柱前衍生化HPLC法测定DHA软胶囊中牛磺酸的含量

用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生高效液相色谱法,运用C18色谱柱为固定相,以0.05mol/L乙酸钠溶液+甲醇+乙腈=45+45+10为流动相,检测波长330nm,测定某DHA软胶囊的牛磺酸。结果衍生化反应迅速,分离效果好,53.6～268 ng范围内与色谱峰面积与进样量呈良好的线性关系。回归方程:C=-0.1368+4.663*10-6×A,r=0.9993,加标回收率为98.7%～107.4%,RSD为3.3%。     

柱前衍生化HPLC法分析马卡列丙多糖中单糖的组成

建立了柱前衍生化测定马卡列丙多糖中单糖组成的方法,采用柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化结合高效液相色谱法(HPLC),分析侗药马卡列丙多糖中单糖的组成及摩尔比值。马卡列丙多糖经硫酸水解,PMP衍生化后,采用Thermo Scientific BDS Hypersil C_(18)(250 mm×4. 6 mm,5μm),以0. 5%的磷酸水和乙腈为流动相,在245 nm波长下检测,测得马卡列丙多糖主要由甘露糖,葡萄糖,阿拉伯糖,木糖组成,其摩尔质量比为0. 10∶3. 87∶1. 00∶0. 07。该方法重现性良好,能够快速对多糖样品进行组成分析。     

水苏碱的柱前衍生化HPLC测定

选择含水苏碱的中药复方制剂前列泰片为对象 ,研究水苏碱的柱前衍生化HPLC测定方法。以对溴基溴化苯乙酮为衍生化试剂 ,18 冠醚 6为相转移催化剂 ,流动相为V(甲醇 )∶V(水 )=75∶2 5 ,检测波长 2 5 4nm ,用外标法定量。线性范围 0 5～ 5 μg(n =5 ) ,相关系数r =0 9992 ,平均回收率 10 0 1% (n =3) ,相对标准偏差 (RSD)为 0 6 4 %。重现性好 ,灵敏度高 ,为中成药中水苏碱的含量测定提供了参考方法。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定猴免疫缺陷病毒基因治疗产品中盐酸组氨酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)基因治疗产品中盐酸组氨酸含量的方法。方法以正亮氨酸为内标,异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)为柱前衍生化试剂,采用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以醋酸钠缓冲液(pH 6.5)和80%乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长254 nm,进样量10μl,流速1.0 ml/min。用建立的方法检测样品中盐酸组氨酸含量,绘制标准曲线,并验证该方法的精密度、稳定性、专属性和准确性。结果盐酸组氨酸在12.54~31.35μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系(r2=0.999 9);3份供试品溶液,每份连续进样5次,盐酸组氨酸峰面积平均RSD值为1.77%;同1份供试品溶液0、3、6、12 h进样,盐酸组氨酸峰面积平均RSD值为1.03%;该方法可将甘氨酸、精氨酸和丝氨酸对照品有效分离;高、中、低浓度样品的平均回收率分别为103.37%、102.28%和102.91%。SIV基因治疗产品中盐酸组氨酸3次检测的平均含量为9.66 mg/ml。结论建立了柱前衍生RP-HPLC检测SIV基因治疗产品中盐酸组氨酸含量的方法,该方法重现性好,专属性强,精密度及准确度高,可对基因治疗产品中的盐酸组氨酸进行质量控制。     

柱前衍生化RP—HPLC测定中药野马追中的氨基酸

采用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了江苏地产药材野马追茎叶及其花蕾中的总氨基酸和游离氨基酸。用邻苯二甲醛(OPA)与一氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用全自动柱前衍生化反相高效液相色谱仪，liozosphezeC18柱，pH=7．2的醋酸钠缓冲溶液和甲醇为流动相，流速为1．OmL／min，荧光检测器，波长为Ex=340nm、Em=450nm，样品中的氮基酸在30min内得到分离和检测。结果表明：野马追茎叶及其花蕾中含17种氨基酸，游离氨基酸17种，总氨基酸含量分别为2．40％和6．5l％，游离氮基酸含量分别0．185％和0．508％，半胱氨酸(cys)和谷氨酸(glu)含量较高，其中7种为人体必需氨基酸。     

PMP柱前衍生化-HPLC法分析玛咖多糖的单糖组成

应用水提醇沉法获得玛咖多糖,苯酚-硫酸法测定玛咖多糖含量,PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生法对酸水解的玛咖多糖衍生化,HPLC法分析其单糖组成。结果表明,PMP柱前衍生化-HPLC法精密度、稳定性和重现性实验的相对标准偏差均小于3%,线性实验结果显示在1.50~650.00μg/m L浓度范围内各单糖的相关系数均大于0.999 1,加样回收实验各单糖的回收率均在98.83%~102.82%之间,确定玛咖多糖的单糖组成及摩尔比为m(D-甘露糖):m(葡萄糖):m(D-半乳糖):m(阿拉伯糖)=1:196:6:6。该方法分析玛咖多糖单糖组成简单易行,结果稳定可靠。     

柱前手性衍生化-RP-HPLC法拆分D,L-草铵膦

[目的]建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分D,L-草铵膦。[方法]以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂,反应生成具有荧光吸收的一对非对映异构体衍生物,采用戴安C18色谱柱,流速1.0 mL/min,50 mmol/L醋酸铵缓冲溶液(pH值5.7)-甲醇(体积比90∶10)流动相,柱温35℃,激发波长350 nm,发射波长450 nm。[结果]L-草铵膦与其光学异构体分离度大于4,最低检测质量浓度为0.1μg/L(S/N≥3),线性范围为1~100 mg/L(r2为0.9995),方法重复性好。[结论]采用邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)经柱前手性衍生化-RP-HPLC法可用于L-草铵膦的光学纯度控制。     

柱前衍生高效液相色谱法测定一乙醇胺含量

建立柱前衍生高效液相色谱（HPLC）内标法测定一乙醇胺含量的方法。以C18（5μm,250mm×4.6mm）为色谱柱,V（甲醇）/V（磷酸氢二钾缓冲液）=40/60,为流动相,在流速为1.0mL/min,柱温30℃,紫外检测波长为310nm,进样量为20μL的情况下,选用衍生试剂2,4-二硝基氟苯（DNFB）将一乙醇胺样品在75℃水浴中衍生90min后进样分析。一乙醇胺在5～25μg/mL范围内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率102.27%,相对标准偏差为1.18%（n=5）。     

柱前衍生化RP-HPLC测定中药野马追中的氨基酸

采用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP HPLC)测定了江苏地产药材野马追茎叶及其花蕾中的总氨基酸和游离氨基酸。用邻苯二甲醛(OPA)与一氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用全自动柱前衍生化反相高效液相色谱仪,liozosphezeC18柱,pH=7.2的醋酸钠缓冲溶液和甲醇为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测器,波长为Ex=340nm、Em=450nm,样品中的氨基酸在30min内得到分离和检测。结果表明:野马追茎叶及其花蕾中含17种氨基酸,游离氨基酸17种,总氨基酸含量分别为2.40%和6.51%,游离氨基酸含量分别0.185%和0.508%,半胱氨酸(cys)和谷氨酸(glu)含量较高,其中7种为人体必需氨基酸。     

柱前衍生化-HPLC测定蓝圆鲮蛋白的氨基酸组成

采用柱前衍生化反相高效液相色谱法测定蓝圆骖蛋白的氨基酸组成,以邻苯二甲醛-9-芴甲基氯甲酸酯为衍生化试剂,醋酸钠缓冲液,甲醇及乙腈为流动相,用HypersilODSC18柱和二极管阵列检测器。结果表明,18种氨基酸在38min内分离效果良好,在一定浓度范围内,氨基酸的峰面积与浓度线性相关系数在0．9932-0．9998,相对标准偏差为1．93％。4．89％（n=5）。并测定了蓝圆够蛋白的氨基酸组成。该方法简便快速、准确可靠,蓝圆够蛋白中含有至少18种氨基酸,其中8种必须氨基酸占总含量的42．68％。     

HPLC柱前衍生法测THPA游离酸含量的研究

建立柱前衍生化高效液相色谱法测定THPA中游离酸的含量,首先将四氢苯酐(THPA)与甲醇反应,生成以四氢苯二甲酸单甲酯(Mono-ME)为主的混合物,然后以2-溴苯乙酮为衍生化试剂,三乙醇胺为催化剂,将单甲酯转换成单苯酯(Mono-BE),将少量四氢苯二甲酸(THOX)转换成四氢苯二甲酸二苄酯(Di-BE),将采用ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以(甲醇-乙腈(58∶27))-水为流动相梯度洗脱,在检测波长235 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min的色谱条件下13 min中内完成的分离检测。结果表明,在10～1 220μg/mL浓度范围内,四氢苯酐(THPA)和四氢苯二甲酸(THOX)衍生物的峰面积与浓度呈现良好的线性关系,相关系数为0.998 17,加样回收率为100.8%,RSD为0.8%。该法重现性好,精确度高,可作为四氢苯酐中游离酸的测量方法。     

柱前衍生化-高效液相色谱法测定叔丁基肼盐酸盐的含量

建立了柱前衍生化-高效液相色谱法测定叔丁基肼盐酸盐含量的方法.以苯甲醛为衍生化试剂,色谱柱为HypersilTM BDS C18,柱温为25℃,流动相为甲醇,流速为1.0 mL/min,检测波长为298 nm.叔丁基肼盐酸盐在3.0 ～7.0mg范围内与其衍生物峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=179 361X-112 865,R2=0.999,RSD=0.68％,平均回收率为100.40％.本方法简便易行、样品前处理简单,具有较高的精密度与准确度.     

柱前衍生-高效液相色谱法测定蔬菜中甲氨基阿维菌素的残留

建立了一种柱前衍生–高效液相色谱测定蔬菜中甲氨基阿维菌素残留量的方法。用乙腈提取,三氟乙酸酐和N-甲基咪唑衍生,高效液相色谱–荧光检测器检测。试验结果表明,甲氨基阿维菌素在0.001mg/kg、0.01mg/kg、0.1mg/kg添加回收率为85.57%～102.9%,变异系数为0.98%～3.14%,检出限为0.001mg/kg。     

2,4-二硝基氟苯柱前衍生化法测定普瑞巴林

利用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,建立了用高效液相色谱法测定普瑞巴林的方法。考察了光、反应温度、摩尔比和反应时间对衍生化反应的影响,确定了最佳衍生反应条件:在65℃水浴中避光反应75min。色谱柱为C18,流动相为50mmol·L-1KH2PO4(pH=3.0)/乙腈(30/70,v/v),检测波长为360nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃。实验结果:在8～48μg·mL-1范围内呈较好的线性关系(r=0.9998),回收率(100.03±1.10)%(n=9),不同浓度下日内精密度0.82%、0.77%和1.87%,8h内稳定性良好(RSD=1.92%),检测限低至0.8ng·mL-1。实验表明该方法简便、快速、准确、灵敏。通过对该方法的实际应用,三批样品测定值的RSD分别为0.59%、0.68%和1.04%,表明该方法能够用于测定普瑞巴林的含量。     

应用高效液相色谱法测定化妆品中熊果苷的含量

本文阐述了采用高效液相色谱法测定化妆品中熊果苷含量的方法。样品用水溶解经氯仿萃取 ,在ODS -C18反相柱中 ,以醋酸缓冲溶液 (pH5 0 )—甲醇 ( 95∶5 ,V/V)为流动相 ,在 2 80nm波长下测定。本方法回收率为 10 1 2 % ,变异系数为2 33% ,检出限为 0 1μg/ml。     

柱前衍生化高效液相色谱法拆分1,1′-联-2-萘酚光学异构体

以(S)-(+)-樟脑磺酰氯作柱前手性衍生化试剂,与外消旋1,1′-联-2-萘酚反应,形成非对映异构体联二萘酚樟脑磺酸酯,再用反相高效液相色谱进行分离。结果表明,采用Zorbax XDB-C8和HypersilODS(C18)柱,流动相V(甲醇)∶V(水)分别为75∶25和85∶15,流速均为1mL/min时,分离度分别为1.86和1.74,有效地分离了两个非对映异构体。进一步水解得到光学纯(R)-1,1′-联-2-萘酚和(S)-1,1′-联-2-萘酚,ee值均达99%以上。     

痕量甲苯咪唑的高效液相色谱法测定

建立了用ＨＰＬＣ测定痕量甲苯咪唑的分析方法。该方法成功地用于甲苯咪唑片生产设备清洗液中痕量甲苯咪唑的测定。方法准确度１００．４％,检出范围０．２５μｇ～２．５０μｇ,棉签回收率７３．１６％,精密度０．２１％     

高效液相色谱法测定驱蚊蚊帐中溴氰菊酯的含量

建立了驱蚊蚊帐中有效溴氰菊酯的提取和高效液相色谱分析方法。以异辛烷与1,4-二氧六环(体积比为4∶1)为溶剂提取驱蚊蚊帐中的溴氰菊酯,采用正相色谱条件,色谱柱为LiChrosorb Si60 150mm×4.6mm,流动相为正己烷-1,4-二氧六环(体积比为95∶5),波长236nm,流速1.3mL/min,紫外检测。实验证明溴氰菊酯在0.8～500mg/L的质量浓度范围内有良好的线性关系,蚊帐中溴氰菊酯加标回收率为99.66%～101.42%。