莲子多糖分离纯化的研究

为了研究莲子多糖的分离纯化工艺,文章采用蛋白酶和sevag试剂相结合的方法脱蛋白,采用DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-20葡聚糖凝胶柱对莲子多糖进行分离纯化,紫外-可见光谱扫描法进行纯度鉴定。结果表明,莲子多糖的脱蛋白最佳工艺为:酶解温度为50℃、酶解时间为50 min和木瓜蛋白酶添加量为120 U/m L,在此条件下,蛋白质的脱除率和多糖的损失率分别为74.25%和5.88%。经过sevag试剂处理2次后,此时蛋白质脱除率为85.5%,多糖损失率为7.5%。莲子多糖为单一组分,该多糖组分在260nm和280nm附近无蛋白质和氨基酸的特征吸收峰,说明该组分为纯度较高的多糖。     

霍山铁皮石斛多糖的脱蛋白工艺及结构分析

优选霍山铁皮石斛多糖脱蛋白工艺,并对其进行分离纯化及结构分析。以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,比较Sevag法、酶法及酶-Sevag法3种脱蛋白方法。结果表明,酶-Sevag法脱蛋白效果最佳,蛋白脱除率为81.58%,多糖损失率为15.63%。采用DEAE-52纤维素柱、Sephadex G-100凝胶柱分离纯化石斛多糖,得活性组分DOPA-1;采用紫外扫描光谱、高效液相色谱鉴定DOPA-1为均一多糖;采用气相色谱分析表明组分单糖由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成(各单糖的物质的量比为1∶0.42∶0.27);采用红外光谱和刚果红实验分析糖链结构表明,DOPA-1有典型的糖类特征吸收峰,存在β-D-甘露吡喃糖苷,且具有三股螺旋构象。     

根瘤菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

以根瘤菌发酵液为原料,提取纯化发酵液中胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS),并对其多糖组分进行分析。采用木瓜蛋白酶与sevage法结合脱蛋白,并利用柱层析法对胞外多糖进行单组分离和纯化,分别得到EPS 1-1、EPS 2-1、EPS 3-1、EPS 4-1和EPS 5-1等5种相对较纯的单一组分。分别采用不同色谱法对上述各单一组分的纯度、结构、相对分子量及单糖组成进行分析和测定,表明各个组分均具有多糖特征峰,且均是以β-型糖苷键连接的吡喃糖,其中EPS 1-1和EPS 3-1是β构型的半乳吡喃糖; 5种多糖组分均主要由具有不同摩尔比的半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,除了EPS 4-1之外,在其他组分中还检测到了不同含量的岩藻糖、鼠李糖和阿拉伯糖等。     

金针菇锌多糖分离纯化及其结构特征

目的：以金针菇为原料,经过逐步分离纯化得到两个锌多糖组分并研究其理化性质、光谱学特性及结构特征。方法：金针菇锌多糖采用热水浸提的方法提取,经DEAE纤维素-52和Sephadex G-100凝胶色谱柱逐步分离纯化后通过火焰原子吸收法测定多糖中锌的含量,高效凝胶过滤色谱法鉴定组分的均一性,并测定其分子质量及单糖组成,采用紫外光谱、红外光谱和刚果红实验对锌多糖的结构特征进行相关研究。结果：通过分离纯化得到两个锌多糖组分CF1、CF2,纯品提取率分别为20.97%与12.25%,其中锌含量分别为191、429 μg/g,平均分子质量分别为890、1 244 kD。CF1组分由葡萄糖、半乳糖等6 种单糖组成;CF2组分主要由甘露糖、葡萄糖、岩藻糖等8 种单糖组成,且两个多糖组分均具有三股螺旋分子结构。     

榨前分离苹果皮多糖的鉴定及抗氧化活性研究

以榨前分离苹果皮为原料,采用超声波辅助法提取多糖,通过改变洗脱液的极性对多糖进行分离纯化,并对各组分的抗氧化活性进行分析。结果表明:多糖样品经过DE-52纤维素柱梯度洗脱得到三个含量较大的洗脱峰,分别为水、0.3mol/L NaCl和0.9mol/L NaCl洗脱组分。采用Sephadex G-200凝胶柱对洗脱组分进一步纯化,得到APPSH2O、APPS-0.3mol/L和APPS-0.9mol/L三种不同组分的多糖纯品。抗氧化实验表明:三种不同组分多糖均有一定的还原力、清除·OH、DPPH·,O-2·的能力,但其抗氧化能力均小于粗多糖和V C。     

红曲霉菌胞外多糖的分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性测定

目的:分离纯化红曲霉菌胞外多糖(Exopolysaccharide,EPS),测定各组分的抗氧化活性并对其结构进行初步表征。方法:红曲霉菌发酵液经乙醇沉淀获得胞外多糖,经精制除杂和DEAE-纤维素柱层析法分离纯化获得多糖组分,再分别用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)、柱前衍生PMP-HPLC法测定相对分子质量(Mw)和单糖组成,测定多糖组分清除DPPH和羟自由基的能力,评价其体外抗氧化活性。结果:EPS经分离得到三个组分EPS-1、EPS-2和EPS-3,相对分子质量分别为8673、143537、238742 Da。EPS-1、EPS-2均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.301∶2.052∶3.614和1∶2.475∶1.950∶1.532,EPS-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.401∶0.066∶0.307∶2.974。三个多糖组分对DPPH·和羟自由基均有清除能力,并与多糖浓度呈现正相关。当多糖浓度为1 mg/m L时,三个组分对DPPH清除率分别为16.4%、15.9%和14.8%;对清除羟自由基的清除率分别为40.4%、39.6%、63.8%。结论:红曲霉菌胞外多糖各组分的相对分子质量和单糖组成比例均有差异;对羟自由基、DPPH·的清除作用也存在差异,这种活性差异可能与各组分Mw及结构差异相关。     

地皮菜多糖的分离纯化及结构组成分析

以地皮菜为原料,采用水提醇沉法获得地皮菜多糖(Nostoc Commune polysaccharides,NCP),经Sevage法脱蛋白、DEAE-Sepharose CL-6B柱色谱法分离纯化、透析、冻干等制备地皮菜精制多糖。利用紫外和红外光谱对其进行纯度及结构分析,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生HPLC法测定其单糖组成及含量。结果表明:地皮菜多糖经DEAE-Sepharose CL-6B柱色谱分离可得到5种多糖组分,其主要组分NCP-3具有典型的多糖吸收峰。HPLC分析表明NCP-3主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖构成,其摩尔比为2.17∶7.14∶2.56∶1。     

桉木预水解液中半纤维素多糖分离纯化及抗氧化活性研究

采用醇沉法从桉木预水解液中提取半纤维素粗多糖（PHLP）,并利用DEAE-650M离子交换柱对其进行分离纯化,对纯化得到的中性多糖PHLP-1和酸性多糖PHLP-2两种组分进行分析。单糖组分结果表明,PHLP-1和PHLP-2均由阿拉伯糖、木糖、半乳糖、甘露糖及葡萄糖组成,摩尔比分别为0.09∶1∶0.13∶0.07∶0.35和0.1∶1∶0.03∶0.09∶0.08。红外光谱测定表明,两种组分均具有多糖的特征吸收峰。扫描电子显微镜表明,PHLP-1和PHLP-2呈无序杂乱的结构形态。抗氧化实验结果表明,两种纯化的多糖组分均具有一定的抗氧化性且存在量效关系,抗氧化能力强弱顺序为：PHLP-2>PHLP-1>PHLP。     

苦瓜果实中多糖的分离纯化及性质分析

以苦瓜果实为材料,经热水抽提、乙醇沉淀和Sevag 法去蛋白后获得了苦瓜果实粗多糖(MCP)。MCP 经DEAE- 纤维素柱离子交换柱层析分离得到4 个级分MCP-A、MCP-B、MCP-C 和MCP-D。MCP-A 经Superdex G-100 柱进一步纯化得到苦瓜果实多糖MCP-A1 组分。MCP-A1 经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其平均分子量为93577D。经过对其理化性质鉴定表明,MCP-A1 不含蛋白质、核酸,含有糖醛酸,为非淀粉类多糖。红外光谱扫描结果表明,其具有典型的多糖吸收峰。     

深层发酵羊肚菌多糖的提取、分离及纯化研究

以深层发酵产生的羊肚菌菌丝体和发酵液为主要原料提取羊肚菌多糖，对影响多糖提取率的几个因素分别进行了对比实验。并对多糖进行了纯化及组分测定。     

黄精多糖的提纯、硫酸化和羧甲基化修饰及其抗氧化活性研究

以黄精为原料,采用超声辅助法提取黄精多糖,经DEAE-52纤维素层析及葡聚糖凝胶层析柱Sephadex G-200分离纯化,得到平均分子量为21.58 kDa的纯黄精多糖(PSP1-A),浓硫酸法制备硫酸酯化多糖(SPSP1-A),氢氧化钠-一氯乙酸体系法制备羧甲基化多糖(CPSP1-A)。通过傅里叶红外光谱法对衍生物进行结构验证,并采用体外实验法对比修饰前后黄精多糖的抗氧化活性。结果表明,黄精多糖提纯修饰后得到取代度为1.44的硫酸化产物和取代度为0.49的羧甲基化产物。在最大浓度10 mg/mL时,CPSP1-A对DPPH·和·OH的清除率分别为74.69%和91.27%。与PSP1-A相比,CPSP1-A对DPPH·和·OH清除力提高,还原力增强,但对ABTS+自由基清除力下降;而SPSP1-A对以上三种自由基的清除作用均增强,10 mg/mL时对DPPH·、·OH和ABTS+·的清除率分别为98.70%、95.72%和97.87%,且还原力明显提高,在10 mg/mL时,SPSP1-A还原力是PSP1-A的三倍多。结果表明,两种修饰均是提高黄精多糖抗氧化能力的有效方法。     

玉米须多糖发酵工艺优化及其抗氧化活性研究

以黑木耳（Auricularia auricula）为菌种发酵玉米须制备多糖,通过单因素试验和响应面试验优化其发酵工艺条件,并考察玉米须多糖体外抗氧化活性。结果表明,玉米须最佳发酵工艺为：接种量8%、发酵温度26℃、发酵时间7 d。此优化条件下多糖的含量为13.12 mg/L。玉米须多糖的红外光谱分析结果表明,其具有糖类物质的特征吸收峰,对羟基自由基（·OH）和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）最大清除率分别为34.5%和43.3%,实验表明其具有一定的抗氧化活性。     

Extraction,isolation, characterisation,antioxidant and anti-fatigue activities of Pleurotus eryngii polysaccharides

Pleurotus eryngii polysaccharide (PEP) was obtained using hot water extraction and ethanol precipitation. Three purified polysaccharide fractions (namely PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A) were obtained from PEP using DEAE-cellulose-52 chromatography and a gel permeation Sephadex G-100 column. Firstly, this paper examined the characterisation of PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A. The corresponding molecular weights were 5.378 × 10⁵, 9.506 × 10⁶ and 4.975 × 10⁵ Da, respectively. PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A had similar monosaccharide compositions. PEP1-A was β-configuration, and PEP2-A and PEP3-A were α-configuration. PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A had pyran-type rings, (1 → 3) glucose and (1 → 6) galactose linkages. Secondly, PEP, PEP1-A, PEP2-A and PEP3-A possessed antioxidant activities, and PEP was best. Therefore, only PEP was used to study its anti-fatigue activity in vivo. The result proved that PEP had anti-fatigue activity. PEP could be used as a valuable natural food supplement for preventing anti-fatigue or functional food.     

亮菌液体发酵工艺的研究

采用“系统数值化及数值全面反馈控制优化技术”对亮菌液体发酵工艺进行了初步研究,优化了液体发酵条件,使发酵菌丝体得率由2．36g／100ml提高到3．83g／100ml,提高了67．63％。     

大豆蛋白与魔芋多糖复合凝胶对发酵型辣椒饮料澄清效果的研究

本文利用大豆蛋白与魔芋多糖的复合凝胶作为澄清剂应用于发酵型辣椒饮料的澄清,研究发现,这两种大分子之间的交互作用能有效增加沉淀的沉降速度,提高澄清的效率,结果表明:这种复合凝胶对发酵辣饮料的澄清效果显著,当澄清条件为:饮料pH4.5,澄清剂大豆蛋白质用量7.00%,魔芋多糖用量1.50%,温度100℃时加入,其透光率可达95%以上,在不同温度条件下存储半年其透光率仍能保持在92%以上,而且不影响饮料本身的风味。     

超声波辅助提取茶多糖及其分子量变化的研究

为了解超声波强化茶多糖提取的效果及其对茶多糖分子量的影响,本实验研究了茶多糖提取过程中温度、液料比、时间、pH值及超声功率等因素对提取率的影响。实验结果表明,传统提取方法的最优条件为:温度60℃,液料比20:1,时间120min,pH值6.0,在最优条件下茶多糖的得率为4.26%;超声波辅助提取法的最优条件为:超声功率150W,液料比30:1,时间40min,温度60℃,pH值7.0,在此条件下茶多糖的得率为5.15%。提取得到的茶多糖样品通过GPC测定,传统提取法得到的茶多糖样品平均相对分子质量为66439,而超声波提取得到的样品的平均相对分子质量为47447。超声波辅助提取可明显提高茶多糖的得率,但同时对茶多糖产生降解作用。     

嗜酸乳杆菌高密度培养时的化学去胁迫

采用向发酵液中添加适当的碱或碱性盐等物质的方法,消除了影响嗜酸乳杆菌生长的有机酸的胁迫作用,达到单位体积的发酵液内含有更多活菌体的目的。结果表明,在发酵过程中,添加一定量的柠檬酸钠可减少乳酸对嗜酸乳杆菌的胁迫作用,从而提高了活菌密度。     

冠突散囊菌接种发酵茯砖茶的初步研究

探讨了冠突散囊菌液体发酵培养条件,并将纯培养冠突散囊菌菌悬液接种于黑茶进行茯砖茶发酵,与市售茯砖茶茶叶浸出液接种于黑茶发酵茯砖茶进行对比试验。实验表明,冠突散囊菌的最佳培养基配方为：NaCl 32g、NH4NO33g、蔗糖20g、MgSO40.5g、K2HPO41g、水1000mL;最佳培养条件为：pH5.8、温度30℃、转速180r/min。试验分别采用冠突散囊菌纯菌液及市售茯砖茶茶叶浸出液分别接种发酵茯砖茶,接种量为5mL、10mL、15mL。发酵中、末期用血球计数板对2组茯砖茶中冠突散囊菌孢子进行计数。经检测,在发酵结束时,接种茶叶浸出液的孢子数只有2.94×104—7.28×104个/g干茶,而接冠突散囊菌菌液的孢子数可达0.313×107—1.71×107个/g干茶。结果表明,使用纯菌液接种发酵茯砖茶可明显提高＂金花＂产量,可为改良传统工艺提供科学依据。     

牛肝菌多糖的提取及抗氧化性研究

该试验以云南牛肝菌烘干粉末为原料,多糖得率为评价指标,从料液比、超声时间和超声温度等因素,对牛肝菌粉末粗多糖的提取工艺进行优化;同时对牛肝菌多糖清除1,1-二苯基苦基苯肼自由基（DPPH·）和羟基自由基（·OH）的能力进行研究。结果表明,牛肝菌粗多糖得率受各因素的影响程度依次为料液比＞超声时间＞超声温度。当料液比为1∶15（g∶mL）,超声时间为2 h,超声温度为60 ℃时,牛肝菌粗多糖得率可达41.76%。牛肝菌粗多糖对DPPH·和·OH的半抑制浓度（IC50）值分别为0.75 mg/mL和5.12 mg/mL,当多糖质量浓度为1 mg/mL、10 mg/mL时,多糖对DPPH·和·OH的清除率可达71.19%、80.69%。     

一种酵素的配方优化研究

以芦荟、山楂、山药、薏苡仁和枸杞为主要原料研制一种酵素食品。应用最优混料设计法研究各主要原料的不同组合对产品主要品质指标的影响,建立各原料配比与目标值的回归模型,最终获得酵素最优原料配方为：芦荟10.00%、枸杞45.29%、山楂24.71%、山药10.00%、薏苡仁10.00%。以该原料配方进行发酵,得到的产品蛋白酶活力293.04 U/g,超氧物歧化酶（SOD）酶活力57.00 U/g,多糖含量11.42 mg/g,综合评分为0.905 9。每克酵素样对超氧阴离子的清除能力相当于1 mg抗坏血酸;每克酵素样对Fe3+的还原能力相当于129.25 mg抗坏血酸;对大肠杆菌和金黄色葡萄球抑菌圈直径分别为12 mm、10 mm,抑菌能力与阳性对照苯甲酸钠相当。说明酵素产品具有一定的抗氧化作用及抑菌活性。