怎样杜绝种子带菌?

各级种子及其培养基都必须事先经过严格的无菌检查,合格后才能接入下一级。1空白斜面必须37℃无菌培养48h后,经严密检查,确认为无菌可靠,才可将菌种接于空白斜面内,以确保纯种培养。2活化好的斜面种经仔细观察菌落形态正常无异后才可接入一级种子。3一级种子培养后,经镜检确认无杂菌,才可接入二级种子(或放冰箱内,待平板检查确认无杂菌后接种)。     

微生物试验法讲座(13)

三酒母、发酵及成品的检查(一)样品的一般检查法1.镜检法(1)直接法先在载玻片中央,用滴管加无菌水一滴。检样如系纯碎培养,则从培养液中用接种环勾取一环;若是现场,则应将酒母或醪液搅匀,再用这种环勾取检样一环(勿过多),否则不易检查),置载玻片的无菌水滴上,涂抹后轻轻盖上盖玻片避免气泡产生,用显微镜直接镜检,观察酵母菌的大小和形状及有无其它杂菌。     

消除食品背景杂菌干扰的金黄色葡萄球菌分离方法的改进

采用国家标准GB4789.10-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》对冷冻肉及肉制品进行金黄色葡萄球菌分离鉴定,受背景杂菌干扰严重,产生大量假阴性结果,金黄色葡萄球菌的分离率偏低.为了解决这一问题,本研究通过改进国标方法,使用质量分数10％氯化钠肉汤进行增菌,增菌后划线于Baird-Parke...     

啤酒生产过程杂菌快速检测方法

传统的啤酒生产中的杂菌(主要指细菌)检测方法,为平板计数法。把定量的待测样(以液体为例)与培养基混匀,制成平板培养。培养温度为25℃和37℃,培养时间为24～48小时。待平板上长出肉眼可见的菌落计数,然后按加入样量计算确定1ml所测样品的杂菌数。     

啤酒生产过程杂菌快速检测方法

<正> 传统的啤酒生产中的杂菌(主要指细菌)检测方法,为平板计数法。把定量的待测样(以液体为例)与培养基混匀,制成平板培养。培养温度为25℃和37℃,培养时间为24～48小时。待平板上长出肉眼可见的菌落计数,然后按加入样量计算确定1ml所测样品的杂菌数。      

食品中单核细胞增生李斯特氏菌两种定量检测方法的比较

研究比较不同杂菌污染条件下平板计数(Plate counting)法和稀释培养计数(Most probable number counting)法检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)含量的准确性,并探讨冷藏和冷冻食品,MPN保存过程中LM的数量增长情况。采用国标法中的平板计数法和MPN计数法对不同程度人工污染杂菌的牛奶、凉拌菜和盐水鸭分别进行LM含量的检测,并用MPN计数法对冷藏(2~8℃)和冷冻(-20℃)条件下保存的牛奶、凉拌菜和盐水鸭进行LM含量的检测。结果表明,杂菌染菌浓度较低时(LM含量与杂菌含量比为10:1), LM检出限较高(≥ 100 CFU/g (mL)),平板计数法检测LM含量的准确性较高,而杂菌染菌的初始浓度较高时(LM含量与杂菌含量比为1:10),LM检出限较低(< 100 CFU/g (mL)),MPN计数法检测LM含量的准确性较高;牛奶、凉拌菜和盐水鸭在经过不同冷藏和冷冻保存时间后LM数量对比差异有统计学意义(p<0.05),且食品中LM数量随着冷藏和冷冻保存时间的增加而增多。     

大肠菌群最近似数(MPN)检索表编制的探索

大肠菌群最近似数(MPN)检验中有一张“每100毫升(克)检样中大肠菌群最近似数(MPN)检索表”,但是无编制说明,现将探索的结果提供同志们参考。微生物的计数法,一般除直接显微镜计数法及平板培养法计算活菌数外,尚有液体稀释法计数。大肠菌群这类有特殊生理活动的微生物,它们的活性可以很容易地用液体培养法检查出来,因此利用一系列稀释液接     

西梅发酵乳酸菌的筛选、鉴定及其抗氧化特性研究

采用传统平板划线的方式分离纯化西梅原浆中的乳酸菌。通过溴甲酚紫MRS固体培养基和西梅汁固体培养初步筛选出5株产酸性能较好,适合西梅发酵的乳酸菌种,经生理、生化鉴定和16S rDNA分子生物学鉴定,最终确定4株菌为屎肠球菌,1株菌为肠膜明串珠菌。测定5株乳酸菌在MRS肉汤中的生长性能、产酸性能以及菌种自身抗氧化性能,结果肠膜明串珠菌E2在MRS肉汤中生长迅速且产酸性能较好,肠膜明串珠菌E2和屎肠球菌C2的完整乳酸菌细胞悬液具有较好的抗氧化能力。以总酚含量、DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率为指标,对比5种乳酸菌在西梅浆中的发酵性能,结果肠膜明串珠菌E2更适合西梅浆的发酵,屎肠球菌C2次之。     

整鸡中弯曲菌定量检测方法的建立与优化

目的建立一种简便、灵敏、稳定的整鸡中弯曲菌定量检测方法,并用北京地区市售整鸡样品进行验证。方法分别对37株鸡肉中常污染的背景杂菌、24株弯曲菌菌株进行抗生素敏感性测试,对弯曲菌分离用选择性培养基及抗生素添加剂进行优化和改进;用77份人工定量污染弯曲菌的鸡淋洗液进行添加回收实验,以生长指数评价选择性平板对鸡肉样品中背景杂菌的抑制情况和弯曲菌生长状况影响。结果在改良后的Karmali和Preston选择性平板上,弯曲菌生长状态稳定,并可有效抑制鸡肉样品中常见的背景干扰杂菌的生长繁殖,此方法对鸡肉中弯曲菌检出的灵敏度可达2.5 CFU/g。结论所建方法灵敏度高、操作简便、计数准确,Karmali和Preston平板组合后可有效提高鸡肉中弯曲菌的检出率,适用于禽类食品中弯曲菌的定量检测。     

怎样取无菌样? 怎样确定是否染菌

在取无菌样时,要注意取样操作中造成的污染而产生的染菌,因为一般车间空间含有的杂菌较多,在自然环境下取样,极易从空气中污染杂菌,因此取样动作要敏捷,取样口要事先用蒸汽充分灭菌,取样时要防止发酵液溅在棉塞上,要迅速塞上棉塞。还应注意关闭周围窗户及排风扇等,以减少空气流动。要确定是否染菌不能先看检查结果,要认真分析。所取样品前后必须有两只或两只以上     

双歧杆菌酸奶的研制

早在70年代，国外双歧杆菌食品就已形成商业化，并在市场上十分畅销。现将双歧杆菌酸奶的研制介绍如下，供企业生产参考。1．设备、原料、苗种1．1设备（略）1．2原料鲜牛奶、白砂糖、葡萄糖1．3菌种双歧杆菌、保加利亚乳杆菌赠热链球菌。2工艺2．1工艺流程2．2制作方法2．2．1菌种制备（以双歧杆菌为例）将购进的菌种接种于事前备好的深层牛奶试管培养基中；37℃培养过夜。出现正常凝乳后，取试管下层培养物在乳清固体平板培养基上划线分离。划线后的平板立即放入真空包装袋进行真空封口。37℃培养18h。或将划线平板置于厌氧罐内培养。将长…     

细胞壁溶酶

酵母及小球藻可用作食品与饲料。但其细胞壁不易被消化,因之需先经细胞壁溶酶处理。以增进其可消化性。细胞壁溶酶亦可用于破坏酵母、霉菌及其它败坏性细菌、以保藏食品。 R.Kobayashi等(美国专利3,969,189及4,032,663)以二株薄膜革菌属(Pellicularia)霉菌,即丝核薄膜革菌(P.Eilamentosa,ATCC14701)及佐佐木薄膜革菌(P.Sasakii-ATCC13289)的细胞壁水解酶。这种复合酶由薄膜革菌于培养中产生及积聚,能水解各种微生物的细胞。用滤过法或离心法取得培养肉汤的上清液,冻干成酶的粗制品。如为固体培养物,则可用水或缓冲到pH4.0～7.0的水抽出后应用。     

减少酱曲杂菌 提高酱油质量

酱油曲是以蛋白质、淀粉等有机营养物为原料,接种AS3.591(即沪酿3.042)米曲霉,在敞口接触空气的温、湿状况下进行的,因此极易感染生产菌以外的各种杂菌。尤其是当温湿度管理不善,通风条件掌握不当的情况下,米曲霉对杂菌抵抗力就弱,更易杂菌生长,引起成曲酶活力不高,影响原料利用率。同时,杂菌的菌体及其代谢产物转移到酱醪中后,还会影响酱油的风味,造成酱油混浊,使成品酱油质量明显下降。杂菌中的各种菌有的产酸、有的产氨,若过量的繁殖势必会影响米曲霉生长繁殖。因此,要严格控制杂菌污染,必须先了解杂菌米源、种类及其危害,然后才能对症下药,做到药到病除。     

食醋中絮状物产生菌的分离鉴定及检测方法研究

通过液体富集培养、平板涂布及划线的方式,结合验证试验,从食醋中分离出絮状物的产生菌,初步鉴定为葡糖杆菌属,并对该菌的检测方法进行正交试验,确定以马铃薯液体培养基进行检测,最佳参数为:葡萄糖3g/100mL,pH值6.0,培养温度28℃。     

红茶菌可以继续饮用

许多同志饮用茶菌后自觉于身体有益,但见有些报道说茶菌液中有杂菌或有害物质,因而产生疑虑,纷纷来信或来访,询问茶菌是否可以饮用及如何合理培养.《食品科技》编辑同志嘱我写此文说明自己的看法,兼以答复关心茶菌的同志.     

市售卤牛肉中腐败菌的分离鉴定

为了有针对性地控制本地市售卤牛肉中微生物污染,延长产品货架期,采用平板划线分离法对卤牛肉中的优势腐败菌进行分离筛选。再采用传统微生物培养方法,根据细菌的菌落形态、菌体形态、革兰氏染色等特征,结合16S rDNA序列分析方法,对分离筛选出的菌株进行鉴定。结果表明,引起本地市售卤牛肉腐败变质的优势腐败菌是魏斯氏菌(Weissella viridescens strain WM33)和佐氏库特氏菌(Kurthia zopfii)。     

由分散广泛杆菌(Panloca dispersa)引起的食物中毒报告

1989年10月22日,在江西省新建县生米乡发生一起因食用变质梨罐头引起的中毒死亡事件。二人进食,二人中毒发病,一人死亡。根据流行病学调查,细菌学检验和毒力测定,确诊为分散广泛杆菌(Panloca dispersa)引起。1 材料与方法材料吃剩的梨罐头瓶一只。方法霉菌和致病菌分离培养,按中华人民共和国国家标准进行。 2 结果2.1 霉菌培养无霉菌生长。2.2 致病菌分离在血琼脂、普通琼脂及PDA 琼脂平板上均直接分离到表面光滑、湿润、边绿整齐的园形菌落。呈优势生长,无其它杂菌菌落。在 PDA 琼脂平板上,沿划线呈     

用生物图谱技术筛选谷氨酸生产菌的原理和要点是什么？

用生物图谱技术筛选谷氨酸生产菌的原理是：用完全培养基平板培养被筛选的菌,培养完毕用牙签同时对应接到两个补充培养基的平板上,待菌体生长后,在其中一个平板上再倒人混有谷氨酸缺陷型菌的基本培养基（加纯化琼脂）。如在被筛选的菌种周围长出谷氨酸缺陷型菌来,就证明该菌是谷氨酸生产菌,即可从另一个平板上挑出对应的菌落。     

沙门菌传代中(氟)喹诺酮类抗生素筛选株药敏性及相关基因突变和表达

目的研究在不同浓度(氟)喹诺酮类抗生素存在条件下,沙门菌在传代时得到的筛选株中与耐药性相关部分基因的变异和表达水平变化规律及其与耐药性间的关联性。方法使用含有一定浓度(氟)喹诺酮类抗生素的肉汤培养基对沙门菌进行培养,在含有相同浓度同类抗生素的平板上划线筛选突变株,微量肉汤稀释法测定筛选株的药敏性,聚合酶链式反应(PCR)结合DNA测序确定喹诺酮耐药决定区(quinolone resistance-determining region,QRDR)基因突变,实时荧光定量PCR(real-time qPCR)法检测外排泵AcrAB-TolC编码基因表达水平。结果沙门菌(ATCC 14028s)在含有不同代、不同浓度(氟)喹诺酮类抗生素的LB培养基中培养、筛选后,筛选株对抗生素耐受性均有不同程度增加。萘啶酮酸第5～7代筛选株gyrA突变,发生Asp87Tyr变异;环丙沙星第4～7代筛选株gyrA突变,发生Asp87Asn变异;加替沙星、左氧氟沙星和德拉沙星第1～7代筛选株gyrA中均未检出核苷酸突变。随着抗生素浓度增加,各抗生素相应筛选株中外排泵AcrAB-TolC编码基因表达水平较原始菌株增加,差异有统计学意义(P0.05),第7代菌株acrAB-tolC表达量间差异无统计学意义(P0.05)。(氟)喹诺酮类抗生素对不同代筛选株的最小抑菌浓度(MIC)与其对沙门菌(ATCC 14028s)的MIC值比值、gyrA突变、acrAB-tolC表达水平与抗生素作用浓度和筛选代数间呈正相关。结论在(氟)喹诺酮类抗生素作用下,沙门菌可通过QRDR基因突变及增加acrAB-tolC表达适应抗生素胁迫环境;新一代(氟)喹诺酮类抗生素作用于沙门菌时,菌株QRDR靶位点突变概率降低;多次重复作用后,菌株acrAB-tolC表达量虽然增加,但表达量间差异无统计学意义(P0.05),避免了因突变导致耐药性的进一步增强。     

椰毒假单胞菌酵米面亚种选择性分离培养基的比较研究

目的比较4种椰毒假单胞酵米面亚种选择性分离培养基(马铃薯葡萄糖琼脂,PDA;改良马铃薯葡萄糖琼脂,mPDA;椰毒假单胞菌酵米面亚种分离琼脂,PCFA;银耳卵黄氯霉素琼脂,TYCA)的分离效果,为修订GB/T4789.29—2003《食品卫生微生物学检验椰毒假单胞菌酵米面亚种检验》提供技术支持。方法接种椰毒假单胞菌酵米面亚种于4种选择性分离培养基,观察各培养基上目标菌菌落形态,计算生长率;接种10种常见致病菌和环境中常见菌于4种选择性分离培养基,进行生长特异性试验;通过直接涂布和增菌划线的加标试验,验证这4种选择性分离培养基对粪便、食品和环境土壤等不同标本/样品中椰毒假单胞菌酵米面亚种的分离检出情况。结果 mPDA和PCFA能够分别抑制8种和6种致病菌的生长,且椰毒假单胞菌酵米面亚种的生长率都高于75%;在mPDA和PCFA上,目标菌与多数杂菌形态有明显区别,而在PDA和TYCA上,形态相近不易区分;在粪便、土壤和食品等不同标本/样品的直接涂布和增菌划线分离的加标试验中,mPDA和PCFA上的检出率均超过80%,明显高于PDA和TYCA。结论 mPDA和PCFA分离效果比原标准的PDA明显提高,建议在标准修订中增加此两种选择性分离培养基。