用玉米芯酶法制备低聚木糖

本文报道了制备木聚糖酶所用最经济斜面和最佳碳源。研究探讨了以稀碱液处理玉米芯作原料，用sp.E-86菌株产的木聚糖酶制备低聚木糖。用TLC法测定研究所得的产物是以木糖、木二糖为主的低聚木糖产品。     

利用玉米芯木聚糖酶法制备低聚木糖的研究

该文采用源于Thermotoga maritima的木聚糖酶基因工程菌JMl09(DE3)／pET-20b-xynB制备木聚糖酶液，试验结果表明，工程菌产木聚糖酶的最佳诱导条件：诱导剂乳糖浓度为25mmol／L；诱导时间为6h。酶法制备低聚木糖时，采用3％～5％的底物浓度和11．25U／g的酶用量较为适宜。TLC检测海栖热袍菌木聚糖酶水解玉米芯木聚糖的酶解产物主要为木二糖和木三糖。     

不同原料酶法制备低聚木糖的研究及成分分析

对木聚糖酶的酶学特性进行了研究,同时以甘蔗渣、玉米芯、麸皮、啤酒槽为原料酶解制备低聚木糖并对其酶解液的还原糖含量和主要成分进行了分析。结果表明:该木聚糖酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH为5.0;同时在温度为40～60℃和pH为6的情况下,木聚糖酶具有较好的稳定性。在最佳酶解条件下,采用木聚糖酶酶解甘蔗渣、玉米芯、麸皮、啤酒槽中的木糖,通过测定酶解液中的还原糖含量以分析木聚糖的水解度,结果表明,麸皮中木聚糖的水解度最高,为21.19mg/mL;其它依次为啤酒糟、玉米芯、蔗渣。采用高效液相色谱法对4种不同原料的木聚糖酶水解产物进行分析,结果显示:啤酒糟的酶解产物中木二糖和木三糖的相对含量最高,分别为13%、26.7%,其他依次为玉米芯、麸皮、甘蔗渣。     

酶法制备玉米芯低聚木糖工艺条件的研究

采用质量分数为10％的NaOH提取玉米芯木聚糖,并对玉米芯木聚糖进行酶法水解,响应面法(RSM法)优化酶解条件.结果表明:玉米芯木聚糖的最佳酶解条件为酶添加量70 U/g、反应时间10 h、玉米芯木聚糖悬浮液质量浓度4 g/(100ml).TLC及HPLC分析表明:酶解液中含有木糖、木二糖、木三糖、木四糖,其中木二糖和木三糖的含量较高.HPLC定量结果表明酶解液中木糖、木二糖和木三糖的含量分别为1.7、3.1和3.6 mg/ml.     

低聚木糖的酶法生产

确立了玉米芯经稀酸预处理后加水蒸煮提取木聚糖 ,然后再加酶水解提取液的生产低聚木糖的工艺路线 .玉米芯在质量分数为 0 .1%的H2 SO4 溶液中于 6 0℃下浸泡 12h后 ,滤去浸泡液并水洗至 pH 6左右 ,然后采用液固比 10∶1,150℃ ,30min的蒸煮条件进行蒸煮 .结果表明 ,可溶性木聚糖的提取得率达 17% (按玉米芯计 ) ,提取液的RS/TS小于 33% .提取液和渣一起用木聚糖酶进行水解 ,可获得阿拉伯糖 /葡萄糖 /木糖 /木二糖 /木三糖之比为 7.7∶6 .8∶11.5∶54.1∶19.8的高纯度低聚木糖产品 .低聚木糖的质量分数大于 70 % (对总糖 ) ,且产品的可溶性总糖得率达2 6 .4 % (对玉米芯 ) .     

玉米芯复合酶法制备低聚木糖工艺的研究

低聚木糖是水解木聚糖得到的一种功能性的木寡糖。以玉米芯为原料,利用复合酶制剂酶解玉米芯制备低聚木糖,对复合酶制剂的组成配比进行了正交试验确定复合酶制剂中阿魏酸酯酶、漆酶和木聚糖酶最佳配方分别是0.2%、0.3%和0.6%。添加复合酶制剂至料液比为1∶20(g∶mL),在最适温度为50℃,酶解4 h后,低聚木糖的含量达到16.8 g/L。与单一酶制剂木聚糖酶的作用相比,低聚木糖的含量提高了64.7%。     

以Bacillus pumlis.木聚糖酶水解玉米芯制备木寡糖

木聚糖酶对 Birch wood,Oat spelt和自制玉米芯木聚糖的水解结果表明,不同来源的木聚糖对木聚糖酶水解的影响非常明显,硬本属的 Birch wood的水解效果较好,自制玉米芯木聚糖的水解效果优于同属于禾本科的 Oat Spelt。自制玉米芯木聚糖的水解结果表明,可溶性木聚糖能够被木聚糖酶有效水解而不溶性木聚糖几乎不被水解,长链木聚糖比短链木聚糖更容易被木聚糖酶水解。采用HPLC对自制玉米芯木聚糖水解液的组成进行分析,结果表明,水解液中低聚木糖的主要成分为木二糖、木三糖和木四糖,占水解液中总糖的80％以上。     

微波处理玉米芯制备低聚木糖的研究

研究了微波处理玉米芯制备低聚木糖的影响因素。分别考察了浸泡碱液NaOH的浓度、固液比、微波处理压力、微波处理时间、木聚糖酶用量以及酶解时间对制备玉米芯低聚木糖的影响。结果表明：微波处理压力、微波处理时间、木聚糖酶用量以及酶解时间对制备玉米芯低聚木糖的影响显著；浸泡碱液NaOH的浓度和固液比对制备玉米芯低聚木糖的影响较小。     

用于低聚木糖生产的玉米芯木聚糖的蒸煮法提取

通过对几种不同的木聚糖提取方法的比较，确立了酸预处理后加水蒸煮的方法提取低聚木糖生产用木聚糖的工艺路线。首先将玉米芯用质量浓度为１ｇ／Ｌ的Ｈ２ＳＯ４在６０℃下浸泡１２ｈ，滤去浸泡液，然后加水至固液比为１∶１０，在１５０℃蒸煮３０ｍｉｎ．采用此工艺木聚糖的提取得率可达到１７％（按玉米芯计），提取液的还原糖与总糖质量之比小于３３％．该法得到的提取液（和渣一起）用自制的木聚糖酶水解，可获得ｍ（木糖）∶ｍ（木二糖）∶ｍ（木三糖）＝１∶５∶２．７的高纯度低聚木糖产品，产品总糖的得率达到２６．４％（按玉米芯计）。     

超声波预处理棉籽壳酶法制备低聚木糖的工艺研究

本文以棉籽壳为原料制备低聚木糖。以超声温度、超声时间,料液比和Na OH浓度为单因素,采用正交实验设计确定了超声波预处理提取木聚糖的最优条件,即超声温度60℃,超声时间30 min,料液比为1∶15,Na OH浓度为8%,此时木聚糖得率为33.66%。在单因素料液比、加酶量、酶解时间、酶解温度的实验基础上,根据Box-Benhnken中心组合实验设计原理,采用4因素3水平的响应面分析法,以低聚木糖含量为响应值建立数学模型,确定了最佳酶解工艺条件:料液比1∶20,加酶量4%,酶解时间3.5 h,酶解温度64℃,此时低聚木糖含量为3.35 mg/m L。     

酶解花生壳制备低聚木糖的研究

以花生壳为原料,在固液比1∶20,H_2SO_4浓度为1.0%,120℃条件下处理30min,木聚糖提取率为40.1%。利用木聚糖酶降解木聚糖制备低聚木糖,确立了酶解工艺条件:50℃,pH4.8,加酶量2%(相对固体花生壳原料).搅拌速度80r/min,反应时间24h。在上述反应条件下,低聚木糖得率为81.2%。     

微生物酶法生产低聚木糖条件的研究

酶解法生产低聚木糖 ,最适底物为麸皮半纤维素 ,底物浓度为 2 % ,加酶量为 10 0u/mL ,于 40℃酶解 12h。     

橄榄绿链霉菌E-86产木聚糖酶水解玉米芯汽爆液生产低聚木糖

本文以橄榄绿链霉菌E-86产木聚糖酶水解玉米芯汽爆液生产低聚木糖为目的,研究了玉米芯汽爆液的水解特征,并与玉米芯木聚糖的酶解产物组成进行了比较,得到如下结果:加酶量120U/100ml、酶解反应8h可获得较好的酶解效果,直接还原糖量46μmol/ml、平均聚合度3.1、水解率46%;玉米芯汽爆液和玉米芯木聚糖的酶解产物中低聚糖组成大致相同,主要是木二糖和少量的木三糖、木糖,汽爆液酶解产物中还含有极少量的鼠李糖和阿拉伯糖;玉米芯汽爆液可代替玉米芯木聚糖为底物生产低聚木糖。     

Properties of an Alkaline‐Tolerant,Thermostable Xylanase from Streptomyces chartreusis L1105, Suitable for Xylooligosaccharide Production

Abstract: An extracellular xylanase was purified to homogeneity from a culture of Streptomyces chartreusis L1105 by a 2‐step method of ammonium sulfate precipitation and carboxymethyl sepharose fast‐flow chromatography (CMSFF). The xylanase was purified by 6.86‐fold, with a recovery yield of 31.96%. The purified xylanase appeared as a single protein band on SDS‐PAGE with a molecular mass of about 34.2 kDa. The optimum temperature and pH of the purified xylanase activity were 70 °C and 7.2 respectively. The xylanase was more stable under alkaline conditions and retained more than 80% activity after 30 min incubation at pH 6 to 10. It also showed specific activity towards different xylans. Hydrolysis of oat‐spelt and corn‐cob xylans by the xylanase yielded xylobiose and xylotriose as principle products without the formation of xylose. These properties indicate that the purified xylanase may potentially be useful in biotechnological applications, such as xylooligosaccharide preparation. This is the first report about the purification and characterization of a xylanase from S. chartreusis.     

嗜热木聚糖酶的克隆表达及其在酶解生产低聚木糖中的应用

目的:为了获得一种耐高温的木聚糖酶,并对其生物特性进行表征,使其能够更有效地应用于低聚木糖的制备。方法:首先通过生物信息学分析,确定来自厌氧孢子菌Caldicellulosiruptor saccharolyticus DSM 8903的木聚糖酶(CsXynB)基因序列,然后扩增CsXynB基因,以pET-20b为载体,构建重组质粒,将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,重组酶通过热处理和镍柱亲和层析纯化获得纯酶,将纯酶用于后续酶学性质和降解木聚糖的研究。结果:通过生物信息学方法研究表明,CsXynB属于糖苷水解酶第10家族。CsXynB的最适反应温度为80℃,最适反应pH为6.5。在65℃以内,pH为5.5~7.5的条件下重组木聚糖酶的稳定性较高。以榉木木聚糖为底物时,CsXynB的K_m,V_max和K_cat值分别为1.8 mg/mL,46.0 U/mg和60.7 s^-1。在65℃、pH6.5条件下,以榉木木聚糖为底物,木聚糖酶CsXynB反应1 h,生成的低聚木糖的主要成分为木二糖和木三糖。结论:CsXynB是一种极具特点的耐高温木聚糖酶,可以催化水解木聚糖生成高含量的木二糖和木三糖,在生产低聚木糖的应用中具有潜在价值。