液态发酵猴头菌多糖工艺优化研究(I)——碳、氮源对得率的影响

研究了适于液态发酵猴头菌多糖的各常用碳源和氮源及C/N比。结果表明 ,葡萄糖为最适碳源 ,其次为糊精 ;复合氮源 (黄豆粉 +玉米粉 +麸皮粉 )为最适氮源 ;最适C/N比为 2 6。C/N比对液态发酵猴头菌多糖的影响符合正态分布规律 ;培养基成分和C/N比是影响猴头菌多糖产量的两个重要因素     

液态发酵猴头菌多糖工艺优化研究（Ⅰ）——碳、氮源对得率的影响

研究了适于液态发酵猴头菌多糖的各常用碳源和氮源及C／N比。结果表明,葡萄糖为最适碳源,其次为糊精;复合氮源（黄豆粉＋玉米粉＋麸皮粉）为最适氮源;最适C／N比为26。C／N比对液态发酵猴头菌多糖的影响符合正态分布规律;培养基成分和C／N比是影响猴头菌多糖产量的两个重要因素。     

白灵菇菌丝体多糖两种测定方法的比较

为选出一种比较准确、方便的测定食用菌菌丝体多糖方法,以白灵菇菌丝体提取的粗多糖为原料,对苯酚-硫酸法、蒽酮-比色法2种方法进行比较。苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法的稳定性实验RSD分别为0.71%和1.40%,精密度实验RSD分别为2.10%和9.53%,回收率平均值分别125.41%和154.88%;苯酚-硫酸法具有稳定性好、精密度高,而且回收率实验也较为理想,是测定食用菌菌丝体多糖含量较为理想的方法。     

玛咖多糖含量的测定

用水提醇沉法从玛咖块根粉末中提取了玛咖多糖,Sevage法脱蛋白。玛咖多糖含量用硫酸-苯酚法测定,测定波长为490nm,正交试验设计选择得到玛咖多糖的最佳显色条件。在10￣60μg/mL范围内吸光度与被测物含量呈良好的线性关系,r=0.9998。测得多糖含量为2.55%,精密度为0.52%。结果表明该方法准确度好、灵敏度高。     

不同干燥方法刺五加多糖含量的测定

为研究不同干燥方法对刺五加多糖含量的影响,以喷雾干燥和冷冻干燥的方法对提取的刺五加多糖进行干燥处理,用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法测定其含量,并比较两种测定法的方法学指标和数据。结果表明:冷冻干燥法优于喷雾干燥法,刺五加多糖在干燥过程中损失显著减少;二种方法的测定结果无显著性差异,且准确可靠,但刺五加多糖含量测定采用苯酚-浓硫酸法更为灵敏,简便易行,可作为刺五加多糖制剂的质控方法。     

苦丁茶不同采收期多糖含量的动态累积分析

评价广西苦丁茶不同生长期多糖含量的动态累积。在单因素考察基础上,通过响应面法优化得出最佳提取条件;采用紫外-可见分光光度法,以葡萄糖为对照品,于482 nm波长处,采用苯酚-硫酸法测定广西苦丁茶不同月份的多糖含量。多糖在5.83 mg/m L~38.54 mg/m L范围内呈良好线性关系(R2=0.997 9),平均加样回收率为98.618%,RSD为1.96%(n=5);样品的多糖含量在4月份、5月份最高,分别为96.6、82.4 mg/g,随后有所下降,12月份含量最低为47.7 mg/g。4月份苦丁茶多糖含量最高,如果以苦丁茶多糖生物活性作为标准,4月份是苦丁茶最佳采收期。     

不同品种姬松茸菌丝体蛋白质和水溶性多糖含量的研究

研究目的在于筛选出性质优良的姬松茸品种。首先对本实验室保藏的姬松茸4个品种进行了菌丝发酵,并通过二奎林甲酸（BCA）检测法和苯酚-硫酸法测定了菌丝体的蛋白质和水溶性多糖含量。结果表明:姬松茸7号的蛋白质含量占菌丝体鲜重的5·41%,其水溶性多糖含量占菌丝体干重的1·499%,是4个品种中蛋白和多糖含量相对较高的品种,值得对其进行深度开发。      

硫酸酯化猴头菌多糖的结构与构象分析

利用碱提醇沉法从猴头菌(Hericium erinaceus)子实体中获得水不溶性多糖HEPFA,氯磺酸-吡啶法对HEPFA进行硫酸化修饰,制得能溶于水的硫酸化猴头菌多糖(S-HEPFA);通过DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和Sephacryl S-500凝胶柱层析对S-HEPFA进行纯化;运用化学方法和波谱技术对S-HEPFA进行结构分析。碱提醇沉得到相对分子量为5.38×105u,硫酸基含量为19.5%的硫酸酯化的猴头菌多糖(S-HEPFA);红外光谱分析表明,在波数1236cm-1、820cm-1处有硫酸酯键的特征吸收峰;离子色谱检测,该组分只含有葡萄糖,甲基化分析得S-HEPFA糖链主要的葡萄糖残基由1-连接Glcp、1,3-连接Glcp和1,3,6-连接Glcp组成,摩尔比为2.07:1:1.83;刚果红实验分析得S-HEPFA在水溶液中或微碱溶液中为三股螺旋构象。     

猴头菌多糖的研究进展

猴头菌多糖是猴头菌中重要的活性成分,日益受到人们的重视。本文从猴头菌多糖的分子结构、提取方法、药用保健功能和研究展望几个方面进行概述。     

刺五加多糖的提取及含量测定

探讨了经80℃热水提取、Sevag法除蛋白、乙醇分级沉淀等步骤提取刺五加多糖,并应用苯酚-硫酸法测定其含量。本法选取490nm为反应产物的测定波长,所测葡萄糖标准曲线相关系数r=0.99956,线性范围为5-22.5μg/mL,测得多糖的总收率为刺五加干重的0.54%。本法反应产物在160min内吸光度值稳定,RSD为1.22%,精密度良好,回收率为97.6%-102.8%。      

超声波辅助提取猴头菇多糖的研究

对超声波技术辅助提取猴头菇多糖工艺及多糖分子量测定和红外光谱扫描进行了研究。以多糖得率为指标,通过单因素试验和响应面分析,得到了超声波提取猴头菇多糖的最佳工艺参数,即超声功率413W,超声时间11min,水料比16∶1;在此条件下多糖得率为6.22%。采用凝胶渗透色谱法测得猴头多糖的平均分子量为20074,与热水浸提所得多糖的分子量相同,且红外光谱扫描表明所得多糖具有多糖类物质的一般红外吸收特征,证明了超声波法提取猴头多糖不会破坏多糖原有的结构。     

液态发酵猴头菌多糖工艺优化研究(Ⅱ)——促生长剂、pH值、装液量、菌龄及菌种稳定性对多糖产量的影响

研究了适于液态发酵猴头菌多糖的促生长剂、pH值及装液量、菌龄和菌种稳定性对HEP的影响。结果表明 ,VB1可以大幅度提高HEP的产量 ,最适培养基初始 pH值为 5 ,装液量以 5 0mL/ 2 5 0mL为最好 ,液态种子菌龄 84h最好 ,菌种稳定性则第 1代产量最高 ,第 2、3、4代间差异不显著 ,第 5代明显衰退     

液态发酵猴头菌多糖工艺优化研究(Ⅳ)——培养基重要组分的影响

用L9(4 3)正交试验法研究了液态发酵猴头菌多糖培养基中 4种主要因素的配比方法 ,从中筛选出了培养基中 4个主要因素的适宜浓度比及它们对猴头菌多糖生物合成的大小和主次顺序 ,当葡萄糖为 3 %～ 4 5 % ,复合氮源为 1 5 %～ 1 68% ,VB1 为 0 0 0 1%～0 0 0 15 % ,pH为 5 0～ 5 2时猴头菌多糖产量最高 ;它们对猴头菌多糖生物合成的主次顺序为氮源、碳源、pH、VB     

猴头菌菌丝多糖的分离纯化及其性质研究

对液体发酵生产的猴头菌丝,利用"水提醇沉"的方法进行多糖的初步提取;粗多糖除去蛋白质杂质之后,进行DEAE-纤维素和Sephadex G-100凝胶分步柱层析纯化,获得的多糖组分经过纯度检验之后,进行多糖性质的研究。结果显示:猴头菌丝多糖主要含有D-木糖和D-果糖,并且,多糖分子容易发生酯化反应而表现出抗病毒作用。     

硒化猴头菇多糖的制备、结构表征及抗增殖活性

以猴头菇纯化多糖（Hericium erinaceus polysaccharide,HEPS）（总糖含量＞92%）为研究对象,在含有VC和亚硒酸钠的氧化还原体系中,制备得到猴头菇多糖纳米硒复合物（HEPS-Se）。通过原子吸收分光光谱仪、傅里叶变换红外光谱仪、X射线衍射仪、扫描电子显微镜、EDX元素分析仪、X射线光电子能谱、纳米粒度仪等对其结构进行表征;同时研究HEPS-Se对人肺癌细胞A549、人前列腺癌细胞DU145的抗增殖作用。结果表明：所制备的HEPS-Se为形貌规则、均一的球体,其元素组成比例为C∶O∶Se∶Pt＝32.92∶24.74∶30.46∶11.87;其中Se元素的含量高达481.79 μg/g。傅里叶变换红外光谱表明HEPS主要通过—OH、—C＝O等基团与纳米硒结合。与HEPS相比,HEPS-Se的粒径显著降低,电位绝对值提高了69.12%。同时,体外抗增殖活性结果表明,HEPS-Se能显著抑制人前列腺癌细胞DU145、人肺癌细胞A549的增值活性,并呈现明显的剂量效应。本研究为有机硒补充剂的开发提供良好的理论依据。     

猴头菌多糖对小鼠H22 肝癌移植瘤的抑制作用

目的：观察猴头菌多糖对小鼠移植性实体瘤H22的影响,并初步探讨其作用机制。方法：将H22瘤株接种于小鼠,制备移植性实体瘤模型。将70只小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、猴头菌多糖低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg,以体质量计),正常组10只,其余各组12只,连续灌胃10d。阳性对照组以20mg/kg隔日腹腔注射环磷酰胺,末次给药后次日处死,计算肿瘤抑制率、胸腺及脾脏指数,检测荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的水平;测定白细胞数和白蛋白含量。结果：不同剂量的猴头菌多糖抑瘤率均高于26%,显著提高胸腺指数,提高血中TNF-α和IL-2的水平,降低实体瘤组织VEGF的水平;不同程度的提高白蛋白水平;猴头菌多糖组白细胞数与模型组比较无明显差异,显著高于阳性对照组。结论：猴头菌多糖对H22荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,其机制可能是通过调节免疫功能和抑制肿瘤组织血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

微波酶解协同提取猴头菌丝体多糖工艺

在相同条件下利用复合酶酶解处理猴头菌丝体,即加入5mL 1%复合酶(果胶酶:纤维素酶质量比为1:1)、调pH4.2、50℃水浴酶解30min。在此基础上,采用单因素试验研究微波功率、微波时间及料液比对猴头菌丝体多糖得率的影响。再利用正交试验设计,确定微波酶解协同提取猴头菌丝体多糖的最佳工艺为微波功率500W、微波时间3min、料液比1:50(g/mL),此条件下提取率为8.01%。     

诱导物对猴头菇子实体生长发育及产量的影响

本文选用了7种诱导物（壳聚糖、茉莉酸甲酯、赤霉素、萘乙酸、三十烷醇、吲哚乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D））设定不同浓度,采用喷湿方法对猴头菇生长发育影响进行研究,结果表明0.5、1.0 mg/kg的茉莉酸甲酯和0.05、0.5 mg/kg的吲哚乙酸能显著缩短猴头菇的生长周期（p<0.05）;1.5、2.0 mg/kg的赤霉素、1.0 mg/kg的萘乙酸及0.5、1.5、2.0 mg/kg的吲哚乙酸能显著提高猴头菇的产量（p<0.05）。其中,0.5 mg/kg吲哚乙酸既能缩短猴头菇生长周期（缩短4 d）又能提高产量（比对照组提高22.18%）,有望进一步应用到生产中。