荧光PCR技术应用于芥辣调味品原料真伪鉴别

建立一种用于鉴别芥辣调味品中山葵和辣根成分的荧光PCr检测方法。分别针对山葵和辣根两种植物的基因设计特异性的引物及探针,以此建立相应的荧光PCr检测方法,并进行灵敏度和特异性的验证。结果表明,所建立的方法具有良好的特异性,能够准确鉴别山葵和辣根成分,检测灵敏度可以达到0.1%,并可应用于实际样品的检测。该方法准确、稳定,可为市售芥辣调味产品的原料真伪鉴别提供可靠的技术支持。     

日本青芥辣酱膏的制作技术

以辣根粉为原料,辅以其它配料,通过科学方法进行了大量试验,配制出目前市场上流行的调味品--日本青芥辣酱膏.为在我国有着较大种植面积和较好经济潜力的辣根和山嵛菜的深加工提供了一条途径.     

基于ITS2序列及二级结构对紫苏与其变种、紫苏子与其混伪品的鉴别

采用ITS2 一级序列联合其二级结构对紫苏与其变种、紫苏子与其混伪品进行鉴定,为紫苏药材的使用提供更科学的分类方法.收集紫苏与其近缘种、紫苏子混伪品基源植物样本,提取DNA进行PCR扩增;并结合GenBank中的序列获得所有物种的ITS2序列.应用MEGA7.0软件进行序列分析、计算种内种间遗传距离、构建NJ树,利用I...     

基于DNA条形码的食用菌与其易混有毒真菌的鉴定

目的 利用DNA条形码技术对常见可食用真菌与其易混的野生有毒真菌进行分子鉴定。方法 使用MEGA7.0软件对GenBank中获得菌类的ITS2、nrLSU及EF1-α基因序列进行分析和序列比对,计算各分类群种内与种间的kimura 2-parameter (K2P)遗传距离、构建相邻结合法(neighbor joining, NJ)系统聚类树,利用ITS2数据库预测各物种的ITS2二级结构。利用4Sale软件进行ITS2二级结构比对,运用ProfDistS软件构建剖面邻接(profile neighbor joining,PNJ)进化树。结果 遗传距离结果表明各分类群存在明显的条形码间隔(barcoding gap);NJ树结果显示各物种均可独立分支,具有良好的单系性;PNJ树同样可以区分食用菌与易混有毒真菌;各物种的ITS2二级结构均存在明显差异。结论 ITS2、nrLSU和EF1-α可作为DNA条形码用于可食用真菌与其易混的野生有毒真菌的鉴定,为推动真菌的分子鉴别在食品安全管理中广泛应用,保障食品安全与公众健康提供了新的技术手段。     

基于ITS2序列鉴定荠菜及其混伪品

目的选用ITS2序列对湖南苗药荠菜及其混伪品进行分子鉴定,为其用药安全、有效提供保障。方法采用DNA条形码技术,对荠菜的ITS2核基因片段进行扩增并双向测序,经Codon Code Aligner拼接后,用MEGA软件分析相关数据,构建邻接(NJ)系统聚类树进行鉴定分析,并用Koetschan等建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果荠菜ITS2序列长度为194 bp,其种内平均K2P遗传距离远远小于其与混淆品的种间K2P遗传距离;由所构建的系统聚类树图可以看出,各物种均表现出了单系性,而同时又与其他物种明显区分开;比较ITS2二级结构发现,各物种在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论 ITS2作为条形码可以方便快捷地鉴别荠菜及其混淆品,进一步验证了DNA条形码技术鉴定中药材的有效性。     

白扁豆的DNA条形码技术鉴别研究

目的鉴定白扁豆及其混伪品ITS2条形码,为白扁豆药材鉴定提供新方法。方法采用PCR法扩增ITS2序列,并双向测序,经Codon Code Aligner拼接后,利用MEGA软件进行数据处理,构建系统聚类树(NJ树)。结果白扁豆ITS2序列长度为218 bp,由所构建的系统聚类树图可见,各物种均表现单系性,同时又可与其它物种明显区分。结论 ITS2条形码适用于白扁豆及其混淆品的快速鉴别,进一步验证了DNA条形码技术应用于中药材鉴别的有效性。     

块茎山嵛菜中五种异硫氰酸酯类化合物的评价及干燥工艺的影响

块茎山嵛菜（Eutremajaponicum），俗称山葵（Wasabi），是风味独特的药食两用植物。异硫氰酸酯类化合物的种类和含量高低决定了山嵛菜属（Eutrema）的口感，因此对主要有效成分进行准确测定是评价不同商品以及野生山嵛菜品质的基础。本研究使用液相色谱法（HPLC）测定了不同酶解时间、不同干燥处理、常温和低温保存条件下，块茎山嵛菜中异硫氰酸酯（AITC）、3-丁烯基异硫氰酸酯（BITC）、5-甲硫基戊基异硫氰酸酯（5-MPITC)、6-甲硫基异硫氰酸酯(6-MHITC)、6-甲磺基异硫氰酸酯(6-MITC)等五种主要异硫氰酸酯化合物的含量。结果表明，无论是新鲜样品还是干燥样品，甲醇酶解90min活性成分提取率最高；常规热干燥、减压干燥、冷冻干燥等三种方法干燥处理活性成分均低于新鲜药材直接提取；超低温保存的样品与新鲜样品有效成分没有显著性差异。最终评价出新鲜药材提取法最大程度保留了山嵛菜中异硫氰酸酯类活性成分，该方法可用于比较块茎山嵛菜栽培种与其野生近缘种异硫氰酸酯的含量差异，并为山嵛菜属蔬菜资源筛选建立重要的评价指标。     

台台缘

山葵酱苹果圈虾球 主料：明虾肉4件、苹果2只 副料：面包糠、蛋黄、澄面调料：山葵酱、沙拉酱、新鲜山葵2支 制作过程：1、将山葵去皮,打成末,和山葵酱、沙拉酱调成风味的山葵酱备用。 2、苹果去皮去核,刻成苹果圈,挂少许蛋黄拍上面包糠炸成金黄色待用。 3、虾球略腌上浆拍粉炸熟裹上山葵酱和苹果圈组装成菜即可。 特点：山葵风味清新、口味层次丰富     

创领中国人的餐料技术标准,再次缔造"世界瓦沙必"

"瓦沙必",在日语里是"芥末"、"山葵"的意思."芥末"、 "山葵"是地道的日式餐料,广泛应用于日式、韩式料理店,以及一些海鲜酒楼. 最初中国市场的日式餐料都是从日本进口的,后来日本企业纷纷将工厂设在山葵的生产基地--大连,并与当地企业合作,将产品销往国际或内销.随着市场的发展,合资的国内企业纷纷自立门户,生产出更适合中国人口味的日式餐料,大连瓦沙必食品有限公司(以下简称瓦沙必)正是其中的领跑者.     

苗药一枝黄花及其混伪品的DNA条形码鉴别

目的选用DNA条形码对湖南苗药一枝黄花及其混伪品进行分子鉴定,为其药材鉴别与安全提供技术支撑。方法利用DNA条形码方法,分别对一枝黄花及其混伪品的ITS2核基因片段和psb A-trn H叶绿体基因片段进行扩增并双向测序,使用Codon Code Aligner软件对其序列进行拼接,用MEGA软件对数据比对分析,构建邻接(NJ)系统聚类树鉴定分析,并用Koetschan等分析预测ITS2二级结构。结果一枝黄花的ITS2序列长度为223 bp,其种内平均K2P遗传距离小于混淆品的种间K2P遗传距离;由所构建的系统NJ聚类树图表明,各物种呈现一定的区域性,又可与其它物种明显区分,而基于psb A-trn H序列构建的统聚类树图不能将一枝黄花区分;通过ITS2二级结构比对分析,一枝黄花和其混伪品的4个螺旋发出时的角度及螺旋区的茎环位置、大小、数目均有明显区别。结论 ITS2作为条形码可方便快捷地鉴别一枝黄花及其混淆品,进一步验证了DNA条形码技术鉴定中药材的有效性。     

Diversity of lactic acid bacteria in suan-tsai and fu-tsai, traditional fermented mustard products of Taiwan

Fu-tsai and suan-tsai are spontaneously fermented mustard products traditionally prepared by the Hakka tribe of Taiwan. We chose 5 different processing stages of these products for analysis of the microbial community of lactic acid bacteria (LAB) by 16S rRNA gene sequencing. From 500 LAB isolates we identified 119 representative strains belonging to 5 genera and 18 species, including Enterococcus (1 species), Lactobacillus (11 species), Leuconostoc (3 species), Pediococcus (1 species), and Weissella (2 species). The LAB composition of mustard fermented for 3 days, known as the Mu sample, was the most diverse, with 11 different LAB species being isolated. We used sequence analysis of the 16S rRNA gene to identify the LAB strains and analysis of the dnaA, pheS, and rpoA genes to identify 13 LAB strains for which identification by 16S rRNA gene sequences was not possible. These 13 strains were found to belong to 5 validated known species: Lactobacillus farciminis, Leuconostoc mesenteroides, Leuconostoc pseudomesenteroides, Weissella cibaria, and Weissella paramesenteroides, and 5 possibly novel Lactobacillus species. These results revealed that there is a high level of diversity in LAB at the different stages of fermentation in the production of suan-tsai and fu-tsai.     

16S与gyrB基因联合建树快速鉴定一株蜡样芽孢杆菌

开发一种可用于保守序列相似度较高的菌群快速鉴定的方法,并用其鉴定一株从土壤采集的芽孢杆菌。从厦门市同安国家农业科技园区施用动物肥的种植区采集土壤,稀释涂布平板,分离纯化菌株后,扩增16S与gyrB基因序列并测序,在Genbank选择序列相似的ATCC菌株进行比对,将16S序列与gyrB序列线性拼接后,利用Paup* 4.0构建进化树,通过生理生化实验对鉴定结果进行验证。在16S序列与gyrB基因序列单独建树均无法鉴定到种的情况下,通过16S与gyrB碱基线性拼接序列联合建树,将土壤中分离得到的芽孢杆菌HX2016002鉴定为蜡样芽孢杆菌,该方法所构建的进化树自展值高,鉴定结果与生理生化实验一致。对Genbank中已知的蜡样芽孢杆菌序列建树分析表明,该方法在蜡样芽孢杆菌中具有普适性。利用16S与gyrB基因拼接序列联合建树,在保守序列相似度高的属内菌种鉴定中具有进一步研究的价值。     

利用LC-MS技术解析黑果枸杞、红果枸杞代谢物的差异

为了分析比较黑果枸杞和红果枸杞代谢物的差异.利用液相色谱质谱联用技术(LC-MS)分析其代谢产物,共检测出6 982种代谢物,包括负离子2 704个,正离子4 278个;主成分分析(PCA)分析发现,黑果枸杞和红果枸杞可以被区分开;对差异代谢物的分析发现,二者共有501种差异代谢物,其中表达量前50的差异代谢物中有7种...     

Expression and purification of the recombinant mustard trypsin inhibitor 2 (MTI2) in Escherichia coli

The mustard trypsin inhibitor 2, MTI2, was expressed in Escherichia coli. A specific procedure for its production and purification is described. The recombinant protein was recovered by protein extraction from the insoluble fraction, then renatured and purified by ion exchange and gel filtration chromatography. Finally, the inhibitory activity against trypsin was also determined.     

Effect of a global regulatory gene, afsR2, from Streptomyces lividans on avermectin production in Streptomyces avermitilis

The global regulatory gene, afsR2, from Streptomyces lividans was previously reported to highly stimulate two structurally unrelated antibiotics, actinorhodin and undecylprodigiosin, in both S. lividans and its close relative S. coelicolor. Production of eight avermectin components was also improved in S. avermitilis: the use of wild-type S. avermitilis and its high-producing mutant, transformed by introduction of multiple copies of afsR2, increased the total avermectin productions by 2.3-fold and 1.5-fold, respectively.     

Expression of a gene encoding chitinase (pCA 8 ORF) from Aeromonas sp. no. 10S-24 in Escherichia coli and enzyme characterization

A gene encoding chitinase from Aeromonas sp. no. 10S-24 was expressed using pTrc99A in Escherichia coli JM 105 which yielded a 5-fold higher activity than when pUC19 was used. Three different truncated enzymes (SA-1, SA-2 and SA-3) were obtained after purification. Their isoelectric points were 7.0, 6.9, and 6.7, respectively. The enzymes showed two optimum pHs, 4.0 and 7.0, when incubated with ethylene glycol chitin as the substrate, and were stable over a wide pH range (3.0–9.0). The optimum temperature was 60°C and the enzymes were stable up to 50°C. The chitinases exhibited wide substrate specificities for chitin-related compounds.     

云南不同品种大叶种茶树生化成分季节变化特征分析

探讨品种及季节对云南大叶种茶树生化成分的影响,为茶树种植品种及茶叶加工采摘季节的选择提供一定理论依据.采用云南大叶种云抗10号、云抗14号、雪芽100号、佛香2号和紫娟共5个品种为供试材料,在春、夏和秋三季,分别取其新梢的一芽二叶进行蒸青固样,分析不同季节5个茶树品种主要生化成分(水分、水浸出物、茶多酚、儿茶素组分、氨...     

变形假单胞菌吡咯喹啉醌合成基因簇的克隆与分析

从变形假单胞菌JUIM01中克隆到吡咯喹啉醌(PQQ)合成基因簇,阐明了其基因组成和生物学信息。根据已报道的假单胞菌的基因组进行简并引物设计,采用LA-PCR技术克隆变形假单胞菌的PQQ合成基因簇,对克隆的基因片段进行测序并使用生物信息学方法进行综合分析。结果表明:克隆到的基因片段全长为11 659 bp,其中包括pqqF、pqqA、pqqB、pqqC、pqqD、pqqE、pqqM、pqqH和pqqI共9个基因,编码PQQ生物合成的前体短肽PqqA和合成途径的相关酶;这些基因与荧光假单胞菌Pf0-1的PQQ合成基因簇的基因组成类似,相应基因的序列一致性达41%～94%。本研究中首次从变形假单胞菌中克隆到PQQ合成基因簇,并对其进行生物信息学分析,为变形假单胞菌的PQQ生物合成途径和胞内再生机制的研究奠定了基础,进而为提高2KGA的生产强度提供了理论支撑。