响应面法优化板栗多肽制备及其清除DPPH·能力的研究

采用碱性蛋白酶酶解板栗蛋白制备抗氧化肽并测定其清除DPPH·能力。以水解度及DPPH·清除率为指标通过单因素实验初步得到板栗多肽提取工艺,再根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,采用四因素三水平响应面分析法,建立了以加酶量、酶解温度、酶解p H、酶解时间与响应值DPPH·清除能力间的回归方程预测模型,确定了板栗抗氧化肽的最佳制备工艺条件:加酶量2.5%,酶解温度50℃,酶解p H9.5,酶解时间3.7 h。在此条件下DPPH·清除率为92.86%,与理论值基本相符。      

白蛋白多肽清除DPPH·测定方法的研究

从方法学上探讨了样品浓度、溶剂、pH、盐浓度对白蛋白多肽清除DPPH·能力的影响,以及白蛋白多肽、Vc、GSH与DPPH反应随着时间推移的动力学关系,并对其EC50进行比较.结果表明,最佳测定条件为以50%乙醇为溶剂,浓度范围为1～7mg/mL,反应时间50min,运用此法测定的清除率在16%～80%之间,具有较高的灵敏度和准确性.白蛋白多肽:EC50=3.64mg/mL,Vc:EC50=3.38×10-3mg/mL,GSH:EC50=0.053mg/mL.     

白蛋白多肽清除DPPH·测定方法的研究

从方法学上探讨了样品浓度、溶剂、pH、盐浓度对白蛋白多肽清除DPPH·能力的影响,以及白蛋白多肽、VC、GSH与DPPH反应随着时间推移的动力学关系,并对其EC50进行比较。结果表明,最佳测定条件为以50%乙醇为溶剂,浓度范围为1～7mg/mL,反应时间50min,运用此法测定的清除率在16%～80%之间,具有较高的灵敏度和准确性。白蛋白多肽:EC50=3·64mg/mL,VC:EC50=3·38×10-3mg/mL,GSH:EC50=0·053mg/mL。      

葡萄籽多肽制备及其自由基清除能力的研究

用复合酶(碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶)水解方法制备葡萄籽多肽,通过单因素试验考察酶添加量、酶解时间、酶解温度和酶解p H值对脱脂葡萄籽蛋白水解度的影响。在基于单因素试验的条件下,选用三因素三水平试验确定复合酶分析3个因素对响应值的影响。结果表明最佳酶解工艺参数为:复合蛋白酶质量比例为7∶3,酶添加量为2%、酶解时间3 h、酶解温度50℃、pH 7.4,在该条件下脱脂葡萄籽蛋白的水解度达24.33%,葡萄籽蛋白复合蛋白酶酶解物在质量浓度为120μg/mL～600μg/mL的范围内,其对DPPH自由基的清除能力为19.25%～41.03%,且存在明显的量效关系,与VC、VE相比,葡萄籽多肽用量为0.15%时抗氧化效果较好。     

酶法制备米糠多肽的研究

研究了不同蛋白酶以及加酶量、酶解温度、酶解时间、pH对米糠多肽产率的影响,并利用响应面法对米糠多肽制备工艺条件进行了优化,同时分析了木瓜蛋白酶酶解米糠蛋白产物的相对分子质量。结果表明,木瓜蛋白酶是较好的米糠蛋白降解酶,木瓜蛋白酶酶解制备米糠多肽的最优工艺条件为:加酶量1.5%,酶解时间3.4 h,酶解温度40.5℃,pH 5.6;在最优工艺条件下,米糠多肽产率达到79.3%。米糠多肽的相对分子质量分布在500~700之间。     

脱脂米糠饼制备米糠多肽的研究

详细介绍了用中性蛋白酶AS1．398水解米糠蛋白得到米糠多肽实验的工艺流程及操作步骤，对实验过程中的碱溶酸沉、煮沸、酶解、灭活、脱色、脱臭等进行了详细说明，通过正交优化实验得出酶水解米糠蛋白的最佳条件是pH值7．0、温度37℃、加酶量5％、酶水解时间3h。     

响应面优化虾头壳酶促水解清除DPPH自由基活性的研究

以碱性蛋白酶水解虾头壳蛋白质,在影响水解条件单因素研究基础上,采用响应面方法中心组合设计,建立以DPPH自由基清除率为指标的水解模型,优化得出最佳酶解条件,并测定水解液中多肽的相对分子质量分布。结果表明,最佳酶解条件为pH7.2、温度50.5℃、加酶量415U/g、时间120min。在此条件下水解,水解度达21.8%,DPPH自由基清除率为66.9%,平均肽段长度为4.6,酶解液中大部分肽的相对分子量低于6500u。      

响应面优化虾头壳酶促水解清除DPPH自由基活性的研究

以碱性蛋白酶水解虾头壳蛋白质,在影响水解条件单因素研究基础上,采用响应面方法中心组合设计,建立以DPPH自由基清除率为指标的水解模型,优化得出最佳酶解条件,并测定水解液中多肽的相对分子质量分布。结果表明,最佳酶解条件为pH7.2、温度50.5℃、加酶量415U/g、时间120min。在此条件下水解,水解度达21.8%,DPPH自由基清除率为66.9%,平均肽段长度为4.6,酶解液中大部分肽的相对分子量低于6500u。     

海马骨粉酶解条件优化及清除DPPH自由基能力测定

以海马骨粉为原料,采用碱性蛋白酶对其水解,对水解物功效测定,以DPPH自由基清除的能力作为评定指标,在单因素的基础上,利用响应面设计方法进行酶解条件优化。单因素结果表明:酶解最佳时间为3 h,最佳温度为50℃,最佳p H为8;再采用Central Composite Design法,研究各因子及其交互作用对海马骨粉酶解液清除DPPH自由基能力的影响。利用Design Expert.8.0.5b软件得到回归方程的模型,并进行响应面分析,得出最佳条件为:酶解温度为48.60℃、酶解时间为4 h、酶解p H为7.04,此时的DPPH自由基清除率为63.89%。      

酶解菜籽粕制备多肽的研究

本试验以菜籽粕为原料,从四种蛋白酶中挑选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶对菜籽粕进行同步复合酶解。分别考察了不同的加酶量、酶比、料液比和时间对多肽得率的影响,并利用响应面分析法对混合蛋白酶水解菜籽粕的条件进行了优化。结果表明,在加酶量固定为4500 U/g,温度50℃,pH为8.0,料液比1:8及碱性蛋白酶:中性蛋白酶为3:1条件下酶解6.5 h,可使多肽得率达到54.89%。     

猪骨粉酶解液的美拉德反应产物清除DPPH·的研究

以猪骨粉酶解液为原料,与还原糖（葡萄糖或木糖）反应制备美拉德反应产物（MRPs）,研究其对DPPH·清除率的影响。结果表明:当起始pH为6.5,时间为4h,温度为120℃,葡萄糖添加量为1.5%时,获得的葡萄糖-MRPs的DPPH·清除率为82.53%;当起始pH为7.5,时间3h,温度为120℃,木糖添加量为1.5%时,木糖-MRPs的DPPH·清除率为88.58%;木糖-MRPs的清除DPPH·的能力较葡萄糖-MRPs的高。      

响应面法优化五味子提取清除物·DPPH作用研究

以南药五味子提取物对DPPH·清除率为指标,进行单因素提取试验,并应用响应面分析法优化提取工艺。试验结果表明：优化的工艺条件为：温度71℃,料液比1：12g/mL,提取剂为质量分数55%的乙醇/水溶液,提取3h。提取液浓度为0.06mL/mL时,五味子提取液对·DPPH的清除率达96.11%,与预测值96.09%接近（PI〉95%）。     

高温米糠粕制备米糠多肽的研究

以高温米糠粕为原料,采用碱溶酸沉法制取米糠蛋白,并将米糠蛋白用碱性蛋白酶水解制备米糠多肽。在单因素实验的基础上,通过二次回归正交旋转组合设计确定最佳的水解条件为：水解温度55℃,加酶量0.3%（占高温米糠粕的质量）,pH 9.6,水解时间3 h。在最佳水解条件下,米糠蛋白水解度为10.3%。所得米糠多肽粗蛋白含量为85.7%,蛋白质分散指数（PDI）为76.4%,氮溶解指数（NSI）为64.1%,相对分子质量在180～3 000之间的米糠多肽占78.88%。     

山杏仁多肽的制备及清除自由基能力研究

以DPPH自由基清除率为指标,对风味蛋白酶酶解脱脂山杏仁的工艺进行研究。在单因素实验的基础上,采用二次回归正交旋转组合设计对其酶解工艺进行优化。建立脱脂山杏仁酶解液的DPPH自由基清除率与蛋白酶用量、酶解温度及酶解pH,3个实验因素的正交回归模型方程,通过频率分析法得到酶解最佳工艺条件:蛋白酶用量0.50%,酶解温度55℃,酶解pH7.2,酶解时间4h,最佳条件下酶解液的DPPH自由基清除率为56.8%。在此条件下,山杏仁蛋白酶解液清除DPPH自由基的IC50值为4.18mg/mL。经过超滤分离获得不同分子量的抗氧化多肽,用DPPH自由基清除率评价其抗氧化性,得分子量小于5ku的肽清除DPPH自由基能力最强。     

猪皮明胶抗氧化多肽酶法制备的响应面优化

在测量猪皮明胶蛋白质含量和氨基酸组成的基础上,采用不同酶水解猪皮明胶,根据水解产物对DPPH·自由基的清除率,筛选较适的蛋白酶。进一步在单因素试验基础上采用响应面法对筛选的酶进行水解工艺优化,获到较佳水解工艺条件。筛选的较适酶为木瓜蛋白酶,较佳水解工艺为:水解温度50.05℃,水解时间4.2h,pH6.16,酶含量4.0%,原料质量浓度为4.3%,在此条件下,水解物对DPPH·的理论清除率为89.1%,实验值为87.4%。在较佳工艺下水解明胶,可以获得清除率最大的抗氧化肽,开发高附加值的活性肽产品。     

米糠多肽蛋白粉酶法生产新工艺研究

米糠是糙米碾白过程中被碾下的皮层,包括果皮、种皮、珠心层、糊粉层胚芽和小碎米的混合物。米糠中蛋白质含量为12～18％,几乎高出普通精米的一倍。本实验以脱脂米糠为原料,采用碱溶酸沉、复合酶（纤维素酶、风味蛋白酶、植酸酶、中性蛋白酶）酶解、活性碳脱色、真空浓缩、喷雾干燥制得米糠多肽蛋白粉。     

利用碱性蛋白酶酶解米糠谷蛋白及功能性的研究

以米糠为原料,采用Osborne连续提取法获得米糠谷蛋白,为改善谷蛋白的功能性,用碱性蛋白酶进行酶解.以溶解度为评价指标,底物中米糠谷蛋白的质量分数、pH值、酶解温度和时间为变量,通过单因素及响应面优化试验,得出最佳酶解条件为:底物中米糠谷蛋白的质量分数28.85％,酶解pH10.76,酶解温度56.79℃和酶解时间2.58h,谷蛋白溶出率理论值可达35.46％,实测值为35.43±0.19％;在此酶解条件下,米糠谷蛋白的NSI值提高了113.85％,EA值提高了76.12％,ES值提高了26.86％,FA值提高了150％,FS值提高了37.38％.     

米糠营养液酶解条件的研究

本文以稳定米糠为原料，利用α-淀粉酶进行预处理。再加入中性蛋白酶进行酶解。通过单因素和正交试验确定中性蛋白酶的最佳水解条件为：反应温度50℃，酶解时间2．5h，pH值8．0，酶用量5％，水解度可达11．23％。米糠可溶物提取率为44．1％。所得酶解液中营养成分丰富。     

响应面法优化元宝枫籽粕酶解工艺及多肽功能特性研究

本文以元宝枫籽粕为原料,采用碱性蛋白酶法对元宝枫籽粕进行酶解,以酶解时间、加酶量、pH、酶解温度、料液比为考察因素,酶解多肽得率为评价指标,在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计对元宝枫籽粕碱性蛋白酶酶解多肽制备工艺进行优化,并对优化工艺获得的酶解多肽进行了氨基酸组成、吸水性、吸油性、起泡性质、乳化性质和表面疏水性等功能特性表征。结果表明:最优的酶解制备工艺为:酶解时间3.3 h,pH为10,加酶量为3%,酶解温度为55 ℃。在最优制备工艺条件下元宝枫籽粕碱性蛋白酶酶解多肽得率为40.13%±0.15%。氨基酸组成分析表明酶解多肽所含八种必需氨基酸量高达20.3%,远高于国际粮农组织所建议成人所需必需氨基酸量。此外,酶解多肽的吸油性（4.553 g/g）高于大豆蛋白（2.61 g/g）,其表面疏水性（1365.3）与大豆7S球蛋白的表面疏水性相似,乳化性和乳化稳定性略低于大豆分离蛋白。本研究所获得的元宝枫籽粕碱性蛋白酶酶解多肽具有较好的功能特性,这也表明它可作为一种潜在的功能成分应用于食品中,为元宝枫籽粕的新应用开发提供数据和理论支撑。     

南瓜子粕蛋白酶解物的制备及清除DPPH活性的研究

以南瓜子粕蛋白为底物,选取碱性蛋白酶为水解酶进行水解反应,制备酶解产物。方法:以水解度DH为指标,通过单因素试验及正交试验确定最佳酶解工艺条件;以DPPH自由基清除率为指标,测定酶解物的抗氧化活性。结果表明,碱性蛋白酶水解工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量5%,pH值8.0,料液比4%,反应时间4 h;经6 h酶解后,DPPH.清除率可达到58.89%。