提取麦冬皂苷用酶的微生物筛选及其产酶条件

为提高麦冬总皂苷提取率,采用生物酶法提取麦冬总皂苷,筛选得到产酶微生物Absidiasp.O8s菌株.通过实验确定了该菌产酶的最适条件：诱导物为豆粕,诱导物浸出液在培养基中的体积分数为15%,发酵温度30℃,培养时间为5 d.     

麦冬多糖水解酶的微生物筛选及其产酶条件

为了提高生物酶法水解麦冬粗多糖的能力,采用单因素研究方法,对菌株及菌体发酵条件,菌株产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,产酶微生物为Absidiasp.O84s菌株;诱导物为麦冬浸出液,麦冬浸出液在培养基中的体积分数为20%,发酵温度30℃,培养时间为6 d:酶反应的最适条件为40℃,6 h,pH 5,底物质量浓度为10 mg/mL。黏度法测定得到麦冬粗多糖的平均分子质量为67 000 u,其水解产物的平均分子质量为39 000 u。     

麦冬多糖水解酶的微生物筛选及其产酶条件

为了提高生物酶法水解麦冬粗多糖的能力,采用单因素研究方法,对菌株及菌体发酵条件,菌株产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,产酶微生物为Absidiasp.O84s菌株;诱导物为麦冬浸出液,麦冬浸出液在培养基中的体积分数为20%,发酵温度30℃,培养时间为6 d:酶反应的最适条件为40℃,6 h,pH 5,底物质量浓度为10 mg/mL。黏度法测定得到麦冬粗多糖的平均分子质量为67 000 u,其水解产物的平均分子质量为39 000 u。     

黄芪皂苷糖苷酶产生菌的筛选及其酶反应条件

从Absida sp．A3r、A84r、A9r、A8r、A38r、ARr6株菌中筛选出了黄芪皂苷糖苷酶高产菌株，该酶能将多糖基的黄芪皂苷水解成低糖基的皂苷。通过实验确定了该黄芪皂苷糖苷酶的最适反应条件：反应温度，30℃；底物浓度，20mg／mL；反应时间，24h；pH，6．0。     

黄芪皂苷糖苷酶产生菌的筛选及其酶反应条件

从Absidasp.A3r、A84r、A9r、A8r、A38r、ARr6株菌中筛选出了黄芪皂苷糖苷酶高产菌株,该酶能将多糖基的黄芪皂苷水解成低糖基的皂苷。通过实验确定了该黄芪皂苷糖苷酶的最适反应条件:反应温度,30℃;底物浓度,20mg/mL;反应时间,24h;pH,6.0。     

发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件

研究了酶法水解黄姜薯蓣皂苷分子上的糖基,使皂苷水解生成无糖基、高活性皂苷元的条件。探讨了4种菌株对薯蓣皂苷糖基的水解能力,筛选出1种薯蓣皂苷酶高产菌株Absidia sp.s00,用于水解薯蓣皂苷。通过薄层层析法分析得到薯蓣皂苷酶解最佳反应条件为40℃p、H 5.0,反应30 h。在此最佳条件下进行酶反应,1 g黄姜薯蓣皂苷底物水解后,酶解产物经分离纯化,得薯蓣皂苷元0.1 g,采用高效液相色谱检测其纯度为90%以上。     

发酵产薯蓣皂苷酶的反应条件

研究了酶法水解黄姜薯蓣皂苷分子上的糖基,使皂苷水解生成无糖基、高活性皂苷元的条件。探讨了4种菌株对薯蓣皂苷糖基的水解能力,筛选出1种薯蓣皂苷酶高产菌株Absidia sp.s00,用于水解薯蓣皂苷。通过薄层层析法分析得到薯蓣皂苷酶解最佳反应条件为40℃p、H 5.0,反应30 h。在此最佳条件下进行酶反应,1 g黄姜薯蓣皂苷底物水解后,酶解产物经分离纯化,得薯蓣皂苷元0.1 g,采用高效液相色谱检测其纯度为90%以上。     

GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件

为提高Arthrobacter chlorophenolicus GS0202菌所产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rg3的能力,采用单因素研究方法,对菌体发酵条件,及其所产酶的酶反应条件进行了研究.结果表明,菌体发酵的最适培养基组成为胰蛋白胨10 g,酵母粉 5 g,氯化钠10 g,水1 L;诱导物为人参总皂苷,其加入量为3.2 mg/mL,培养温度为28 ℃;酶反应的最适条件为25 ℃,pH 4,底物质量浓度为3 mg/mL.     

GS0202菌产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶条件及其酶的反应条件

为提高Arthrobacter chlorophenolicus GS0202菌所产人参皂苷-β-葡萄糖苷酶水解人参皂苷Rb1生成人参皂苷Rg3的能力,采用单因素研究方法,对菌体发酵条件,及其所产酶的酶反应条件进行了研究。结果表明,菌体发酵的最适培养基组成为胰蛋白胨10 g,酵母粉5 g,氯化钠10 g,水1 L;诱导物为人参总皂苷,其加入量为3.2 mg/mL,培养温度为28℃;酶反应的最适条件为25℃,pH 4,底物质量浓度为3 mg/mL。     

麦冬多糖糖苷酶的分离纯化及其酶性质

分离纯化了Absidia sp.O84s菌产的麦冬多糖糖苷酶,并对其酶性质进行了研究。结果表明,酶蛋白的分子质量为72 ku,最适pH为5.0,在pH 4.0~8.0范围内稳定。最适反应温度为40℃,在20~55℃范围内稳定。Ca+、K+、Na+、Fe3+、Mg2+Zn2+对该酶活性没有影响,Cu2+对酶活力具有抑制作用。酶反应动力学参数Vmax=0.131 5 mmol/(h.L),Km=2.375 mmol/L。     

麦冬多糖的分离纯化及其组分的初步分析

采用高温水提取低温乙醇沉淀的方法得到麦冬粗多糖,使用葡聚糖凝胶柱Sephadex G-100对已提取的麦冬粗多糖进行分离纯化。将纯化所得的麦冬多糖完全水解,分别以木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖色谱纯为标准品,采用薄层层析法和高效液相色谱法对上述全水解产物进行比对分析。TLC和HPLC定性分析发现麦冬多糖中单糖组成主要是果糖和葡萄糖,以果糖和葡萄糖的质量浓度与HPLC峰面积的线性关系定量分析出其组分的含量。结果表明,浙江慈溪产麦冬中多糖的糖单元基本组成是果糖和葡萄糖,并确定了其摩尔比为12∶1。     

麦冬多糖糖苷酶的分离纯化及其酶性质

分离纯化了Absidia sp.O84s菌产的麦冬多糖糖苷酶,并对其酶性质进行了研究。结果表明,酶蛋白的分子质量为72 ku,最适pH为5.0,在pH 4.0~8.0范围内稳定。最适反应温度为40℃,在20~55℃范围内稳定。Ca+、K+、Na+、Fe3+、Mg2+Zn2+对该酶活性没有影响,Cu2+对酶活力具有抑制作用。酶反应动力学参数Vmax=0.131 5 mmol/(h.L),Km=2.375 mmol/L。     

麦冬多糖的分离纯化及其组分的初步分析

采用高温水提取低温乙醇沉淀的方法得到麦冬粗多糖,使用葡聚糖凝胶柱Sephadex G-100对已提取的麦冬粗多糖进行分离纯化。将纯化所得的麦冬多糖完全水解,分别以木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖色谱纯为标准品,采用薄层层析法和高效液相色谱法对上述全水解产物进行比对分析。TLC和HPLC定性分析发现麦冬多糖中单糖组成主要是果糖和葡萄糖,以果糖和葡萄糖的质量浓度与HPLC峰面积的线性关系定量分析出其组分的含量。结果表明,浙江慈溪产麦冬中多糖的糖单元基本组成是果糖和葡萄糖,并确定了其摩尔比为12∶1。     

麦冬多糖OPF-1的结构分析

分离纯化麦冬多糖,得到多糖组分OPF-1,并对其一级结构进行初步分析。水提醇沉法得到麦冬粗多糖,Sevage法除蛋白后经Sephadex G-100柱分离纯化得到OPF-1。运用完全酸水解和HPLC法测定麦冬多糖OPF-1的单糖组成;并采用高碘酸氧化、Smith降解、GC、IR等方法研究OPF-1的化学结构。结果表明,麦冬多糖OPF-1为果聚糖,其相对分子质量为48000,主要由2→1和2→6糖苷键连接的呋喃型果糖组成。该多糖中还含有少量的葡萄糖(果糖与葡萄糖的摩尔比为16∶1),可能连接在多糖的还原性末端。     

皂荚总皂苷提取工艺的优化研究

对水煎煮提取法、乙醇回流法和超声波提取法提取皂荚总皂苷的工艺进行了比较,并对超声波提取法进行了优化研究．结果表明,超声波提取皂荚总皂苷,提取率高,时间短,温度低,提取速率快．最佳提取工艺条件是,温度为40℃,时间为20min,溶剂量为皂荚质量的5倍．     

重组海参溶菌酶的表达及其性质

研究了重组海参(Stichopus japonicus)溶菌酶(SjLys)可溶性表达的发酵条件。采用多因素正交优选法,以摇瓶培养方式从培养基组分、发酵条件两个方面对重组海参溶菌酶进行研究,构建了高效分泌型表达重组海参溶菌酶工程菌。研究结果发现,30℃、140r/min、IPTG浓度0.3mmol/L、诱导后继续培养14h,目的蛋白分泌表达量可达到30~40mg/L,且产物以大量可溶性蛋白存在。