α-乙酰乳酸脱羧酶高产菌株的选育及产酶条件的研究

以从土壤中分离出的9株地衣芽孢杆菌株，通过产酶实验发现BL－4的产酶活性最好，通过UV和NTC对BL－4进行复合诱变，获得了一株产酶活性比出发菌株BL－4高1．22倍的α－乙酰乳酸脱羧酶高产菌株，并研究了该菌株的最佳发酵产酶条件：培养温度30℃，发酵时间36h，发酵液起始pH6.5.     

α—葡萄糖苷酶的初步研究及其在异麦芽低聚糖浆生产中的应用

从７种霉菌中筛选出１株产α－糖苷酶的曲霉Ｂ－１菌株Ｃｏ６０照射两次，进行诱变处理，得曲霉Ｂ－１ＣＯ２菌株，３７℃固体培养４８ｈ最高酶活７２０ｕ／ｇ（曲干基），酶作用最适ｐＨ５．３，最适温度为５５℃。对Ｃａ、Ｍｇ＾＋＋激活酶，对固体培养基组成、水分、培养时间、培养温度等进行了初步试验。通过纸上层析法检出酶作用产物的异构糖组分，在实验室中制备异麦芽低聚糖浆并叙述了它的生理性质及在食品工业上的应用。     

产α-L-鼠李糖苷酶细菌Bacillus velezensis的筛选及酶学性质研究

L-鼠李糖苷酶广泛应用于食品加工、医药及医药前体的制备。研究从海洋样品中筛选产α-L-鼠李糖苷酶的细菌,对菌株进行鉴定,并对α-L-鼠李糖苷酶粗酶性质进行测定。通过透明圈平板筛选法从海州湾海域海泥样品中筛选获得一株产α-L-鼠李糖苷酶的细菌菌株DTC03。通过形态学特征、生理生化特性,以及16SrDNA序列的扩增与分析,将菌株DTC03鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。对菌株DTC03α-L-鼠李糖苷酶粗酶液酶学性质进行测定,该酶最适催化温度和pH分别为40℃和pH7.0;在50℃范围内保持1h后,剩余酶活力高于50%;在pH6.0～8.0的缓冲液放置12h后,仍有60%以上酶活。金属离子Ba~(2+)和Al~(3+)对酶有显著激活作用,而Ni~(2+)、Cu~(2+)和Cd~(2+)对酶有显著抑制作用。目前尚未见Bacillus velezensis产α-L-鼠李糖苷酶的报道,研究结果为该酶的进一步研究奠定实验基础。     

α－葡萄糖苷酶的初步研究及其在异麦芽低聚糖浆生产中的应用

从７种霉菌中筛选出１株产α－糖苷酶的曲霉Ｂ－１菌株Ｃｏ６０照射两次．进行诱变处理．得曲霉Ｂ－１ＣＯ２菌株，３７℃固体培养４８ｈ最高酶活７２０ｕ／ｇ（曲干基），酶作用最适ｐＨ５．３，最适温度为５５℃。对Ｃａ＋＋、Ｍｇ＋＋激活酶，对固体培养基组成、水分、培养时间、培养温度等进行了初步试验。通过纸上层析法检出酶作用产物的异构糖组分，在实验室中制备异麦芽低聚糖浆并叙述了它的生理性质及在食品工业上的应用。     

产甘油假丝酵母酸性磷酸酯酶突变株的选育及其性质研究

运用化学诱变法从高产甘油的工业生产菌株产甘油假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｇｌｙｃｅｒｏｌｇｅｎｅｓｉｓ）ＷＬ２００２－５（Ｈ－）筛选获得两类酸性磷酸酯酶突变株．一类为阻遏型酸性磷酸酯酶缺失突变株;另一类为对磷调节不敏感的部分去阻遏调节突变株,并研究了它们的发酵性能     

糖化酵母在干啤酒生产中应用的研究（Ⅰ）──具有糖化酶活性和去除POF1基因的糖化酵母的选育

比较了多株单、双倍体糖化酵母，选出糖化酶活性及发酵度较高的糖化酵母单倍体──Ｓｏｃ．ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ２６０６７－４４。同时发现糖化酵母单倍体菌株的酶活性高于二倍体菌株。含有ＰＯＦ１基因的糖化酵母（ｐｏｆ＋表型）可脱羧肉桂酸形成苯乙烯，ｐｏｆ－菌株无此能力。通过气相色谱检测肉桂酸－酒花麦汁发酵液中的苯乙烯含量，可以鉴别出去除ＰＯＦｌ基因的菌株。本文利用酵母菌的群体杂交法，通过Ｓ．ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ２６０６７－４４与酿酒酵母单倍体杂交，获得１株糖化酶活性及发酵度较高，并且去除了ＰＯＦ１基因的单倍体菌株Ｈ－３（２）－２（ａ，ＳＴＡ，ｐｏｆ－）·     

甘肃河西走廊葡萄酒产区高产糖苷酶非酿酒酵母菌株筛选及其酿酒适应性分析

为筛选高产糖苷酶的本土非酿酒酵母菌株，以甘肃河西走廊葡萄酒各子产区主栽酿酒葡萄为原料，在自然酒精发酵过程中分离得到912株酵母菌；采用七叶苷培养基进行产β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase, β-Glu)菌株初步筛选，通过对硝基苯酚(p-nitrophenol,p-NP)法分别定量测定初筛菌株的β-Glu、α-L-阿拉伯糖苷酶(α-L-arabinofuranosidase, α-L-Ara)、α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase, α-L-Rha)、β-D-木糖苷酶(β-D-xylosidase, β-Xyl)活力，并对优选菌株进行葡萄酒酿造条件适应性分析。结果表明，HX-1、HX-2、HX-3和HX-4具有较高的糖苷酶活力，经WL培养基形态特征及26S rDNA D1/D2区域序列分析鉴定，HX-1和HX-3为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum),HX-2和HX-4为美极梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)。各糖苷酶的最适pH值为5.0～6.0,最适温度为40～50℃,高乙醇、高SO₂和...     

一株α-淀粉酶产生菌的分离、鉴定及产酶条件研究

为获得具有高产α-淀粉酶能力的菌株,从不同土壤环境中分离产酶菌株,对其进行分类鉴定和产酶条件研究。通过透明圈法初筛、3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法复筛分离得到产α-淀粉酶能力较强的菌株,利用形态学和生理生化反应特征,结合16S rDNA序列分析,对其进行分类鉴定;通过单因素试验和正交试验确定该菌株的最佳产酶条件。结果表明:从土壤环境中分离得到一株产α-淀粉酶菌株MF04,初步鉴定为蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus),其初始产酶活力为32.5 U/mL;产酶条件试验结果显示其最适培养温度为37℃,初始pH值为6.0,培养时间为72 h,经优化后液体发酵得到的粗酶液酶活力为60.2 U/mL,是优化前的85.2%。因此分离得到菌株MF04在工业生产中具备潜在开发价值。     

里氏木霉91－3纤维素酶产生条件的研究

里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）Ａ＿３经亚硝基胍和紫外线复合处理，获得一株纤维素酶高产菌株９１－３。该菌株在最适固态发酵条件下，纤维素酶滤纸酶活力为１７０ｕ／ｇ曲，产酶水平是出发菌株的１．６倍。酶作用的最适条件为ｐＨ４．８，５０℃；ｐＨ稳定范围为３～７；９０℃处理７ｍｉｎ，酶活保存率为９１．６４％；室温放置半年，酶活保存率在９０％以上，室温放置一年，酶活保存率在８０％以上。     

里氏木霉91－3纤维素酶产生条件的研究

里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）Ａ＿３经亚硝基胍和紫外线复合处理，获得一株纤维素酶高产菌株９１－３。该菌株在最适固态发酵条件下，纤维素酶滤纸酶活力为１７０ｕ／ｇ曲，产酶水平是出发菌株的１．６倍。酶作用的最适条件为ｐＨ４．８，５０℃；ｐＨ稳定范围为３～７；９０℃处理７ｍｉｎ，酶活保存率为９１．６４％；室温放置半年，酶活保存率在９０％以上，室温放置一年，酶活保存率在８０％以上。     

低聚木糖产生菌的选育研究

黑曲霉能分解玉米蕊木聚糖并产生低聚糖,以黑曲霉ＨＧ１１为出发菌株,经紫外线,亚硝基胍处理,获得一高产低聚木糖菌株ＨＧ１１－１８－８＾＃。该菌株具有稳定遗传性能,在最适发酵条件下,木二糖相对於木聚糖转化率为６８．８％,比原菌株提高了１６１．５％。     

产β-糖苷酶菌株的筛选及酶活的研究

利用对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷为底物筛选酿酒酵母菌,得到1株高产糖苷酶的酿酒酵母菌。以该菌株作为实验菌株,研究该菌株的酶活特性,对酿酒酵母菌酶活性测定条件进行研究。通过单因子试验,确立了该菌株发酵对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷酶的最适培养条件：pH4．0,温度为40℃,发酵时间为6h。高浓度的葡萄糖、果糖对酶活没有抑制作用,酒精度超过14％vol时对产酶有抑制作用。     

L—异亮氨酸产生菌的选育

以黄色短矸菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＡＴＣＣ１４０６７为出发菌株，经硫酸二乙酯（ＤＥＳ），紫外线（ＵＶ）和亚硝基胍（ＮＴＧ）逐级诱发处理，α－氨基－β－羟基戊酸（ＡＨＶ），Ｓ－２－氨基乙基－Ｌ－半胱氨酸（ＡＥＣ）磺胺胍（ＳＧ），乙硫氨酸（Ｅｔｈ）α－氨基丁酸（α－ＡＢ），异亮氨酸氧肟酸（ＩｌｅＨｘ）等氨基酸结构类似物及琥珀酸主碳源平板定向筛选，获得一株Ｌ－异亮氨酸高产菌ＺＱ－４     

低聚木糖产生菌的选育研究

黑曲霉能分解玉米蕊木聚糖并产生低聚糖,以黑曲霉ＨＧ１１为出发菌株,经紫外线,亚硝基胍处理,获得一高产低聚木糖菌株ＨＧ１１－１８－８~＃。该菌株具有稳定遗传性能,在最适发酵条件下,木二糖相对於木聚糖转化率为６８．８％,比原菌株提高了１６１．５％。     

葡萄酒酿造乳酸菌的分离鉴定及糖苷酶活分析

从自然发酵葡萄酒中分离出1株乳酸菌,通过形态观察和分子生物学鉴定,评价乳酸菌的α-L-阿拉伯糖苷酶活、α-L-鼠李糖苷酶活性和β-D-葡萄糖苷酶活性。结果显示,分离菌株为短乳杆菌,其具有α-L-阿拉伯糖苷酶活性、α-L-鼠李糖苷酶活性和β-D-葡萄糖苷酶活性,且在生长平台期酶活较高,主要存在于菌株胞内和完整的细胞中。不同碳源对菌株的上述3种酶活的影响也不同,与葡萄糖为碳源相比,纤维二糖、熊果苷对菌株β-D-葡萄糖苷酶活有一定的促进作用,而对α-L-阿拉伯糖苷酶活有一定的抑制作用;熊果苷对菌株α-L-鼠李糖苷酶活有促进作用,而纤维二糖对菌株α-L-鼠李糖苷酶活有抑制作用。本研究结果为开发新的葡萄酒酿造乳酸菌株及提高葡萄酒品质提供了理论参考。     

啤酒酿造用复合酶的研制

从一系列枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）和淀粉液化芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）出发，经筛选和诱变选育，得到一株淀粉液化芽孢杆菌突变株（ＷＬ－ＢＡ－ｌ），该菌株经三角瓶摇瓶和２０Ｌ发酵后，在３０００Ｌ标准通风罐上进行试验，菌株发酵周期短，发酵液中β－葡聚糖酶约为１２０ｕ／ｍｌ，α－淀粉酶约１５０ｕ／ｍｌ，蛋白酶约１８００ｕ／ｍｌ．发酵液经压滤浓缩后制得液体酶制剂。     

胆固醇氧化酶发酵研究

对从土壤中筛选到的菌株ＤＧＣ－００７进行ＵＶ诱变,选育到菌株ＤＧＣ－０４８．对影响突变株产酶的条件进行了优化,初步确定了ＤＧＣ－０４８合适的产酶摇瓶培养基组成．在发酵温度为３０℃,培养基起始ｐＨ７．５～８．０的条件下,接种量１０％,发酵４８ｈ,产酶可达３５０μｍｏｌ／（ｍｉｎ·Ｌ）     

多重抗药性突变株中α－淀粉酶高产菌株选育

以解淀粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓａｍｙｌｏｌｉｑｅｆａｃｉｅｎｓ）Ａ－４为出发菌株，经诱变处理，选育多重抗药性突变株。研究结果表明，抗药性突变株α－淀粉酶产量提高的正变率和正变幅度明显大于非抗药性突变株，负变率和负变幅度也较高。经ＮＴＧ和ＮＴＧ－ＵＶ诱变处理，获得一株林可霉素、Ｄ－环丝氨酸和万古霉素多重抗性突变株ＬＣＶ＿５（Ｌｉｎ￣ｒ，Ｃｓ￣ｒ，Ｖｍ￣ｒ），其α－淀粉酶活力比出发菌株Ａ－４提高３２．５％，发酵周期短，摇瓶为４０ｈ，酶活力达４６１ｕ／ｍｌ．     

酸菜汁中乳酸菌的分离,鉴定及应用

从酸菜汁中分离出一株产乳酸力强，发酵无异味的菌株，经鉴定为植物乳杆菌，其产酸量达２．０％，而自然发酵菜汁中的产酸率为０．８％，产酸率提高了２．５倍，经正交实验，确定其最佳发酵条件为：温度３５℃，发酵时间４８ｈ，后，采用液体深层发酵，经小规模发酵试验，白菜经处理后，接入ＬＰ－８菌株和酸菜发酵优质菌群，发酵温度为３５℃，４８ｈ，酸度可达１．８％，且发酵成熟，口味自然，无异味，效果很好。     

L-异亮氨酸的发酵条件

从黄色短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＡＴＣＣ１４０６７出发，选育获得一株Ｌ－异亮氨酸高产菌ＺＱ－４．试验结果证明，生物素是ＺＱ－４菌株唯一必需生长因子，生物素或玉米浆用量分别为５０μｇ／Ｌ和２０ｍＬ／Ｌ时可得到较高的产酸率。为了获得较高的Ｌ－异亮氨酸积累量，培养基中葡萄糖质量浓度为１４０ｇ／Ｌ，硫酸铵用量为４０ｇ／Ｌ时较为适宜；以适当的摇瓶装液量改善通风状况可明显提高产酸率。在适宜的发酵条件下，ＺＱ－４经摇瓶发酵培养３ｄ，Ｌ－异亮氨酸积累量可达２８～３０ｇ／Ｌ．