国内专利文献

从红豆杉中提取分离紫杉醇及其它紫杉烷类化合物的方法本发明将公开一种从红豆杉中提取分离紫杉醇及其它紫杉烷类化合物的方法,它包括:提取-脱脂-萃取-分别对有机相和水相进行粗分离-反相色     

产紫杉烷类化合物的红豆杉内生真菌的筛选

从红豆杉树皮中分离得到内生真菌,液体培养基培养后提取其发酵产物,然后以紫杉醇和巴卡亭Ⅲ为标准品,用薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)等技术检测,筛选产紫杉醇或产紫杉烷类化合物的内生真菌。结果筛选出一株产巴卡亭Ⅲ的内生真菌12.4.1,其发酵产物与巴卡亭Ⅲ对照品有相近的TLC迁移斑点,且HPLC中,在巴卡亭Ⅲ对照品色谱峰相近保留时间处有吸收峰;显微鉴别表明菌株12.4.1属于曲霉菌。     

从红豆杉中提取紫杉醇的工艺研究

紫杉醇(Taxol)是从红豆杉树皮中分离得到的一种二萜化合物,具有独特疗效的抗癌物,现已被多个国家批准应用于临床治疗卵巢癌和乳腺癌等疾病。由于红豆杉中的紫杉醇含量非常低(仅为0.010%~0.013%),而且大量结构类似的紫杉烷类物质存在,使得紫杉醇的分离纯化非常困难。本文通过对比5种不同提取方法 (液液萃取、固相萃取、硅胶层析、氧化铝层析、薄层层析),提出一种新的以氧化铝层析结合固相萃取工艺,具有紫杉醇高回收率的特点。     

云南红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化

以云南红豆杉树皮为原料,采用纤维素酶法提取其中的紫杉烷类化合物。以酶处理时间、酶用量、酶处理温度、料液比为考察因素,以紫杉烷类化合物得率为考核指标,通过单因素实验和正交实验对提取工艺进行了优化。结果表明,最佳工艺条件为:酶处理时间1.0h、酶用量0.6%、酶处理温度45℃、料液比1∶16(g∶mL),在此条件下,紫杉烷类化合物的得率为0.898%。该提取工艺操作简单,提取条件温和、稳定。     

云南红豆杉内生真菌次生代谢产物抗菌活性的研究

从红豆杉树皮中分离得到一株产紫杉醇或紫杉烷类化合物的内生真菌,分别用三氯甲烷、乙酸乙酯对其次生代谢产物进行提取,以白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌作为指示菌株,对提取液的抑菌活性进行了检测。结果显示:目标菌株次生代谢产物的两种提取物对五种致病菌都有一定的抑制效果,且胞外提取物的抑菌活力均比胞内提取物的抑菌活力大;三氯甲烷提取物的抑菌活性强于乙酸乙酯提取物的抑菌活性;其中三氯甲烷胞外提取物对金黄色葡萄球和白色念珠菌菌表现出非常强烈的抑菌效果。     

紫杉醇的合成研究进展

紫杉醇是一种从天然红豆杉类植物中提取分离得到的二萜类有机化合物,为世界上使用最广泛的抗癌药物之一.但由于红豆杉类植物的紧缺且紫杉醇含量的微小,其从天然植物中提取的路径用于大生产不可取,因此从其他途径合成紫杉醇成为研究热点.就紫杉醇的全合成、半合成、生物合成进行综述,为追求更优的合成方式提供参考和思路.     

专利快递

Z0 4 0 0 1　利用基因工程技术提高紫杉醇含量的方法　 公开号 :CN 1 385530A ,公开日 :2 0 0 2 .1 2 .1 8　本发明提供了紫杉醇生物合成中限速步骤的关键酶之一的紫杉二烯合成酶基因的cDNA及其在利用基因工程技术提高紫杉醇含量方面的应用。涉及基因的cDNA的获得及利用基因工程技术提高紫杉烷类化合物如紫杉醇含量的方法。Z0 4 0 0 2　提取茶多酚的工艺方法　 公开号 :CN 1 386 731A ,公开日 :2 0 0 2 .1 2 .2 5　一种从干绿茶中分离提取茶多酚的工艺方法 ,主要包括蒸煮、丙酮吸附、回收丙酮、有机溶剂萃取、回收有机溶剂和浓缩干燥 …     

抗癌巨星—紫杉醇

紫杉醇最初是从红豆杉属植物紫杉的树干、树皮中提取的一种天然抗肿瘤药物。自1967年被发现以来,随着研究的不断深入,人们对紫杉醇的理化性质认识越来越深刻,并进行了化学合成。目前它已被广泛应用于各种癌症的临床治疗。     

一种卡巴他赛的合成新方法

提出了一种全新的卡巴他赛合成路线.以7-木糖基紫杉烷类化合物为起始原料,经氧化脱木糖基、甲基化、肼解脱侧链得到7,10-二甲基巴卡亭Ⅲ;再与1-叔丁氧羰基-（3R,4S）-4-苯基氮杂环丁烷-2-酮缩合,最后在冰醋酸甲醇溶液中脱除乙氧基乙基（EE）得到卡巴他赛.该合成方法所用起始原料均为紫杉醇提取过程中的废料,成功解决了紫杉醇提取中的废料回收利用问题;并且所用原料价格低廉,反应条件温和,有利于工业化生产.     

紫杉醇市场供不应求

迄今为止,国际市场上只有2种紫杉醇原料药：一种来自各种红豆杉树皮;另一种是从欧洲观赏紫杉枝条里提取出“10-浆果赤霉碱”,然后再经半合成而成,即多西他赛（多烯紫杉醇）,其结构与天然提取紫杉醇十分相似。这两种原料药均为国际医药市场上的畅销原料药产品,并长期处于供不应求状态,据有关部门估计,紫杉醇原料药与多烯紫杉醇原料药的销量之比大约为10：1。     

科技动态

紫杉醇的细胞培养 紫杉醇是美国、台湾近年研制成功的抗癌新药,都从植物中提取。中国科学院昆明植物研究所1993年中以云南红豆杉枝叶为原料,分离提取得到紫杉醇。利用大规模细胞培养技术生产紫杉醇尚属国内外首创。 此外华中理工大学生物系采用大规模细胞培养技术生产紫杉醇获得成功,产品     

外加紫杉醇后南方红豆杉细胞的耐受性及其凋亡的研究

利用显微照相和DNA提取等技术，研究了外源紫杉醇作用于服浮培养南方红豆杉细胞（Taxus chinensis var.Mairei)的凋亡和对紫杉醇（taxol）的耐受性。利用荧光显微照相技术观察到，外源紫杉醇作用下，随培养时间延长，南方红豆杉细胞发生明显核分化，应用DNA电泳观察到细胞DNA断裂形成典型的180bp及其整数倍梯形条带（DNA.ladders) ,应用TUNEL检测发现DNA的3'-OH断端可被特异性标记，证实了加入紫杉醇后南方红豆杉细胞发生了凋亡。研究结果说明南方红豆杉细胞对紫杉醇的耐受性是有限度。并证明了植物细胞有类似于动物细胞的凋亡特征，也表明该体系可以作为研究植物细胞凋亡的实验模型。     

最新专利

最新专利·从紫杉属植物大量生产紫杉醇的方法中国专利ＣＮ１１５２３３９Ａ〔汉〕／三养吉尼克斯;１９９７．６．１８;Ｃ１２Ｐ１７／０２涉及一种从紫杉属植物的细胞培养物高纯度、高收率地大量生产紫杉醇的方法。步骤：（１）对紫杉属植物的生物体进行有机溶剂萃取得...     

超临界CO_2流体萃取东北红豆杉中紫杉醇的研究

采用超临界CO_2萃取法从东北红豆杉中提取紫杉醇,分别考察红豆杉的不同部位、红豆杉的颗粒粒径、萃取压力、萃取时间和萃取温度对紫杉醇萃取率的影响。结果表明:当红豆杉树叶的颗粒粒径为100目,萃取压力为35MPa,萃取时间为120 min,萃取温度为35℃时,紫杉醇的提取率最高。在最佳提取条件下,10 g东北红豆杉中紫杉醇的平均提取量为3.28 mg,平均提取率为96.2%。超临界CO_2萃取法拥有无刺激性气味,操作简单安全,提取率高,保护环境的特点,工业应用前景广泛。     

从植物中寻找农药活性物质──川楝子化学成分的研究（Ⅰ）

从川楝（ＭｅｌｉａｔｏｓｅｎｄａｎＳｉｅｂ．ｅｔＺｕｃｃ．）果实中分得５个化合物，经各项波谱鉴定确定了其中４个化合物的结构，它们分别为川楝素（１）、正三十烷酸（２）、正三十二烷醇（３）、正十六烷酸（４），其中化合物（２）～（４）为首次从该植物中分离得到。室内生测表明：正三十二烷醇具有调节植物生长的作用。     

从植物中寻找农药活性物质：川楝子化学成分的研究（Ⅰ）

从川楝中果实中分得５个化合物，经各项波谱鉴定确定了其中４个化合物的结构它们分别为川楝素，正三十烷酸，正三十二烷醇、正十六烷酸，其中化合物（２）－（４）首次从该植物中分离得到。室内生测表明，正三十二烷醇具有调节植物生长的作用。     

红豆杉植物和愈伤组织培养物中紫杉醇含量的检测

采用UV和HPLC两种方法,对南方红豆杉(Taxuschinensisvar.mairei)、曼地亚红豆杉(Taxusmediacv.Hicksii)天然植物和组织培养物中紫杉醇含量进行了检测。检测结果:南方红豆杉天然植物中未能检测出紫杉醇,南方红豆杉愈伤组织培养物中紫杉醇含量最高,为万分之4.09,是曼地亚红豆杉愈伤组织培养物中的2～27倍,是曼地亚红豆杉天然植物中的6～8倍。     

真菌诱导子对悬浮培养南方红豆杉细胞次生代谢的影响

在悬浮培养的南方红豆杉细胞体系中 ,细胞进入指数生长期末期时 ,加入真菌诱导子 (即尖孢镰刀菌胞壁成分的粗提出物 ,其主要成分为糖类和多肽 ) ,对几个主要的细胞次生代谢指标进行了监测 .实验结果表明 ,诱导子引起了南方红豆杉细胞次生代谢结构的变化 ,胞内酶蛋白的含量呈先上升后下降的趋势 ,而胞外酶蛋白的含量显著上升 ;苯丙烷类代谢途径中重要的酶PAL的活性显著升高 ;次生代谢产物中 ,酚类物质的含量增加 ,且于 4天后急速上升 ,同时多酚氧化酶的活力也加强 ,萜类产物中紫杉烷类的生物合成均得到了加强 ,其中紫杉醇的含量得到了大幅度的提高 ,达到对照组的 5倍左右 .     

紫杉醇及其衍生物的半合成概述

紫杉醇是第一个被发现能促进微管蛋白聚合的天然产物,是近20年来最成功的抗癌药物之一。简单叙述了紫杉醇的发现和历史、来源和作用机理。目前紫杉醇的合成方法有紫杉醇的其他植物资源、紫杉烷植物细胞悬浮培养、生物合成、真菌培养、全合成与半合成等方法,目前真正用于实际工业化生产紫杉醇的方法是半合成方法,着重总结了半合成的研究进展。     

产5α羟化紫杉二烯醇人工酵母的组合设计构建

利用工程化微生物生产天然药物如紫杉醇在近年来受到研究者广泛关注。本工作研究如何设计和构建人工酵母以生产紫杉醇生物合成途径中第一个由细胞色素P450酶催化的羟化产物--5α羟化紫杉二烯醇(taxadien-5α-ol)。利用组合设计原理,选用3种不同红豆杉来源的紫杉二烯5α羟化酶和2种不同植物源的细胞色素P450还原酶,分别对其进行N端穿膜区域的预测和截短,并对还原酶使用2种不同强度启动子进行调控,所得羟化酶模块和还原酶模块之间分别表达共产生72种组合方式。然后将其分别整合入紫杉二烯生产菌株基因组中,最终在72个组合中筛选到48个可以生产5α羟化紫杉二烯醇的菌株,最高产量67.3 μg·L^-1,在酿酒酵母中实现紫杉二烯C₅位羟化产物的从头合成。研究结果表明,利用组合设计策略研究模块间相互作用及其与底盘间适配性将为在微生物细胞中实现细胞色素P450酶系介导的催化反应过程提供重要参考。