玉米大豆复合肽体内ACE抑制活性研究

为了考察玉米大豆复合肽的体内抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性,采用自发性高血压鼠(SHR)为模型,进行了一次性给药和长期给药动物试验,并以卡托普利(Captopril)作为阳性对照,采用尾袖法测定SHR的血压变化.结果表明:一次性给药后,中(50 mg/kg·bw)、高剂量(100 mg/kg·bw)玉米大豆复合肽(CSP)组的降血压作用可一直持续3 h,血压值降低达显著水平(P<0.05);长期试验中,每日给予CSP,12 d后开始,与模型组SHR比较,中剂量组(25 mg/kg·bw)和高剂量组(50 mg/kg·bw)的SHR血压值均明显降低(P<0.05～P<0.01);高剂量(50 mg/kg·bw)给肽组的降血压效果略好于Captopril组,并对正常大鼠的血压无影响;CSP对大鼠有增加体重的作用.因此CSP对SHR具有良好的短期和长期降血压作用,并对正常血压大鼠无影响;CSP同时是大鼠良好的营养剂.     

菜籽肽的ACE、肾素抑制活性及抗氧化性研究

本研究采用1、3、5、10 ku的超滤膜分离菜籽蛋白嗜热菌蛋白酶水解物(TPH),得到了4种不同分子质量的菜籽肽,研究了各菜籽肽的血管紧张素转化酶-Ⅰ(ACE)抑制活性、肾素抑制活性、氧自由基吸附能力(ORAC)和细胞抗氧化(CAA)活性。结果表明,菜籽肽的分子质量与其ACE抑制活性、肾素抑制活性以及ORAC值有明显的正相关性(P0.05);1 ku的菜籽肽的ORAC值远高于TPH的,其ORAC值(Trolox)高达(4 363.53±45.87)μmol TE/g,是谷胱甘肽(GSH)的2.4倍,其中2个菜籽肽的ORAC值与GSH相当(p0.05);细胞抗氧化试验表明TPH的CAA值最高,为(26.53±1.71)μmol QE/g,其次是1 ku组分,其CAA值是(23.91±0.69)μmol QE/g。研究认为,菜籽蛋白酶水解物及各菜籽肽不仅具有ACE和肾素双重抑制活性,还有一定的氧自由基吸收能力。因此,菜籽蛋白可用于开发降血压制剂或相关功能性产品。     

ACE抑制肽研究进展

该文对目前国内外有关ACE抑制肽研究进展进行综述,重点介绍制备ACE抑制肽原料、分离提取方法、结构与活性关系、活性测定方法和功能性评价方法,并简介其在食品中应用及发展前景,以期为对ACE抑制肽进一步研究提供参考。     

微生物发酵法制备大豆ACE抑制肽菌种的筛选

以大豆分离蛋白为底物,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率和肽含量为检测指标,选择5株乳酸菌、3株霉菌和1株枯草芽孢杆菌为出发菌种,通过微生物发酵筛选出具有高ACE抑制活性的发酵菌株。结果表明:乳酸菌中具有强ACE抑制活性的菌株为保加利亚乳杆菌,ACE抑制率和肽含量分别为57.93%和3.27mg/mL;霉菌中具有强ACE抑制活性的菌株为米曲霉,ACE抑制率和肽含量分别为41.23%和2.17mg/mL;枯草芽孢杆菌ACE抑制率和肽含量分别为45.02%和2.25mg/mL。综合比较9种菌株的发酵特性,选用保加利亚乳杆菌作为制备大豆抗高血压活性肽优良菌株。     

葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性初步研究

以自发性高血压大鼠(SHR)建立试验模型,探讨葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性。试验结果表明:一次性给药后,葵花籽ACE抑制肽各剂量组对SHR收缩压的降低作用存在明显的量效关系,且降压活性具有时效性;长期灌胃葵花籽ACE抑制肽,SHR体重均呈增加趋势,空白组增加最大,阳性对照组增加最小;在为期4周的长期给药实验中,除低剂量组和空白组的收缩压无显著差异外,其余各组均与对照组相比有显著的差异;各试验组SHR的心率值之间无显著差异性,表明葵花籽ACE抑制肽对SHR心率无显著的副作用。     

葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性初步研究

以自发性高血压大鼠(SHR)建立试验模型,探讨葵花籽ACE抑制肽的体内降压活性。试验结果表明:一次性给药后,葵花籽ACE抑制肽各剂量组对SHR收缩压的降低作用存在明显的量效关系,且降压活性具有时效性;长期灌胃葵花籽ACE抑制肽,SHR体重均呈增加趋势,其中剂量组大鼠体重的增加量居于对照组和阳性对照组之间;在为期4周的长期给药试验中,除低剂量组外,其余各组均与对照组相比有显著的差异;各试验组SHR的心率值之间无显著差异性,表明葵花籽ACE抑制肽对SHR心率无显著的副作用。     

具ACE抑制活性的大豆肽的制备及精制研究

采用酶解技术制备具ACE抑制活性的大豆肽混合物。选择了最佳水解用酶,优化了反应条件。确定碱性蛋白酶解最佳条件为:pH9.0,温度50℃,底物浓度6%,酶用量([E]/[S])3%,作用时间4h。选择D3520型大孔树脂对水解产物进行脱盐精制,脱盐率91.2%,肽回收率89.3%,ACE抑制活性提高了28.5%,大豆分离蛋白ACE抑制肽混合物分子质量主要分布为200-720,在pH3-10,溶解性达98.1%以上,且稳定性好。     

中试规模酶解制备的大豆低聚肽中抗氧化肽和ACE抑制肽的分离和鉴定

本研究开发了一种通过中试规模制备大豆低聚肽的方法,制备出的大豆低聚肽具有较高的蛋白含量（91.45%）和较低的分子量（84.37%的分子量小于1000 u）。测定了大豆低聚肽的抗氧化和血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性,然后利用反相高效液相色谱对其进行分离纯化,收集六个主要的液相组分,分别命名为组分1~6,利用质谱仪对这些组分进行肽段结构鉴定。共鉴定出41个肽段结构,选择15个肽段进行抗氧化和ACE抑制活性评价。结果表明,大豆低聚肽中有两个新型抗氧化肽段和四个ACE抑制肽段。抗氧化肽段分别为：Tyr-Glu,8.61±0.42 mmol Trolox等同物/g样品;Asp-Tyr-Arg,6.53±0.34 mmol Trolox等同物/g样品;ACE抑制肽段分别为：Leu-Val-Arg,IC50=51.75 μM;Leu-Tyr,IC50=305.76 μM;Asp-Tyr-Arg,IC50=1082.95 μM;Asp-Phe,IC50=1106.04 μM。这些肽段大多数是从大豆中新发现的抗氧化肽段和ACE抑制肽段。大豆低聚肽和这些活性肽段可作为抗氧化或降血压物质用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

大豆分离蛋白ACE活性抑制肽的研究

研究了预处理条件对大豆分离蛋白水解效果的影响,热处理与微波辅助处理相结合能显著提高蛋白酶的水解效率.比较了6种酶解大豆蛋白产物的ACE抑制活性,选择碱性蛋白酶为最佳水解用酶,并优化了酶解条件.研究了8种大孔树脂对水解产物精制效果,结果表明:经D3520型大孔吸附树脂精制后,水解产物脱盐率89.4%,肽回收率90.6%,ACE抑制活性达84.1%.经HPLC法测定,大豆分离蛋白ACE活性抑制肽混合物分子质量主要分布在200～800 ku之间.     

如何提高食源性ACE抑制肽活性的探讨

就如何提高食源性ACE抑制肽的活性，分别对原料、蛋白酶和分离纯化方法等几方面的选择作了探讨。     

具有ACE抑制活性乳酸菌菌株的筛选与鉴定

以ACE抑制活性和蛋白水解活性为检测指标,选择138株乳酸菌为出发菌株,筛选出具有强ACE抑制活性的乳酸菌菌株.结果表明,筛选出具有强ACE抑制活性的4株乳酸菌,其中3株菌为瑞士乳杆菌,1株菌为干酪乳杆菌.瑞士乳杆菌KLDS1.0485和干酪乳杆菌KLDS1.0486比例为1:1,制成的发酵乳ACE抑制活性可达到61.55%.因此,组合瑞士乳杆菌KLDS1.0485和干酪乳杆菌KLDS1.0486可作为制备乳源ACE抑制肽的优良菌株.     

发酵大豆豆粕水提物分离纯化ACE抑制活性小肽

本文开发了一种利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵大豆豆粕并结合多级超滤、纳滤配合凝胶渗透色谱(GFC)和液相色谱(HPLC)分离纯化具有血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性的小肽的方法。利用色谱法从发酵豆粕超滤提取液中分离纯化大豆小肽,用氨基酸序列分析仪PPSQ-21和基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱基质(MALDI-TOF-TOF/MS)定性,再用标准固相肽合成法(SPPS)合成小肽,用HPLC法测定其ACE 抑制活性,并对小肽进行Sprague-Dawley Rat大鼠的心血管离体实验。结果表明,超滤后得到不同分子量滤液F1(1000~10000 Da)、F2(500~1000 Da)、F3(<500 Da)均具有不同程度的ACE 抑制活性且分子量最小的F3(<500 Da)组分最强。从F3组分中分离纯化了两个ACE 抑制活性小肽,HAGR和CGAAP,在相同浓度(2 mg/mL)下其抑制率分别为34.99%和77.79%,后者抑制活性高于F3组分。离体实验的结论同样证实,大豆提取小肽具有舒张已被收缩的血管环的活性,但活性强度与ACE抑制活性不直接相关。实验证明,枯草芽孢杆菌配合超滤的方式可以从大豆发酵物中制备具有血管生物活性的组分,其生物活性可能来源于这种组分中的部分小肽。     

乳蛋白源ACE抑制肽的研究进展

血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)在血压调节方面起着重要作用.目前已从乳蛋白质中分离出多种ACE抑制肽.本文综述了ACE抑制肽的降压原理、结构特点、分离提纯、活性检测方法和乳蛋白源ACE抑制肽的国内外最新研究进展,并对其应用前景进行了展望.     

ACE抑制肽的生理功能和研究进展

血管紧张素转化酶(ACE)在人体血压调节方面起着重要的生理作用.近年来天然食品来源的ACE抑制肽已成为生物活性肽研究领域的热点.ACE抑制肽通过抑制ACE活性起降血压作用.文章综述了ACE抑制肽的作用机制、结构特点、评价方法和研究进展.     

具有ACE抑制活性的大豆肽的RP-HPLC分离和结构鉴定

在优化RP-HPLC洗脱条件的基础上，对经大孔吸附树脂DA201-C、凝胶过滤色谱Sephadex G-15分离得到的ACE抑制活性大豆肽组分进行进一步的纯化。在分离得到的11个组分中，峰9的ACE抑制活性最高，在0．2mg／mL．的浓度下，其ACE抑制率达到96．92％。分析型RP—HPLC纯化组分9得到三个组分，其中组分9-Ⅰ具有最高的ACE抑制活性，为98．46％，其含量约占组分9的50％以上。经过LC-MS序列分析，降血压组分9-Ⅰ的分子质量为772．4，有三种可能的结构：VISTGAEP、VLSTGAEP和ANSAGTVGP。     

牡蛎功能短肽的制备及ACE抑制活性

以新鲜无壳牡蛎为原料,采用酶水解的方法制备牡蛎短肽,经SephadexG 15分离,并用HPLC测定其相对分子质量分布,通过HPLC法定量马尿酸测定各组分的ACE(血管紧张素转化酶)抑制活性。结果表明,牡蛎水解液中相对分子质量较大和较小部分的ACE抑制活性偏低,只有相对分子质量在一定范围内的短肽,对ACE具有较好的抑制作用,质量浓度为0.4mg/mL的牡蛎功能短肽的ACE抑制率为51.4%.     

蚕蛹源ACE抑制肽的稳定性和抑制ACE动力学

研究了温度、pH、干燥方式和体外肠道酶消化对蚕蛹源ACE抑制肽稳定性的影响,并通过Lineweaver-Burk双倒数曲线作图和紫外光谱初步探讨了蚕蛹源ACE抑制肽对ACE的抑制机理。结果表明:蚕蛹源ACE抑制肽在高温、酸性和碱性条件下不稳定,易失活;冷冻干燥和喷雾干燥对蚕蛹源ACE抑制肽的活性影响较小;蚕蛹源ACE抑制肽对胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶具有较强的抗消化能力,经胃蛋白酶、胰蛋白酶和α-胰凝乳蛋白酶共同消化后,蚕蛹源ACE抑制肽仍能保留初始活性的94.0%;蚕蛹源ACE抑制肽竞争性抑制ACE,其抑制常数(Ki)为0.06 mg/mL;ACE被蚕蛹源ACE抑制肽抑制后,ACE在240～280 nm附近的紫外吸光值明显增加,初步揭示了蚕蛹源ACE抑制肽抑制ACE活性时,ACE的分子结构发生了改变。     

酶解丝素蛋白制备ACE抑制肽的研究

本研究首次探讨利用Alcalase酶解丝素蛋白制备高活性ACE抑制肽.以水解度为主要评价指标,研究了温度、浓度、pH、加酶量以及反应时间对酶解反应的影响.分析了不同水解度下的酶解产物与ACE体外抑制活性、肽得率和蛋白回收率的关系.确定了制备ACE抑制肽的最佳酶解反应DH值为17.12％,此时所得丝素蛋白肽的肽得率为50...     

魔芋ACE抑制肽的分离纯化及活性检测

利用碱溶酸沉法从魔芋飞粉中提取魔芋蛋白,以魔芋蛋白为原料,利用碱性蛋白酶酶解制备魔芋ACE抑制肽粗品;其粗品通过超滤法除去大分子杂质,再经过Sephadex G-15柱层析分离,最后经过RP-HPLC纯化后得到纯度较高的魔芋ACE抑制肽,并且对超滤膜进行选择、Sephadex G-15柱层析分离进行条件优化;以马尿酸含量为指标,紫外分光光度法测其活性。实验结果表明:选择规格为1 kDa超滤膜;Sephadex G-15最佳分离条件为浓度为120 mg/mL、流速为0.8 mL/min、上样量为1.0 mL;经过RP-HPLC纯化后得到魔芋ACE抑制肽抑制率可达到92.85%。空白液中Hip含量为22.50 mg,反应液中Hip含量为9.22 mg,说明魔芋ACE抑制肽抑制活性较好。     

花生ACE抑制活性肽的分离纯化与结构鉴定

本实验研究了花生水酶法提油中的另一产物--花生肽的抑制血管紧张素转换酶(Angiotcnsin converting enzyme,ACE)活性,并对其中ACE活性抑制率最高的肽进行了分离纯化和结构鉴定.该组分的氨基酸序列为Tyr-Gly-Asn-Leu-Tyr.