TSA对发育期大鼠癫痫后脑损伤的保护作用及其机制

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑素A(TSA)在癫痫后脑损伤发病中的作用及其机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为4组:对照组、海人酸(KA)组、小剂量TSA干预组(0.03 mg/kg)及大剂量TSA干预组(0.1 mg/kg)组,通过腹腔注射海人酸(KA)制作发育期大鼠癫痫模型,TSA于KA诱导癫痫前2 h腹腔注射给药,评估惊厥发作的等级及记录惊厥的潜伏期。癫痫后24 h处死大鼠,HE染色观察脑组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠海马神经元细胞凋亡;CD68染色检测活化的小胶质细胞;Western blot检测IL-1β和TNF-α蛋白的表达。结果 KA组均达到Ⅳ~V级惊厥发作,而TSA干预组能减轻惊厥发作的等级和延长惊厥的潜伏期。HE染色可见KA组明显的神经元凋亡及细胞水肿,伴有较多的炎症细胞浸润,而TSA干预组能减轻神经元凋亡及细胞水肿,同时减少炎症细胞浸润。与对照组比较,KA组神经元凋亡数、小胶质细胞活化数及炎症因子的表达均显著增加(P<0.05),而TSA能抑制KA诱导的改变。相对于0.03 mg/kg TSA干预组,0.1 mg/kg TSA干预组治疗作用更明显(P<0.05)。结论 TSA能抑制癫痫后海马神经元凋亡、小胶质细胞活化及炎症因子的表达,同时能减轻惊厥发作的等级和延长惊厥的潜伏期,从而对癫痫后脑损伤起到保护作用。     

竹叶黄酮抑制大鼠脑海马的炎症反应减轻糖尿病大鼠认知功能障碍

目的:观察竹叶黄酮(bamboo leaf flavone)对糖尿病大鼠认知功能障碍的影响及其相关机制的研究。方法:40只雄性SD大鼠高糖高脂喂养4周后,采用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)一次性腹腔注射(50 mg/kg)诱导大鼠Ⅱ糖尿病模型。造模成功的36只大鼠随机分为三组:模型组(DM组)、模型+给药组(DM+BLF组)、模型+溶剂对照组(DM+CO组),每组12只。同时,随机选取12只同月龄正常的大鼠作为对照组(CON组)。给药12周后,通过水迷宫(morris water maze,MWM)测试,观察竹叶黄酮对糖尿病大鼠认知障碍的影响;采用尼氏染色法观察竹叶黄酮对糖尿病大鼠海马神经细胞的影响;同时应用免疫印迹(weatern-blot,WB)法检测竹叶黄酮对糖尿病大鼠海马区白介素-6(interleukin-6,IL-6),环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子表达的影响。结果:竹叶黄酮可以减轻糖尿病大鼠认知功能障碍,保护海马区神经元,抑制糖尿病大鼠海马区炎症因子IL-6、COX-2和TNF-α的蛋白表达。结论:竹叶黄酮降低海马神经元损伤,抑制大鼠脑海马的炎症反应改善糖尿病大鼠认知功能障碍。     

石菖蒲挥发油对东莨菪碱致大鼠学习记忆障碍的影响及作用机制研究

目的研究石菖蒲挥发油对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的影响及可能的作用机制。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、多奈哌齐组(0.25 mg/kg)、石菖蒲挥发油组(12 g/kg),每组10只,每天灌胃给药1次,连续灌胃21 d。第15天起,按2.1 mg/kg的剂量腹腔注射东莨菪碱,1次/d,连续给药7 d以制备大鼠学习记忆障碍模型。通过Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,免疫组化法分析海马组织中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,酶联免疫法检测大鼠海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果石菖蒲挥发油能显著缩短模型大鼠逃避潜伏期,增加模型大鼠穿越平台次数,显著降低模型大鼠海马组织中GFAP的表达量和MDA的含量,升高SOD的含量。结论石菖蒲挥发油可以有效改善东莨菪碱所致的学习记忆障碍模型大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与其下调海马区星形胶质细胞内GFAP的表达以及抗氧化作用有关。     

罗格列酮对去卵巢大鼠学习记忆及脑内TNF-α、IL-6表达的影响

目的观察罗格列酮对去卵巢大鼠学习记忆功能及海马内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达的影响。方法 56只SD雌性大鼠,随机分为4组:假手术对照组、去卵巢组、假手术+罗格列酮组、去卵巢+罗格列酮治疗组,第15周进行Morris水迷宫试验。第16周处死大鼠,ELISA法检测大鼠大脑海马区的TNF-α、IL-6的表达。结果与假手术组比较,去卵巢组大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.01),大脑海马区TNF-α和IL-6的表达明显升高(均P<0.01);与去卵巢组比较,罗格列酮治疗组大鼠学习记忆能力明显改善,大脑海马区TNF-α和IL-6的表达明显降低(均P<0.01)。结论罗格列酮能改善去卵巢大鼠的学习记忆障碍,其机制可能与其降低海马TNF-α和IL-6的表达有关。     

内质网应激因子PERK在抑郁模型大鼠海马组织中的表达及β-细辛醚的干预作用

目的:探讨内质网应激因子PERK在抑郁模型大鼠海马组织中的表达及β-细辛醚的干预作用。方法:将100只SD大鼠随机分为5组(正常对照组、模型组、氟西汀组、β-细辛醚低剂量组和高剂量组),每组20只。孤养结合慢性不可预见性刺激,模型复制成功后第2天给予氟西汀组和β-细辛醚组1次/d灌胃,给药剂量分别为氟西汀10 mg/(kg·d)、β-细辛醚25 mg/(kg·d)、β-细辛醚50 mg/(kg·d)。于实验前和实验第29天,对大鼠进行行为学测量,采用免疫组织化学检测法检测PERK蛋白水平。结果:经28 d慢性不可预见性温和刺激(CUMS)后,模型组大鼠水平运动和垂直运动得分均明显低于正常对照组(P<0.05);β-细辛醚低剂量和高剂量组与氟西汀组大鼠水平和垂直运动得分均明显高于模型组(P<0.05)。模型组大鼠海马区PERK蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.05),β-细辛醚低、高剂量组与氟西汀组大鼠海马区PERK蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05)。结论:β-细辛醚可以改善大鼠抑郁行为,其机制可能与降低大鼠海马组织中PERK蛋白表达有一定关联。     

白子菜总黄酮对脑缺血模型大鼠的影响

目的:探讨白子菜总黄酮对脑缺血模型大鼠的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:60只SPF级wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(尼莫地平片,20 mg·kg~(-1))、白子菜总黄酮大、小剂量组(200 g·kg~(-1)、100 g·kg~(-1))。造模大鼠预防性给药14 d,末次给药2 h后,大鼠两侧颈总动脉用微动脉夹夹闭30 min,复制脑缺血模型。取大鼠脑组织,一半脑组织9倍生理盐水组织匀浆,酶免疫法检测大鼠脑组织匀浆液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i Nos)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量。一半脑组织采用体积分数10%福尔马林固定液固定,切片,观察脑组织海马区病理情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织IL-6、IL-1β、TNF-α、i Nos、NO含量显著提高(P <0. 01);与模型组比较,白子菜总黄酮能降低大鼠脑组织IL-6、IL-1β、TNF-α、i Nos、NO含量(P <0. 01,P <0. 05),显著改善缺血所致脑组织海马区损伤。结论:白子菜总黄酮对脑缺血模型大鼠有较好的改善作用。     

野黄芩素通过PI3K/Nrf2/HO-1途径减轻LPS诱导的大鼠急性肺损伤

目的探讨野黄芩素(SCT)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠表达血红素氧合酶-1(HO-1)的机制。方法大鼠静脉内注射LPS(30 mg/kg)以诱导ALI。1h后分别给予不同浓度的SCT(0.1,0.5和1.0 mmol/kg)静脉注射。获肺组织标本,实时定量PCR和Western blot分别检测血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA及蛋白的表达;比色法检测HO-1酶活性;HE染色观察病理学改变情况。提取组织总蛋白和核蛋白,Western blot检测PI3K磷酸化以及Nrf2核转位情况,同时观察SCT处理前后对大鼠血浆中TNF-α,IL-6和IL-10水平的影响。结果 LPS注射后肺组织中HO-1 mRNA和蛋白表达水平有所增加,而SCT处理后能进一步上调HO-1表达水平,并能增强其酶活性。同时,SCT也可促进PI3K磷酸化,并能诱导转录因子Nrf2核转位。此外,0.5和1.0 mmol/kg的SCT能减少大鼠血浆中TNF-α和IL-6含量,并能进一步增加IL-10水平。HO-1抑制剂Sn PP处理后可消除SCT对细胞因子的影响。结论 SCT可能通过激活PI3K/Nrf2诱导HO-1表达来减轻LPS所致炎症反应。     

石榴健胃片对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠结肠炎症因子的影响

目的研究石榴健胃片对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(SKD-UC)模型大鼠结肠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10的影响。方法采用15%大黄混悬液灌胃联合2,4,6-三硝基苯磺酸-乙醇溶液灌肠的病证结合法建立SKD-UC大鼠模型,将模型大鼠随机分为阳性组,模型组,石榴健胃片高、中、低剂量组,每组20只,另取20只作为空白组。造模成功后第2天开始进行药物干预,阳性组大鼠灌胃柳氮磺胺吡啶(SASP,0.36g/kg),石榴健胃片高、中、低剂量组分别灌胃石榴健胃片混悬液2.4,1.2,0.6g/kg,模型组和空白组灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续21d。末次给药后24h处死大鼠,取结肠组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测结肠组织中IL-1β,IL-6,IL-10,TNF-α的基因表达。结果与空白组比较,模型组大鼠结肠IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA相对表达量明显增高,IL-10的mRNA相对表达量明显降低,组间比较差异均有高度统计意义(P<0.01);与模型组比较,石榴健胃片高、中、低剂量组大鼠结肠IL-1βmRNA和TNF-αmRNA相对表达量明显降低(P<0.05或P<0.01),高、中剂量组IL-6mRNA相对表达量明显降低(P<0.01),而高、中、低剂量组IL-10mRNA相对表达量明显升高(P<0.05或P<0.01);与阳性组比较,石榴健胃片高剂量组大鼠结肠IL-1β,TNF-α和IL-6的mRNA相对表达量及中剂量组IL-1βmRNA相对表达量明显降低(P<0.05),高、中剂量组IL-10mRNA相对表达量明显升高(P<0.05);各剂量组之间IL-1β,IL-6,TNF-α和IL-10的mRNA相对表达量比较差异均无统计意义(P>0.05)。结论石榴健胃片对SKD-UC模型大鼠的结肠TNF-α,IL-1β,IL-6及IL-10的基因表达具有调节作用。     

ShRNA干扰NLRP3对缺氧缺血性脑损伤模型新生大鼠心肌损伤和免疫反应的保护作用及机制研究

目的 探究shRNA(short hairpin RNA)干扰NLRP3对缺氧缺血性脑损伤模型新生大鼠心肌损伤和免疫反应的保护作用及作用机制。方法 MCAO诱导新生大鼠模型，分4组：假手术组、模型组(MCAO组)、MCAO+Scramble组和MCAO+sh-NLRP3组，每组10只。采用RT-PCR和蛋白印迹法检测NLRP3表达；HE染色观察心肌组织病理学改变；免疫组化检测Ki67表达，蛋白印迹检测Ki67和PCNA表达；TUNEL染色检测心肌细胞凋亡率，蛋白印迹检测心肌细胞Caspase-3、-9表达；Elisa检测Mb、CK-MB和cTnⅠ含量及心肌炎标记分子IL-1β、iNOS、IL-6和L-10表达；蛋白印迹实验检测TGF-β1、NF-κB p65和TNF-α表达。结果 sh-NLRP3能抑制模型大鼠NLRP3在基因和蛋白水平的表达(P < 0.01)，改善心肌坏死，上调心肌组织中Ki67和PCNA表达(P < 0.01)，降低心肌细胞凋亡率(P < 0.01)和Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达(P < 0.01)，降低大鼠血清中Mb、cTnⅠ和CK-MB的含量(P < 0.01)，降低IL-1β、iNOS、IL-6和增加IL-10含量，同时下调TGF-β1、P-P65/P65和TNF-α的蛋白表达。结论 sh-NLRP3对缺氧缺血性脑损伤模型新生大鼠的心肌损伤和免疫反应起到保护作用，其机制与抑制TGF-β1/ NF-κB p65/TNF-α炎症通路活化相关。     

藻蓝素对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用

目的观察藻蓝素(CPC)对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组和CPC干预组。其中模型组采用盲肠结扎穿刺建立脓毒症急性肺损伤大鼠模型。CPC干预组在模型组基础上分别给予浓度为20 mg/kg、40 mg/kg和60 mg/kg CPC腹腔注射。术后72 h获取血液及肺组织标本,检测PaO2/FiO2、肺湿干重比、支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6水平,以及肺组织中丙二醛(MDA)水平及髓过氧化物酶(MPO)活性。结果与正常对照组相比,模型组PaO2/FiO2含量显著降低(P<0.05)。不同浓度CPC干预后,PaO2/FiO2进一步增高。模型组肺湿干重比以及MDA和MPO显著高于正常对照组(P<0.05),CPC处理后,肺湿干重、MDA和MPO水平随之降低;模型组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6含量明显增高,CPC能进一步降低其含量。结论 CPC可减轻脓毒症急性肺损伤大鼠肺部气体交换功能和炎症反应,从而发挥对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用。