玉米蛋白粉酶解工艺技术研究

玉米蛋白粉经蒸煮处理,在一定的温度、pH、底物浓度条件下,经碱性蛋白酶水解后得到含有玉米低聚肽的混合液体。在该体系下,酶解反应的最适条件为:温度45℃,初始底物浓度7.5 mg/m L,酶浓度0.5μ/m L,pH 9.0。在此工艺条件下,蛋白质转化率为25.60%,蛋白质转化量为2.214 mg/m L。采用透过分子量10 000道尔顿的超滤膜除去大分子物质,采用透过分子量1000道尔顿的钠滤膜去除小分子物质及各种离子,得到分子量在300~1200道尔顿的低聚肽,其含量在80%以上的低聚肽液体。经验证该酶解工艺技术可行。     

刺参低聚肽的质量评价和抗疲劳作用研究

对刺参低聚肽的氨基酸组成、分子量分布、营养成分、微量元素、农兽药残留及急性经口毒性试验进行综合评价,研究并比较刺参低聚肽、大豆低聚肽和海参粉对小鼠的抗疲劳作用。分别灌胃不同剂量(0.085、0.17、0.50 g/kg)的刺参低聚肽、大豆低聚肽、海参粉,30 d后测定小鼠的负重游泳时间、血清尿素氮和肝糖原含量。结果表明,刺参低聚肽中氨基酸种类齐全,富含多种人体必需氨基酸,分子量低于1 000 Da低聚肽含量大于98%,主要分布在180 Da～500 Da,含有众多的微量元素,且牛磺酸含量较高,无兽药及农药残留,无重金属超标,样品经口服的半数致死量(median lethal dose,LD_(50))大于10 000 mg/kg,无毒性,口服安全。与阴性对照组相比,刺参低聚肽、大豆低聚肽和海参粉都具有抗疲劳的作用,其抗疲劳能力强弱顺序为:刺参低聚肽大豆低聚肽海参粉,刺参低聚肽各剂量组均使得小鼠负重游泳时间明显延长,血清尿素氮含量明显降低,肝糖原含量明显增加,但并非剂量越高效果越好,最佳给药剂量为0.17 g/kg。     

豌豆低聚肽硒螯合物的稳定性研究

以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料制备豌豆低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮、分子质量分布的基础理化性质进行研究,然后以分子质量分布和硒含量为指标对螯合物的热稳定性、酸碱稳定性、消化稳定性进行考察。结果表明,豌豆低聚肽硒螯合物水分含量为(14. 17±1. 12)%(质量分数),酸溶蛋白含量为(23. 22±0. 12)%(质量分数),总氮含量为(23. 87±0. 30)%,分子质量分布在1 000 Da以下的占比超过76%。在温度25～100℃时,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于2%,硒含量变化不显著。在pH=3～11,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于3%,硒含量虽有一定变化,但含量仍在78%以上。经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和2种酶共同消化后,分子质量在1 000 Da以下的部分比例均都在90%以上,而硒含量变化不显著。这说明豌豆低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

乌鸡低聚肽铁配合物的稳定性研究

以乌鸡为原料制备乌鸡低聚肽铁配合物,以分子量分布和铁含量为指标,对乌鸡低聚肽铁配合物的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性进行了考察。结果表明:在温度为20⁸0℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为380℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为3⁹时,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到6%,铁含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有58.4%以上的铁含量;乌鸡低聚肽铁配合物经过蛋白酶消化后,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到8%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有37.6%的铁含量。这说明乌鸡低聚肽铁配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性。     

玉米低聚肽硒螯合物的理化性质及稳定性

以玉米低聚肽和亚硒酸钠为原料制备玉米低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮(粗蛋白)、分子量分布进行了考察,然后以螯合态的硒含量和分子量分布为指标,研究了螯合物对温度、pH、消化方式的稳定性,结果表明:玉米低聚肽硒螯合物的螯合率为54.25%±0.24%,得率为53.02%±0.17%,水分含量为7.46%±0.07%,酸溶蛋白含量为16.38%±0.03%,总氮含量为21.17%±0.35%,分子量低于1000 u的比例为85.1512%。在25~100℃环境下,分子量低于1000 u的比例变化不超过7%,硒含量最低不小于70%;在pH=2~12的环境下,分子量低于1000 u的比例变化最高不超过16%,硒含量最低仍在75%以上;在经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和两种酶的消化后,分子量低于1000 u的比例分别增加5%、7%和8%,硒含量最低仍在70%以上。这说明玉米低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

大豆低聚肽的成分分析及体外抗氧化作用

以大豆分离蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,再经过超滤膜超滤后制得大豆低聚肽粉,对其基础理化成分、分子量分布和氨基酸组成进行了分析,并从DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力以及还原能力4个方面考察了体外抗氧化活性。理化成分分析表明:大豆低聚肽中蛋白质含量为86.98%,分子量小于1 000 Da的组分高达83.54%,氨基酸组成丰富,富含谷氨酸、天门冬氨酸、亮氨酸和精氨酸;抗氧化评价结果显示:大豆低聚肽对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为3.4,5.8和16.3 mg/m L,并且具有一定的还原能力。因此,大豆低聚肽具有良好的抗氧化活性。     

酸菜发酵液中抑菌物质的提取与鉴定

通过低温浓缩法、浓度梯度盐析沉淀法、透析层析法从酸菜水中提纯一种肽类物质,经过抑菌试验检测发现其抑菌效果优于Nisin,利用UV-5800紫外分光光度计测定其吸光值,得到A280=0.195和A280=0.316两个峰值,通过尿素-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳确定该物质的分子量主要包含3 510Da和22 000Da两部分,证实该物质虽属于小肽类抑菌物质但与Nisin不同。     

豌豆低聚肽的体外抗氧化作用

以豌豆为原料,利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶进行酶解,经超滤后得到豌豆低聚肽,对其水分、灰分、蛋白质含量、氨基酸构成和分子量分布情况进行测定,以DPPH自由基、OH自由基和还原能力为指标,评价豌豆低聚肽的体外抗氧化作用。结果表明,水分为4.46%±0.02%,灰分为5.04%±0.03%,总氮含量(以干基计)为88.30%±2.25%,酸溶蛋白含量(以干基计)为84.20%±2.04%。氨基酸含量丰富,谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸比例高,分子量有92.95%分布在1 000 Da之下,清除DPPH自由基、OH自由基的IC50值分别为3.39±0.02 mg/mL和23.72±0.10mg/mL,同时也具有较高的还原能力。     

食源性低聚肽的血管紧张素转化酶(ACE)抑制作用

在对海洋胶原低聚肽、乌鸡低聚肽、玉米低聚肽、小麦低聚肽、大豆低聚肽的基础理化成分和分子量分布进行分析的基础上,对其ACE抑制作用进行了考察。组成分析显示:5种食源性低聚肽中蛋白质含量很高,均达到了85%以上;分子量大多为1000 u以下(均在85%以上),主要分布在132~576 u范围内。ACE抑制作用实验结果显示:这5种食源性低聚肽的ACE抑制活性均呈显著的量效关系,半抑制浓度IC_(50)值在0.53-2.76 mg/mL之间,其中玉米低聚肽的ACE抑制作用最强,乌鸡低聚肽的ACE抑制作用最弱。研究明确了食源性低聚肽的ACE抑制作用,为其作为降血压保健食品的开发利用提供了一定的理论支持。     

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。     

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。      

基于分子质量分布的食源性低聚肽品质评价

研究收集了12种市面在售的不同来源的食源性低聚肽粉样品,采用高效凝胶色谱法绘制出样品的分子量分布图,并通过GPC软件分析各自的分子量分布范围和集中区域,重点分析了低聚肽样品在分子量1000以下、最小二肽(Gly-Gly)和最大三肽(Trp-Trp-Trp)分子量区间内以及20种常见氨基酸平均分子量以下的比例。实验结果表明,在所检测的样品中有5种低聚肽样品的品质较好,5种样品的品质一般,还有2种样品的品质较差。进而在蛋白质含量测定以及酸溶蛋白含量测定的常规检测基础上,提出更加深入的品质评价指标,具体包括:(1)食源性低聚肽粉产品的分子量1 000以下的比例应达到85%以上;(2)产品在分子质量132～576区间内所占的比例应在65%以上;(3)产品的分子质量137以下所占比例应在5%以下。     

食源性低聚肽的成分分析及持钙能力研究

采用两步酶解法制备出海洋胶原肽、海洋骨原肽、海洋蛋白肽、乳清肽、卵白肽、玉米肽、大豆肽7种食源性低聚肽,对其基础理化成分、氨基酸组成和分子量分布进行分析,然后采用火焰原子吸收分光光度法测定低聚肽的持钙能力。成分分析显示:7种低聚肽的蛋白质含量很高,均在80%以上;所有低聚肽均具各自的氨基酸构成特点,不同低聚肽氨基酸含量不同;低聚肽是小分子肽的混合物,以分子量在132～576u之间的肽为主。持钙能力实验结果显示:大豆肽的持钙效果最好,在6mg/mL和10mg/mL的添加浓度下,钙损失率分别为8.55%和5.49%。其它肽在6mg/mL和10mg/mL的添加浓度下,钙损失率均在35.95%至60.20%之间,其中乳清肽持钙效果相对较好。通过评价不同低聚肽的持钙能力,可用于筛选食源性促钙吸收肽,为进一步动物试验或临床试验提供促钙吸收活性依据。     

模拟胃肠消化对牡蛎低聚肽抗氧化活性的影响

以去壳牡蛎肉为原料通过酶解法制备牡蛎低聚肽,并通过体外模拟消化试验,对比消化前后牡蛎低聚肽分子量分布、DPPH自由基清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、ABTS自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)变化,探究牡蛎低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。试验结果显示,牡蛎低聚肽的相对分子量主要在1 000 Da以下,胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后重均分子量下降不超过8.2%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率降低分别不超过7.9%,8.7%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,·OH清除率降低分别不超过9.3%,3.8%;胃蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率降低9.2%,胰蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率提高3.6%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,ORAC值分别提高11.5%,1.3%。胃肠消化对牡蛎低聚肽的抗氧化活性评价各指标均无显著性影响(P＞0.05)。说明牡蛎低聚肽具有较好的综合抗氧化活性和稳定性。     

大豆低聚肽分子质量分布的测定及体外消化实验

为验证国产化大豆低聚肽产品分子质量分布和产品在体内经消化道后的稳定性,对该产品进行了分子质量分布测定及体外消化实验,目的是为以大豆低聚肽为原料开发功能性保健系列产品提供产品稳定性的理论依据。研究结果显示,国产大豆低聚肽分子质量均低于1 000 Da;经胃蛋白酶处理后,该大豆低聚肽95%以上未被消化,经胰蛋白酶处理后,约90%未被消化,说明该产品具有良好的稳定性,在体内大部分将以多肽的形式被直接吸收。同时应用该大豆低聚肽产品开发功能性食品时,其本身所具有的各项生理功能将不会发生改变。     

黄豆酱中低聚肽的分离及抗氧化活性研究

为研究黄豆酱中低聚肽的抗氧化性质,以黄豆酱为原料,通过超滤、离子色谱、凝胶色谱等技术手段分离出黄豆酱中高抗氧化活性组分,并确定其抗氧化活性与分子量分布。获得最佳分离条件:DEAE离子交换树脂上样最佳pH为8.6,葡聚糖凝胶G-15分离最佳流速为2mL/min,上样浓度为1.2mg/mL,并确定高抗氧化活性的两组黄豆酱低聚肽分子量范围为925~1 124Da和580~925Da。     

紫苏籽低聚肽中营养及特征成分研究

考察了紫苏籽低聚肽蛋白质含量、低聚肽含量、相对分子质量分布、氨基酸组成以及具有功能活性特征肽段成分。结果显示,蛋白质含量为93.14%,低聚肽含量为86.35%,相对分子质量主要分布在140～1 000 Da,占总比例的82.8%,氨基酸组成较为平衡,精氨酸含量较高,为102.72 mg/g。胱氨酸和蛋氨酸是紫苏籽低聚肽的限制氨基酸。必需氨基酸指数为59.55%,氨基酸组成基本符合FAO/WHO推荐的人体必需氨基酸的构成模式。从紫苏籽低聚肽中鉴定出了2条具有生物活性的二肽结构,分别为甘氨酰精氨酸二肽(glycyl-arginine,GR)和丙氨酰精氨酸二肽(alanlyl-arginine,AR),这2条二肽序列均为国内外首次从紫苏籽低聚肽中鉴定出来。     

玉米低聚肽硒螯合物的体外抗氧化作用

以玉米低聚肽和亚硒酸钠为原料经螯合工艺制得玉米低聚肽硒螯合物,对其水分、粗蛋白、酸溶蛋白、分子量分布情况进行了考察,然后从DPPH自由基、OH自由基清除能力和还原能力3方面对螯合原料和螯合物进行抗氧化功能对比与评价。结果表明,螯合得率为53.02%±0.17%,水分含量为7.46%±0.07%,酸溶蛋白占粗蛋白的比例为77.38%,分子量分布在1000u以下的比例超过85%。螯合原料中亚硒酸钠仅对OH自由基有较强清除能力;玉米低聚肽对DPPH自由基、OH自由基均有一定清除能力,且具有一定还原性;螯合物清除DPPH自由基、OH自由基能力及还原能力均比玉米低聚肽强,且具有剂量依赖。     

玉米醒酒肽的脱苦工艺研究及表征分析

蛋白质水解后其热稳定性、溶解性以及功能特性得到了改善,同时形成了大量的苦味肽。采用活性炭吸附法对玉米醒酒肽脱苦工艺条件进行研究。通过响应曲面分析方法优化其水解工艺,结果表明,脱苦温度为29.7℃,固液比为1∶12(m/v),pH为3.5,时间2h。所测得的玉米肽液中OD220/OD280为37.90。采用高效液相色谱法对玉米醒酒肽进行测定分子量的实验,结果表明:玉米醒酒肽的分子量主要分布在1356.594 Da³207.308 Da之间。氨基酸分析结果显示:玉米醒酒肽中亮氨酸含量最高,丙氨酸其次。     

不同链长花生蛋白肽的体外抗氧化活性研究

研究不同链长花生蛋白肽的体外抗氧化活性.采用碱性蛋白酶Alcalase水解花生蛋白质,经超滤获得分子量介于5 000～3 000 Da之间以及分子量小于3 000 Da的2种花生蛋白肤混合物PPH-1和PPH-2;以VE为对照,分别测定肤对脂质过氧化的抑制性能、还原能力和对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)清除能力.在抑制脂质过氧化方面,浓度为0.05 mg/mL时,PPH-1的活性低于VE,PPH-2的活性则高于VE,在第7天,PPH-1和PPH-2对脂质过氧化的抑制率分别为69.1%和84.5%;在还原能力方面,PPH-2的活性大于PPH-1,但二者均低于VE,在浓度为1 mg/mL时,PPH-1和PPH-2的还原能力分别与浓度为0.013,0.021 mg/mL的VE相当;在自由基清除能力方面,随着花生蛋白肽浓度的增加,其对二苯代苦味酰基自由基清除能力增大,在浓度达到50 mg/mL时,PPH-1和PPH-2对二苯代苦味酰基自由基的清除率分别是35.2%和60.3%.PPH-2的分子量主要分布在2大区域,其氨基酸含量达到91.15%.分子量小于3 000 Da的花生蛋白肽具有较好的抗氧化活性.