牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机理。方法 采用在体大鼠冠脉结扎后再通的方法,观察牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注后心肌梗塞的范围,血清和心肌中SOD活性、MDA和NO含量的影响。结果 牛磺酸可明显减少大鼠心肌缺血再灌后的心肌梗塞范围(P<0.05,0.01),提高大鼠心肌缺血再灌注后血清和心肌中的SOD活性(P<0.01),降低心肌和血清中MDA和NO含量(P<0.05,0.01)。结论 牛磺酸对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,可能与其提高血清和心肌组织中SOD 活性、降低MDA和NO含量有关。     

川芎嗪对心肌细胞核钙转运功能异常的保护

目的: 观察异丙肾上腺素(ISO) 致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能的变化及川芎嗪对其影响。 方法: Wistar 大鼠皮下注射 5 mg·kg^-1 ISO 液, 造成心肌缺血损伤模型。超速离心分离纯化心肌细胞核。 酶学方法鉴定核纯度和测定核膜Ca²⁺-ATP 酶活性, 同位素法观测核钙的摄取。 结果: 与正常对照组比较, 心肌缺血组(实验组) 心肌细胞核膜 Ca²⁺ 依赖性ATP 酶活性降低 18.1%(P<0.05), ⁴⁵Ca²⁺ 摄取效率也显著降低, 其最大反应速度(V_max ) 降低 54.6%, 细胞核 Ca²⁺ 依赖性ATP 酶的最大反应速度(V_max ) 降低 33.0%(P<0.05), 平衡常数(K_m ) 降低 42.8%(P<0.01);川芎嗪保护组心肌细胞核 Ca²⁺-ATP 酶活性及核 ⁴⁵Ca²⁺ 摄取与正常对照组比较均未见显著性改变。结论: 川芎嗪对 ISO致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能降低有保护作用。     

葡萄糖酸镁对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 观察葡萄糖酸镁对心肌缺血再灌注损伤的影响, 探讨葡萄糖酸镁心肌保护作用及其机理。方法: 采用改进了的整体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型, 检测组织内 Na⁺-K⁺ -ATPase 活力及丙二醛(MDA) 和 Ca²⁺ 含量, 并测定由ADP 诱导的血小板5 min 最大聚集率 AGG(M)。结果: 与假手术组相比, 缺血再灌注组心肌组织内 Na⁺ -K⁺ -ATPase 活力显著下降(P<0.01), MDA 和Ca²⁺ 含量明显升高(P<0.01), AGG(M) 升高(P<0.05)。与缺血再灌注组比较, 葡萄糖酸镁 3 个不同剂量保护组心肌组织内Na⁺ -K⁺-ATPase 活力明显升高(P<0.01), MDA和Ca²⁺ 含量明显降低(P<0.05 或 P <0.01), AGG(M) 也明显降低(P<0.01), 且各作用均随用药剂量的增加而更加显著。结论: 葡萄糖酸镁对心肌缺血再灌注损伤有保护作用, 其保护作用机制与增加Na⁺ -K⁺-ATPase 活性 、减轻钙超载和抑制脂质过氧化反应以及血小板聚集有关。     

复方心康口服液心肌保护作用的实验研究

目的: 探讨心康口服液对急性心肌损伤的保护作用。方法: (1) 将小鼠分为对照组、运动衰竭组(运衰组)、牛磺酸+运衰组(牛磺酸组)、丹参 +运衰组(丹参组), 采用不同比例配伍的心康口服液用于小鼠, 观察其游泳至衰竭时间。(2) 用 Wistar 大鼠建立离体心脏模型及心脏损伤模型, 分为对照组、缺血损伤(A R) 组、心康组, 分别观察各组大鼠心功能指标、CPK 活性、心肌组织 MDA 及 GSH-PX, SOD 活性、心肌细胞超微结构。(3) 以 1 ~ 3 d 的 SD 大鼠的心室肌细胞为基质, 建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型, 分为对照组(复氧组)、A R(缺氧/复氧) 组、心康组, 观察 3 组的心肌细胞存活率、培养液中 LDH 活性、心肌细胞超微结构。结果: (1) 牛磺酸组、丹参组较衰竭组小鼠的游泳时间显著延长(P<0.05), 血清中 CPK 活力低于运衰组(P<0.05)。心康口服液中牛磺酸对小鼠的游泳能力影响较大, 且高浓度好;丹参的影响次之, 中浓度较好。(2) 对照组整个灌流期间 LVSP、dp/dt_max、HR均无明显变化, 心肌细胞超微结构正常。A/R 组在复灌 5、10、20、30 min 时LVSP、dp/dt max、HR 下降(P<0.01), 心肌酶活力降低,MDA 含量及 CPK 活性升高(P<0.01), 心肌细胞超微结构破坏, 成不可逆损伤, 心康组在复灌 5、10、20、30 min 时 LVSP、dp/dt_max、HR 与 A/R 组相比均升高(P<0.01);心肌酶活力均升高, MDA 含量及CPK 活性降低(P<0.01);细胞超微结构大有改善。(3)A R 组与对照组相比其细胞存活率降低(P<0.01), LDH 活力升高(P<0.01), 心康组与 A R 组相比细胞存活率升高(P<0.01);LDH 活力降低(P<0.01);对照组心肌细胞超微结构正常, A/R 组心肌细胞超微结构破坏, 成不可逆损伤, 心康组细胞超微结构大有改善。结论: 牛磺酸和丹参配物而成的心康口服液, 对心肌缺血/再灌注损伤具有显著的保护作用, 心康口服液作为心肌缺血/再灌注损伤治疗的辅助性用药将具有较好的临床应用前景。     

无创性延迟肢体缺血预适应对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注氧化损伤的影响

目的: 观察无创性延迟肢体缺血预适应(NDLIP) 对糖尿病(DM) 大鼠心肌缺血/再灌注氧化损伤的保护作用。方法: 尾静脉注射链脲佐菌素(STZ) 制备DM 大鼠模型。将DM 大鼠随机分成心肌缺血再灌注(I/R)、心肌缺血预适应(MIP)、无创性延迟肢体缺血预适应(NDLIP) 组。通过3个循环的左后肢5 min 缺血 /5 min 再灌注, 每天1次, 连续3 d, 建立NDLIP 模型。心肌冠状动脉左前降支(LAD) 实施3 次5 min 缺血 /5 min 再灌注建立MIP 模型。各组实施LAD 30 min 缺血 /120 min 再灌注复制I/R 模型。用BL-420E 生物机能实验系统连续监测心电图(ECG), 记录缺血期间室性心律失常(VA) 的发生情况。TTC 染色测定大鼠心肌I/R 后梗死面积(IS) 。检测心肌组织中总-超氧化物歧化酶(T-SOD)、锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD) 活性及丙二醛(MDA) 含量。结果: 与I/R 组相比, MIP 组和NDLIP 组室性早搏(VPC)出现时间明显推迟(P<0.01), 持续时间明显缩短(P<0.01), 室性心动过速(VT) 和心室纤颤(VF) 发生率都明显降低(P<0.05), IS 明显缩小,梗死面积/危险区(IS /AAR) 重量比值显著降低(P<0.01), 心肌组织MDA 含量均明显下降(P<0.01), 而T-SOD 及Mn-SOD 活性均明显升高(P<0.01) 。结论: 无创性延迟肢体缺血预适应可以改善DM 大鼠的心肌抗氧化能力。     

异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠海马线粒体能量代谢、ATP酶活性及自由基系统的影响

目的: 观察异丙酚对缺血再灌注损伤大鼠海马线粒体能量代谢、ATP酶活性、脂质过氧化及超微结构的影响。方法: 雄性Wistar 大鼠30 只,随机分为假手术组、缺血再灌注对照组和缺血再灌注异丙酚处理组。采用大鼠全脑缺血再灌注损伤模型。全脑缺血10 min 再灌注60 min 时,断头处死大鼠。检测海马线粒体三磷酸腺苷(ATP)、丙二醛(MDA)含量及Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性并观察线粒体超微结构的改变。结果: 缺血再灌注后海马线粒体的ATP含量及Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca2+-ATP酶、SOD、GSH 活性均有不同程度的降低,MDA 含量增高,线粒体超微结构亦发生明显损害;麻醉相关剂量的异丙酚可使ATP含量、Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶、SOD、GSH活性有不同程度的恢复,并降低MDA 的含量,减轻线粒体损伤的程度。结论: 异丙酚对脑缺血再灌注损伤的保护作用可能与其抑制线粒体脂质过氧化反应,清除自由基,保持线粒体结构的完整性,促进线粒体ATP含量和ATP酶活性的恢复有关。     

氨氯地平对高胆固醇大鼠心肌缺血再灌注时一氧化氮合酶的影响

目的: 探讨高胆固醇血症大鼠心肌缺血 再灌注损伤时氨氯地平对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在冠脉血管内皮表达的影响。方法: 雄性Wistar 大鼠分4 组:单纯高胆固醇血症组;氨氯地平组;氨氯地平+N-甲基亚硝基左旋精氨酸甲酯组;氨氯地平+假手术组。大鼠经高胆固醇喂养6 周后,开胸结扎左冠状动脉,缺血30 min 后,行再灌注20 min、2 h。分别用免疫组织化学ABC 法检测冠脉血管内皮eNOS 和iNOS 的表达水平。结果: 缺血前,氨氯地平可显著降低冠脉血管内皮iNOS 表达(P<0.01)。缺血30 min,高胆固醇血症组eNOS、iNOS 表达明显减少(P<0.01),氨氯地平组eNOS 表达上调(P<0.01),iNOS 下调;再灌注20 min 时,高胆固醇血症组冠脉血管内皮表达iNOS 增多,氨氯地平组eNOS、iNOS 表达明显下调;再灌注2 h 时,氨氯地平组NO 水平及eNOS、iNOS表达较高胆固醇血症组轻度降低。各时相点LNAME均可部分阻断氨氯地平对eNOS、iNOS 的效应。结论: 在高胆固醇血症时、缺血期及再灌注早期,氨氯地平可调节eNOS、iNOS 表达,减少心肌缺血再灌注损伤。     

川芎嗪对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的 观察川芎嗪对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机理。方法 采用大鼠冠脉结扎30 min后再通20 min 造成心肌缺血再灌模型。大鼠随机分对照组、缺血组、模型组(缺血再灌组)和川芎嗪保护组。观测心肌细胞膜和线粒体中过氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH·PX)、Ca²⁺-ATP酶和K⁺, Na⁺-ATP 酶活力, MDA及心肌钙含量。结果 川芎嗪保护组心肌细胞膜SOD、GSH·PX、Ca²⁺-ATP 酶和Na⁺, K⁺-ATP酶活性较缺血再灌组均有显著性升高(P＜0.05 或P ＜0.01), 丙二醛(MDA)和心肌钙含量却呈显著性降低。线粒体中SOD和GSH·PX 活力也呈显著性升高(P ＜0.05), MDA 却为显著性降低。结论 川芎嗪对大鼠缺血再灌注损伤心肌有确切保护作用, 其机理是通过提高对氧自由基的清除及抑制脂质过氧化。     

应用Albunex 评估无复流时肌酸磷酸激酶同工酶和肌钙蛋白I 释放动力学变化的实验研究

目的 通过检测肌酸磷酸激酶同工酶MB(CK-MB) 和肌钙蛋白I(cTnI), 了解无复流时CK-MB和cTnI 的变化与心肌微血管损害之间的关系, 分析微血管损伤对CK-MB 和cTnI 释放的影响。 方法 19只犬通过制作急性心肌缺血-再灌注动物模型, 采用弹丸式注射声学造影剂Albunex 进行心肌声学造影研究;测定外周循环中CK-MB 和cTnI 在基础状态、60 min 心肌缺血(T₀)、再灌注60 min 时的浓度(T₆₀), 计算再灌注60 min 时其上升斜率(T₆₀-T₀/60) 和相对增加值(T₆0-T₀ /T₀)。 结果 CK-MB 和cTnI在心肌缺血60 min 时外周血液浓度明显高于基础状态(P <0.01), 复流组明显高于无复流组(P <0.01);60 min 再灌注时CK-MB 和cTnI 的浓度、上升斜率和相对增加值复流组仍显著高于无复流组(P<0.01 和P <0.001)。 结论 心肌微血管床的损害影响缺血再灌注心肌酶和结构蛋白的释放。     

银杏叶提取物抗鼠肾缺血再灌注损伤及对P选择素表达的影响

目的: 探讨银杏叶提取物保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤作用与机理。方法: SD 大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、银杏叶提取物组。通过HE染色观察肾组织损伤和中性粒细胞浸润,免疫组织化学方法观察P选择素的表达情况。结果: 与假手术组相比,缺血再灌注组肾小管上皮细胞呈明显的缺血性改变,P选择素表达明显增强(P<0.01),肾小球内中性粒细胞增加明显(P<0.001);银杏叶提取物组比缺血再灌注组肾小管上皮细胞缺血性改变减轻,P选择素表达减少(P<0.01),肾小球内中性粒细胞较缺血再灌注组减少(P<0.001)。结论: 银杏叶提取物减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,减少P选择素表达及中性粒细胞浸润。     

羟丁酸钠对大鼠原代培养皮层神经元缺氧复氧损伤的保护作用与GABAA 受体的关系1

目的 探讨羟丁酸钠(SO) 对大鼠皮层神经元缺氧复氧损伤的保护作用与GABAA 受体的关系。 方法 采用原代培养大鼠皮层神经元建立缺氧复氧损伤模型, 观察细胞的形态学, 测定其LDH 漏出率、MDA 含量、SOD、GPx 活力。 结果 缺氧复氧可引起神经元损伤, LDH 漏出率增加,MDA 含量升高(P <0.01), SOD、GPx 活力降低(P <0.01)。SO 能显著减少损伤神经元的LDH 漏出率及MDA 的生成(P <0.01), 升高SOD、GPx (P <0.01) 的活力, 这种作用可被GABAA 受体阻断剂seurinine 减弱(P <0.01)。 结论 SO 对缺氧复氧神经元损伤的保护作用可能与其激动GABAA 受体有关。     

平律复方抗实验性心律失常的作用及其机理研究

目的: 研究平律复方(PL)抗实验性心律失常的作用, 并初步探讨其作用机理。方法: 采用氯仿、氯化钙以及心肌缺血再灌注三种心律失常动物模型, 监测标准Ⅱ导联心电图;测定缺血再灌注大鼠血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;放射配基受体结合法分析心肌组织血小板激活因子(plateletactivating factor, PAF)受体蛋白表达水平;RT-PCR法检测PAF 受体mRNA 表达水平;测定心肌脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果: PL(ig, 0.04 、0.20 、1.00 g·kg^-1)对氯仿引起的小鼠心室纤颤有一定的保护作用;能减少氯化钙致大鼠室颤的发生率, 降低死亡率;可显著降低心肌缺血再灌注大鼠心律失常的发生率, 缩短持续时间, 与模型对照组比较, PL 小、中、大剂量组心肌CK 和LDH 分别降低了35.4 %、51.8 %、57.5 %和22.4 %、34.4 %、38.4 %;剂量依赖性下调心肌细胞PAF 受体蛋白及mRNA 表达水平, 升高心肌SOD 活性、降低MDA 含量。结论: PL 对氯仿、氯化钙以及心肌缺血再灌注诱发的心律失常均有较好的保护作用, 其作用机制可能与下调心肌细胞PAF受体水平, 抑制脂质过氧化有关。     

珠子参总皂苷对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的: 研究珠子参总皂苷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(Myocardium ischemia/Reperfusion injury, MI/RI)的保护作用及可能的作用机制。方法: 实验大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注模型组、珠子参总皂苷100 和 200 mg/kg 组。治疗组各组大鼠分别给予相应的药物,给药 7 d 后,行冠状动脉结扎术,结扎 30 min 后,再灌注 24 h。记录再灌注后 30 min 内心律失常发生情况,24 h 后进行血流动力学测定,然后取血进行乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)含量分析;心脏经TTC染色和HE染色,计算心肌梗死面积和心肌组织形态学观察。实时定量PCR检测SOD/GPX/CAT反应系统SOD1~SOD3、GPX1和CAT基因表达,Western blot检测细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达。结果: 珠子参总皂苷(100、200 mg/kg)可显著降低心律失常发生率(P<0.01),能明显改善心功能,降低血液中CK、LDH含量和MDA水平,增加SOD、GSH-Px、CAT酶的活性;减轻ROS所致心肌氧化应激损伤,降低心肌梗死面积(P<0.05,P<0.01)和改善心脏组织形态学;上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位,增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平(P<0.01)。结论: 珠子参总皂苷对MI/RI具有较好的保护作用,激活Nrf2抗氧化途径和抗脂质过氧化可能是其作用机制之一。     

大豆异黄酮活性组分对阿尔茨海默病小鼠抗氧化作用的研究

目的: 探讨大豆异黄酮活性组分对阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)小鼠的抗氧化作用。方法: 取10月龄的小鼠,以D-半乳糖和三氯化铝复制AD模型小鼠,用本实验室制备的大豆异黄酮活性组分灌胃15d后,眼球取血,测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的含量,观察脑内海马组织切片神经元细胞的形态改变。结果: 与模型组小鼠相比,实验组小鼠血清SOD活力显著提高(P<0.01)、血清LDH含量显著升高(P<0.05)、血清MDA含量明显降低(P<0.01),海马区神经元细胞数量也显著增多,形态改善。结论: 异黄酮活性组分能有效地改善衰老AD小鼠的抗氧化系统的功能。     

人参皂苷Rb1预适应对肥厚乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的: 研究人参皂苷Rb1 对心肌细胞缺氧复氧(H/R) 损伤的保护作用。方法: 用血管紧张素II(Ang II) 刺激乳鼠心肌细胞肥厚, 以0.01 ~ 10μmol·L^-1 Rb1 对H/R 损伤心肌细胞预适应给药48h, 检测心肌细胞表面积(CSA)、细胞蛋白含量(TP)、细胞凋亡率、细胞生存率和乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA) 及一氧化氮(NO) 含量。结果: 与H/R 组相比, Rb1 组CSA 和TP 分别减少41.56%和43.37%;细胞生存率增加2.28 倍;凋亡率降低85.29%;LDH、MDA 含量分别降低59.20% 和72.03%;NO活性增加2.67 倍(P <0.01)。结论: Rb1 显著减轻肥厚心肌细胞H/R 损伤, 机制与抑制细胞凋亡、减少脂质过氧化和LDH 释放、增强NO 活性有关。     

纳洛酮对兔心肌缺血-再灌注损伤β-内啡肽的影响

目的: 探讨纳洛酮在心肌缺血-再灌损伤时对血浆及心肌匀浆β-内啡肽(β-EP) 的影响。方法: 新西兰兔45 只, 随机分成5 组:正常组5 只, 心肌缺血组、缺血再灌注组、纳洛酮保护组和纳洛酮治疗组,每组10 只。制作心肌缺血模型和缺血再灌注损伤模型, 并抽取不同时间点的静脉血, 在心肌缺血、缺血再灌注、纳洛酮保护和纳洛酮治疗后6 h 制作缺血心肌匀浆, 采用放射免疫法分别测定β-EP 的含量。结果: 心肌缺血2 h 后血浆β-EP 含量逐渐下降, 较缺血前显著降低(P<0.05) ;而心肌匀浆上清液β-EP 含量也降低。缺血再灌注后各时段β-EP 含量明显高于缺血前(P<0.05或P<0.01) ;纳洛酮保护组在4 h 后血浆β-EP 含量逐渐下降, 与缺血前比较无显著性差异(P >0.05) ;纳洛酮治疗组β-EP在缺血后各时间点与缺血前比较均无显著性差异(P >0.05) 。3 组心肌匀浆上清液β-EP 含量与缺血前的含量比较无明显变化。结论: 纳洛酮可有效降低心肌缺血及缺血再灌注损伤时血浆β-EP 水平;从而减轻β-EP 对血管和心肌组织的损伤作用。     

内啡肽-1后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的: 观察内啡肽-1(EM-1)后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法: 健康雄性SD大鼠48只,随机分为8组:假手术组(S组),缺血再灌组(IR组),缺血后处理组(IPO组),EM-1后处理10、20和 50 μg/kg(EM10、EM20、EM50)三组,EM-1 50 μg/kg+纳洛酮 3 mg/kg 后处理组(EM50+Nal组)、Nal后处理组(Nal组),均 i.v. 给药。结扎冠脉左前降支 30 min,再灌 120 min 造IR模型。全程监测心率(HR)、平均动脉压(MAP)和Ⅱ导联心电图(ECG)。动脉血浆检测丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果: 除EM各组再灌注 120 min MAP外,IPO组和EM各组HR、MAP、RPP的下降程度均显著低于IR组(P<0.05,P<0.01);与IR组比较,IPO组和EM-1三个剂量组均使血浆LDH活性降低、MDA含量降低及SOD活性增加(P<0.05,P<0.01),且EM对MDA含量及SOD活性的影响呈剂量依赖;与EM50组比较,EM50+Nal组血浆LDH活性升高、MDA含量增加及SOD活性降低(P<0.05,P<0.01)。结论: EM-1后处理可能是通过激动阿片受体,引起MDA含量降低及SOD活性增加,发挥对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。