辐射对肝癌细胞中乏氧诱导因子-1α的影响及机制研究

研究辐射对肝癌细胞中乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）的调控作用。采用氯化钴（CoCl2）化学模拟乏氧,诱导HepG2肝癌细胞内HIF-1α稳定表达,再进行不同剂量的γ射线照射,观察照射后细胞内HIF-1α表达的变化,同时,利用荧光显微镜和流式细胞术（flowcytometry,FCM）对细胞内的活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量进行检测。结果显示,在乏氧条件下HepG2细胞受1—5Gyy射线照射后,细胞内HIF-1α的表达与辐照剂量呈正相关。在1—3Gyy射线照射后,细胞内活性氧的含量与HIF-1α的表达呈负相关。此研究提示,辐射可增强乏氧细胞内HIF-1α的表达水平,活性氧含量的降低可能与这一调控作用有关。     

沉默生存素基因增强人肝癌细胞SMMC-7721放射敏感性

为探讨沉默生存素(Survivin)基因对人肝癌细胞SMMC-7721放射敏感性的影响,利用靶向Survivin基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)质粒pGenesil-survivin,采用阳离子脂质体介导法转染SMMC-7721细胞后48 h,分别以RT-PCR和Western blot法检测Survivin基因mRNA和蛋白表达,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,克隆存活实验检测细胞放射敏感性的变化。结果表明,转染质粒pGenesil-survivin后48 h,SMMC-7721细胞Survivin基因mRNA和蛋白表达水平与对照和阴性干扰组相比明显降低(p0.05);转染后第1—4 d,细胞增殖活性与对照组相比明显降低(p0.05或p0.01);转染后48 h,细胞阻滞于G2/M期(p0.001),凋亡百分率明显高于对照组(p0.001);转染后SMMC-7721细胞D0值减小,放射敏感性增强,增敏比为1.24。结果提示,沉默生存素基因可增强人肝癌细胞SMMC-7721放射敏感性。     

病毒蛋白与宿主相互作用及其对细胞放射敏感性的影响

为了解病毒感染对电离辐射生物效应的可能影响和作用机理,本文着重评述了病毒编码蛋白与宿主细胞蛋白的相互作用,特别是干扰宿主DNA 损伤修复、影响辐射致细胞凋亡、干扰DNA损伤后的细胞周期检查点,以及其对哺乳动物细胞的放射敏感性的影响.病毒蛋白与宿主细胞的相互作用,不仅在病毒感染及相应致病作用中扮演着重要角色,而且也影响到被感染组织对辐射或某些化学物质的反应.业已证实,一系列的病毒蛋白与宿主蛋白发生作用,这种作用与包括DNA修复、凋亡、细胞周期检查点在内的DNA双链断裂的细胞反应有关,造成宿主蛋白的细胞定位改变、降解、失活或激活等;另外一些蛋白直接或间接调节多种宿主基因的转录水平,或诱发辐射损伤反应相关蛋白的转录后修饰的变化,使得这些基因产物上调或下调、活性改变.病毒蛋白与宿主的相互作用,在一定程度上改变了细胞的放射敏感性.充分、准确地了解病毒感染的辐射生物学意义,将促进我们关于人体对辐射健康效应的个体敏感性的理解和对未来辐射防护思路的拓展.     

17-AAG对HeLa细胞和V79细胞放射敏感性的影响

为研究17-AAG对肿瘤细胞和正常细胞辐射敏感性的影响,以人宫颈癌Hela细胞和中国仓鼠肺成纤维细胞V79为研究对象,用克隆形成实验观察细胞的存活率。结果表明,17-AAG能明显降低受X射线照射的Hela细胞的存活率,而对V79细胞的存活率则无明显影响,表明17-AAG对HeLa细胞具有放射增敏作用,对V79细胞无放射敏感影响。     

槲皮素对人宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性的影响

为观察槲皮素对人宫颈癌细胞HeLa增殖及其放射敏感性的影响,以人宫颈癌细胞株HeLa为研究对象,以MTT比色法和克隆形成实验检测槲皮素对HeLa细胞生长的抑制作用,并以克隆形成实验观察槲皮素对HeLa细胞株放射敏感性的影响。结果表明槲皮素能明显抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,存在剂量依赖和时间依赖性。克隆形成实验显示槲皮素对HeLa细胞的作用可分为两部分,一部分抑制HeLa细胞增殖,另一部分为诱导HeLa细胞死亡。克隆形成实验也显示槲皮素联合X射线照射能著显降低照射后HeLa细胞的存活率。本实验研究认为槲皮素具有放射增敏作用,为临床开展放射线联合槲皮素治疗肿瘤的研究提供了实验依据。     

STAT3抑制剂WP1066对乏氧人脑胶质瘤细胞U251放射敏感性的影响

采用CoCl2处理U251细胞模拟细胞乏氧,用甲基四唑蓝(MTT)法检测U251细胞活力的改变;RT-PCR和Western blot检测HIF-1α在U251细胞中的mRNA和蛋白水平的表达;克隆形成法检测X射线照射下不同处理组的克隆形成率。结果表明,100μmol·L-1 CoCl2处理及100μmol·L-1 CoCl2与0.5μmol·L-1 WP1066联合处理U251细胞24 h无明显细胞毒性作用(p0.05);CoCl2诱导HIF-1α的mRNA及蛋白表达水平上调,WP1066抑制HIF-1α在蛋白水平的表达;与空白对照组相比,CoCl2组的克隆形成能力明显上调(p0.05),CoCl2与WP1066联合处理组克隆形成能力明显下降(p0.05)。WP1066可增加乏氧U251细胞放射敏感性,其机制可能是通过抑制STAT3通路降低HIF-1α的表达而发挥放射增敏作用。     

99Tcm-HL91乏氧显像预测高压氧放疗增敏的可行性

目的99mTc-HL91乏氧显像预测高压氧对肿瘤的放疗增敏情况。方法40只荷H22肝癌小鼠均分为4组,每组10只;①对照组,不进行高压氧治疗,其中5只行99mTc-HL91乏氧显像,5只行照射治疗;②15分钟组;③30分钟组;④60分钟组,后3组小鼠按高压氧后不同时间顺序,其中5只行99mTc-HL91乏氧显像,其余5只行照射治疗。各组显像小鼠通过核医学感兴趣区（regionfinteresting,ROI）技术,计算肿瘤与对侧相应部位放射性比值（T/NT）。图像采集结束后立即处死小鼠,完整剥离肿瘤,称重并计算放射性计数,计算肿瘤微分摄取率（DUR）。各组照射治疗小鼠均记录肿瘤照射后生长天数及小鼠平均存活时间。结果 与对照组比较,15分钟组、30分钟组DUR值、T/NT值、肿瘤及小鼠生长延迟天数,差异有显著性（P<0.05）,60分钟组,各数值均未见显著性差异（P>0.05）。结论99mTc-HL91乏氧显像是一种有效预测高压氧增敏效果的方法,且高压氧增敏作用随时间延长逐渐减弱。     

非硝基化合物S-8712对离体培养细胞放射增敏作用研究

以离体培养HeLa细胞存活曲线研究了S-8712对乏氧细胞放射增敏效果。实验结果表明浓度为2m mol/L时,以D_0和D_q分别计算所得增敏比(SER)为1.04和1.26。6m mol/L的SER则分别为1.35和1.25。该化合物对有氧细胞的亚致死损伤修复有抑制作用,但对有氧细胞放射敏感性没有影响。     

p53基因状态对人卵巢癌细胞辐射敏感性的影响

本研究应用PCR-SSCP银染法检测3株人卵巢癌细胞p53基因的存在状态,以四甲基偶唑蓝（MTT）染色法和流式细胞术（FCM）比较不同p53基因状态的肿瘤细胞在1～10Gy^60Coγ射线照射后的体外生长及凋亡率。结果显示,p53野生型的A2780细胞^60Coγ射线照射后发生明显的生长抑制和凋亡,而p53基因突变型的A2780-CP细胞和缺失型的SKOV3细胞则呈现较强的辐射抗性。本研究结果说明,人卵巢癌细胞的p53基因状态直接影响其对γ射线照射的敏感性。     

ELAC2对乳腺癌细胞MCF-7浸润转移和放射敏感性的影响

为了探讨ELAC2对乳腺癌细胞MCF-7浸润转移和放射敏感性的影响,利用脂质体转染法将ELAC2基因转入MCF-7细胞,Western blot法检测ELAC2、cyclinB、CDC2和P53蛋白表达水平,细胞划痕法和Boyden小室法检测细胞浸润转移能力,集落形成法检测细胞存活分数,流式细胞仪检测细胞周期。结果表明,成功构建了ELAC2高表达的MCF-7/ELAC2细胞株;ELAC2高表达明显抑制细胞的浸润和转移;细胞受X线照射后,ELAC2高表达使细胞放射敏感性增强,G2期细胞比例增多,同时cyclinB表达降低,P53和Tyr-15磷酸化CDC2表达升高。提示ELAC2高表达可明显抑制细胞浸润和转移;ELAC2高表达使细胞辐射敏感性增加很可能与下调cyclinB、上调P53和Tyr-15磷酸化CDC2蛋白水平有关。     

G2期早熟染色体凝集技术预测肝癌细胞低LET射线辐射敏感性

用^60Co产生的γ射线照射人肝癌细胞系SMMC-7721.以克隆形成法测定经照射后的细胞存活率,用化学诱导剂Calyculin-A诱导的早熟染色体凝集（Premature chromosome condensation,PCC）技术研究染色体损伤.结果显示G2期细胞内的染色单体和等点染色单体断裂数与照射剂量之间存在着线性相关性,染色单体断裂数与细胞存活率之间存在较好的线性相关性.表明辐射诱导的染色单体断裂可以作为预测SMMC-7721细胞内在辐射敏感性的指标,也可为临床诊断和治疗肝癌提供依据.     

气溶胶中210Bi对210Po测量结果推算的影响

气溶胶中²¹⁰Pb和²¹⁰Po两者之间浓度处于不平衡状态,被核素²¹⁰Bi隔开,²¹⁰Bi初始活度浓度往往未知,²¹⁰Po活度浓度较难推算到采样初始时刻的量值。本文从理论上分析了²¹⁰Bi对²¹⁰Po测量结果推算影响大小。大多实际情况空气中²¹⁰Po/²¹⁰Pb比小于1,需要考虑空气中²¹⁰Bi/²¹⁰Pb的比值,需在一个月内对²¹⁰Bi进行快速测量,否则无法衡量采样时刻²¹⁰Bi/²¹⁰Pb的大小。建议在初始空气中²¹⁰Bi的活度浓度值未知的情况下,采取短时间采样、快速测量等措施以避免这种误差。     

Increased radiosensitivity of human nasopharyngeal carcinoma cells by coixenolide under hypoxic condition

1 IntroductionCoixenollde (CXL) is a component extracted from Chinese herbal drug coal seed,and has been reported to exert anticancer and immunoregulation actions[1]. We havefound that CXL could enhance radiosensitivity of hUman nasopharyngeal carcinoma cellline CNE-ZZ in the presence of oxygen (unpublished data). But what is more importantclinically is whether CXL has the same effect under hypoalc condition.1.1 Cell lineCell line CNE-ZZ (established in Guangdong medical college) was…     

气溶胶中210Po分析方法研究

经过同位素示踪实验,研究了酸度、时间、体积、温度、还原剂对²¹⁰Po自沉积的影响,以及气溶胶预处理的条件实验,得出了最佳实验条件,对实际气溶胶样品中²¹⁰Po进行了分析测定,全程化学回收率在94.0%～103%,平均值为(98.1±5.5)%。太原地区冬季气溶胶中²¹⁰Po的活度浓度范围为1.21～1.53 mBq/m³,平均值为(1.31±0.08) mBq/m³。     

LGK-974对人肝癌细胞系HepG2的辐射增敏作用

观察LGK-974(CAS:1243244-14-5)对人肝癌细胞系HepG2的辐射增敏作用,并探讨可能的作用机制。应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测LGK-974对HepG2细胞的生长抑制作用;细胞克隆形成法确定1.0mmol/L LGK-974对HepG2细胞放疗敏感性的影响;H2DCFH-DA探针流式细胞法检测细胞活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;RT-PCR及Western Blot法检测Nrf2及其下游NQO-1、HO-1基因的转录水平和蛋白表达水平。结果显示,LGK-974抑制HepG2细胞的生长分裂和增殖,24、48、72 h的半抑制浓度(IC50)为4.3、2.14、0.536mmol/L(p0.05);1.0mmol/L LGK-974对HepG2细胞的放射增敏比(SERD0)为1.37;LGK-974能增大辐射产生的ROS水平(p0.05);照射后Nrf2及其下游基因HO-1、NQO-1的转录水平和表达水平均增加;LGK-974能降低辐射对Nrf2、HO-1和NQO-1的转录和表达水平的增加作用(p0.05)。由此得出,LGK-974对人肝癌细胞系HepG2具有明显的辐射增敏作用,其机制可能是抑制Nrf2信号通路,阻止细胞缓解辐射产生的氧化压力。     

AuNPs@MPA-PEG纳米粒子对肿瘤细胞辐射敏感性影响

为研究3-巯基丙酸(MPA)-聚乙二醇(PEG)修饰的金纳米粒子(AuNPs@MPA-PEG)对人宫颈癌Hela细胞辐射敏感性的影响,以柠檬酸钠为稳定剂,硼氢化钠为还原剂,还原氯金酸制备5.4 nm的金纳米粒子(AuNPs),并分别用MPA-PEG、PEG修饰金纳米粒子,制备AuNPs@MPA-PEG、AuNPs@PEG。通过电感耦合等离子体发射光谱仪检测Hela细胞及细胞核对AuNPs、AuNPs@MPA-PEG、AuNPs@PEG的吸收量;克隆形成法测定AuNPs、AuNPs@MPA-PEG、AuNPs@PEG对X射线照射后Hela细胞存活率的影响。结果表明,Hela细胞和细胞核对AuNPs、AuNPs@MPA-PEG、AuNPs@PEG的吸收量具有浓度依赖性。MPA-PEG、PEG修饰减少细胞对金纳米粒子的吸收,但是MPA-PEG对金纳米粒子进行修饰,却增加细胞核对金纳米粒子的吸收。对于160 kVp X射线,AuNPs、AuNPs@MPA-PEG、AuNPs@PEG均对Hela细胞有辐射增敏作用,但增敏效果不明显。MPA-PEG、PEG修饰没有增加金纳米粒子的辐射增敏作用。     

X射线联合沙利度胺对胶质瘤U251细胞的抑制作用

为探讨X射线联合沙利度胺对胶质瘤U251细胞的抑制作用,采用H~3-TdR掺入法和细胞克隆形成法检测沙利度胺增强U251细胞的辐射敏感性;细胞划痕实验观察沙利度胺抑制U251细胞的浸润能力.结果表明,沙利度胺能够抑制U251细胞浸润、DNA合成和克隆形成,与X射线联用后抑制作用增强,表现出协同作用.当细胞存活率为50%时,60 μg/mL、100 μg/mL 沙利度胺的辐射增敏系数为1.18和1.51.实验证明X射线联合沙利度胺能显著提高胶质瘤U251细胞的辐射敏感性,对U251细胞具有辐射增敏作用.     

槲皮素对HeLa细胞辐射敏感性影响及其机理

为探讨药物槲皮素对HeLa宫颈癌细胞的辐射敏感性影响及其机理,使用不同浓度的槲皮素和不同照射剂量处理HeLa细胞,采用克隆形成法测定细胞存活率,应用流式细胞术测定细胞DNA双链断裂,以及测定槲皮素与电离辐射联合作用对HeLa细胞的周期影响.结果显示,不同槲皮素浓度处理组的HeLa细胞在不同照射剂量组间的存活率比较有统计...