绞股蓝总皂甙对氧化修饰低密度脂蛋白损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用

目的 探讨绞股蓝总皂甙(GYP)对氧化修饰低密度脂蛋白(oxidatively modified low density lipoprotein, oxLDL)损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用及可能机制。 方法 在体外培养的小牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cell, BAEC)中加入oxLDL(终浓度为0.1 g pr·L^-1)及GYP 低、中、高剂量组(5.0, 10.0, 20.0 mg·L^-1), 培养24 h 后, 采用细胞毒试验、丙二醛(MDA)测定及细胞计数等方法, 分别对其贴壁细胞及培养液进行检测。 结果 ①细胞毒试验发现, oxLDL 对BAEC 的生长增殖有明显的抑制作用(20.63 %), GYP 组(10.0, 20.0 mg ·L^-1)为9.14 %和6.56 %(P <0.01);②加oxLDL 组和GYP组BAEC 粘附的HL60 细胞数明显多于对照组(P <0.01);③MDA 检测发现oxLDL 促进BAEC 脂质过氧化物生成, 并高于GYP 组和对照组(P <0.01)。 结论 绞股蓝总皂甙具有对氧化修饰低密度脂蛋白损伤小牛主动脉内皮细胞的防治作用。     

灵菌红素对人胰腺癌细胞增殖抑制的实验研究

目的 观察从生物工程技术得到的灵菌红素对人胰腺癌8898 细胞增殖抑制的药效学作用, 并探讨其作用的部分机理。 方法 用MTT 法测定8898细胞的存活率和抑制率, 用流式细胞仪分析细胞的周期变化和凋亡细胞的百分比, 用HPLC 检测人胰腺癌8898 细胞内灵菌红素的浓度, 用琼脂糖凝胶电泳对DNA 段片化进行分析。 结果 灵菌红素5 mg·L^-1的培养液中8898 细胞出现凋亡早期的形态学特征, 半数抑制浓度(IC₅₀) 为30 mg·L^-1。而3T3 细胞却未显示出该作用。研究表明灵菌红素抑制细胞的增殖, 与抑制S 期细胞的DNA 复制及调控细胞的增殖周期相关。同时, 细胞凋亡的产生与实验药物呈正相关。HPLC 结果显示, 灵菌红素的药理学作用与细胞内药物浓度相关。 结论 灵菌红素能有效的进入细胞内, 抑制细胞的增殖, 其机理与诱导细胞凋亡和调控细胞的增殖周期相关。     

黄芪总提物对佐剂性关节炎的抗氧化作用

目的 研究黄芪总提物(total extract of astragalosides,TEA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用与其抗氧化作用的关系。方法 测量(AA)大鼠非致炎侧足爪容积和滑膜细胞LPO;测量兔滑膜成纤维细胞的增殖量;间接测量体外超氧阴离子自由基(O₂^-)和羟自由基(·OH)产生量。结果 TEA 对AA 大鼠的阶段性治疗(90mg·kg^-1·d^-1,d15~23,ig),不仅有抗关节炎作用,且可使AA 鼠过高的滑膜细胞MDA 水平降至正常;对低水平氧化应激诱导兔滑膜成纤维细胞的增殖反应,TEA(10~40μg·ml^-1)有明显抑制作用。TEA(5~80μg·ml^-1)对黄嘌呤(X)-黄嘌呤氧化酶(XO)体系以及非酶体系产生O₂^-有明显抑制作用,高浓度T EA(80μg·ml^-1以上)对XO的活性还有抑制作用;TEA(0.05~160μg·ml^-1)对Fenton反应(Fe²⁺-H²O²)产生-OH引起苯甲酸羟化也有明显的浓度依赖性抑制作用。结论 TEA对AA鼠的治疗作用可能与其抗氧化作用有关。     

缬沙坦与苯那普利降压和逆转左心室肥厚效应的比较

目的 比较缬沙坦和苯那普利降压和逆转左心室肥厚的效应。方法 将24只自发性高血压大鼠(SHR)随机分成4 组,每组6只。其中3 组分别灌胃缬沙坦8 mg·kg^-1、24 mg·kg^-1和苯那普利1mg·kg^-1,对照组和6 只正常大鼠给生理盐水。结果 用苯那普利和缬沙坦后血压均显著降低(均P<0.01),以缬沙坦(24mg·kg^-1)的降压幅度最大,与苯那普利组比有显著差异(P<0.01)。苯那普利组的心肌细胞横径(TDM)显著低于对照组(P<0.05),缬沙坦(24mg·kg^-1)组的TDM 和心脏湿重/体重(HW/BW)显著低于对照组(P<0.01),且与苯那普利组比有显著差异(P<0.05)。结论 苯那普利和缬沙坦均具降压和逆转左心室肥厚的作用;缬沙坦的作用呈剂量依赖性,且降压和逆转左心室肥厚的作用强度并不平行;缬沙坦(24 mg·kg^-1)逆转左心室肥厚的作用较苯那普利(1mg·kg^-1)强。     

铝镁硅油片对大鼠胃酸和胃蛋白酶活性的影响

目的 考察铝镁硅油片对大鼠胃酸和胃蛋白酶活性的影响。方法 以胃酸和胃蛋白酶活性测定作为药效学指标。结果和结论 与对照组相比,本品不影响大鼠正常胃液分泌,但能显著升高胃液pH 和降低总酸排出量,高剂量组(600 mg·kg^-1)尚能显著降低胃液总酸度;能抑制大鼠胃蛋白酶活性,180 mg·kg^-1,600 mg·kg^-1的作用更为显著(P<0.05,P<0.01),其剂量和酶活性抑制作用间呈良好的线性关系。     

氯胺酮对腹腔感染脓毒症小鼠生存率的影响

目的: 探讨早期使用氯胺酮是否延迟盲肠结扎穿孔(CLP)所致脓毒症小鼠的死亡时间。方法: 60只CLP小鼠,分别于术后1、6 h 腹腔注射氯胺酮0、3、6、12 mg·100 g^-1,观察小鼠死亡情况并比较累计生存率。结果: 氯胺酮延长CLP小鼠死亡时间(P<0.05);氯胺酮6 mg·100 g^-1组小鼠生存时间明显长于3 mg·100 g^-1组和12 mg·100 g^-1组(P<0.05)。结论: 氯胺酮延迟CLP小鼠死亡时间,并呈现剂量依赖性。     

蝎毒组分Ⅲ对人头颈部鳞状细胞癌细胞生长的影响

目的 观察蝎毒组分Ⅲ(SVC-Ⅲ)对人头颈部鳞状细胞癌细胞株(AGZY-973)生长的影响,试图找出SVC Ⅲ抑制鳞状细胞癌的最佳浓度。方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测经不同浓度SVC-Ⅲ 作用下AGZY-973 生长抑制率。结果 SVC Ⅲ能抑制该细胞的生长,SVC-Ⅲ可导致AGZY-973 细胞代谢MTT 的能力显著低于对照组,生长抑制率达68.96%(P <0.01)。当SVC Ⅲ的浓度<40 mg·L^-1时,剂量效应关系明显;而SVC-Ⅲ的浓度>40 mg·L^-1时无剂量效应关系。5-Fu 治疗组生长抑制率达55.27% P <0.01)。结论 SVC-Ⅲ是存在于东亚钳蝎蝎毒中的一种抗肿瘤成分,能够抑制AGZY-973 的生长,并在一定浓度范围内存在剂量效应关系。     

不同浓度丹参酮对大鼠脑片缺氧缺糖损伤的保护作用

目的: 探讨不同浓度丹参酮对大鼠脑片缺氧缺糖损伤的保护作用及其机制。方法: 建立大鼠脑片缺氧缺糖损伤模型, 设立对照组、缺氧缺糖损伤组、丹参酮20 mg·L^-1组和丹参酮200 mg·L^-1组。利用2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑(TTC) 染色定量比色、乳酸脱氢酶(LDH) 、免疫组化、电镜评价不同浓度丹参酮对脑损伤的保护作用。同时激光共聚焦显微镜测定脑片胞内钙变化。结果: 不同浓度丹参酮(20 、200 mg·L^-1) 抑制脑片OGD 损伤所致的TTC 染色降低, 减少LDH 释放, 减轻神经元凋亡, 改善神经元超微结构的病理损伤。OGD 损伤增加bax 和bcl-2 蛋白表达和胞内钙离子浓度。不同浓度丹参酮(20 、200 mg·L^-1) 进一步上调bcl-2 蛋白表达, 降低bax 蛋白表达, 同时抑制胞内钙离子浓度。与丹参酮20mg·L^-1相比, 丹参酮200 mg·L^-1作用较强。结论: 不同浓度丹参酮具有脑保护作用, 能够抑制缺氧缺糖损伤导致的大鼠脑片神经元损伤及其凋亡过程, 且丹参酮对于胞内钙离子的调控可能是其发挥保护作用的重要机制之一。     

克拉霉素血药浓度HPLC 测定方法和生物等效性研究

目的: 建立一种固相萃取的克拉霉素血药浓度HPLC测定方法,进行生物等效性分析。方法: 采用高效液相色谱法,色谱柱为C18 柱(4.6 mm ×150 mm),流动相为乙腈:0.02 mol·L^-1KH₂PO₄ (pH=3.07)=32∶68,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为210 nm 。结果: 本方法在0.05 ~ 3.2mg·L^-1浓度范围内线性关系良好。最低可定量浓度为0.05mg·L^-1(信噪比>3),两制剂间AUC、Cmax、T_max、t_12β药动学参数经统计学检验无显著性差异(P>0.05)。供试制剂的相对生物利用度为(101.10 ±19.40)%。结论: 本HPLC方法简单、快速、准确,很好地评价了两种制剂的生物等效。     

四氢孕酮和地西泮对暴露于架高十字迷宫小鼠的作用

目的 比较孕酮的还原性代谢产物四氢孕酮和地西泮抗焦虑作用。方法 C57小鼠腹腔注射四氢孕酮 、地西泮或赋形剂,20 min 后观察在架高十字迷宫试验中的表现,测定其自发活动 。结果 腹腔注射四氢孕酮 0.1mg·kg^-1,明显缩短小鼠进入十字迷宫开臂的潜伏期[ 从(31.30±8.39)s 减少到 (8.80±6.00)s,P<0.001],并显著增加进入十字迷宫开臂的次数 (从 1.20±0.42 增到4.80±1.75,P<0.001) 及在开臂的滞留时间占总时间的百分比 (从 7.13%增加到 32.50%,P<0.001) 。而腹腔注射地西泮 0.25 mg·kg^-1的抗焦虑作用弱于四氢孕酮 。自发活动实验显示,0.5 mg·kg^-1地西泮明显减少小鼠自发活动 (P<0.01),而 0.1mg·kg^-1地西泮和 0.25 mg·kg^-1的四氢孕酮均不影响小鼠自发活动。结论 试验结果提示神经甾体和地西泮对小鼠行为有不同的作用 。四氢孕酮具选择性抗焦虑作用而不影响自发活动,可望成为地西泮抗焦虑的代用品。     

青蒿琥酯诱导肿瘤细胞凋亡与抑制存活蛋白表达有关

目的 探讨青蒿琥酯(artesunate, Art)诱导肿瘤细胞凋亡与存活蛋白(survivin protein)表达的关系。 方法 采用细胞荧光染色、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳法和测定细胞浆Caspase-3 的活性等手段检测肿瘤细胞暴露于不同浓度的Art 时, 对肿瘤细胞凋亡的诱导作用;用RT-PCR、Western Blotting 法,检测不同浓度的Art 作用于肿瘤细胞时, 对survivinmRNA 和survivin 蛋白表达的影响。 结果 HL60 细胞暴露于Art 时, 呈现典型细胞凋亡特征, 如:胞核固缩、形成凋亡小体;凋亡细胞的比例呈浓度依赖性增高;琼脂糖电泳出现明显的“ 梯状” 条带;细胞浆Caspase-3 的活性呈浓度依赖性增高等。RT-PCR 检测表明, A549 细胞暴露于Art 10 和50 g·L^-1 72 h后, survivin mRNA 的表达呈浓度依赖性降低, 对照组、10 和50 mg·L^-1 处理组的survivin 条带和内标GAPDH 条带灰度的比值分别为1.745、0.390 和0.023;Western Blotting 法也检测到Art 抑制Survivin蛋白的表达。 结论 Art诱导肿瘤细胞发生凋亡, 激活Caspase-3 途径, 可能与抑制survivin 基因表达有关。     

新一代胸苷酸合成酶抑制剂ZD1694 的体内外抗肿瘤作用

目的: 观察ZD1694 对小鼠体内S180 肉瘤生长的抑制作用及其在体外对人胃腺癌SGC-7901 细胞增殖的影响。方法: 采用荷瘤小鼠模型, 腹腔注射不同剂量的ZD1694, 分单次给药与连续5 d 分次给药两种方案。处死动物后称取肿瘤组织重量, 计算抑瘤率。另外采用MTT 比色法及流式细胞仪观察ZD1694 对人SGC-7901 胃腺癌细胞株生长的影响。结果: ZD1694 可抑制小鼠体内S180 肉瘤的生长, 其抑瘤率无论是单次给药组(200 、100 、50 mg·kg^-1) 还是连续5 d 给药组(40 、20 、10 mg·kg^-1 ·d^-1), 均可见剂量依赖性增加。ZD1694(0.001 ~ 1 000 mmol·L^-1)对SGC-7901 人胃腺癌细胞的生长抑制率呈浓度依赖性和时间依赖性增加, 可使G₀-G₁ 期细胞增多,S 期和G₂-M 期细胞减少。结论: ZD1694 对荷瘤小鼠产生明显的抗瘤作用, 一次性给药的抑瘤率大于相同剂量分5 次给药的抑瘤率。该药在体外可抑制人胃腺癌SGC-7901 细胞生长, 使细胞发生G₁ 期阻滞。     

诺司咪唑抗过敏作用的实验研究

目的: 观察诺司咪唑(norstemizole)的抗过敏作用。方法: 采用豚鼠在体和离体实验模型, 观察诺司咪唑的抗过敏效应。结果: 诺司咪唑10^-9~10^-8 mol·L^-1, 能抑制磷酸组胺引起的豚鼠离体回肠平滑肌的收缩, IC50为4.42 ×10^-9 mol·L^-1 。豚鼠口服诺司咪唑0.1, 0.5 和1.0 mg·kg^-1 3 个剂量, 均可显著地抑制磷酸组胺所致的休克作用和皮肤血管通透性增加(P<0.01)。在大鼠同种被动皮肤过敏(PCA)模型中, 能显著地抑制其皮肤过敏, 抑制率分别为23.6 %, 67.9 %和81.7 %。结论: 诺司咪唑为第三代抗组胺药, 在药效上优于母体化合物阿司咪唑。     

盐酸奈福泮缓释片药代动力学及生物等效性

目的: 验证盐酸奈福泮缓释片的缓释特性并判定其生物等效性。方法: 18 名健康受试者随机分成两组, 采用双周期交叉试验设计, 单剂量、 多剂量连续给药, 用高效液相色谱法测定血药浓度, 以3p97 药代动力学程序求算相关参数。 结果: 单剂量给药的结果表明 :缓释片在给药后 2 ~ 12 h 内血药浓度维持在 20 ~ 40 mg·L^-1 之间, c_max 为(45.8 ±15.7) mg·L^-1, t_peak 为(3.4 ±0.8) h; 普通片在给药后 0.5 ~ 8 h 内血药浓度维持在 20 mg·L^-1 以上,c max 为(72.7 ±26.0) mg·L^-1, t_peak 为(1.6 ±0.6) h。两制剂的 AUC 分别为(363.4 ±107.7) 及(374. 8 ±125.7) mg·h·L^-1, 平均相对生物利用度为1.02 ±0.25。多剂量给药的结果表明:缓释片和普通片的c_max 分别为(31.5 ±12.7) 及(33.7 ±10.5) mg·L^-1, c_min 分别为(13.4±4.4) 及(10.9 ±5.4) mg·L^-1, t_peak分别为 (2.6 ±0.6) 及 (1.2 ±0.5) h, FI 分别为0.77±0.26 及 1.04±0.18。结论: 该缓释片具有缓释特征, 两制剂生物利用度 (AUC) 具有等效性。     

灵芝多糖肽对小鼠巨噬细胞自由基的清除作用

目的: 研究灵芝多糖肽对小鼠腹腔巨噬细胞自由基的清除作用。方法: 用四氧嘧啶、叔丁基氢过氧化物(tBOOH) 为氧化剂, 分别在小鼠体内、体外损伤小鼠腹腔巨噬细胞, 以DCHF-DA 为荧光指示剂,用共聚焦显微镜观察巨噬细胞的荧光变化, 并用共聚焦显微镜作时间系列扫描, 观察巨噬细胞荧光的动态变化。结果: 四氧嘧啶(75 mg·kg^-1, iv) 、叔丁基氢过氧化物(7.76 ×10^-5 mol·L^-1) 可造成巨噬细胞的氧化损伤, 使荧光密度增加, 灵芝多糖肽可减轻其损伤, 使荧光密度减少。时间系列扫描显示:随时间改变, 灵芝多糖肽可减少静息状态下小鼠腹腔巨噬细胞荧光密度, 也可减少由PMA(50 nmol·L^-1) 诱导的呼吸爆发状态下小鼠腹腔巨噬细胞荧光密度。结论: 灵芝多糖肽具有抗氧化作用, 对小鼠腹腔巨噬细胞自由基有清除作用。     

索他洛尔治疗心律失常的血药浓度与疗效的研究

目的: 观察索他洛尔(sotalol, S) 治疗心律失常的疗效、副作用与血药浓度的关系。方法: 选择门诊快速房性、室性心律失常患者 100例, 男 53例, 女 47例。依次服用索他洛尔 80、160、240 mg°d^-1, 各 2周, 在每个剂量递增期的最后 1 d, 分别于清晨服药前及服药后 3 h(即谷、峰浓度时) 抽外周静脉血3 ml, 反相高效液相色谱-荧光法(HPLC) 测定索他洛尔的血药浓度, 同时检查心电图测量 QT、QTc 间期、QTd 以及动态心电图。结果: 索他洛尔对室早的总有效率为 85.7%, 成对室早和短阵室速总有效率为73.3%、房性心律失常总有效率为 70%, 对预防阵发性房颤发作效果较好(P<0.05), 而对持续性房扑、房颤以控制心室率较理想。索他洛尔治疗有效者平均有效药物浓度谷值为 0.67±0.21 mg°L^-1, 峰值 1.33 ±0.51 mg°L^-1;无效者平均血药浓度谷值0.69±0.22 mg°L^-1, 峰值 1.36 ±0.53 mg°L^-1。结论: 索他洛尔最佳剂量为 160 ~ 240 mg°d^-1, 副作用小, 门诊应用较安全, 持续用药可维持疗效, 对房性及室性心律失常均有效。     

阿霉素热化疗诱导A549 细胞凋亡及线粒体跨膜电位的变化

目的 探讨阿霉素(adrimycin, ADM) 热化疗诱导人肺腺癌A549 细胞凋亡及对线粒体跨膜电位(Δψm) 的影响。 方法 不同浓度的阿霉素作用于体外培养的A549 细胞, 42.5 ℃ 作用30 min 后, 37 ℃继续培养, 在不同时间内检测。用电镜、MTT 法、流式细胞仪检测。 结果 阿霉素热化疗明显增强对A549 细胞的抑制作用, 细胞内阿霉素的浓度显著高于化疗组(P < 0.01);阿霉素浓度为1.0,2.0 mg·L^-1时, 热化组与化疗组比较, 凋亡率增高,线粒体膜电位下降(P <0.01)。 结论 线粒体跨膜电位下降可能是ADM 热化疗诱导A549 细胞凋亡的关键。