奶粉中阪崎肠杆菌的风险评估

阪崎肠杆菌能引起脑膜炎、NEC和菌血症等，约2．5％～14％婴儿配方奶粉含有阪崎肠杆菌，0％～12％的普通奶粉含有阪崎肠杆菌，含量从0．36-66．0cfu／100g。婴幼儿奶粉中的阪崎肠杆菌问题已受到了全世界的普遍关注。本文基于大量研究和调查数据，从奶粉中阪崎肠杆菌的危害识别、奶粉中阪崎肠杆菌的暴露评估、奶粉中阪崎肠杆菌危害特性以及阪崎肠杆菌的检测方法等方面客观地对奶粉中阪崎肠杆菌进行风险评估，并对降低我国婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌风险提出建议。     

基于PAMAM树枝状大分子纳米免疫传感器快速检验婴幼儿奶粉中的阪崎肠杆菌

以聚酰胺胺树状大分子材料结合还原性石墨烯纳米复合物为电活性修饰膜层,固定于玻碳电极表面,采用物理吸附法固定化辣根过氧化物酶标记阪崎肠杆菌抗体制备成纳米免疫传感器,建立一种快速检测婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的方法。优化的试验条件:以K3[Fe(CN)_6]为探针,过氧化氢浓度为0.5 mmol/L,pH 7.0的PBS溶液为检测底液,孵育温度37℃、孵育时间20 min。采用微分脉冲伏安法研究免疫传感器响应电流与阪崎肠杆菌浓度之间的关系。结果表明,免疫响应电流与阪崎肠杆菌浓度之间呈线性关系(ΔIpc(μA)=-1.1817 lg C+1.723,R~2=0.9989),其检出限为5.8×10~1 CFU/mL(S/N=3)。该法用于检测婴幼儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌,其结果与国标方法(实时荧光PCR法)的数据一致,而且具有样品预处理简单、灵敏度高、快速、费用低等优点,可用于婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的快速检测。     

奶粉中阪崎肠杆菌的污染及快速检测方法的研究

目的：了解福建省市售婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染状况、污染途径并寻找快速准确的检测方法。方法：应用分离鉴定、PCR 和荧光PCR 等方法检测,分离鉴定采用阪崎肠杆菌显色培养基和全自动微生物生化仪。结果：阪崎肠杆菌在192 份市售婴幼儿配方奶粉中的检出率为1.56%,在60 份原料奶粉中的检出率为13.33%,30 份生产车间环境样本均未检出。结论：福建省市售婴幼儿配方奶粉中存在阪崎肠杆菌的安全隐患,某工厂奶粉中阪崎肠杆菌的污染主要来自原料奶粉。荧光PCR 和显色培养基可用于阪崎肠杆菌的快速筛选和分离。     

配方奶粉生产过程中阪崎肠杆菌的风险与控制

阪崎肠杆菌是20世纪发现的一种对婴幼儿具有严重健康威胁的致病微生物,在婴幼儿配方奶粉的原料和生产过程中都有污染阪崎肠杆菌的风险。准确对配方奶粉生产过程中阪崎肠杆菌的污染风险进行评价,并相应制定科学有效的风险控制措施,对于降低风险、提高产品品质、保障食品安全具有重要意义。本文综述了配方奶粉生产过程中阪崎肠杆菌的存活规律、配方奶粉原料中可能存在的被阪崎肠杆菌污染的风险,以及通过环境、空气、设备以及制度操作等方面对阪崎肠杆菌风险进行控制的各种措施。     

佛山市三水区销售婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染状况调查

目的:通过对2012-2014年佛山市三水区CDC对区内各大超市婴幼儿配方奶粉和婴幼儿辅助食品抽样调查的情况进行汇总分析,了解阪崎肠杆菌的污染情况。方法:根据随机抽样的方法原则,2012-2014年在佛山市三水区内覆盖80%消费人口的各大超市内随机抽取婴幼儿配方奶粉和婴幼儿辅助食品,将检验结果汇总分析。结果:共检测60份样品,8份样品检出阪崎肠杆菌,检出率为13.33%,检出阳性样品均为婴幼儿辅助食品。结论:佛山市三水区销售婴幼儿配方奶粉和婴幼儿辅助食品中有阪崎肠杆菌的污染,对婴幼儿健康有潜在危害,应加大监测力度,采取有效措施,减少阪崎肠杆菌对婴幼儿健康的危害。     

环境因子对阪崎克罗诺肠杆菌生物膜形成的研究

目的研究阪崎克罗诺肠杆菌生物膜的形成特性。方法采用结晶紫染色法检测生物膜形成量,考察培养时间、培养温度以及初始pH值3个环境因子对阪崎克罗诺肠杆菌生物膜形成的影响。结果结果表明培养时间、培养温度以及初始pH值对生物膜形成影响较大,且各阪崎克罗诺肠杆菌的最佳成膜条件分别为:阪崎克罗诺肠杆菌CICC21550最适温度为30℃,最适PH为7,最佳培养时间为36h;阪崎克罗诺肠杆菌CICC 21562最适温度为30℃,最适pH为5,最佳培养时间为48 h;阪崎克罗诺肠杆菌CICC 21544最适温度为42℃,最适pH为7,最佳培养时间为24 h;阪崎克罗诺肠杆菌CICC 21563最适温度为30℃,最适pH为7,最佳培养时间为36 h。结论 4株阪崎克罗诺肠杆菌的生物被膜成膜能力由强及弱依次为阪崎克罗诺肠杆菌CICC 21550、21544、21563、21562。本研究为阪崎克罗诺肠杆菌生物膜相关研究提供理论参考。     

柳江县市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染监测分析

目的 了解市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染状况,为消费预警提供科学依据。方法 分别按2011、2012年版国家食源性致病菌监测工作手册对市场上11家国内生产的32份婴幼儿配方粉进行检测。结果 32份样品检出2株阪崎肠杆菌,检出率为6.25%。其中婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌检出率4.35%(1/23);婴幼儿谷物食品中阪崎肠杆菌检出率11.11%(1/9)。结论 柳江县市售部分婴幼儿配方粉中存在阪崎肠杆菌污染,食用安全隐患不容忽视,应加强监测力度,预防和控制阪崎肠杆菌引起的食物中毒事件发生。     

奶粉中阪崎肠杆菌的分离与鉴定

目的了解某地区婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染情况,为我国制定婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的限量标准及为政府加强对婴儿配方奶粉的管理提供科学依据。方法常规生理生化鉴定法和实时荧光PCR法。结果检出2株阪崎肠杆菌。结论我国市售的婴儿配方奶粉中存在少量的阪崎肠杆菌污染。     

阪崎肠杆菌-食品安全控制的新目标

自 196 1年英国首次报道阪崎肠杆菌引起婴儿脑膜炎病例以来 ,世界上相继有多个国家报道了新生儿阪崎肠杆菌感染事件 ,婴儿配方奶粉与疾病的暴发密切相关。在 2 0 0 3年第 35次食品卫生法典大会上 ,美国和加拿大提出了有关控制婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的危险性框架 ,指出 1岁以下的易感婴幼儿感染阪崎肠杆菌后有生命危险。 2 0 0 4年第 36次食品卫生法典大会一致通过并设立了以加拿大为首的起草工作组 ,加速修订婴幼儿食品国际卫生操作规范 ,制定阪崎肠杆菌和其它可能导致婴幼儿健康危害的相关病原菌的微生物标准。     

3种方法检测婴幼儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌

目的对市售婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌检测方法进行研究。方法分别用常规培养鉴定方法、常规PCR方法和实时荧光PCR方法对32份奶粉样品进行阪崎肠杆菌分离鉴定。结果32份样品中检出2株阳性株，阳性率为6．25％，3种鉴定方法结果相符。结论联合使用多种鉴定方法可提高阪崎肠杆菌检测的可靠性。     

不同条件对阪崎克罗诺肠杆菌生物被膜形成的影响

本研究旨在探究不同生长温度(12℃、25℃、37℃)、培养基质(胰蛋白胨大豆肉汤、婴幼儿乳粉肉汤)和接触材料(不锈钢、玻璃、硅胶)对阪崎克罗诺肠杆菌ATCC 29004生物被膜形成的影响。研究首先通过活菌计数法评估不同条件下阪崎克罗诺肠杆菌粘附及生物被膜中的活菌量反映菌体粘附及成膜能力;随后借助场发射扫描电镜观测不同因素对菌体生物被膜微观结构的影响;最后分析不同条件下形成的生物被膜对三种季胺类消毒剂的抗性。结果表明:25℃和37℃下阪崎克罗诺肠杆菌的粘附菌量和生物被膜形成量高于12℃,菌体在胰蛋白胨大豆肉汤中的生物被膜形成量高于在婴幼儿乳粉肉汤中的形成量,37℃时硅胶材料表面粘附菌量高于不锈钢和玻璃材料,其他条件下菌体在三种材料表面粘附和生物被膜形成量无明显差异;阪崎克罗诺肠杆菌在25℃和37℃形成了致密且立体的生物被膜结构,12℃生物被膜为单层结构,三种材料表面生物被膜结构呈现出明显差异;阪崎克罗诺肠杆菌生物被膜对消毒剂的抗性取决于菌体的生长温度、接触材料及消毒剂的种类。综上所述,生长温度、培养基质和接触材料对阪崎克罗诺肠杆菌生物被膜形成均有影响,调节生长条件和选择接触材料对于控制阪崎克罗诺肠杆菌生物被膜的形成具有重要意义。     

测试片法：实现乳品阪崎肠杆菌的快速检测

阪崎肠杆菌是寄生于人和动物肠道内的条件性致病菌,可导致新生儿出现脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎等疾病,具有发病急、致死率高等特点。该菌的自然来源比较广泛,但是从多起阪崎肠杆菌引发的中毒事件中发现,婴幼儿配方奶粉是目前阪崎肠杆菌主要感染渠道。而2002年和2003年发生的两家国际乳业巨头因产品中检出阪崎肠杆菌主动召回产品的事件则使阪崎肠杆菌成为世界瞩目的焦点。     

阪崎肠杆菌生物膜形成条件及超声波对其去除作用

通过96/6孔板培养法进行生物膜体外模型建立,比浊法测定生物膜含量,结晶紫染色法观察生物膜形态,平板菌落计数法评价超声波对玻璃表面生物膜的去除作用效果,激光共聚焦显微镜观察超声波处理后生物膜脱落效果,研究阪崎肠杆菌生物膜的形成条件和超声波处理对其去除作用效果。结果表明,阪崎肠杆菌生物膜形成的最适温度37℃,最适pH 7.5,最适盐度为2.5%。CaCl_2(0.50%)、MgCl_2(1.50%)对阪崎肠杆菌生物膜形成具有明显促进作用。Cu~(2+)(1.50%)、EDTA(2.5%)对阪崎肠杆菌生物膜形成具有抑制作用。超声波处理能够使玻璃表面上附着的阪崎肠杆菌生物膜脱落,超声波处理初始温度30℃,时间14 min条件下去除效果最好。激光共聚焦显微镜可直接观察到超声波处理后盖玻片上生物膜中阪崎肠杆菌活菌数量变化,可用于证实和评价超声处理对玻璃表面阪崎肠杆菌生物膜的去除效果。     

应用VITEK全自动微生物鉴定系统检测婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌

基于对婴儿配方奶粉中微生物安全性问题的关注，本实验对婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的检测方法进行了初步研究。应用VITEK32自动微生物鉴定系统对人工污染的婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌进行检测，获得与美国食品药品管理局（FDA）推荐的API 20E生化鉴定方法一致的结果。     

使用微孔板光谱分析仪和平板计数测定阪崎肠杆菌的生长

本实验采用96孔板培养阪崎肠杆菌,然后由微孔板实时监测阪崎肠杆菌的生长.采用微孔板光谱分析仪和传统的平板方法测定阪崎肠杆菌数量之间具有非常好的相关性(R2=0.92),且可缩短测定时问(由至少24h,缩短为小于10h).阪崎肠杆菌菌株36℃培养末期数量相近,但生长曲线不同.进一步研究17株阪崎肠杆菌菌株42℃生长情况,发现微孔板光谱分析仪方法不仅能快速简便测定生长,且可以一种实时的方式知道阪崎肠杆菌在整个培养过程中的生长情况.研究结果表明,采用该方法可将阪崎肠杆菌菌株根据生长曲线的差异进行表型分类,该表型与阪崎肠杆菌菌株生化反应表型结果一致.     

基于环介导等温扩增技术快速检测阪崎肠杆菌

为实现婴幼儿配方乳粉中阪崎肠杆菌快速检测,建立等温荧光扩增方法特异性检测阪崎肠杆菌。针对阪崎肠杆菌特异性保守ompA基因设计3套引物,通过引物筛选和反应体系优化,建立阪崎肠杆菌快速检测的实时荧光环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。以人工污染方式检验该方法在乳粉中阪崎肠杆菌检测灵敏度和稳定检测限,并对比实时荧光LAMP法和国标法在48份市售婴幼儿配方乳粉中的实际检测效果。结果显示,筛选ompA-2引物扩增效率最优,且与常见食源性致病菌无交叉反应;建立的实时荧光LAMP法对人工污染乳粉样品中的阪崎肠杆菌检测灵敏度、稳定检测限分别为10~2 cfu/g和10~3 cfu/g;48份市售乳粉样品进行增菌12 h,实时荧光LAMP法检测结果与传统国标培养结果一致。建立的实时荧光LAMP方法将为阪崎肠杆菌快速检测提供有力手段。     

中国市售配方粉中阪崎肠杆菌和其它肠杆菌的污染状况

目的:调查和研究我国市售配方粉中阪崎肠杆菌和其它肠杆菌的污染状况。方法:采用传统的微生物学分离和鉴定方法检测212份市售配方粉中阪崎肠杆菌和其它肠杆菌。试验采用无菌水增菌、EE肉汤选择性增菌、VRBGA平板选择性分离、TSA平板分离培养和生化鉴定等。结果:从11份配方粉中分离到阪崎肠杆菌(占检测样品总数的5.19%),从103份样品中检出肠杆菌(占检测样品总数的48.58%)。检出的肠杆菌包括:泛菌属某些种、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌、醋酸钙-鲍曼复合不动杆菌、阪崎肠杆菌、非脱羧勒克氏菌、伤口埃希氏菌和大肠埃希氏菌等。结论:配方粉中肠杆菌的污染可能会导致婴幼儿,特别是婴儿的严重感染。本研究结果将有助于针对我国市售配方粉的卫生预防和控制。     

新型阪崎肠杆菌选择性分离培养基的研制

目的:筛选一种新型、特异性高的阪崎肠杆菌选择性培养基.方法:通过药敏实验,筛选出对阪崎肠杆菌耐药而对其他杂菌敏感的抗生素;利用抑菌浓度实验、抗生素组合平板实验,筛选出最佳的抗生素组合方式及浓度.将抗生素组合与显色剂添加到基础培养基中,配制成阪崎肠杆菌的新型选择培养基.结果:组合抗生素(4μg/mL万古霉素、0.1μg/mL头孢噻吩)和显色剂(0.1g/L 5-溴-4氯-3-吲哚-a-葡萄糖苷)添加到脑心培养基中,制成阪崎肠杆菌VC选择性显色培养基,能最大限度地抑制杂菌生长,而对阪崎肠杆菌的生长没有影响.经灵敏性实验,对接种的奶粉样品中的阪崎肠杆菌的检出限达到lcfu.结论:制得的新型阪崎肠杆菌选择性培养基特异性强、灵敏度高,可用于奶粉样品的分离检测.     

奶粉伴侣中微生物污染特点分析

目的:了解婴幼儿经常食用的奶粉伴侣中微生物的污染状况。方法:2016年在我国8个省(直辖市)采集奶粉伴侣864份,按照食品安全国家标准方法检测菌落总数、大肠菌群、阪崎肠杆菌、单核细胞增生李斯特菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌。结果:1.04%(9/864)的奶粉伴侣菌落总数10~4cfu/g,0.12%(1/864)大肠菌群10~2cfu/g,未检出单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌,但1份样品检出阪崎肠杆菌。结论:奶粉伴侣微生物污染水平较低。     

味全奶粉被检测出含致病菌

目前,国家质检总局公布了去年8月至11月进境的852批不合格食品、化妆品名单。其中,味全食品的三类配方奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。去年10月17日,产自台湾的9,624吨配方奶粉从香港进境时被检验出阪崎肠杆菌超标,进口商为深圳市恒利安贸易有限公司。不合格奶粉包括味全婴儿配方奶粉、味全幼儿成长配方奶粉和味全较大婴儿配方奶粉。