对缺氧-复氧损伤的大鼠心肌细胞具有保护作用,它能显著地对抗缺氧-复氧对心室肌细胞的损伤作用 。     

吡格列酮对培养的心肌细胞肥大的抑制作用

目的: 利用体外培养的乳鼠心肌细胞, 观察吡格列酮对高浓度葡萄糖与去甲肾上腺素共同诱导的肥大心肌细胞的影响, 进一步推测吡格列酮对糖尿病性心肌肥大的可能作用及作用机制。方法: 以培养的乳鼠心肌细胞为模型分组给药后, 用显微镜目镜计数心肌细胞搏动的频率;用Lowry' s 法测心肌细胞的蛋白质含量;用[³H] leucine 标记法测定心肌细胞蛋白的合成;利用计算机图象分析系统测心肌细胞的体积。结果: 吡格列酮在1 ～ 10 μmol·L^-1 浓度对25. 5 mmol·L^-1高糖与1 μmol·L^-1去甲肾上腺素联合诱导的肥大心肌细胞的蛋白含量、蛋白合成及体积均有显著的抑制作用。其抑制肥大的效果比1 μmol·L^-1 维拉帕米更为显著;同时观察到10 μmol·L^-1吡格列酮同1 μmol·L^-1维拉帕米一样有抑制心肌细胞搏动的作用。结论: 吡格列酮能有效抑制高糖与去甲肾上腺素联合诱导的心肌细胞肥大。这种作用可能是通过作用于PPARγ来实现的。     

氨甲酰胆碱和毛果芸香碱对血管内皮细胞M受体基因表达的调节作用

目的: 比较氨甲酰胆碱和毛果芸香碱对血管内皮细胞M受体 基因表达调节作用的异同点。方法: 氨甲酰胆碱和毛果芸香碱分别孵育培养的牛主 动脉内皮细胞10 h后,提取细胞总RNA,R T-PCR方 法测定M受体5个亚型mRNA的表达。结果: M₁ ~M₅受体mRNA在牛主动脉内皮细胞上均有表达,氨甲酰胆碱和毛果芸香碱孵育后 表达量均增加,但二者之间无差异。结论: 氨甲酰胆域和毛果芸香碱对M受体5个亚型的基因表达均发生了相同的影响,两者对M受体可能的作用尚不能解释其对血管张力的影响。     

华法林负荷量法抗凝治疗短暂性脑缺血发作的研究

目的 观察华法林抗凝治疗短暂性脑缺血发作(TIA) 的安全性和疗效。 方法 2003 年1 月至2004 年1 月入院的TIA 病人, 适合抗凝治疗者, 按Roberts 依年龄调整华法林负荷量指南用药, 对照组为2002 年1 月至2003 年1 月住院的TIA 病人, 并剔除用肝素治疗的病人。 结果 华法林组10 d 内无脑卒中发生, 仅有4 人次再次TIA, 未发现有出血者;对照组10 d 内脑梗死6 例, 再次TIA 12 人次, 华法林组于TIA 发作后10 d 内发生脑梗死及再次TIA较对照组低(P <0.05)。 结论 按Roberts 华法林负荷量指南抗凝治疗TIA 优于非抗凝治疗, 而且安全。     

在非洲爪蟾卵母细胞上表达大鼠肌肉乙酰胆碱受体的方法学研究

目的:建立适合于研究肌肉松驰药作用的乙酰胆碱受体的实验模型。方法:采用磁珠技术从大鼠肌肉中提取多聚腺嘌呤mRNA, 注入去膜的非洲爪蟾卵母细胞, 表达为有功能的离子通道, 并与未去膜和去膜未注射的卵母细胞比较, 利用电压钳方法记录电压依赖性的离子通道电流, 观察并分析三组电流特性。结果:三组卵母细胞的静息膜电位和钳制到-60 mV 时的补偿电流之间无显著的统计学意义, 通过去除卵母细胞的卵泡膜可以去除内源性受体的干扰, 在注射大鼠肌肉mRNA 的卵母细胞膜上记录到典型的N₂ 型ACh 受体的电流。结论:本实验建立的模型可作为在细胞和蛋白水平研究肌松药的方法。     

异丙酚对氯胺酮所致大脑皮质神经元损害保护作用的机制

目的: 观察异丙酚对氯胺酮诱导的 c-fos 基因在大鼠大脑后扣带回皮质区表达的影响, 并探讨异丙酚预防或减轻氯胺酮所致精神症状及神经损害的机制。方法: 雄性 Wistar 大鼠 30 只, 随机分为生理盐水 5 ml 组、氯胺酮 100 mg°kg^-1组、异丙酚 100 mg°kg^-1组、异 丙 酚 50 mg°kg^-1+氯 胺 酮 100 mg°kg^-1组、异 丙 酚 100 mg°kg^-1+氯 胺 酮 mg°kg^-1 组。异丙酚与氯胺酮用药间隔 15 min。所用药物用生理盐水配至 5 ml 经腹腔注射。各组动物于用药后 2 h, 断头处死, 分离脑组织, 用半定量RT-PCR 技术和免疫组织化学方法检测各组 c-fosmRNA与 c-fos 蛋白在大鼠后扣带回皮质区表达的变化。结果: 氯胺酮可明显诱导 c-fos mRNA 与 c-fos蛋白在大鼠后扣带回皮质区的表达;异丙酚自身不能诱导 c-fos mRNA 和 c-fos 蛋白的表达;预先给予异丙酚可显著抑制氯胺酮诱导的 c-fos mRNA 和 c-fos蛋白在这一区域的表达, 且抑制效应成剂量依赖性。结论: 异丙酚可抑制氯胺酮诱导的 c-fos mRNA 与 c-fos蛋白在大脑后扣带回皮质区的表达, 这可能是其预防或减轻氯胺酮所致精神症状和神经损害的机制之一。     

羟丁酸钠在大鼠海马脑片缺氧复氧损伤中的保护作用机制

目的 研究羟丁酸钠(SO) 在大鼠海马脑片缺氧 复氧(H R) 损伤中的保护作用, 揭示SO 在缺血性脑损伤中的保护作用机制。方法 采用大鼠海马脑片H R 损伤模型。设正常对照组, H R组, SO 1 、10 、100 μmol/L 组, NCS-382 100 μmol/L +SO 100 μmol/L (NCS-382 + SO) 组、NCS-356100 μmol/L (NCS-356) 组。测定脑片孵育液中乳酸脱氢酶(LDH) 释放率, γ-氨基丁酸(GABA) 、谷氨酸(Glu) 含量;脑片进行TTC 染色计算组织损伤百分率;HE 染色观察组织病理形态学变化, 流式细胞仪测定细胞内钙;酶组织化学法检测一氧化氮合酶(NOS) 的表达。结果 SO 明显降低H R 海马脑片LDH 释放率(P<0.01), 提高TTC 染色的A490值, 降低组织损伤百分率(P<0.01), 升高GABA Glu 比值(P<0.01), 减轻H R 所致的组织病理损伤。H R 组脑片细胞内钙荧光强度和NOS阳性神经元明显高于正常对照组(P<0.01) ;SO 100 μmol/L 组、NCS-356 组细胞内钙荧光强度较H R 组显著减弱(P<0.01),NOS 阳性神经元的数目明显减少(P<0.01)。用γ-羟基丁酸(GHB) 受体选择性阻断剂NCS-382 后再使用SO, 细胞内钙荧光强度、NOS 阳性神经元的数目均接近H R组。结论 SO 对大鼠海马脑片H R 损伤有明显的保护作用, 其机制可能与升高GABA Glu 比值, 激动GHB 受体抑制细胞内钙的增高及NOS 的表达有关。