致病性金黄色葡萄球菌的快速检测法

由乳与乳制品引起的葡萄球菌食物中毒现象,国内外均曾有报道。葡萄球菌食物中毒是由于致病性金黄色葡萄球菌在食品中繁殖产生的耐热性肠毒素所致。因此,致病性金黄色葡萄球菌在食品中的存在是个潜在的危险。我国食品卫生标准规定:乳与乳制品中不得检出致病性葡萄球菌。1986年,卫生部食品卫生监督检验所又提出了用于制备还原奶的进口奶粉,0.1克中不得有致病性葡萄球菌存在。根据国家食品卫生标准检验     

鲜湿米粉中金黄色葡萄球菌污染状况研究

监测市售鲜湿米粉中的金黄色葡萄球菌的污染情况,并进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株(MRSA)鉴定和肠毒素分型,为预防湿米粉中金黄色葡萄球菌中毒及食品安全风险积累数据。监测结果为139份样品中有38个样品检出金黄色葡萄球菌。在分离出的38株分离株中,21株鉴定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株(MRSA),32株携带肠毒素基因。结果表明:湿米粉中金黄色葡萄球菌检出率高,菌株产肠毒素能力较强,存在的食品安全隐患不容忽视。     

肉鸡屠宰环节金黄色葡萄球菌污染定量评估研究

目的解析某大型肉鸡屠宰场中金黄色葡萄球菌的风险和关键防控点,为肉鸡屠宰过程金黄色葡萄球菌污染的科学防控提供指导。方法通过某大型肉鸡屠宰场金黄色葡萄球菌的监测和调研,应用@RISK 7软件建立金黄色葡萄球菌污染的定量评估模型,对肉鸡屠宰四个环节(烫洗煺毛、净膛、清洗预冷和分割传送)进行定量评估。结果初步探明了鸡肉中金黄色葡萄球菌在屠宰加工过程中的消长变化规律,清洗预冷环节和分割传送环节是金黄色葡萄球菌污染的主要风险环节,预冷池水中金黄色葡萄球菌浓度和工人手部带菌程度是肉鸡屠宰加工过程中金黄色葡萄球菌的关键风险点(相关系数分别为0.62和0.50)。结论对肉鸡屠宰环节的金黄色葡萄球菌进行关键控制点识别和精准采取控制措施,可有效保障终端鸡肉产品的卫生安全。     

乳粉中金黄色葡萄球菌与沙门氏菌定性检测能力验证结果与分析

为了提升实验室食品中金黄色葡萄球菌与沙门氏菌的检测能力,增强实验室竞争能力,本实验室参加了贵州省食品药品检验所组织的乳粉中金黄色葡萄球菌与沙门氏菌定性检测能力验证。根据能力验证作业指导书、《GB4789.10-2010食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》与《GB 4789.4-2010食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌菌检验》的要求,分别对QC-001B-4金黄色葡萄球菌待测样品和QC-001A-5沙门氏菌待测样品进行增菌、分离与鉴定。两个待测样品中,其中QC-001B-4检出金黄色葡萄球菌,QC-001A-5未检出沙门氏菌,2个样品检测结果均获得满意。     

辣椒制品金黄色葡萄球菌污染及肠毒素污染研究

了解辣椒制品金黄色葡萄球菌的污染状况,检测辣椒制品中金黄色葡萄球菌携带肠毒素的情况,为开展辣椒制品安全风险评估,企业及产品分类管理提供必要的依据.方法:参照GB 4789.10-2010对样品进行金黄色葡萄球菌分离、培养,用VITEK 2 compact全自动微生物鉴定分析系统进行生化鉴定,同时用全自动荧光酶标免疫测试系统(VIDAS 30)检测分离菌株携带肠毒素SEA-SEE情况.结果:从705份样品中共检出金黄色葡萄球菌21株,总检出率为2.98％.其中干辣椒制品未检出金黄色葡萄球菌、油辣椒检出率为3.34％,发酵辣椒制品检出率为5.63％,其他辣椒制品检出率为1.32％.21株金黄色葡萄球菌中11株葡萄球菌肠毒素阳性,总检出率为52.38％.其中油辣椒葡萄球菌肠毒素阳性率为46.67％,发酵辣椒制品葡萄球菌肠毒素阳性率为75.00％,其他辣椒制品葡萄球菌肠毒素阳性率为50.00％.辣椒制品样品产地涉及15个省(区、市),从4个省(区)产的辣椒样品中检出金黄色葡萄球菌并携带肠毒素.结论:不同类型辣椒制品污染程度存在差异,不同产地辣椒制品污染程度存在差异,辣椒制品存在金黄色葡萄球菌污染风险,并且产肠毒素的金黄色葡萄球菌占一定的比例.     

金黄色葡萄球菌分型方法的建立及应用

建立食源性金黄色葡萄球菌的分型与溯源方法。方法 以血浆凝固酶为目标基因,通过PCR方法对食源性金黄色葡萄球菌进行鉴定,同时借助全自动微生物基因指纹鉴定系统(RiboPrinter)对其进行分型和类聚状况分析。结果 PCR方法可特异性鉴定金黄色葡萄球菌,RiboPrinter方法可将金黄色葡萄球菌分为6个亚型,各亚型类聚状况平均分布。结论 上述方法的建立可准确地将金黄色葡萄球菌进行鉴定和分型,分析类聚分布与同源性关系,为食源性致病菌的快速鉴定与分型溯源提供技术手段。     

乳酸菌对金黄色葡萄球菌生物拮抗作用的初步研究

利用试管混合培养特性实验发现,保加利亚乳杆菌、嗜热 链球菌和金黄色葡萄球菌共同生长时,保加利亚乳杆菌、 嗜热链球菌二者对金黄色葡萄球菌的生长具有明显的抑 制作用,在混合培养的前12h,实验组金黄色葡萄球菌的 活菌数比对照组下降2-3个对数级,到培养后期则没有 活的金黄色葡萄球菌检出。为了进一步探讨乳酸菌对金 黄色葡萄球菌抑制作用的机理,采用牛津杯法观察了保 加利亚乳杆菌、嗜热链球菌发酵液对金黄色葡萄球菌的 抑制作用,发现其抑制作用主要是由于有机酸和抗菌类 物质共同作用的结果。     

食品中金黄色葡萄球菌检测技术

正致病菌污染是导致食品安全问题的主要原因,其中金黄色葡萄球菌是引发食物中毒常见的致病菌之一。本文对食品致病菌中金黄色葡萄球菌的限度及检测方法进行了综述,并对分子生物学技术、免疫学技术等快速检测方法进行了探讨。生物学特性及危害葡萄球菌属(Staphylococcus)属微球菌科,包括20多个种。金黄色葡萄球菌为葡萄球菌属致病菌,革兰氏阳性球菌,呈葡萄串状排列,直径为0.5~1μm,无芽孢、无鞭毛、无荚     

津沪地区原料奶中金黄色葡萄球菌的污染情况研究

金黄色葡萄球菌是影响原料奶质量的微生物之一,它能产生高温灭菌被破坏的肠毒素。近年来,由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食物中毒事件屡见不鲜,严重影响到消费者的身体健康。本研究是利用黄色葡萄球菌金标特异性单克隆检测试板和金黄色葡萄球菌快速检验测试片对天津周边地区及上海共84个原料奶样品进行检测和调查。结果表明,原料奶市场的微生物污染状况不容乐观。通过本研究确定金黄色葡萄球菌金标特异性单克隆抗体快速检测试板是一种快速、简便、准确的检测产品,值得在原料奶市场大力推广。     

云南省食源性金黄色葡萄球菌脉冲场凝胶电泳分型分析

目的采用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)方法分析云南省2013～2015年食源性金黄色葡萄球菌分子分型带型,初步建立金黄色葡萄球菌PFGE分型的数据库。方法用限制性内切酶Smal I酶切113株金黄色葡萄球菌染色体DNA以进行PFGE分析,并利用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析。结果 113株食源性金黄色葡萄球菌的PFGE图谱的相似性系数在56.67%～100%之间,经聚类分析得到89个PFGE型别。结论建立云南省食源性金黄色葡萄球菌PFGE分型数据库,PFGE带型呈现多样性,对今后云南省金黄色葡萄球菌引起食物中毒的诊断和溯源工作有重要意义。     

金黄色葡萄球菌生物被膜的控制方法研究进展

金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性病原菌.金黄色葡萄球菌能够形成生物被膜,使其更加难于根除.文中对金黄色葡萄球菌生物被膜的控制方法进行了全面综述,包括去除已形成的生物被膜、杀灭生物被膜中的金黄色葡萄球菌和抑制生物被膜的形成3个主要方面,旨在为食品工业领域生物被膜的控制提供借鉴.     

山东部分地区生牛乳中金黄色葡萄球菌的检测与分析

目的了解山东省部分地区的生鲜乳中金黄色葡萄球菌污染情况。方法收集山东省3个地区的生牛乳样品204份,其中地区A 130份,地区B 60份,地区C 14份。利用金黄色葡萄球菌测试片初筛可疑菌株,分离纯化培养后,用API法鉴定是否为金黄色葡萄球菌,以此了解山东地区生牛乳中金黄色葡萄球菌的污染状况。结果地区A检出率为44.62%,地区B检出率为50.00%,地区C检出率为64.28%。结论山东地区金黄色葡萄球菌污染情况存在一定差异,明显高于文献报道安徽、重庆地区的污染率。     

加压CO2对污染乳中金黄色葡萄球菌杀菌效果的研究

通过加压二氧化碳对人工污染金黄色葡萄球菌的乳进行处理,对时间,温度,压力三个单因素试验对金黄色葡萄球菌的杀菌情况进行研究。结果显示单因素试验中,伴随着因素水平的增加,杀菌率随之提高。然后选取三个因素中最适宜的条件进行正交试验,并通过方差分析得出压力因素对金黄色葡萄球菌杀菌效果最显著、温度次之,时间不显著。在7.5 MPa,45℃,60 min时,杀菌效果最好达到98%以上。     

金黄色葡萄球菌肠毒素与多位点序列分型分子分型研究进展

金黄色葡萄球菌是引起临床疾病、社区感染和食物中毒的常见革兰氏阳性菌;肠毒素是参与金黄色葡萄球菌引起食物中毒、猩红热、全身感染等疾病的重要毒力因子;目前已发现27种金黄色葡萄球菌肠毒素/类肠毒素,不同来源金黄色葡萄球菌携带肠毒素/类肠毒素存在差异;多位点序列分型(MLST) 是一门新兴的基于细菌多个管家基因位点差异性分析、可长期监测细菌遗传进化趋势的分子分型技术;截至2021年初MLST已建立128种细菌的分型数据库,金黄色葡萄球菌数据库中已有6583种分型,金黄色葡萄球菌ST分型存在明显的地区流行性,各地已形成独特优势克隆。目前研究表明金黄色葡萄球菌肠毒素/类肠毒素携带与MLST分型间存在一定的相关性,本文将围绕金黄色葡萄球菌肠毒素/类肠毒素、MLST分型及相关性进行综述。     

接种乳酸菌发酵剂对风干肠加工过程中理化性质及安全品质的影响

为研究乳酸菌发酵剂对风干肠在加工过程中理化性质及安全品质的影响,本试验分别将SHI-59(木糖葡萄球菌、戊糖片球菌、植物乳杆菌)、WBL-45(木糖葡萄球菌、肉葡萄球菌、清酒乳杆菌)、PRO-MIX5(木糖葡萄球菌、清酒乳杆菌、类植物乳杆菌)复合型商业发酵剂接种到肉馅中,3个接菌组分别用SHI、WBL、PRO表示,经过...     

盐干带鱼中葡萄球菌的分离鉴定及其特性研究

研究了盐干带鱼加工过程中各种微生物类群数量的变化,并对产品中葡萄球菌进行了分离鉴定和生物学特性研究。结果表明,整个加工过程中细菌总数、酵母、乳酸菌、葡萄球菌和微球菌均呈现逐步增加趋势,葡萄球菌是盐干带鱼中重要微生物类群之一。从产品中分离得到葡萄球菌疑似菌株20株,经鉴定初步确定为木糖葡萄球菌(7株)、松鼠葡萄球菌(3株)、马胃葡萄球菌(3株)、腐生葡萄球菌(3株)和耳氏葡萄球菌(2株),其余2株未能鉴定种类,其中木糖葡萄球菌为优势葡萄球菌。与耳氏葡萄球菌相比,木糖葡萄球菌和松鼠葡萄球菌具有良好的生长性能和耐盐性;酶活性实验表明,松鼠葡萄球菌具有弱蛋白酶活性,木糖葡萄球菌具有弱脂肪酶活性。     

金黄色葡萄球菌食物中毒病原检测

目的:调查本次食物中毒的原因,为临床诊断和现场处理提供可靠的依据。本实验依据国家标准GB4789-2010、GB17012-1997等方法,对食物中毒标本进行金黄色葡萄球菌分离培养,结果 6份腹痛、腹泻病人的呕吐物标本中均检出金黄色葡萄球菌,9份可疑牛奶中有7份检出金黄色葡萄球菌;对食物中毒标本及分离的阳性菌株作肠毒素定性测定,13个阳性菌株C型肠毒素检出率100%。结论:该中毒确诊为金黄色葡萄球菌C型肠毒素中毒。     

基于TaqMan探针荧光定量PCR技术快速检测乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A

目的:建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素A的Taq Man探针实时荧光定量PCR方法。方法:对金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因序列分析、对比,设计特异性引物和Taq Man探针,建立对金黄色葡萄球菌肠毒素A的快速检测方法,并验证该方法的特异性、稳定性和灵敏性。结果:Taq Man探针荧光PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A具有极强特异性,标准曲线相关系数为0.998,最低可检测出71个拷贝数的细菌DNA,检测乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A菌灵敏度为1.3×102CFU/m L,不同浓度质粒重复性扩增试验Ct值的变异系数均3%,显示了良好重复性。结论:Taq Man探针荧光定量PCR方法可以在6h内快速、准确地检出金黄色葡萄球菌肠毒素A,为金黄色葡萄球菌快速检测和食物中毒快速诊断提供技术支撑,推动了荧光PCR技术在食品安全检测方面的实践应用。     

上海市闵行区初级农产品中金黄色葡萄球菌污染状况及毒力基因分布特征研究

了解上海市闵行区初级农产品中金黄色葡萄球菌的污染状况及毒力基因的携带情况。方法 按国标方法,采用科玛嘉显色培养基,对初级农产品中的金黄色葡萄球菌进行分离、生化鉴定,收集的菌株采用实时荧光PCR方法检测血浆凝固酶基因coa,耐热核酸酶基因nuc,粘附素基因clfA和肠毒素基因sea、seb、sec、sed、see。结果 206份食品中检出金黄色葡萄球菌43株,检出率为20.87%;43株金黄色葡萄球菌均含有coa、nuc和clfA基因,而see基因全部缺失,其余4个毒力基因则表现为部分缺失。结论 本地区初级农产品中存在金黄色葡萄球菌的污染,生肉禽类食品中金黄色葡萄球菌污染比较严重,应加强监督管理;金黄色葡萄球菌菌株均包含有coa毒力基因,可以作为一项检测其致病力的指标。     

食品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌检出能力验证结果与分析

目的提升食品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检测能力,增强实验室竞争力。方法依据能力验证作业指导书、国家标准GB 4789.10-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》和GB 4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》的要求,分别对1~#~5~#金黄色葡萄球菌待检样品和6~#~10~#沙门氏菌待检样品进行增菌、分离和生化反应鉴定。结果 10个待测样品中,2~#、4~#检出金黄色葡萄球菌,6~#、7~#检出沙门氏菌,10个样品均取得满意的结果。结论通过参加能力验证工作,可以较好地提高实验室的检测能力。