山羊KLF17基因克隆与组织表达

克隆山羊Krüppel样因子17基因(KLF17)的c DNA序列,并检测其组织表达水平,为KLF17基因的功能研究奠定基础.随机选取2~3周岁的健康简州大耳羊和藏山羊羯羊各4只,屠宰采集山羊不同组织样品(心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪),提取组织总RNA,利用RT-PCR法克隆山羊KLF17基因序列,进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(q PCR)法检测KLF17基因mRNA的表达水平.结果表明,克隆得到山羊KLF17基因c DNA序列1 450 bp,包含CDS区全长858 bp,5'UTR序列12 bp,5'UTR序列580 bp,编码285个氨基酸残基.其CDS区与牛、绵羊相比在5'端少99 bp,而在531位多出361 bp,这导致其编码区在858位提前终止.山羊蛋白序列较牛、绵羊少113个氨基酸残基.组织表达结果显示,KLF17基因在藏山羊肺中具有最高的表达水平,而在简州大耳羊皮下脂肪中具有最高的表达水平.两种山羊均在背最长肌中具有最低的KLF17表达量.这些结果表明KLF17可能在山羊脂质代谢过程中具有重要调控作用.     

血管过氧化物酶1在Ang-Ⅱ诱导血管平滑肌细胞表型转化中的作用及机制

血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化在动脉粥样硬化等血管增生性疾病中起重要作用,但具体调节机制仍不明确。为探讨血管过氧化物酶1(VPO1)在血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导VSMCs表型转化中的作用及机制,予以Ang-Ⅱ培养VSMCs,结果发现Ang-Ⅱ升高VSMCs内VPO1的表达,伴随着SM22α、α-SMA表达下降和OPN、KLF4表达升高。VPO1基因沉默后可明显抑制Ang-Ⅱ诱导的SM22α、α-SMA表达下降和OPN、KLF4表达升高,同时抑制HOCl的生成。HOCl培养VSMCs使SM22α、α-SMA表达下降和OPN、KLF4表达升高。研究结果表明VPO1通过调节KLF4的表达在Ang-Ⅱ诱导VSMCs表型转化中起重要作用。     

Nodal对小鼠成纤维3T3细胞中CCL5表达的促进作用

以小鼠成纤维细胞为模型,探讨Nodal对趋化因子CCL5的调控作用。采用Western blotting、实时荧光定量PCR、小分子RNA干扰技术、质粒过表达技术等测试方法对Nodal调控的CCL5的机制进行探究。结果发现,Nodal可以引起NF-KappaB入核增加,从而促进CCL5的转录,并且Nodal还可以激活AKT/GSK-3β通路。由此可以得出,转录因子NF-KappaB在Nodal诱导的CCL5上调中发挥着重要作用,并且AKT/GSK-3β通路参与了Nodal诱导的CCL5的上调。     

精原细胞分化及维甲酸在其中的作用与机制研究进展

多种microRNAs及RNA结合蛋白参与调控精原细胞分化,维甲酸(retinoic acid,RA)在精原细胞分化过程发挥了重要作用,RA可通过调控microRNA及RNA结合蛋白影响Stra8、Sohlh1、Sohlh2及Kit等精原细胞分化决定因子的转录后加工、修饰,或直接激活m TOR信号通路促进精原细胞分化,但睾丸内调控精原细胞对RA反应的机制及RA作用于精原细胞后的下游分子机制尚未完全明确。     

microRNA和泌尿系常见肿瘤的探析

microRNA,被称作微小的RNA,于1993年被发现,为真核细胞中所固有的,长度为18~25 nt。microRNA通过碱基配作用于靶基因,抑制靶基因的翻译或降解,从而发挥对靶基因的调控作用。也可以通过抑制下游靶基因的表达发挥其生物学功能。miRNA可以调控肿瘤细胞的增殖、凋亡,参与细胞的自我更新和分化的过程,起抑癌基因或癌基因样作用。本文就miRNAs的生物学特性、功能特性及其与泌尿系肿瘤的关系等做一简要综述。     

抗肿瘤药物治疗靶点Sp1研究进展

特异蛋白转录因子1(Sp1)属于Sp/KLF家族成员,是一种序列特异性的DNA结合蛋白,可调控某些启动子中富含GC/GT序列的细胞核病毒基因的转录过程,其广泛存在于几乎所有组织的细胞核中。不仅在正常胚胎发育、产后个体生长等过程中起着重要作用,还可以通过调控癌基因、抑癌基因及相关信号通路分子的表达,影响细胞周期、细胞凋亡及血管新生等过程,参与多种肿瘤的发生发展。本文就Sp1与癌症患者的预后意义、致瘤作用及其作为抗肿瘤药物治疗靶点进行综述。     

27-羟基胆固醇在乳腺癌、前列腺癌和子宫内膜癌发生发展中的作用

血浆中最丰富的胆固醇初级代谢产物27-羟基胆固醇(27HC)是肝X受体(LXR)配体激动剂和内源性选择性雌激素受体调节剂(SERM),具有雌激素样作用,能促进肿瘤生长。研究发现27HC是多种恶性肿瘤发病的危险因素,参与肿瘤的发生,肿瘤微环境的调节以及肿瘤细胞增殖、血管生成、肿瘤细胞侵袭、迁移和转移等过程。同时,调控27HC含量的关键酶的表达也与27HC在肿瘤中的作用密切相关,可作为乳腺癌、前列腺癌等疾病预后复发的预测及监测生物标志物。本综述重点介绍了近年来27HC在乳腺癌、前列腺癌和子宫内膜癌中的研究成果,阐述了27HC在肿瘤生理病理过程中的雌激素受体(ER)和LXR依赖性作用及其对其它信号通路的调控作用,为防治相关癌症提供了新的理论依据和思路。     

5-HMF抑制A375细胞增殖的信号转导通路

通过Caspase活性检测和Western blotting法对ROS介导的A375细胞凋亡和G0/G1细胞周期阻滞中相关蛋白进行分析。结果表明:5-HMF通过清除细胞内ROS激活了DNA损伤介导的P53磷酸化、AKT通路和MAPKs通路,这些通路共同作用于相应的下游底物,激活外源性的死亡受体通路和内源性的线粒体通路导致细胞的凋亡,其中,5-HMF通过上调线粒体中的促凋亡因子、下调抑凋亡因子并活化Bid而激活內源性途径;此外,P53、AKT等也可以抑制或增强G0/G1期主要调控因子的表达,导致G0/G1期阻滞,证明了5-HMF可抑制A375细胞增殖的信号转导通路。     

MicroRNA与骨代谢相关疾病

MicroRNA(miRNA)是一种非编码的小分子RNA,在基因表达调控过程起重要作用,其在疾病发生发展中的作用已成为研究热点之一。部分miRNA能够调节成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞的分其代谢,进而影响骨代谢,导致骨代谢相关疾病的发生。提示miRNA与骨代谢相关疾病之间存在关联,改变相关miRNA表达水平可能对骨代谢疾病有治疗作用。本文对miRNA的生物活性及其在骨质疏松症和骨关节炎中的作用和调节机制予以综述。     

miRNA失调控与肿瘤的发生发展

<正>microRNA(miRNA)为长度约19～25个核苷酸的非编码RNA,miRNAs能够识别特定的目标mR-NA并在转录后水平通过促进靶mRNA的降解和/或抑制翻译过程而发挥负调控基因表达的作用[1]。计算机预测表明,每个miRNA有能力调控约200个靶基因,说明人类大约1/3的基因表达受miRNAs的精细调节。它们主要通过调节信号分子(细胞因子、生长因子、转录因子和促凋亡或抗凋亡基因等)的表达参与动植物的生长、发育、分化和代谢[2]。近几年来的研究发现,一些miRNA的特异性调节和