益生菌抗氧化活性及菌体抗氧化相关成分的分析

目的比较乳杆菌、双歧杆菌、嗜热链球菌和乳酸乳球菌的抗氧化活性,分析抗氧化活性较高菌株内与抗氧化相关的成分。方法采用清除DPPH自由基、清除羟自由基以及抗脂质过氧化能力3种方法评价40株益生菌的抗氧化活性,选出抗氧化活性较高的菌株分析其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和总巯基化合物(TTG)的含量。结果所比较的40株益生菌的抗氧化能力差别较大,既具有种属特异性,又具有菌株特异性;7株嗜热链球菌和11株乳酸乳球菌中的SOD活性最高[(平均分别为124.02U/mg(蛋白质)和107.10U/mg(蛋白质)]、2株双歧杆菌中GSH的含量最高(平均为311.03μmol/L细胞破碎液),所分析的菌株中TTG含量均较高。研究结果表明,实验菌乳酸乳球菌清除自由基能力最强,其次是嗜热链球菌,所试验的乳杆菌和双歧杆菌最弱;SOD对益生菌的抗氧化起主要作用;GSH的存在因种属和菌株的不同而差别较大;TTG对益生菌的抗氧化起了积极作用。     

Activity of Brassica oleracea leaf juice on foodborne pathogenic bacteria

Many vegetables of the Cruciferae family have been found to possess antimicrobial properties against several microorganisms of clinical importance. In this study, we reported the antibacterial effect of Brassica oleracea juice on several food-borne pathogens. The juice was found to be effective in inhibiting the growth of Salmonella Enteritidis, verotoxigenic Escherichia coli O157:H7, E. coli HB producing thermolabile toxin, nontoxigenic E. coli, and Listeria monocytogenes, but not Enterococcus faecalis. All cauliflower cultivars tested suppressed bacterial growth in a dose-dependent manner after 5 h of treatments, and the reduction in the number of viable cells ranged from 1 log with a 10% juice concentration to more than 3 log with a 20% juice concentration. The foodborne bacteria tested were also markedly reduced by isothiocyanates, natural components abundant in the genus Brassica, indicating that glucosinolate-derived isothiocyanates can play a major role in the antimicrobial activity of cauliflower. The antimicrobial effect of juice was reduced in presence of cysteine, suggesting that one mechanism of action of the juice involves blocking bacterial sulfhydryl groups.     

马齿苋多糖组分的分离纯化及抗氧化活性研究

本文对马齿苋总多糖进行了纯化分离,得到了POLⅠb、POLⅡa、POLⅢ’三种单一的多糖组分,分子量分别为18kD、56kD和410kD;均是非单一组分多糖,POLⅠb、POLⅢ’主要由葡萄糖、半乳糖组成,含有α-糖苷键;POLⅢ含有六种单糖,分别是阿拉伯糖、木糖、果糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,含有β-糖苷键。三种多糖体外实验证明均有一定的抗氧化功能,POLⅢ对于·OH有较高的灭活作用。     

甘蓝中氟啶脲残留量测定方法的研究

建立氟啶脲在甘蓝中的残留分析方法。样品用乙酸乙酯提取,弗罗里硅土柱净化,高效液相色谱法测定。结果表明：本方法最小检出量为1.2ng,在0.05、0.5、2mg/kg 添加水平下,添加回收率在81.95%～100% 范围内,变异系数范围为2.37%～6.21%。该方法符合农药残留分析的要求,适于甘蓝中氟啶脲的检测。     

Metabolites of Eurotium Species, Their Antioxidative Properties and Synergism with Tocopherol

Natural antioxidants and synergists for tocopherol (Toc) have been isolated as acetone or ethyl acetate extracts from mycelial mats or culture broth of Eurotium species. The acetone extract, eluted stepwise with benzene and ethyl acetate by silica gel column chromatography, gave fractions that were synergistic with Toe. However, the benzene fraction appeared better because it was highly soluble in oil and did not change the color and taste of the oil. The metabolites in the benzene fraction differed in the various Eurotium species in their composition in respect to known metabolites with antioxidative activity.     

响应面法优化生姜蛋白酶活性测定方法

以生姜蛋白酶为研究对象,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化酶活测定条件,探讨反应时间、反应温度、底物浓度、缓冲液pH值对姜酶活性的影响。通过软件分析得出生姜蛋白酶活性测定最佳条件:反应时间3.6min,反应温度46.44℃,底物浓度0.95%,缓冲液p H6.78,此条件下生姜蛋白酶活130.46 U,验证试验测得生姜蛋白酶活性为133.15 U,与预测值吻合。试验结果表明,响应面法优化生姜蛋白酶活性测定方法可行。     

磷脂酶酶活力测定条件的优化

采用无油磷脂为底物,酸碱滴定法测定磷脂酶LecitaseUltra的酶活力,在单因素试验的基础上,选定反应时间、反应温度、反应pH值进行响应面分析试验,建立磷脂酶酶活力的二次回归方程,通过响应面分析得到酶活力测定的优化组合条件。结果表明:反应时间、反应温度、反应pH值对酶活力都有极其显著影响,测定酶活力的最佳条件为:底物质量浓度4g/100mL、终点pH 9.0、酶液稀释倍数100倍、反应pH5.1、反应温度53℃、反应时间8min,得到磷脂酶的酶活力为9550U/g。     

反相高效液相色谱法测定5种藏羌五加菜中金丝桃苷的含量

目的：建立5种藏羌五加菜中金丝桃苷的反相高效液相色谱法含量测定方法,并比较其金丝桃苷的含量差异。方法：采用液相色谱-质谱定性鉴别红毛五加、糙叶藤五加和蜀五加中金丝桃苷。金丝桃苷提取物通过60%乙醇溶液回流提取105min制得;Kromasil C18柱(4.6mm×250mm,5μm)、柱温30℃,流动相甲醇(A)-0.5%磷酸溶液(B),梯度洗脱;检测波长355nm,流速1mL/min。结果：金丝桃苷在0.17～2.55mg范围内峰面积与进样量具有良好的线性关系,回归方程Y＝2×106X＋1.94883×106(r＝0.9990,n＝6)。平均回收率100.31%,RSD为0.95%(n＝9)。结论：本法简便、准确、重复性好,可用于五加菜质量的控制方法研究。四川阿坝藏族羌族自治州、四川甘孜藏族自治州的五加属植物中金丝桃苷含量：老叶远低于嫩叶;糙叶藤五加嫩叶(低温烘干品)≈蜀五加嫩叶(低温烘干品)＞红毛五加嫩叶(低温烘干品)＞无梗五加嫩叶(低温烘干品);糙叶藤五加的不同加工工艺：阴干＞茶叶＞烘干＞热烫≈微波干燥≈晒干＞＞盐渍＞冻藏1个月≈热烫后冻藏1个月。     

车前子总黄酮的提取工艺优化及体外抗氧化作用研究

通过正交试验,对溶剂法提取车前子总黄酮化合物的工艺进行了优化研究。实验结果表明,各因素对总黄酮提取率的影响程度由大到小依次为:乙醇浓度>温度>提取次数>固液比。最佳提取工艺条件为:乙醇浓度60%,固液比1:30,提取温度90℃,提取3次,每次2h。用DPPH法和邻苯三酚自氧化法评价了该提取物的体外抗氧化能力。结果表明,车前子总黄酮具有较强的体外抗氧化活性。     

壳聚糖没食子酸衍生物酶法催化条件优化及抗氧化活性和细胞毒性

利用漆酶、辣根过氧化物酶在均相和非均相反应体系中催化壳聚糖与没食子酸反应,以增强壳聚糖的抗氧化性。研究酶种类、反应体系p H值、反应温度、反应时间、酶用量和底物的质量比等因素对产物接枝率的影响。利用单因素试验和正交试验确定的最适反应条件为反应p H 4.5、反应温度25℃、反应时间5 h、没食子酸与壳聚糖的质量比3∶1、漆酶用量4 U,此条件下衍生物的接枝率为65.2%。对衍生物分别进行体外抗氧化活性和细胞毒性检测,结果表明,在相同添加量的情况下,衍生物的抗氧化性显著高于未改性的壳聚糖,而且产物无细胞毒性。     

普鲁兰酶活性测定方法

本文以酶学动力学理论为依据,对国产普鲁兰酶制剂的特性及酶活性测定体系进行了研究,在原有方法的基础上,修改了测定条件,提出两种分别以糯米淀粉和普鲁兰多糖为底物的测定方法,和原方法相比,有测定周期短,操作简便,准确度高等优点。     

利用青海大黄油菜和芥蓝合成大粒甘蓝型油菜

利用青海大黄油菜（QD,2n=20,AA）与几种不同的甘蓝（CC,2n=18）正反杂交,辅以幼胚抢救、子房培养和染色体加倍技术人工合成甘蓝型油菜。结果表明：以QD为母本的多个杂交组合获得69株杂种苗,反交组合均未得到正常发育的胚。与中迟芥蓝杂交后的QD子房在MS、1/2MS、MS＋0.2mg/L 6-BA三种培养基中得胚率依次为15.5%、8.9%和4.4%,共获得24个杂种胚,而在MS＋1.5mg/L 6-BA＋0.25mg/L NAA分化培养基上角果内未发现成熟胚。染色体加倍处理结果表明,在培养基中添加秋水仙素后加倍率最高（59.4%～86.4%）。SSR分子标记结果显示：受试材料全部为真杂种,并且没有出现新增带和缺失带。人工甘蓝型油菜在形态上介于双亲之间,千粒重较高,达到5.48g～7.45g,显著高于甘蓝型油菜品种青油14号和中双4号。     

Free Radical Scavenging Activity of Aqueous and Ethanolic Extract of Brassica oleracea L. var. italica

In this study, antioxidant activities of aqueous and ethanolic extracts of Brassica oleracea L. var. italica were investigated. The antioxidant properties of both extracts of Brassica oleracea L. var. italica were evaluated using different antioxidant tests, including 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging, superoxide radical scavenging, inhibition of microsomal lipid peroxidation, reduction of power, and metal ion chelating activities. Inhibition of superoxide scavenging by aqueous and ethanolic extracts showed an IC₅₀ of 0.93 and 0.25 mg/ml, respectively. Metal ion chelation showed an IC₅₀ of 0.35 mg/ml of both the extracts and was equipotent to positive control, ethylenediamine tetra-acetic acid. The ethanolic extract of Brassica oleracea L. var. italica exhibited higher antioxidant activity in DPPH radical and superoxide anion scavenging than that of aqueous extract. The results obtained in the in vitro models clearly suggest that, Brassica oleracea L. var. italica is a natural source for antioxidants, which could serve as a nutraceutical with potential applications in reducing the level of oxidative stress and related health benefits. However, comprehensive studies need to be conducted to ascertain the in vivo safety of such extracts in experimental animal models.     

反相高效液相色谱测定不同品种皱皮木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量

采用反相高效液相色谱法测定鲜皱皮木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量,并进行方法学考察.采用Agilent C18 柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-1%HAc水溶液(85:15);流速:0.6ml/min;柱温:35℃;检测波长:210nm.齐墩果酸在0.162～6.48 μg范围内线性良好,回归方程为y=512802x 19211(R2=0.9997),平均回收率分别为100.2%,RSD为0.9%(n=6);熊果酸在0.391～15.62μg范围内线性良好,回归方程为y=50865x-5090.4(R2=0.9998),平均回收率为100.0%,RSD为1.1%.该方法简便准确,重现性好,适用于鲜皱皮木瓜中齐墩果酸和熊果酸的定量分析.     

一种简易的尿激酶活性测定方法

本研究改良了溶栓酶筛选采用的平板法,建立了一种新的尿激酶活性测定方法。该方法以琼脂糖为载体,纤维蛋白原经凝血酶激活后转变为纤维蛋白形成凝块,再经尿激酶作用使其溶解,形成透明圈,透明圈的面积与尿激酶的活性大小呈正相关。与《药典》中使用的气泡法测定尿激酶活性相比该方法成本低、操作简单、重复性好。     

响应面法优化树莓鞣花酸提取工艺及其体外抗氧化活性

本研究旨在通过微波辅助提取法确定树莓鞣花酸的最佳提取工艺,并对其抗氧化活性进行研究。以红树莓为实验原料,使用乙醇提取溶剂,采用微波辅助溶剂法提取红树莓中鞣花酸,通过单因素试验与响应面试验优化红树莓中鞣花酸提取工艺,利用高效液相色谱(HPLC)法对鞣花酸进行分析测定,并对其抗氧化性进行研究。结果表明:响应面试验优化出最佳提取条件为:提取时间1.8 min、提取温度60 ℃、乙醇浓度50%、液料比19:1、微波功率411 W,此条件下测得鞣花酸提取量为(82.75±1.05) mg/100 g,高于传统盐酸水解法在最佳提取条件下所测树莓鞣花酸提取量。实际结果与理论预测高度吻合,因此本实验得到的最优条件准确可靠有参考应用价值。微波辅助溶剂法所得鞣花酸对羟自由基清除能力、清除DPPH自由基能力都显著高于传统盐酸水解法所得鞣花酸对羟自由基清除能力,清除DPPH自由基能力,说明微波辅助溶剂提取法,不但提取时间短暂,提取溶剂用量少,而且更好的保护了树莓鞣花酸的抗氧化活性,可为树莓鞣花酸工业生产提供一定参考。     

牡丹花粉黄酮的提取及抗氧化性研究

采用水浴回流和闪式提取两种方法对牡丹花粉中的黄酮类物质进行提取,以总黄酮得率为指标,通过正交试验对两种提取方法的工艺进行优化。并利用体外抗氧化测试法对两种工艺的提取粗产物进行了总抗氧化能力和还原力研究比较。结果表明,水浴回流法的最优工艺参数为:溶剂100%乙醇,提取时间60 min,水浴温度90℃,料液比1∶20(g/mL),总黄酮得率为8.28%;闪式提取法的最优工艺参数为:乙醇浓度90%,提取时间2 min,料液比1∶25(g/mL),提取转速4 000 r/min,总黄酮得率为7.89%;两种方法黄酮得率相近。另外两种方法提取产物的抗氧化性数据显示,闪式提取是一种不改变提取物活性、高效率的提取方法。