蜜环菌饲料的研制

对蜜环菌饲料制作的工艺进行了优化研究，研究表明，当采用最佳培养条件时，发酵液中多糖含量高，制成的成品饲料含多糖为0．296mg/mL，氨基酸为1．6g/L，蛋白质为44．9mg/L，当发酵液中添加5．5％蔗糖，0．1％柠檬酸及0．05％黄原胶等添加剂时，可以得到色、香、味俱全的营养保健饮料。     

固态发酵生产蜜环菌饮料

以蜜环菌固态发酵物为原料制得一种蜜环菌饮料。以蜜环菌固态发酵物为原料,提取其中的多糖等营养和药效成分,进行风味调配,通过正交试验和感官评价的方法确定蜜环菌饮料的配方。该发酵饮料的培养基配方为:白砂糖1.5%,大米80%,黄豆1%,麸皮10%,红薯7.5%;饮料配方为:蜜环菌发酵液添加比例为30%、白砂糖为20 g/L、柠檬酸0.6 g/L、黄原胶0.2 g/L,测得成品饮料中各成分的含量为:多糖0.049 mg/mL,还原糖0.042 mg/mL,蛋白质53.0 mg/mL,氨基酸1.226 mg/mL。饮料的感官指标、理化指标和微生物指标均达国家标准。     

蜜环菌发酵保健饮料的研制

蜜环菌(Armillaria mellea Quel)是同兰科天麻互为寄生的食药兼用真菌，本项目对蜜环菌发酵保健饮料研制工艺进行了研究。结果表明，采用最佳工艺条件，发酵液中多糖含量高，添加6％复合甜味剂、0．1％L-乳酸及0．05％海藻酸钠等配制成饮料，可得多糖含量为0．3mg／mL，氨基酸为1．5g／L，蛋白质44mg／mL，色香味俱全的营养保键饮料。     

蜜环菌多糖生产培养基的研究

进行了蜜环菌深层发酵产胞外多糖的培养基的研究,研究结果表明：以豆粕粉作氮源时,菌丝得率最高,以麸皮作氮源时,多糖产量最高;红薯粉为蜜环菌菌丝生长和多糖产量的最适碳源,最适培养基配方为：红薯粉3%,葡萄糖1%,豆粕粉1.5%,KH2PO40.15%,机械搅拌对菌丝的生长和多糖的产生都不利;接种后当即上摇床比接种后静置一段时间再上摇床的菌丝干重及多糖含量都多;培养基中加1%的乙醇对菌丝的生长和多糖的产生都不利;600ml发酵试验中,发酵液多糖含量可达0.485mg/ml,菌丝干重可达20.8g/L。当发酵液pH降为5.0左右,颜色开始变为棕褐色,菌丝亮光由强变弱时,即可终止发酵。     

蜜环菌多糖分离纯化及性质的研究

进行了蜜环菌胞外糖分离纯化及性质的研究，得到如下结果：发酵液浓缩，三倍体积乙醇沉淀、75%乙醇洗涤、Sevage法除蛋白、20%H2O2脱色，得到的粗多糖上DEAE-纤维素（OH^-）柱层析，用蒸馏水、0.05-0.5mol/L的NaCl梯度洗脱，可以得到中性多糖和几咱酸性多糖。中性多糖上SephadexG-150柱层析，用蒸馏水洗脱，得到一种多糖A，多糖A为纯多糖。在400-4000cm^-1范围内摄得多糖A的红外光谱清明其含有β-糖苷键。多糖A的完全酸水解液用硅胶GF254薄层层析，氯仿-甲醇（60：40）与丙酮-水（96：4）展层，以及纸层析，丙酮-水（96：4）展层，苯胺-二苯胺显色，证明其组成单糖为葡萄糖。考马斯亮兰G-250反应阴性、茚三酮反应阴性、双缩脲反应阴性，聚丙烯酰胺凝胶电泳后、考马斯亮兰R-250染色无蛋白质带，都证明其不含蛋白质。     

假蜜环菌胞内多糖的发酵研究

对假蜜环菌进行发酵条件的优化,确定其最适培养基为葡萄糖3g/L,蔗糖7g/L,蛋白胨5g/L,酵母膏3g/L,K2HPO40.1g/L,KH2PO4 0.5g/L,MgSO4 0.5g/L,pH6.4。最适培养条件为27℃培养5d,通气量为(200mL培养基/500mL三角瓶),160r/min。在最适培养基及培养条件下,假蜜环菌胞内多糖的产量可达298.35mg/L,菌体生物量可达314.3g/L。     

利用啤酒废酵母深层发酵培养假蜜环菌的研究

明确了假蜜环菌试验菌株摇瓶培养条件为:碳源浓度25g/L,氮源浓度0.336g/L,初始pH4.0,种龄为7d的液体种子接种量为10%(V/V),在27℃,摇床转速140r/min。对照此培养条件,确定假蜜环菌深层发酵培养基的组成为:经过破壁处理啤酒废酵母粉4.8g/L,葡萄糖24g/L。相同培养条件下,菌丝体收获量为干重13.5g/L,生物量高于利用蛋白胨培养基扩大培养的产量:13.0g/L。     

利用啤酒废酵母深层发酵培养假蜜环菌的研究

明确了假蜜环菌试验菌株摇瓶培养条件为:碳源浓度25g/L,氮源浓度0.336g/L,初始pH4.0,种龄为7d的液体种子接种量为10%(V/V),在27℃,摇床转速140r/min。对照此培养条件,确定假蜜环菌深层发酵培养基的组成为:经过破壁处理啤酒废酵母粉4.8g/L,葡萄糖24g/L。相同培养条件下,菌丝体收获量为干重13.5g/L,生物量高于利用蛋白胨培养基扩大培养的产量:13.0g/L。      

固体发酵蜜环菌多糖提取工艺的研究

研究了从固体发酵蜜环菌菌丝体中提取水溶性多糖的工艺。通过比较,证明了冷冻能提高多糖的提取效率;通过单因素实验,确定水溶性多糖的提取工艺;正交试验进一步优化提取工艺：即浸提时间2．5h、浸提90℃、固液比1：5为最佳提取条件。     

蜜环菌多糖提取工艺的优选

探讨采用热水浸提法和超声波提取法提取蜜环菌多糖的工艺条件。研究结果表明:水提法的最佳工艺参数为:料液比1:50,温度40℃,提取时间6h。此条件下,得率为5.96%;超声波提取法的最佳工艺参数为:料液比为1:30,功率为360W,超声35min,超声提取的得率为5.38%。由此可知,热水浸提法优于超声波提取法。     

灵芝,酵母“双菌”发酵饮料的研制

采用灵芝菌深层培养滤液再继啤酒酵母发酵制成“双菌”发酵饮料。经测定，每１００ｍｌ饮料中总糖含量达２．４８ｇ，粗蛋白量为４２．４３ｍｇ，游离氨基酸含量为３５．７２ｍｇ。同时，该饮料符合中国食品卫生标准。     

“饮中王”蜜环菌营养保健饮料研制报告

利用蜜环菌的疗效作用和蜂蜜、果汁的保健营养作用，融合饮料的配制技术研制了一种饮料，商品名“饮中王”毒理试验表明，“饮中王”未见中毒症状，属无毒、无遗传、无毒性作用物质，并保留了蜜环菌本来的保健作用。     

蜜环菌对硒的富集及多糖中硒的分布

采用不同的硒浓度对蜜环菌进行了补硒培养,研究了蜜环菌对硒的积累和存胞内外多糖中的分布.结果表明:菌丝体硒含量与多糖硒含量随着硒处理浓度的增加而增加,但硒积累量达到20mg/L后趋于稳定,胞内多糖的硒积累量达到10mg/L后趋于稳定,而胞外多糖硒积累量在硒处理浓度超过5mg/L后仍有增长趋势.     

蜜环菌水溶性多糖的抗氧化活性研究

目的:通过蜜环菌水溶性多糖对·OH、O2-·和DPPH·三种自由基清除作用,评价其抗氧化性能,为蜜环菌药物制剂的活性研究及其产品的质量检测标准提供重要参考。方法:经热水浸提、除蛋白等步骤分离纯化到水溶性多糖,以抗坏血酸和TBHQ为对照,采用分光光度法评定其抗氧化特性。结果:蜜环菌水溶性多糖对三种自由基均有不同程度的清除活性,对三种自由基的清除能力是DPPH·>·OH>O2-·,当清除率达到90%以上时,清除DPPH·、·OH和O2-·的所需的多糖浓度分别为1.0、5.0、6.0mg·mL-1,蜜环菌多糖的清除能力显著。结论:蜜环菌水溶性多糖在体外具有较明显的抗氧化活性,在实验浓度范围内,抗氧化效果与浓度呈显著的线性相关。作为一种重要的天然活性物质,蜜环菌多糖的抗氧化活性和抗衰老作用将具有较高的应用价值。      

蜜环菌水溶性多糖的抗氧化活性研究

目的:通过蜜环菌水溶性多糖对·OH、O2-·和DPPH·三种自由基清除作用,评价其抗氧化性能,为蜜环菌药物制剂的活性研究及其产品的质量检测标准提供重要参考。方法:经热水浸提、除蛋白等步骤分离纯化到水溶性多糖,以抗坏血酸和TBHQ为对照,采用分光光度法评定其抗氧化特性。结果:蜜环菌水溶性多糖对三种自由基均有不同程度的清除活性,对三种自由基的清除能力是DPPH·>·OH>O2-·,当清除率达到90%以上时,清除DPPH·、·OH和O2-·的所需的多糖浓度分别为1.0、5.0、6.0mg·mL-1,蜜环菌多糖的清除能力显著。结论:蜜环菌水溶性多糖在体外具有较明显的抗氧化活性,在实验浓度范围内,抗氧化效果与浓度呈显著的线性相关。作为一种重要的天然活性物质,蜜环菌多糖的抗氧化活性和抗衰老作用将具有较高的应用价值。     

蜜环菌产漆酶的发酵条件研究

对蜜环菌(Amillariella mellea)产漆酶的发酵条件作了研究。结果表明蜜环菌产漆酶的最佳培养基成分为:玉米粉30g/L,豆粕12g/L,微量元素混合液40mL/L,C/N2.5,吐温801g/L,木屑0.01g/L,CuSO4·5H2O0.05mmol/L。最佳发酵条件为培养基初始pH5.0,培养基装量为250mL三角瓶中35mL培养液,25℃条件下振荡培养(180r/min)18d。     

蜜环菌多糖分离纯化及性质的研究

进行了蜜环菌胞外多糖分离纯化及性质的研究，得到如下结果：发酵液浓缩，三们体积乙醇沉积，75％乙醇洗涤、Sevage法除蛋白、20％H2O2脱色，得到的多粗多糖上DEAE－纤维素（OH^-）柱层析，用蒸馏水、0．05－0．5mol/l的NaCl梯度洗脱，可以得到中性多糖和几种酸性多糖，中性多糖上SephadexG-150柱层析，用蒸馏水洗脱得到一种多糖A，多糖A显纯多糖，400－4000cm^-1范围内摄得多糖A的红外光谱表明其含有β－糖苷健。多糖A的完全酸水解液用硅胶GF254薄层层析，氯仿－甲醇（60：40）与丙酮－水（96：4）展层，以及纸层析，丙酮－水（96：4）展层，苯胺－二胺显色，证明其组成单糖为葡萄糖，考马斯亮兰G－250反应阴性，茚三酮反应阴性，双缩脲反应阴性，聚丙烯酰胺凝胶电泳后，考马斯亮兰R－250染色无蛋白质带，都证明其不含蛋白质。     

硒对蜜环菌的作用规律及其在多糖中的积累

采用不同硒浓度对蜜环菌进行了补硒培养,研究了硒对蜜环菌生长、蜜环菌多糖产率的影响以及蜜环菌对硒的积累。结果表明:浓度为10mg/L以下的硒能够促进蜜环菌的生长,超过该浓度之后,硒对蜜环菌的生长产生阻碍;在所设计的浓度范围内,硒能够促进蜜环菌胞内外多糖的合成和分泌。蜜环菌胞内外多糖中硒质量分数都随着硒处理浓度的增加而增加,但硒积累量变化趋势不尽相同。胞内多糖的硒积累量在硒处理浓度为10mg/L时后趋于稳定;胞外多糖硒积累量在硒处理浓度超过5mg/L后仍有增长趋势。