适用于鱼肉中氯霉素检测的抗体包被金磁纳米微粒修饰安培免疫传感器研究

研制了基于氯霉素抗体包被Fe3O4/Au金磁纳米微粒(GMP)和三乙撑四胺铜(II)(CuL)共固定修饰平面热解石墨电极的安培免疫传感器(PRG|CuL / anti CAP-GMP),用于测定鱼肉中CAP含量.该免疫传感器是利用外加磁场,将anti CAP-GMP吸引到CuL修饰的PRG电极(PRG|CuL)表面制备而成.CuL对H2O2还原具有良好的电催化能力,当该传感器在含CAP样品液中温育后,CAP与电极表面的anti CAP的免疫结合物导致CuL对H2O2的催化还原电流(I)降低,电流下降值(△I)和CAP浓度成正比,可用于CAP定量测定.在25℃的pH=6.5磷酸盐缓冲液(PBS)中温育30 min,该传感器对CAP的检测线性范围为0.6~110 ng/mL,检出下限为0.092 ng/mL(3σ法).应用于鱼肉中CAP检测并与传统的液相色谱法(HPLC)比较,结果一致,其添加回收率在97%~104%之间.该免疫传感器集分离、富集为一体,电极表面可更新,检测灵敏快速,对于水产品中痕量氯霉素分析提供了一种新颖的方法.     

基于铜配合物和抗体包被化学镀纳米金共固定的癌胚抗原安培免疫传感器

研制了基于抗体包被化学镀纳米金(AuNPs)和[Cu (bpy) 2 (ONO)]NO3配合物(CuL）共固定修饰玻碳电极(GCE)的安培免疫传感器,并用于血清中癌胚抗原(CEA)的检测。首先将GCE电极表面氧化形成羧基,进而键合上乙二胺。将此胺化电极浸泡在CuL和化学镀金溶液后, CuL可通过π-π堆积作用吸附到GCE表面,并在电极表面还原成30~50 nm的纳米金层（GCE|CuL/AuNPs）。将上述电极浸泡在CEA抗体(anti CEA)溶液中,利用AuNPs固定anti CEA,并通过辣根过氧化物酶(HRP)封闭剩余的AuNPs位点,由此构建了一类快速检测 CEA的无试剂安培免疫传感器（GCE|CuL-AuNPs /anti CEA-HRP）。由于HRP可以催化CuL和过氧化脲（CP）的氧化还原反应,因此该电极在CP溶液中形成催化还原电流。当该传感器在37 ℃下,含CEA的pH 6.5PBS溶液中温育30 min后,随着温育液中CEA浓度的增加,电极表面形成的免疫复合物也增加,导致CuL 对CP 的催化电流下降。电流下降百分比I%与CEA浓度在0.1~80 ng/mL 成线性关系,检测限为0.052 ng/mL（3σ）。由于采用化学镀法可以方便地在GCE表面制备纳米金膜进而包被抗体,并通过π-π堆积作用吸附CuL作为电子媒介体,故该免疫电极制备简单;采用可催化CP还原的HRP封闭AuNPs层多余位点,大大提高了电极灵敏度,有望用血清中痕量CEA分析。     

基于Nafion-石墨烯复合物固定甲胎蛋白电化学免疫传感器的研究

该文利用Nation-石墨烯复合物和纳米金固定甲胎蛋白抗体(anti-AFP),构建了高灵敏的电化学免疫传感器.首先将石墨烯分散在Nation溶液中制得Nation-石墨烯的复合膜,并将其固定在玻碳电极(GCE)表面,通过静电吸附和共价键合作用将硫堇(Thi)和纳米金颗粒(nano-Au)依次固定到Nation-石墨烯复合膜修饰的玻碳电极表面.再通过纳米金单层吸附anti-AFP,最后用牛血清蛋白(BSA)封闭电极上的非特异性吸附位点,从而制得了甲胎蛋白免疫传感器.实验结果表明,该修饰电极对不同浓度的甲胎蛋白(AFP)有很好的响应,其线性范围为0.8～100 ng/mL,检出限为0.36 ng/mL.     

纳米金修饰铂金电极固载白喉抗原免疫传感器的研究

该文报道了一种制作电流型白喉抗原免疫传感器的方法.用金纳米颗粒吸附白喉抗原,采用聚乙烯醇缩丁醛(PVB)为辅助固定抗原膜基质将其固定在铂金电极的表面,制成白喉抗原免疫传感器.根据抗原抗体特异性结合形成的免疫复合物使电极敏感膜有效扩散面积减小,电流减少的特性,实现对白喉抗体的定量检测.该传感器对白喉抗体检测的线性范围是2...     

基于聚硫堇的一次性O型口蹄疫抗原酶免疫传感器的研制

将O型口蹄疫酶标抗体掺杂于有机-无机溶胶凝胶中,并修饰于聚硫菫的丝网印刷碳电极表面,从而制备一次性口蹄疫病毒抗原(FMDV-Ag)酶免疫传感器。试验中采用直接免疫分析法检测口蹄疫病毒抗原。根据免疫反应前后还原峰电流下降的百分率K值的大小实现对抗原的检测。在优化条件下,免疫传感器检测抗原的线性范围为77～388ng/mL,最低检出限为32ng/mL。免疫电极具有较好的特异性、重现性(RSD=5.6%)、稳定性(10d后电流响应为初始值的89.5%)和准确性(与AGP符合率为95%)。因此,该免疫传感器有望用于O型口蹄疫抗原的快速检测。     

基于甲胎蛋白抗体和巯基丁二酰胺铜(II)共固定修饰电极的人血清中甲胎蛋白免疫传感器

研制基于甲胎蛋白抗体(Ab-AFP)和巯基丁二酰胺铜(Ⅱ)(CuL)共固定修饰玻碳电极(GCE|Ab-AFP/TiO2/CuL)的免疫传感器,用于测定人血清中AFP抗原水平。该免疫传感器是利用溶胶-凝胶气相沉积技术,将AFP抗体分子固定在CuL修饰玻碳电极表面制备而成。电极表面的CuL具有电活性,对H2O2有良好的电化学还原催化。当该免疫传感器在含AFP样品的溶液中于25℃温育30min后,AFP抗原与Ab-AFP抗体分子的免疫结合物导致CuL的电子传递被部分阻碍,使CuL对H2O2电催化还原的效率降低,电流值的下降量和AFP浓度成正比,可用于AFP定量测定。在pH=6的PBS中,25℃温育30min的优化条件下,该传感器对AFP的检测线性范围为0.5～3.9和3.9～100ng/mL,检出下限为0.081ng/mL(3σ)。该免疫传感器制备过程比基于酶标抗体修饰传感器简单,尤其是对H2O2催化响应迅速,稳定性好,可以在磷酸盐缓冲溶液中稳定存放15d。对于构建无试剂的免疫传感器和临床免疫分析提供了一种新颖的方法。     

基于纳米金/硫堇修饰金电极的脱落酸安培免疫传感器的研制

提出了一种基于纳米金/硫堇修饰金电极的ABA安培免疫传感器。该传感器基于H2O2-HRP-硫堇催化波体系构建,其中硫堇为传感介质。当HRP存在时,通过加入H2O2,硫堇的还原电流大幅增加,并且电流的增加依赖于HRP活性。HRP活性又由ABA与HRP酶标抗体结合物调控,产生一个减小的催化波。用BSA封闭硫堇单分子层修饰后可能存在的活性位点以避免非特异性吸附。优化了测定条件,包括酶标抗体和硫堇的最佳比例、培育时间、缓冲液的pH值和H2O2浓度。此传感器的还原电流在ABA浓度0.5~1000ng/mL范围内呈线性下降,回归方程为y=0.0209x 17.071,相关系数为0.9922,检测限为0.2ng/mL。     

基于抗体包被纳米金和铜配合物共固定修饰电极的癌胚抗原安培免疫传感器研究

研制了基于抗体包被化学镀纳米金(AuNPs)和[Cu(bpy)2(ONO)]NO3配合物(CuL)共固定修饰玻碳电极(GCE)的安培免疫传感器,并用于血清中癌胚抗原(CEA)的检测。首先将GCE电极表面氧化形成羧基,进而键合上乙二胺。将此胺化电极浸泡在CuL和化学镀金溶液后,CuL可通过π-π堆积作用吸附到GCE表面,并在电极表面还原成30~50nm的纳米金层(GCE|CuL/AuNPs)。将上述电极浸泡在CEA抗体(anti CEA)溶液中,利用AuNPs固定anti CEA,并通过辣根过氧化物酶(HRP)封闭剩余的AuNPs位点,由此构建了一类快速检测CEA的无试剂安培免疫传感器(GCE|CuL-AuNPs/anti CEA-HRP)。其中CuL作为电子媒介体对过氧化脲(CP)有催化还原作用,而且HRP可增强这种作用。当该传感器在37℃下,含CEA的pH6.5PBS溶液中温育30min后,随着温育液中CEA浓度的增加,电极表面形成的免疫复合物也增加,导致CuL对CP的催化电流下降。电流下降百分比1%与CEA浓度在0.1~80ng/mL之间成线性关系,检测限为0.052ng/mL(3σ)。由于采用化学镀法可...     

基于抗体包被金磁纳米微粒修饰的磁性安培免疫传感器研制及对人血清癌抗原19-9的检测

在金电极表面修饰壳聚糖(CS)膜,并在酸性pH下利用CS上形成的-NH3+静电吸引Fe(CN)]3-6-(FeCN)到电极表面,制成了在pH 6.5磷酸盐缓冲液(PBS)中具有电活性的Au | CS-FeCN电极;再通过外加磁场吸引,在Au | CS-FeCN表面修饰一层血清癌抗原19-9单克隆抗体(anti CA19-9)包被的金磁纳米微粒(Fe3O4(核)／Au(壳),简称GMP),由此构建了一类快速检测CA19-9的无试剂安培免疫传感器(Au| CS-FeCN／GMP-anti CA19-9).用扫描电镜(SEM),X-射线荧光光谱(XFS)和X-射线光电子能谱(XPS)对电极表面进行了表征;并采用循环伏安法(CV),示差脉冲伏安法(DPV)、交流阻抗法(E1S)分 别研究了该传感器的电化学性质和对CAl9-9的检测性能.实验表明:Au I CS-FeCN／GMP-anti CAl9-9电极在含CAl9-9的pH 6.5 PBS中于35℃下温育25 min,其DPV还原电流下降值(AI)与CA19-9在0.1～10 U／mL和10~50 U／mL范围内成正比,检出下限为0.056 U／mL(3d).用于血清样本检测并和标准ELISA方法对照,结果一致.只需移去外加磁场,用PBS清洗电极表面即可实现电极更新.该磁性免疫传感器集分离、富集和测定于一身,灵敏度高、稳定性好、表面易更新,有望用于人血清中痕量CA19-9的快速检测.     

碳纳米管组装电化学免疫传感器测定IgG抗体的研究

应用吸附法将IgG抗原固定于多壁碳纳米管修饰的玻碳电极表面,制备用于IgG抗体检测的电化学免疫传感器。以辣根过氧化物酶为标记物,对苯二酚为底物,利用辣根过氧化物酶标记IgG抗体与待测IgG抗体竞争电极表面固定的IgG抗原,建立了免疫竞争法检测IgG抗体的高灵敏度电化学分析方法。碳纳米管的大比表面积和电化学催化作用,提高了分子识别物质的固定量和电化学检测的灵敏度。工作电位为 0.030 V(vs.SCE)时,响应电流与IgG抗体浓度在0.30~10μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限为0.11μg/mL。     

可再生使用的磁性纳米修饰C反应蛋白电流型免疫传感器

利用Fe3O4(核)/Au(壳)(简称GMPs)标记C反应蛋白酶标抗体(HRP-anti CRP),构建了一类新型的磁性纳米探针(HRP-anti CRP/GMPs),将其修饰在丝网印刷电极(SPCE)表面构建了可再生使用的CRP安培型酶联免疫传感器.首先将多壁碳纳米管(MCNTs) -硫堇(Thi) -Nafion复...     

多壁碳纳米管-Nafion/纳米金构建阻抗传感器研究

利用多壁碳纳米管（ MWNT）—Nafion和纳米金（ GNPs）修饰金电极构建了一种简单、灵敏检测人端粒DNA的电化学阻抗传感器。首先将Nafion分散的MWNT滴涂于Au电极表面,再利用电化学沉积法将GNPs沉积到MWNT—Nafion修饰Au电极表面,以GNPs为载体固定人端粒探针DNA制备DNA传感器。在最优实验条件下,将传感器用于人端粒DNA的检测中,结果表明：目标人端粒DNA的线性范围为1.0×10－13～5.0×10－11mol/L,检出限（S/N＝3）为2.5×10－14mol/L。采用MWNT为基底沉积GNPs修饰电极检测的灵敏度显著提高。     

电沉积纳米金修饰钛电极对甲醛的电催化氧化

制备了电沉积纳米金修饰的钛电极(Au/Ti),扫描电镜观察发现钛基体表面纳米金颗粒大小均匀、粒径大约为150～170 nm.运用循环伏安和电位阶跃技术研究了Au/Ti对甲醛的电氧化,Au/Ti电极对甲醛氧化具有良好的电催化活性.0.1 mol/LNaOH溶液中,甲醛浓度0～60 mmol/L范围内,甲醛氧化峰电流与甲醛浓度呈良好的线性关系,检测下限达4.7312×10-7mol/L.     

Alpha-1-fetoprotein antibody functionalized Au nanoparticles: Catalytic labels for the electrochemical detection of α-1-fetoprotein based on TiO2 nanoparticles synthesized with ionic liquid

A novel strategy for the preparation of amperometric immunosensor for rapid determination of α-1-fetoprotein (AFP) in human serum has been developed. TiO₂ nanoparticles (NPs) were prepared by solvothermal reaction using TiCl₄ as raw materials and the mixture of ionic liquids and doubly distilled water as solvent. α-1-fetoprotein antibody (AFP Ab) was mixed with TiO₂ NPs/chitsotan (CHIT) solution and immobilized onto the surface of a glassy carbon electrode. AFP (Ab) functionalized Au NPs were used as catalytic labels for the amperometric detection of AFP by means of the electrocatalyzed reduction of Au NPs to H₂O₂. The electrochemical behavior of the immunosensor was studied. Other experimental conditions such as pH, immunoreactions temperature and time were also studied. The prepared immunosensor offers an excellent amperometric response for AFP ranging from 1.0 to 160.0 ng/mL with a detection limit of 0.1 ng/mL. The result shows that the immunosensor displays rapid response, high sensitivity, good reproducibility and favorable stability.     

铜掺杂聚L-天冬氨酸修饰电极同时测定多巴胺和尿酸

用循环伏安法制备了铜掺杂聚L-天冬氨酸修饰玻碳电极,研究了多巴胺（DA）和尿酸（UA）在该修饰电极上的电化学行为,建立了同时测定DA和UA的新方法。在pH3．5的磷酸盐缓冲溶液中,扫描速率为120mV]s时,DA和UA在该电极上产生氧化还原峰,峰电位分别为Eps=0．429V、Epc=0．336V（DA）和Eps=0．617V（UA）,DA和UA的氧化峰分开达0．188V。采用循环伏安法（CV法）和示差脉冲伏安法（DPVs法）同时测定DA和UA的线性范围分别为：DA：3．00×10^-6-4．00×100mol／L、4．00×10^-5～1．00×10^-4mlo/L（CV）、3．00×10^-7～3．00×10^-6mol／L、3．00×10^-6—1．00×10^-5mol／L（DPVs）,UA：8．00×10^-6～5．00×10^-5mol／L、5．00×10^-5-2．00×10^-4mol／L（CV）、3．00×10^-7～5．00×10^-5mol／L、5．00×10^-5．2．00×10^-4mol／L（DPVs）;检出限分另U为8．0×10^-7mol／L、1．0×10^-6mol／L（CV）和3．0×10^-7mol/L、3．0×10^-7mol／L（DPVs）。用于人体尿液中DA和UA的同时测定,结果满意。     

基于纳米金/碳纳米管修饰古墨电极测定大黄酸

本文首次采用自沉积方法将HAuCl4直接还原成纳米金颗粒并修饰在直接生长于石墨基体上的碳纳米管电极表面,制备了对大黄酸具有高催化性能的Au-CNTs／C电极。采用循环伏安法考察了大黄酸在Au—CNTs／C电极上的电化学行为,发现在-0．037V出现明显的氧化峰。在磷酸盐缓冲溶液P13S（DH=7．4）中,大黄酸的响应电流与浓度在1．8×10-4-2．5×10-3g／L范围内呈线性关系,相关系数为0．9878,其检测限为8．0×10^-4g／L。     

A reusable capacitive immunosensor with a novel immobilization procedure based on 1,6-hexanedithiol and nano-Au self-assembled layers

A novel immobilization procedure of antibody proteins for capacitive immunosensing, based on thiolor sulfur compound (1,6-hexanedithiol, HDT) and colloid Au layers is proposed. The insulating organic monolayer film was first formed by the spontaneous assembly of HDT from solution onto gold. When these thiol-rich surfaces are exposed to Au colloid, the sulfurs form strong bonds to gold nanoparticles, anchoring the clusters to the electrode substrate. After the assembly of gold nanoparticles layer, the original formed organic thiols surface was restored, and a new nano-Au surface was obtained. Thus, the antibody could be immobilized through electrostatic adsorption between nano-Au and the antibody proteins. After use, the formed immunocomplex layer can be rinsed out, via a saline solution with extreme pH. Therefore, the immunosensor can be regenerated repeatedly, highlighting a clear advantage of this new approach with respect to classical immunoassays employing covalent immobilization.     

银、L-半胱氨酸修饰电极同时测定多巴胺和抗坏血酸

采用电聚合的方法将银、L-半胱氨酸先后修饰到电极表面,制备了银、L-半胱氨酸修饰电极fPLC／Ag／GCE）。研究了多巴胺和抗坏血酸在该修饰电极上的电化学行为,构建的电极可实现对多巴胺和抗坏血酸的同时检测。实验表明：在扫速为120mV／s,pH=3．0的磷酸盐缓冲溶液（PBS）中,多巴胺产生一对氧化还原峰,其氧化峰和还原峰的电位分别为0．447V和0．409V;而抗坏血酸只产生一个明显的氧化峰,其峰电位为0．238V。多巴胺和抗坏血酸的AEpa=0．209V,不需要分离便可对两者进行同时检测。在最佳条件下,测定多巴胺和抗坏血酸的线性范围分别为1．00×10-6～2．50×10-4mol/L和7．50×10-6--1．00×10-3mol／L．检出限分别为5．0×10-7mol／L和2．5×10-6mol／L。该方法可用于多巴胺和抗坏血酸的同时测定。