壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

体外抑菌法研究了壳聚糖分子量、脱乙酰度以及pH值对金黄色葡萄球菌(St.aureus)抑制作用的影响。通过测定壳聚糖作用前后菌液中碱性磷酸酶、β-糖苷酶活性和核酸、蛋白质含量,研究了细胞内容物的泄露以及细胞膜完整性;运用透射电子显微镜和激光共聚焦荧光显微镜从超微结构探讨了壳聚糖对St.aureus的作用位点。结果发现细胞膜是壳聚糖对St.aureus作用的位点,壳聚糖改变了细胞膜的渗透性而使细胞膜破坏,伴随大量细胞内容物泄露。     

10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究

利用倍半稀释法确定10-HDA对金黄色葡萄球菌的最小抑菌质量浓度为0.062 mg/m L。通过对金黄色葡萄球菌生长曲线、细胞膜通透性、细胞超微结构、细胞代谢、菌体蛋白表达的影响研究,探讨10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。结果表明10-HDA可破坏金黄色葡萄球菌细胞的完整性,使细胞膜通透性增加,胞内大量离子以及具有紫外吸收的大分子物质泄漏,细胞代谢发生紊乱。原子力显微镜结果表明,10-HDA可破坏菌体细胞结构,导致细胞表面凹陷,形成褶皱。SDS-PAGE电泳结果显示,10-HDA对金黄色葡萄球菌蛋白表达有明显影响,可抑制部分蛋白的正常表达。结论:10-HDA通过使金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,破坏菌体正常形态及代谢活力,进而使细胞生长受到抑制,最终导致死亡。     

槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑菌机理

通过测定槐糖脂抑制金黄色葡萄球菌最低抑菌质量浓度和生长曲线,探讨槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑菌机理,同时利用扫描电镜和透射电镜观察金黄色葡萄球菌显微形态。结果表明:槐糖脂能有效抑制金黄色葡萄球菌生长,且抑制作用体现质量浓度依赖特性,最小抑菌质量浓度(MIC)为1.5625mg/mL。酸性和高温条件不影响槐糖脂抑菌性,表明其具有很好的稳定性。电镜结果表明,槐糖脂对金黄色葡萄球菌的抑制可能源于其对菌体细胞壁和细胞膜的破坏作用。     

纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

【目的】研究纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。【方法】通过对金黄色葡萄球菌生长曲线、细胞膜通透性、细胞蛋白的合成、细胞超微结构、细胞代谢的影响等方面的研究,探讨纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。【结果】脂肽可以使金黄色葡萄球菌的细胞膜通透性增加,使得具有紫外吸收的大分子物质发生泄漏;可以导致金黄色葡萄球菌细胞壁形成孔洞甚至使细胞断裂;脂肽对金黄色葡萄球菌蛋白表达未见有明显影响,但可抑制部分蛋白质的合成;对金黄色葡萄球菌代谢活力有较强的抑制作用。【结论】纳豆菌脂肽可使金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,或细胞膜形成孔洞导致细胞内物质泄漏,使细胞生长受到抑制,进而导致死亡。      

扁枝槲寄生提取物对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

本论文主要研究了95%乙醇扁枝槲寄生提取物的抑菌效应,并研究了抑菌机理。研究发现,95%乙醇扁枝槲寄生提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、李斯特杆菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌及变异微球菌均有明显抑菌效果,对枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌无明显作用,对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好(最低抑菌量为0.1 mg/m L)。进一步研究发现,提取物可增加金黄色葡萄球菌的细胞壁及细胞膜的通透性,引起细胞内含物如可溶性糖类、蛋白质等外泄,导致电导率上升。光学显微镜、扫描电镜以及透射电镜观察证实了提取物不仅能作用于菌体的壁膜系统,破坏菌体细胞的正常结构,还能通过抑制细胞分裂等方式来杀灭菌体。本文研究结果表明扁枝槲寄生具有开发成天然食品添加剂的良好前景。     

肉桂精油气相熏蒸金黄色葡萄球菌的抗菌机理

该研究主要探讨了肉桂精油的抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抗菌机制,实验采用气相熏蒸法研究精油的气相抗菌活性,通过TEM、电导率实验、FT-IR、荧光光谱等方法探讨肉桂精油的气相抗菌机制。结果表明肉桂精油具有显著的气相抗菌活性,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为0.25μL/m L,最低杀菌浓度(MBC)为0.5μL/m L。TEM观察显示,经肉桂精油气熏后的金黄色葡萄球菌菌体细胞膜破损溶解,细胞皱缩,从而引起内容物外泄。电导率实验进一步表明气熏后的菌体细胞膜通透性提高,并通过测试OD260发现核酸外泄与精油浓度变化的正相关关系。通过FT-IR图与荧光光谱图,发现肉桂精油引起金黄色葡萄球菌菌体蛋白构象的变化,并通过分析酰胺Ⅰ带推测在气熏过程中菌体蛋白二级结构发生无序变化,以及通过荧光强度和波长峰位的变化判断肉桂精油气熏后菌体蛋白发生了改变,暴露出更多的发色基团。由此可见,肉桂精油气相熏蒸金黄色葡萄球菌可能的抑菌机理是改变菌体细胞膜通透性和形态,并改变了菌体蛋白的二级结构和三级结构。     

肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌机理研究

研究了肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其抑菌机理。本文采用滤纸片扩散法测定抑菌圈大小,双倍稀释法测定最低抑菌浓度、最低杀菌浓度,以此评价肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌性,通过扫描电镜观察、胞膜通透性、胞膜完整性、膜电位实验,阐述肉桂醛抑菌的机理。结果表明:肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为21.75 mm、29.37mm,最低抑菌浓度均为0.25μL/m L,最低杀菌浓度均为0.5μL/m L;肉桂醛破坏了菌体细胞的形态,出现形变;随着肉桂醛浓度的增大,悬液中相对电导率迅速升高,表明肉桂醛影响细菌的膜通透性,而成倍数增长的核酸、蛋白质含量表示胞膜的完整性遭到破坏,肉桂醛降低菌体膜电位,影响其代谢活性,从而抑制细菌生长。肉桂醛主要作用于细胞膜,适宜作为天然防腐剂,抑制食品中腐败菌和致病菌的生长,延长食品货架期。     

壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌活性的研究

研究了壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌活性,考察了不同壳聚糖浓度、pH值、金属离子、醋酸浓度对壳聚糖抑制金黄色葡萄球菌活性的影响,并以壳聚糖浓度、pH值、醋酸浓度为因素进行正交试验,确定了壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌活性的最优条件。实验结果表明,壳聚糖对金黄色葡萄球菌的抑制能力随其浓度的升高而增强;壳聚糖溶于浓度为2%的醋酸溶液时,培养基pH控制在6.0时壳聚糖的抑菌活性最强;金属离子在一定程度上降低了壳聚糖的抑菌活性;这3个因素对壳聚糖的抑菌活性的影响程度为壳聚糖浓度pH值醋酸浓度。     

葡萄籽原花青素对金黄色葡萄球菌的抑菌研究

从宁夏赤霞珠葡萄酿酒皮渣中分离出葡萄籽,经60%乙醇热萃取和柱纯化获得纯度98.5%的原花青素。以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)为指示菌,研究原花青素的抑菌机制。结果表明:原花青素能够有效抑制菌体生长,其最低抑菌质量浓度(MIC)为4.0 mg/m L。经原花青素溶液作用后,菌体可溶性总蛋白含量与对照组相比明显减少,菌体细胞外渗液的电导率上升和核酸类物质的泄漏量增大,且原花青素浓度越大,抑制效果越明显。扫描电镜照片显示出经原花青素处理过的菌体细胞表面褶皱,细胞壁遭到破坏。由此推断,葡萄籽原花青素通过破坏细胞通透性及减少胞内蛋白(酶)量而使菌体丧失了增殖能力或者死亡。     

迷迭香酸协同ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌的抑菌机理初探

本文研究了迷迭香酸协同ε-聚赖氨酸对食品常见污染菌——金黄色葡萄球菌的抑菌作用,检测了两种抑菌成分对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)、抑菌圈、联合作用效果、抑菌动力学曲线、可溶性蛋白、还原糖外泄和菌表面蛋白SDS-PAGE(十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)图谱的效果。结果表明:迷迭香酸和ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为4和0.1875 mg/mL,且抑菌浓度指数(FICI)为0.5,有较好的协同增效作用。1/4 MIC迷迭香酸和1/4 MIC ε-聚赖氨酸的复合有较强的抑菌活力,能损伤菌细胞膜,导致蛋白质和还原糖外泄,其蛋白图谱分析的菌体表面蛋白分子量变化,说明这两种抑菌成分促使金黄色葡萄球菌表面蛋白降解,抑制了金黄色葡萄球菌表面毒力因子的毒性。     

浅析肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌机理

本文浅析讲述了肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其抑菌机理。用滤纸片扩散法测定抑菌圈大小,用双倍稀释法测定最低抑菌浓度和杀菌浓度,用以反应肉桂醛对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌性。本文通过扫描电镜、胞膜通透性分析、胞膜完整性实验以及膜电位实验,希望能够更加深入地研究肉桂醛的抑菌作用及其抑菌机理。     

姜厚朴水提物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究

为了探讨姜厚朴水提物(GMB)对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理,试验对GMB作用下菌体形态结构、膜系统上离子通道的酶活力和能量代谢等方面进行了研究。结果表明,GMB对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为6.25、12.5 mg/m L。大肠杆菌胞外AKP酶和β-半乳糖苷酶吸光度值分别增加1.78和4.24倍,GMB作用4 h后电导率显著上升,膜上Na+K+-ATP酶活性从0.42增加到1.74 mg prot/m L,且为阴性对照的1.7倍;金黄色葡萄球菌体表出现囊泡状、不规则的突起结构,SDH酶活性、总ATP酶活性和胞内蛋白质含量分别降低40%、23.4%和17.9%,且AKP酶活和电导率均有所增加。由此推测出GMB主要是通过破坏大肠杆菌细胞壁、膜结构,增加其渗透性和通透性,造成胞内物质外流和蛋白质合成量下降等现象,进而抑制菌体生长。而GMB抑制金黄色葡萄球菌的作用机制是增加细胞壁的通透性、降低能量代谢相关酶的活性,干扰其正常的代谢活动。     

野艾蒿提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌机制研究

文章研究野艾蒿提取物对金黄色葡萄球菌(SA)的作用机制。通过野艾蒿提取物作用后SA细胞外碱性磷酸酶(AKP)含量、电导率大小以及DNA和RNA大分子物质含量的变化研究其对SA细胞壁及细胞膜通透性的影响;通过测定SA胞内蛋白含量的变化研究野艾蒿提取物对SA蛋白合成的影响;通过测定苹果酸脱氢酶(MDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性研究野艾蒿提取物对SA呼吸代谢的影响;通过扫描电镜观察野艾蒿提取物对SA细胞形态的影响。通过1%的葡聚糖凝胶电泳测定野艾蒿提取物与DNA的相互作用。结果表明,野艾蒿提取物作用后SA胞外AKP含量升高,电导率增加,核酸含量无明显变化,SA胞内蛋白含量降低,MDH和SDH活性降低,细胞形态无明显变化,野艾蒿提取物与SA的DNA发生紧密的结合。由此可知,野艾蒿提取物是通过影响SA细胞壁及细胞膜通透性、胞内蛋白含量、MDH和SDH活性并且与SA的DNA发生结合发挥抑菌作用。     

抗菌肽brevilaterin与ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌的协同抑菌机理

金黄色葡萄球菌是食品中常见的致病菌,控制食品中金黄色葡萄球菌的生长繁殖对提高食品安全性至关重要。本研究以金黄色葡萄球菌作为指示菌,考察了抗菌肽brevilaterin与ε-聚赖氨酸的协同抑菌机理。抑菌动力学结果表明抗菌肽与ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌具有协同抑菌效果;细胞膜质子动力势研究结果显示,抗菌肽对跨膜pH值梯度无明显影响,ε-聚赖氨酸会破坏跨膜pH值梯度,1/4最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)抗菌肽+1/4 MICε-聚赖氨酸(联用组)对跨膜pH值梯度产生了协同破坏作用;采用流式细胞术结合荧光显微镜考察细胞膜的完整性,发现抗菌肽对细胞膜完整性具有较强的破坏作用,1/4 MIC抗菌肽即可导致36.3%的膜破损,而ε-聚赖氨酸对膜完整性损伤较小,1/4 MICε-聚赖氨酸仅破坏10.4%的细胞膜完整性,两者联用可对细胞膜完整性产生协同破坏作用,导致51.3%细胞膜完整性发生损伤;采用透射电子显微镜观察了细胞超微结构,发现抗菌肽和ε-聚赖氨酸联用较单独使用对细胞形态和细胞内容物的泄漏产生了协同破坏作用;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺...     

花生肽亚铁胃肠仿生消化产物对金黄色葡萄球菌的抑菌机理

为探讨花生肽亚铁胃肠仿生消化产物作为抑菌剂的潜在可能性,从抑菌活性、表面疏水性、最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、细胞膜渗透性、紫外吸收大分子物质和K⁺泄漏等方面进行了研究。结果表明,胃肠仿生消化能增强花生肽亚铁抑菌活性;仿生消化270 min时表面疏水值最大;小肠仿生消化产物(simulated intestinal fragment,SIF₄)为0.2×10^-3g/L时(MIC)对金黄色葡萄球菌有明显抑菌作用;试验组细胞膜渗透性、蛋白质和核酸等紫外吸收物质泄露与对照组均有显著差异(P <0.05)。经1/2 MIC、1/4 MIC和MIC处理后,金黄色葡萄球菌胞内K⁺的泄露随温育时间延长呈递增趋势,特别是MIC组。研究认为,金黄色葡萄球菌经SIF₄处理后,细胞膜完整性遭到破坏而造成膜穿孔,使胞内蛋白质与核酸等生物活性物质外泄并造成菌体坏死,起到良好抑菌效果。因此,花生肽亚铁经胃肠仿生消化后可作为一种潜在的新型多肽...     

啤酒糟蛋白水解物对金黄色葡萄球菌抑菌能力研究

选择4种蛋白酶制备出不同时间水解的啤酒糟蛋白水解物,分别检测其对金黄色葡萄球菌的抑菌能力。结果表明:采用Flavourzyme水解180min的水解物具有较好的抑制金黄色葡萄球菌的能力;采用聚酰胺柱层析、离子交换柱层析方法及凝胶柱层析方法对水解物进行分离测定,得到分子量约为1 877.67的啤酒糟多肽样品,其对于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2%。     

工业大麻叶对金黄色葡萄球菌的抑菌机制

探索工业大麻叶的抑菌组成及对金黄色葡萄球菌的抑菌机制,为以工业大麻叶成分为先导化合物开发新型天然防腐剂提供理论依据。工业大麻叶乙醇提取物经乙酸乙酯萃取、硅胶柱分离,采用微量二倍稀释法确定最低抑菌浓度(MIC),获得高活性组分,GC-MS分析抑菌组成;研究作用前后菌体细胞壁完整性、细胞膜通透性、能量代谢和氧化损伤变化,探讨抑菌机制。结果表明,工业大麻叶Fr5(石油醚和乙酸乙酯的体积比为1∶1)组分抑菌效果最佳,对金黄色葡萄球菌的MIC为31.25μg/mL,GC-MS共鉴定出24种化合物;经Fr5处理后,细菌表面明显凹陷,胞外碱性磷酸酶(AKP)活力升高,培养液电导率升高,核酸相对浓度增加,可溶性蛋白质质量浓度增大,菌体三磷酸腺苷(ATP)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性均先升后降。工业大麻叶Fr5可破坏金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜结构,导致细胞膜通透性增加,内容物外泄,进而影响菌体能量代谢并造成质膜氧化损伤,最终抑制细胞生长。     

草果提取物对金黄色葡萄球菌抑菌机制的初探

对草果抑菌物质进行初步提取和分离,研究石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌生长曲线及膜通透性的影响,探讨草果提取物的抑菌机理。结果表明,乙酸乙酯萃取物和氯仿萃取物最小抑菌浓度最小均为1.25mg/mL,石油醚萃取物为2.5mg/mL,正丁醇萃取物为5mg/mL。在草果提取物最小抑菌浓度作用下,金黄色葡萄球菌生长曲线各时间点的OD值增长不明显,细胞膜通透性有所提高,其中蛋白质含量呈小幅度降低,菌液电导率呈上升趋势。草果提取物能有效地抑制金黄色葡萄球菌的生长,可能与其对金黄色葡萄球菌细胞膜和细胞壁的破坏直接相关。      

肉桂精油对成团泛菌和腐生葡萄球菌的抑菌活性及其机理

本文利用滤纸片法和二倍稀释法分别测定了肉桂精油对成团泛菌及腐生葡萄球菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC)来评估肉桂精油对其的抑菌活性,通过扫描电镜、透射电镜探究肉桂精油对成团泛菌和腐生葡萄球菌的形态影响,以及通过测定细胞膜的通透性、细胞膜的完整性和膜电位来共同阐释肉桂精油对两种菌活性抑制的机理。结果表明肉桂精油对成团泛菌和腐生葡萄球菌的生长均有较强的抑制作用,且对腐生葡萄球菌的抑菌作用明显强于成团泛菌的抑制作用;肉桂精油改变细胞的形态、增加膜的通透性、破坏了膜的完整性、并造成了细胞内容物的泄露、膜电位的降低,从而导致细菌的死亡。      

三硫烷二丁烯酸对金黄色葡萄球菌抑菌的研究

本文研究一种新型化合物三硫烷二丁烯酸(2E,2E)-4,4-trisulfanediylbis(but-2-enoic acid)(TSDB)对食品中常见金黄色葡萄球菌的抑菌机理。通过蛋白质十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法,观察在TSDB作用下菌体蛋白质的变化;高效液相色谱测定有机酸变化;Annexin V单染色法观察细胞凋亡情况。结果表明:TSDB处理后金黄色葡萄球菌胞内蛋白质44.3~200 ku之间的条带变模糊或消失;菌体胞内苹果酸、柠檬酸含量均显著减少(分别平均下降了65.16%、56.18%)(p0.05),而草酸和乳酸未检测到相对于空白对照组;细胞凋亡时,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,与带有绿色荧光探针FITC的Annexin V高度结合,使菌体细胞呈苹果绿。结论:TSDB处理后造成菌体细胞膜通透性改变,引起细胞有机酸代谢紊乱,抑制蛋白质合成,从而导致细胞凋亡或坏死。这一研究发现对开发食品防腐剂具有指导意义。