miR-124通过靶向调控DNMT3B抑制胃癌细胞增殖

目的明确miR-124是否通过靶向调控DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)表达而抑制胃癌细胞增殖能力,从而揭示miR-124的抑瘤分子机制。方法采用MTT检测miR-124对人胃癌MKN-45细胞的增殖能力;构建DNMT3B 3'UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告检测观察miR-124对DNMT3B3'UTR-荧光素酶活性的影响;将miR-124 mimics转染胃癌细胞MKN-45,采用Western blot检测DNMT3B表达水平。结果 MTT结果显示,在转染miR-124 mimics 24、48和72 h后OD值(0.264±0.023、0.377±0.041、0.524±0.029)分别与对照组(0.414±0.051、0.619±0.065、0.898±0.072)比较,差异均有显著性(均P<0.05),且具有时间依赖性;荧光素报告载体系统证实DNMT3B是miR-124直接调控的靶基因。Western blot结果显示,miR-124可抑制DNMT3B蛋白的表达。结论 miR-124通过靶向调控DNMT3B的表达而抑制胃癌细胞增殖能力。     

miR-222下调高糖下小鼠系膜细胞TIMP3表达

目的探讨miR-222是否通过靶向调控TIMP3表达参与糖尿病肾病的发生过程,从而进一步揭示糖尿病肾病的发病机制。方法运用qRT-PCR检测经25 mmol/L葡萄糖处理的小鼠系膜细胞(HG组)和对照小鼠系膜细胞(5 mmol/L葡萄糖,NG组)中miR-222和TIMP3的表达;将miR-222 mimics转染小鼠系膜细胞,以TIMP3 siRNA为阳性对照,采用Western blot检测其对TIMP3蛋白表达水平的影响。结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-222在经高糖处理的小鼠系膜细胞中的表达相对比正常浓度糖处理的小鼠系膜细胞中明显上调,而TIMP3在经高糖处理的小鼠系膜细胞中mRNA的表达相对比正常浓度糖处理的小鼠系膜细胞中明显下调;Western blot结果显示,过表达miR-222或干扰TIMP3可抑制TIMP3蛋白的表达(P<0.05)。结论 miR-222可能通过调控TIMP3的表达参与糖尿病肾病的发生发展。     

miR-26a通过调节MTDH基因表达抑制CAOV3细胞系生长

目的检测miR-26a在卵巢癌组织的表达改变,明确miR-26a调控卵巢癌细胞生长的分子机制。方法运用qRT-PCR检测52例卵巢癌及相应癌旁组织中miR-26a的表达改变;将miR-26a mimics转染卵巢癌细胞CAOV3,以MTDH siRNA为阳性对照,采用Western blot检测其对MTDH蛋白表达水平的影响;然后采用MTT法检测高表达miR-26a对CAOV3细胞生长增殖的影响。结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-26a在52例卵巢癌组织中表达下调;Western blot结果显示,过表达miR-26a或干扰MTDH可抑制MTDH蛋白的表达。MTT检测发现,过表达miR-26a或干扰MTDH可抑制人CAOV3细胞的生长(P<0.05)。结论 miR-26a通过调节MTDH基因的表达而抑制卵巢癌细胞的生长。     

长链非编码RNA PTV1通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制甲状腺癌细胞的增殖、侵袭及诱导凋亡

目的探究长链非编码RNA PTV1在甲状腺癌细胞株中的表达情况及其调控PTC细胞增殖、凋亡及侵袭过程中的作用机制。方法qRT-PCR检测细胞中PTV1的表达情况；将PTC细胞随机分为3组，分别转染PTV1-siRNA沉默载体（PTV1-siRNA组）、PTV1-siRNA空表达载体（siNC组）及空白对照PBS（Blank组）。采用CCK-8法、流式细胞术、Transwell法检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力；利用Western Blot法检测Wnt信号通路相关蛋白β-catenin、c-myc和cyclin D1的表达水平。结果与正常甲状腺细胞株HT-ori3相比，人甲状腺癌细胞株IHH-4（PTC）、FTC-133、8505C的PTV1表达水平明显增加（P<0.05）；沉默PTV1表达可明显抑制PTC细胞的增殖和侵袭能力，诱导细胞凋亡、降低β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平（P<0.05）。结论LncRNA PTV1在甲状腺癌细胞中高表达；沉默LncRNA PTV1可抑制PTC细胞的增殖和侵袭，促进凋亡，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的表达有关。     

GRIM-19表达对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

目的:通过体内和体外实验探讨GRIM-19表达对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法:采用脂质体转染法将GRIM-19重组质粒转染HeLa细胞,建立稳定表达GRIM-19的细胞株;采用RT-PCR和Western印迹法检测HeLa细胞转染GRIM19重组质粒前后GRIM-19 mRNA和蛋白水平的表达情况;应用MTT法检测各组细胞增殖水平,并将HeLa/con、HeLa/GRIM-19细胞接种到裸鼠皮下以检测荷瘤情况;同时对移植瘤检测其GRIM-19 mRNA及其下游STAT3 mRNA的表达水平.结果:建立稳定表达GRIM-19基因的HeLa/GRIM-19细胞株.RT-PCR结果显示GRIM-19基因在HeLa/GRIM-19细胞中mRHA表达明显增加,Western 印迹法检测同样发现GRIM-19蛋白的表达显著升高,而STAT3的表达明显受到抑制.MTT检测结果显示HeLa/ GRIM-19细胞增殖较HeLa/con明显减慢(P<0.05),其接种后肿瘤生长速度亦明显减慢(P<0.01).移植瘤的RT-PCR结果表明GRIM-19表达升高、STAT3表达降低.结论:GRIM-19的表达可以抑制子宫颈癌细胞的增殖,可能作为子宫颈癌治疗的一个新靶点.     

LIMK1在结肠癌中表达与沉默对人结肠癌细胞迁移与侵袭的影响

目的探讨LIMK1在结肠癌中的表达与临床病理参数的关系和沉默LIMK1对人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法免疫组化检测LIMK1在结肠癌表达;RNA干扰建立LIMK1-miR/SW480细胞株;RTPCR与Western blot分别检测LIMK1 mNRA与蛋白及磷酸化LIMK1表达;划痕实验和侵袭实验检测沉默LIMK1对SW480细胞迁移与侵袭的影响。结果免疫组化显示,LIMK1在结肠癌中表达明显高于结肠正常组织,高分化腺癌表达明显低于中分化与低分化腺癌,而低分化高于中分化腺癌;<5.0 cm的结肠癌表达明显低于≥5.0 cm;淋巴结转移显著高于无转移;Dukes分期A+B组表达明显低于C+D组(P<0.05)。RT-PCR与Western blot显示,LIMK1-miR/SW480细胞LIMK1 mNRA与蛋白表达明显下调,表明成功构建稳定沉默LIMK1基因的SW480细胞。免疫细胞化学证实,沉默组LIMK1表达较未转染组与空载体组明显降低。Western blot显示,沉默组LIMK1和磷酸化LIMK1较未转染组与空载体组明显下调(P<0.05)。划痕实验显示,沉默组癌细胞迁移率(22.53%)较对照组(76.50%)与空载体组(72.14%)明显降低(P<0.05)。侵袭实验发现,沉默组穿膜细胞(43.67±1.51个)较未处理组(143.33±1.52个)与空载体组(136.34±1.53个)明显减少(P<0.05)。结论 LIMK1表达与结肠癌发生、大小、淋巴结转移及Dukes分期有关。沉默LIMK1基因可抑制人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭。     

紫杉醇对Caski细胞增殖及APC、DKK-3基因表达的影响

目的研究紫杉醇对Caski细胞增殖及APC、DKK-3基因表达的影响。方法用MTT法、RT-PCR法及甲基化特异性PCR分别检测紫杉醇对人宫颈癌Caski细胞株增殖的影响、APC与DKK-3 mRNA表达水平、APC与DKK-3启动子甲基化水平。结果≥1μmol/L紫杉醇能明显抑制人宫颈癌Caski细胞株的增殖(P<0.05);从5μmol/L开始,随着紫杉醇给药剂量的增大,Caski细胞APC、DKK-3 mRNA表达水平明显增加(P<0.05),而Caski细胞APC、DKK-3启动子甲基化水平显著降低(P<0.05)。结论紫杉醇能呈剂量依赖性的抑制Caski细胞的增殖并上调APC、DKK-3 mRNA的表达,这可能与其诱导APC、DKK-3启动子的去甲基化有关。     

敲低ACTL8基因对子宫内膜癌细胞增殖与迁移的影响

目的探讨采用携带shRNA特异序列的载体转染子宫内膜癌细胞敲低肌动蛋白样蛋白8(ACTL8)基因对细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其机制。方法选取人子宫内膜癌Ishikawa细胞株进行实验研究,以携带shRNA特异序列的载体及空载质粒分别转染Ishikawa细胞株,形成敲低ACTL8基因的shACTL8组和以空载质粒转染的对照组。荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两组细胞中ACTL8 mRNA表达,Western blot法检测两组细胞ACTL8蛋白表达,Transwell迁移和侵袭实验分析Ishikawa细胞侵袭和迁移能力,CCK8细胞增殖实验及平板克隆实验检测细胞的增殖情况,Western blot法检测两组细胞的E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、P21蛋白的表达情况。结果 shACTL8组的ACTL8 mRNA、ACTL8蛋白相对表达强度均低于对照组(P<0.05);shACTL8组的Ishikawa细胞侵袭、迁移水平均低于对照组(P<0.05);在细胞培养后1天、2天、3天,shACTL8组的Ishikawa细胞数目测定OD值显著低于对照组(P<0.05);平板克隆实验培养3天,可见shACTL8组培养皿中细胞生长数目明显少于对照组(P<0.05);shACTL8组E-cadherin蛋白、P21蛋白表达强度高于对照组(P<0.05);shACTL8组N-cadherin蛋白、MMP-9蛋白表达强度低于对照组(P<0.05)。结论敲低ACTL8基因抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭。     

miR-195表达调控对大肠癌细胞HT-29增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的:探讨miR-195对大肠癌细胞HT-29增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:应用脂质体转染的方法,将miR-195 mimics转染入HT-29细胞,q RT-PCR检测转染后miR-195的表达,分别采用CCK-8法及流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况,qRT-PCR和Western blot检测转染后VEGFA mRNA和蛋白表达变化。结果:与NC组比较,miR-195 mimics转染组明显上调HT-29细胞miR-195的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,下调VEGFA mRNA及蛋白表达,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:上调HT-29细胞的miR-195表达,可明显抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与抑制其靶基因VEGFA表达相关。     

miR-140靶向LRP4基因对甲状腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨miR-140对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法:运用qRT-PCR检测甲状腺癌TPC-1细胞和正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中miR-140和LRP4的表达水平;将miR-con组(转染miR-con)、miR-140组(转染miR-140 mimics)、si-con组(转染si-con)、si-LRP4组(转染pcDNA-LRP4)、anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-140组(转染anti-miR-140)、miR-con+WT-LRP4组(转染miR-con和WT-LRP4)、miR-con+MUT-LRP4组(转染miR-con和MUT-LRP4)、miR-140+WT-LRP4组(转染miR-140 mimics和WT-LRP4)、miR-140+MUT-LRP4组(转染miR-140 mimics和MUT-LRP4)、miR-140+pcDNA组(转染miR-140 mimics和pcDNA)、miR-140+pcDNA-LRP4组(转染miR-140 mimics和pcDNA-LRP4)均用脂质体法转染至TPC-1细胞;采用CCK-8法检测各组细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果:甲状腺癌TPC-1细胞在正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1、miR-140的表达水平显著降低,LRP4 mRNA和蛋白质的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-140、抑制表达LRP4均可抑制TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭;miR-140可靶向负调控LRP4的表达。过表达LRP4可逆转miR-140过表达对甲状腺癌TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:miR-140可抑制甲状腺癌TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向LRP4有关,将可为甲状腺癌的诊断、治疗提供新靶点。     

云南曲溪盆地新近纪砂岩型铀矿找矿前景

阐述了云南曲溪新近纪砂岩盆地的地质概况、铀矿化特征以及盆地砂岩型铀矿的成矿地质条件,分析认为基本具备形成砂岩型铀矿的有利条件,在盆内寻找可地浸砂岩型铀矿是可能也是可行的。并对下一步的铀矿勘查工作提出了方向和建议。     

“3+3+3”教学模式在单片机课程中的应用与研究

针对当前社会对单片机人才质量要求的提高,我国各大工科院校对单片机教学改革的弊端,提出了"3+3+3"教学模式在单片机课程中的应用与研究。将单片机课程的知识体系分为"基本理论、知识延伸、实践应用"三个层次,按教学效果分别以"微课MOOC、翻转课堂、现场教学"三种教学形式,在"网络覆盖地、多媒体教室、实训基地"三种教学场所进行教学组织,教师可根据具体教学目标,进行多种教学手段、不同教学模式的灵活设计。旨在培养学生学习兴趣、提高学生学习效率、拓宽学生理论基础、增强学生动手实践能力。     

郑州市乒乓球俱乐部的经营现状与分析

近几年业余乒乓球群体发展趋势不断上升,健身意识和体育消费市场扩大,乒乓球爱好者的技术水平也越来越高。在这个时期出现的经营性乒乓球俱乐部能否成为21世纪最大的体育产业的发展先驱,加强这方面的研究很有意义。为此,通过文献资料、对我省现有的乒乓球俱乐部进行剖析,对其经营现状和发展前景及其存在的问题提出了一些建议,为大家提供参考依据。     

团簇Ti_3Al_3的磁性及自旋密度研究

设计团簇Ti_3Al_3模型,基于密度泛函理论(DFT)并在B3LYP/lanl2dz水平下运用Gaussian 09程序对其进行一系列的优化、计算。研究发现团簇Ti_3Al_3在二、四重态下的构型具有磁性,且Ti原子磁矩对团簇总磁矩的贡献较大;d轨道的电子自旋态密度图对称性最差,说明其上的成单电子最多,是团簇磁性的主要来源。另外,在0 eV处,由于存在巡游电子的磁性,使自旋向上的α电子和自旋向下的β电子发生位置互换,且磁距完全对称。     

YB-3与DYB-3航空有机玻璃综合性能对比

本论文系统对比了YB-3、DYB-3有机玻璃的基本力学性能、缺口敏感性、耐应力-溶剂性、大气老化寿命等内容。从数据对比来看,DYB-3的冲击韧性、断裂韧度、缺口敏感性、耐应力-溶剂银纹、大气老化等指标明显优于YB-3有机玻璃。     

硫酸铝中Fe3+、Al3+含量的快速检测法

为快速、准确地测定净水剂硫酸铝中的Fe^3＋、Al^3＋含量，研究了采用EDTA络合-铜盐返滴定法的可行性，并考察了该方法的影响因素。结果表明，在优化试验条件下该方法的加标回收率为95．2％-103．5％，可实现对净水剂硫酸铝中Fe^3＋、Al^3＋的连续测定，并具有快速、简便、准确的特点。     

硫酸铝中Fe3+、Al3+含量的快速检测法

为快速、准确地测定净水剂硫酸铝中的Fe3+、Al3+含量,研究了采用EDTA络合-铜盐返滴定法的可行性,并考察了该方法的影响因素.结果表明,在优化试验条件下该方法的加标回收率为95.2%～103.5%,可实现对净水剂硫酸铝中Fe3+、Al3+的连续测定,并具有快速、简便、准确的特点.     

基于A3航空摄影系统和Smart3d软件快速进行实景影像三维模型生产

当今社会,数字城市建设飞速发展,对城市实景影像三维建模需求越来越多,A3数字航摄仪以其独特的优势能快速辅助城市实景影像三维模型生产。本文以天津重点区域为例,利用先进的A3数字航摄仪,结合Smart3D软件,详细阐述了从数据获取到实景影像三维模型制作的过程。     

Model geogrids and 3D printing

This paper summarizes the technical aspects of using 3D printing to fabricate small model geogrids for geotechnical experiments, with the aim of scaling their geometry and tensile behavior under operational conditions, say up to 5% strain. Specifically, we successfully fabricated model geogrids with one-hundredth of the tensile strength of prototypes, which is desirable for 1:10 model tests under 1-g condition. We also successfully fabricated another one with tensile strength close to one-tenth of prototypes, which is desirable for 1:10 model tests under 10-g condition in centrifuges. Therefore, by using 3D-printed model geogrids with properly scaled dimensions and tensile behavior, it is possible to achieve the two scaling laws simultaneously in reinforced-soil model tests, making the small-scale model tests more representative of field conditions.