胰岛素抵抗细胞模型建立及药物评价的研究进展

2型糖尿病主要表现为胰岛素抵抗,即机体对胰岛素的敏感性降低。近年来,建立体外胰岛素抵抗细胞模型,来模拟机体胰岛素抵抗已成为研究热点。肝脏、脂肪组织和骨骼肌是胰岛素作用的主要靶器官。采用高胰岛素浓度、高糖高脂和地塞米松等体外诱导Hep G2细胞、3T3-L1细胞和C2C12细胞,观察细胞生长情况及葡萄糖摄取率的变化,建立胰岛素抵抗细胞模型,从而筛选具有改善胰岛素抵抗的中西药物。本文主要对糖尿病发病现状、胰岛素抵抗细胞模型建立方法、潜在改善胰岛素抵抗的药物评价做简要概述。     

鉴定活性维生素D细胞模型的构建

本文构建了维生素D受体(Vitamin D receptor,VDR)融合蛋白的真核表达载体,并获得稳定表达VDR融合蛋白的细胞体系,为含有活性维生素D食品及药物的鉴定建立成熟的细胞模型。设计并合成特异性引物扩增VDR基因,将扩增产物克隆至pcDNA3.1/His真核表达载体上,将其转染HEK293细胞。采用免疫沉淀(IP)技术鉴定VDR融合蛋白的表达效率。在构建pcDNA 3.1/VDR-His成功的基础上,用活性1,25(OH)_2D_3处理转染的细胞,收集总蛋白和m RNA,分别利用免疫印迹(Western blot,WB)和实时定量PCR(q RT-PCR)技术,检测VDR融合蛋白以及其下游基因CYP24A1基因的表达。IP结果证实VDR融合蛋白具有转录活性。WB和q RT-PCR结果显示,1 nmol/L浓度的活性1,25(OH)_2D_3处理转染细胞能有效激活VDR蛋白的表达,以及显著增强CYP24A1的m RNA表达(p0.01)。利用该细胞模型检测维生素D类药物的活性,结果显示不同药物中维生素D的活性与药物种类有关。pcDNA3.1/VDR-His融合表达载体构建成功,并以此构建了鉴定活性维生素D的细胞模型。     

大叶紫薇叶中降血糖活性成分的筛选

为筛选大叶紫薇叶中具有降血糖活性的成分,采用3T3-L1细胞葡萄糖消耗模型作为检测手段,对大叶紫薇叶提取物采用HP-20树脂吸附、溶剂萃取、制备薄层分离和制备高效液相分离,导向筛选具有降血糖作用的各分离组分.结果发现,大叶紫薇叶中corosolic acid、熊果酸和总三萜具有降血糖活性.     

基于Flare3D的DNA分子模拟展示

随着互联网的日益普及和虚拟现实技术的迅猛发展,应用软件模拟实验室,成为一种不可阻挡的趋势。伴随着分子模拟和计算生物学的发展,计算机分子模拟,现在是一个炙手可热的研究方法,已逐步变成与理论研究平行的一种方法。它利用计算机来构造、实现、分析和储存分子模型,提供直观的分子立体图像。随着Flare3D的不断发展,由于该引擎方便的接口和全面的功能,基于Flare3D的3D环境越发的成熟全面、功能强大。文章所描述的就是基于Flare3D的DNA分子模型交互功能,通过ActionScript3.0与Flare3D的结合,创建一个虚拟的实验环境,在该环境中可以实现DNA分子模型的创建、展示。     

生物打印组织技术的研究进展

3D生物打印技术是在计算机辅助设计技术下,实现数字化快速成型的新技术。该技术可通过调控支架结构、细胞分布和生物信号分子,将生物材料、细胞以及生长因子混合打印。3D生物打印技术的出现使制造器官微结构成为可能,且制造的组织器官更能接近生物组织的天然微结构。该项技术通过将天然生物材料或合成材料打印成组织器官支架,在其内部的种子细胞可生长增殖,并分泌细胞外基质。打印材料支架结构会在在不同时间逐渐降解吸收,所制造的组织结构可逐渐再生转化为与天然组织器官相类似的结构。3D生物打印技术的出现推动组织工程和再生医学的发展,这篇文章主要对3D打印技术及打印材料进行综述,总结了3D打印技术和打印材料的最新进展。     

氧化应激细胞模型建立的研究进展

细胞模型是筛选评价抗氧化物质,研究氧化应激损伤机制的有效方法之一。目前有不少研究采用氧化应激细胞模型探讨植物化学物质的抗氧化效果及机制。根据研究目的,可以选择多种细胞株及应激源,但模型建立缺乏统一标准,系统性的总结少见报道。因此,本文从细胞株和应激源的选择、模型判断指标等方面介绍氧化应激细胞模型的建立方法,并从化学、物理和生物等方面对应激源进行了分类总结,旨在为筛选、评价抗氧化剂效果,探究干预氧化损伤机制等研究提供参考。     

Caco-2细胞模型评价食品功能因子的吸收、代谢及其功能研究进展

Caco-2细胞源自于人结肠癌细胞系,其表现出许多与小肠上皮细胞相似的特性,具有微绒毛结构、刷状边缘以及细胞间紧密连接等,是目前应用最广泛、最经典的模型之一。近年来,随着细胞培养技术的发展,通过体外细胞培养来评价食品功能因子的吸收、代谢机制及其功能成为研究热点。本文从Caco-2细胞模型的建立和评估方法入手,对功能食品提取物在Caco-2细胞中的抗炎、抗氧化、抗增殖等功能性进行系统概述,再结合功能食品提取物在Caco-2细胞中的吸收、代谢、转运机制,对Caco-2细胞模型在共培养等方面的研究进行展望,以期改进Caco-2细胞模型的局限性,为进一步研发准确度高,材料成本低,更接近人体内部环境的细胞培养模型奠定基础。     

鞋专利鳞爪

一种用于计算用于定制鞋的鞋楦的几何形状的方法包括以下步骤：在数据库中收集鞋楦的3D模型；创建在长度和适合度方面具有不同测量的鞋楦的网格；获取脚的3D模型；确定测量参数接近于所述脚的测量参数的至少两个鞋楦的子集；     

黑色素生物合成抑制剂的初步研究

利用比基尼链霉菌筛选模型和急性细胞毒性试验从 170 0株放线菌中筛选出编号为MBI 3 9-2 4的菌株作为黑色素生物合成抑制剂研究的试验菌株 ,并初步鉴定为秃裸链霉菌 (Streptomycescalvus)。借鉴了一些天然药物的提取和分离方法 ,分离出 4种具有抑制黑色素生物合成活性的单峰物质 ,并将其对B16鼠黑素瘤细胞中黑色素合成的抑制效果进行了评价 ,确定了抑制效果最好的单峰物质MBI -3 # ,其对于B16鼠黑素瘤细胞中黑色素合成的抑制活性为 15 μg/mL ,细胞毒性与最小抑制浓度的比值为 16 67。     

耐热乳酸菌热致死动力学模型研究

测定了从云南传统乳制品乳扇中筛选的2种6株耐热乳酸菌在60℃和65℃热处理条件下的菌株存活情况.发现E.faeciumgrx28的耐热能力最强,D60为6.45min,D65为1.32 min与其他菌株有显著差异.分别基于Linear,Weibull和Log-logistic动力学模型,对各耐热乳酸菌在不同热处理条件下的活菌数量的变化情况使用lstopt1.0软件进行数据的曲线拟合及相关系数的分析,确定在60℃的热处理条件下,Weibull模型更适合描述菌株的残活量,而在65℃的热处理条件下,Logistic模型与菌株的存活曲线更为接近,得到各菌株在不同处理条件下的动力学方程.结果表明,乳酸菌在不同热处理条件下,乳酸菌的死亡变化并不相同.     

中国科学家研究胶原蛋白和聚已内酯复合新聚合物材料作为器官组织修复的3D支架

<正>由于严峻的疾病或外伤引起的组织损伤或器官衰竭是主要的医疗保健问题,而组织或或器官移植价格高昂又易受捐献者匹配度的限制。再生生物替代品来修复或代替受损伤的组组织和器官主要有以下3个重要部分:细胞、支架(3D聚合模型)和生长因素。其中,支架架非常重要并影响细胞和生长因素再成一个特殊组织。成功的支架必需具有特殊的性能,如如必需具有生物相容性和生物可降解性、具有与所替代组织相似的机械性能、支持细胞附     

群体感应抑制活性深海细菌的分离与筛选

为了从东太平洋深海沉积物中筛选得到具有群体感应抑制活性的细菌菌株,为进一步以抑制病原菌群体感应系统为靶点研究抗感染药物提供新颖、有效的天然产物资源.采用10倍梯度稀释法涂平板从深海沉积物中分离细菌菌株,以紫色杆菌ATCC12472和紫色杆菌CV026报告菌株建立双菌株筛选模型,采用双层平板打孔法筛选具有群体感应抑制活性的菌株.从深海沉积物样本中共分离得到50株细菌,经初筛和复筛,得到了3株具有较强群体感应抑制活性的菌株,具有进一步研究的价值.结果表明:深海细菌中含有具有群体感应抑制活性的菌株,有望成为天然群体感应抑制剂和天然药物先导化合物的重要来源.     

矢车菊素-3-葡萄糖苷干预丙烯酰胺细胞毒性的体外模型筛选

丙烯酰胺是食品热加工过程中形成的一种内源性化学污染物,能引起细胞毒性。矢车菊素-3-葡萄糖苷作为一种果蔬中广泛存在的花色苷,具有显著的抗氧化活性。目前应用花色苷进行AA细胞毒性的干预尚无系统性研究。为了筛选适用于AA细胞毒性干预的细胞模型,对体外培养的Hep G2、L02、Caco-2、BHK-21及MDA-MB-231等细胞,通过不同浓度AA和Cy-3-glu培养,采用结晶紫染色法测定不同时间的细胞存活率,最终确定AA最适的作用时间为24 h,适宜作用浓度分别为2.5 mmol/L和5.0 mmol/L;Cy-3-glu的最适预处理时间为4 h。筛选出适合Cy-3-glu干预的AA诱导的细胞模型为MDA-MB-231细胞。通过Cy-3-glu抑制细胞内活性氧生成和谷胱甘肽的降低并验证,10~100μmol/L Cy-3-glu预处理表现出显著的AA毒性的保护作用,为毒性干预研究提供模型基础。     

淀粉原料3D打印特性

3D打印作为一种新兴的加工方法,在食品制造领域受到越来越多的关注。该研究以马铃薯、小麦和玉米淀粉为原料,对3D打印样品的特性进行了研究。采用外观形态、颜色、碘吸收光谱、快速黏度分析仪(rapid visco analysis,RVA)、质构分析、傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)和扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)对产品质量进行了评价。结果表明,所有淀粉凝胶均可获得完整的3D打印模型。用小麦淀粉制作的3D打印样品的尺寸最接近CAD设计模型。小麦淀粉凝胶具有较低的黏度、较好的挤出性和贮藏性能。此外,小麦淀粉制作的3D打印样品的微观结构比马铃薯淀粉和玉米淀粉具有更规则的网状结构。为3D打印技术在食品生产中的应用提供了理论依据,并为实际生产提供了技术支持。     

基于3D打印技术的工艺品制作

3D打印技术在现今的社会上已经很常见了,为了让越来越多的人认识3D打印技术,感受科技带来的便捷,本文则以这个为出发点,简析基于3D打印技术的工艺品制作。利用3Dmax软件来建立需要打印的模型,从最初建立起来的框架模型上添加了很多工艺品模型的细节方面,使模型更加的真实化。其制作出的模型有篮球、佛像、人物雕像、鱼嘴笔筒、校徽、长城、杯子、毛泽东雕像等工艺品模型。建立好模型之后就是打印的工作了,通过调节好3D打印机的打印环境后,把已经建立好的模型转换成3D打印机能够识别的格式后进行打印,打印出的成品具有很好的观赏性和实用性。     

加氏乳杆菌的降脂活性研究

目的:探究加氏乳杆菌是否具有降脂活性,并验证其对HepG2细胞脂质堆积和高脂血症小鼠脂质代谢活性的影响.方法:利用油酸诱导建立HepG2细胞脂质堆积模型,通过多次油红O染色定量对166株加氏乳杆菌进行降脂活性筛选,选择活性最强的一株菌通过Bodipy染色、甘油三酯含量测定进行验证.利用C57BL/6J小鼠喂食高脂饲料建...     

响应面法优化植物乳杆菌冷冻干燥保护剂配方的研究

本实验应用二水平部分因子设计和响应面中心组合设计联用的方法筛选并优化了植物乳杆菌冷冻干燥的保护剂配方.实验结果表明,众多保护剂当中脱脂乳、海藻糖、硫酸锰的作用最为突出,能够显著提高细胞对冷冻和干燥的环境的耐受能力.以冻干后的细胞存活率为响应目标,响应面法优化的结果为:脱脂乳3.34%、海藻糖1.85%、硫酸锰0.25%.用此配方保护剂冻干样品时,能使细胞存活率达到96.8%±1.3%,与理论预测值较为接近.     

具有抑制肠道致病菌和黏附Caco-2细胞作用的益生性乳酸菌的筛选及鉴定

为了筛选具有肠道益生特性的乳酸菌,进一步开发益生菌资源,本文研究采用牛津杯、人工模拟胃肠液及体外黏附Caco-2细胞等方法,以鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)为对照菌株,对实验室保藏15株乳酸菌的益生特性进行筛选与评估。实验结果表明:15株乳酸菌对两株沙门氏菌都具有一定抑制效果,抑菌圈直径为10.95~22.06 mm;乳酸菌C174、D24、D599、C37、D512具有较好的耐酸耐胆盐能力,在人工胃液3 h内存活率达到60%以上,人工肠液4 h内存活率达到80%以上;在黏附试验中,C174对Caco-2细胞具有较强黏附能力,黏附数量为740 CFU/100细胞,略高于对照菌株鼠李糖乳杆菌(543 CFU/100细胞);通过对具有高黏附性的菌株C174进行生理生化和16S rRNA分子测序鉴定,结果表明菌株C174为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),命名为Lactobacillus plantarum ZJ-174。Lactobacillus plantarum ZJ-174的抑菌能力强、能够耐酸耐胆盐,并具有很强的黏附能力,是一株潜在的益生菌,具有治疗或预防人和动物肠道疾病等应用价值。     

酿酒酵母菌单倍体分离及其呼吸缺陷型的选育

采用不同培养基对MT09酿酒酵母进行不同条件下的生孢培养实验,通过菌体前培养和诱导生孢子、单倍体细胞的分离、单倍体生孢能力的确认、菌体生长曲线的绘制、单倍体菌株的诱变和营养缺陷型的筛选,得出单倍体菌株D3作为最好的诱变出发菌株。最后筛选出菌株D3-02为遗传稳定性的呼吸缺陷型突变株。(孙悟)     

甘南传统牦牛酸奶来源抗氧化性乳酸发酵菌株的筛选

为寻找甘南传统牦牛酸奶中具有优良发酵与抗氧化性能的乳酸菌,对分离纯化的菌株以H_2O_2耐受力、耐酸、耐胆盐和凝乳发酵性进行初步筛选,再以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)、羟基(·OH)自由基和超氧阴离子(O_2~-·)的清除率筛选抗氧化能力强的菌株。结果表明,所筛选出的6株乳酸菌中,菌株M5的发酵性能与抗氧化活性最强,生理生化及分子生物学特征鉴定结果为副干酪乳杆菌。该菌株凝乳发酵时间为6. 2 h;上清液对DPPH和羟自由基清除率分别为47. 8%和54. 4%;无细胞提取物对超氧阴离子的清除率为49. 9%。酵母存活细胞模型验证,其无细胞提取物、发酵上清液、完整细胞对酿酒酵母的存活率分别提高了95. 3%、130%和28. 5%。试验所筛选出的副干酪乳杆菌M5的发酵及抗氧化能力强,具有进一步开发利用价值。