转基因番木瓜pUC57-Papaya质粒标准分子的构建与适用性研究

构建了含番木瓜2个内标准基因、4个筛选靶标及3个转化体特异性片段的质粒分子pUC57-Papaya,进行了适用性验证实验。应用普通PCR和实时荧光定量PCR对其进行互换性评估;使用质粒分子对2个样品进行转基因含量测定。结果显示：质粒分子全部9个目的片段按照设计排列,序列完全一致;全部9个基因片段普通PCR和实时荧光PCR方法均能正确扩增得到预期结果,特异性、灵敏度与基因组DNA一致;全部9个基因构建标准曲线做定量测试时,与基因组DNA标准曲线斜率无显著差异,线性相关系数均大于0.99,其中内标准基因Papain、NOS终止子、YK1601与55-1事件特异性片段的截距无差异;利用质粒分子测量2个样品的Papain、NOS终止子、YK1601与55-1事件特异性片段拷贝数,计算转基因含量,结果与基因组DNA一致;测序结果显示各片段拷贝数比值为1,质粒DNA拷贝数浓度为(2.54±0.10)×10⁶ copies/μL。构建的标准质粒分子可代替基因组DNA用于定量检测,也可作为转基因番木瓜定性和定量检测用标准物质。     

转基因玉米质粒分子国家标准样品的构建

本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品.研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等.均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定.采用PicoGreen DNA分子荧光定量方法定值标准样品.多家单位合作定值,确定标准样品的标准值及其不确定度.所研制的转基因玉米质粒分子标准样品获得了国家标准样品证书,适用于转基因产品的定量和定性测定.     

转基因油菜T45质粒分子标准物质协同实验研究

对转基因油菜T45荧光定量PCR方法的关键参数进行了方法验证,结果表明该方法适合于标准物质协同实验.选择6家实验室采用经过验证的方法对转基因油菜T45质粒分子标准物质进行了协同实验研究.通过比较分析转基因油菜T45基因DNA与质粒分子DNA两者产生的标准曲线的斜率(扩增效率)、线性拟合度和截距,发现转基因油菜T45基因...     

转基因棉花Mon15 985 质粒标准物质多家验证实验研究及不确定度分析

对转基因棉花Mon15985实时荧光定量PCR方法进行了方法确认,组织多家实验室进行协同实验验证,对该标准物质参考值进行测定。经统计分析,得出Mon15985质粒分子的参考值为1.02,扩展不确定度为0.04（k=2）。质粒分子与转基因棉花Mon15985的基因组DNA相比,无论是扩增斜率还是线性相关性,均具有可替代性,该棉花转基因Mon15985质粒标准物质,可作为分析检测标准提供相关部门使用。     

转基因玉米T25基体标准物质协同实验研究

对转基因玉米T25转化体特异性荧光定量PCR方法的关键参数进行了方法验证,选择了7家实验室采用经过验证的方法对3个水平的转基因玉米T25基体标准物质进行协同实验研究。通过比较分析各参与实验室的实验条件、标准曲线的参数,进一步证明该方法室间重复性好。经统计学分析各参与实验室的数据等精度,因此计算各实验室的总平均值做为标准物质的标准值。3个水平的基体标准物质的标准值和扩展不确定度（k=2）分别为1.17%±0.22%、2.17%±0.38%和9.81%±2.30%。     

转基因玉米NK603基体标准物质协同定值实验

对转基因玉米 NK603基体标准物质荧光定量PCR方法的关键参数进行了方法验证,结果表明该方法适合于标准物质量值协同实验。选择7家实验室采用经过验证的方法对3个水平的转基因玉米NK603基体标准物质量值进行了协同实验,通过分析比较各参与实验室的实验条件、标准曲线的参数,进一步证明该方法室间重复性较好。经统计学分析各参与实验室的数据等精度,3个水平基体标准物质的量值和扩展不确定度分别为0.57%±0.11%、1.21%±0.30%和4.92%±1.80%（k=2）。     

转基因玉米MON810基体标准物质Q-PCR量值协同实验研究

针对3种不同转基因含量水平的转基因玉米MON810基体标准物质,组织7家实验室对其量值采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法进行了协同实验研究,并对Q-PCR得到的参考值进行了不确定度分析.经过加权平均,转基因玉米MON810 A、B、C3个水平的基体标准物质转基因含量的Q-PCR方法参考值分别为0.51％±0.10...     

转基因水稻标准物质的研制

从水分含量、粒度大小、基因纯度等方面研究了候选材料的性质及其对转基因标准物质特性量值的影响.采用重量法进行了转基因水稻种子粉标准物质制备,建立了通过纳米银标记和电感耦合等离子体质谱技术相结合的均匀性检测技术方法.进行了转基因水稻种子粉标准物质的制备和均匀性、稳定性检验,并确定了最小取样量,分析了重量法配制值和荧光定量PCR测定值的一致性.该转基因水稻标准物质可应用于实验室质量控制、水稻转基因成分的定量检测等领域.     

转基因玉米TC1507基体标准物质协同实验及不确定度评定

7家实验室共同采用实时荧光定量PCR方法,对转基因玉米TC1507基体标准物质A、B、C3种含量水平的量值,进行了协同实验研究,并对得到的参考值进行了不确定度分析.实时荧光定量PCR方法协同实验结果表明,转基因玉米TC1507基体标准物质转基因含量的参考值分别为0.41％±0.22％、1.1％±0.4％、4.5％±1....     

转基因水稻克螟稻标准物质的初制备

建立了转基因水稻克螟稻基体标准物质的初制备体系.按照0.5％、1％、2％、5％的质量比分别加入阳性粉末和阴性粉末,配制成4个水平的基体标准物质.实验结果表明,所选的阳性粉末和阴性粉末的水分分别为3.288％和4.039％,粒径均小于200 μm.从标识“金粉”的检测结果也可以看出,4个水平的基体标准物质均具有较好的均匀...     

亚微米生物功能磁性复合微球的构建及在质粒DNA捕获中的应用

采用分散聚合法，以Mn-Zn铁磁体为磁铁，苯乙烯－丙烯酸共聚物为高分子壳层，合成了表面带羧基的磁性高分子微球。通过比较微球与有机试剂（酚／氯仿）纯化分离质粒DNA的效果，得出结论：前者具有安全、低耗、快速、高效及不接触有毒试剂的特点。     

动态不确定度的估算方法和应用实例

提出动态校准结果的动态不确定度,并说明其物理意义、估算方法和步骤。并给出对压力和力两种传感器的多次动态校准结果以及估算其动态不确定度的应用实例。     

TUB2基因重组质粒的构建、鉴定及其在毛壳菌中的转化

根据苯并咪唑类杀菌剂抗性基因的核酸序列 ,在其阅读框架外的上、下游设计一对特异性引物 ,并在其 5′ 端分别加上PstI位点。以pRB12 9质粒为模板 ,PCR扩增得到一条长约 1 4kb的片段 ,经酶切鉴定证明是TUB2基因。将此PCR产物经消化后与同样酶切的pTA质粒连接 ,构建出 pTA TUB2质粒并转化大肠杆菌。再以pTA TUB2质粒为模板 ,PCR扩增该目的基因 ,通过对其核苷酸序列分析证明构建的质粒是含TUB2基因的 pTA TUB2质粒。利用PEG方法 ,将该质粒转化毛壳菌 ,使得对多菌灵非常敏感的毛壳菌能够在 30 0 μg/ml多菌灵的培养基上正常生长 ,其抗药性提高 30 0倍以上 ,且转化稳定性试验表明 ,其抗药性在非选择性培养基上连续培养 10代保持不变。结果表明质粒pTA TUB2对毛壳菌的转化率为 2 7/ (2× 10 5)。     

碳纤维增强复合材料中改性木质素的应用

目的 解决碳纤维增强环氧树脂复合材料中由双酚A合成的环氧树脂成本高、危害环境与健康、耐化学性差的问题,使木质素代替双酚A合成环氧树脂来制备碳纤维复合材料。方法 通过综述木质素在环氧树脂合成中的改性方法与合成方案的研究进展,分析碳纤维复合材料成型工艺的优缺点。结论 采用不同方法对木质素进行化学改性,可在降低成本的同时提高热稳定性与耐化学性等各项性能。用改性或降解木质素来合成碳纤维复合材料的环氧树脂基体为碳纤维增强材料的研究提供了新的研究方向,对碳纤维增强材料降低成本、提高性能和促进行业发展都具有积极作用。     

改性有机硅及其竹基材料的制备条件

通过试验筛选出合成有机硅树脂的较佳条件,并且通过聚氨酯与有机硅树脂的共混得到改性有机硅树脂,将所得改性有机硅树脂应用于竹基材料的表面涂装,以获取最佳的改性有机硅竹基材料的制备条件.结果表明：有机硅树脂的合成最佳条件为以苯基三甲氧基硅烷与甲基二甲氧基硅烷为合成单体,且两单体的体积之比为1.5,水解温度为55 ℃,水解时间为2.5 h,w（HCl）：w（Si——OR）,w（H2O）：w（Si——OR）,w（H2O）：w（二甲苯）：w（丙酮）分别为0.002 00,10：3和8：4：1;改性硅树脂竹基材料的最佳制备条件为聚氨酯与硅氧烷的添加质量分数为树脂总质量的12.5%,固化剂用量为树脂总质量的24.5%,并于80 ℃条件下烘烤3 h;红外光谱分析表明,有机硅树脂在—Si—O—Si—有较宽的吸收峰;耐化学腐蚀性试验结果表明,所合成的有机硅改性树脂漆膜具有很好的耐化学腐蚀性能.     

Application of Genetic Algorithms in Texture Analysis and Optimization

The genetic algorithms method (GAM) is a modern computer technique based on some ideas taken from biological evolution theory. The GAM is especially useful in a study of problems being not completely determined. They are, e.g., problems having a few but not very different solutions or problems without a strict (exact) solution. The last situation may occur if it is enough to find a good enough solution but not necessarily the best one. In GAM approach, it is not necessary to know a priori a general scheme of problem solution; however, it is important to have a procedure estimating the quality of a solution. This procedure is necessary to eliminate some solutions and to accept another ones. In the last years, GAM was applied with success in different areas of science (e.g., sociology, construction engineering, artificial intelligence and many others). The present authors have applied GAM in crystallographic texture analysis: the orientation distribution function (ODF) was calculated from a set of measured pole figures. The quality of obtained results was very good; however, the calculation time and memory space were relatively high. The main reason of this situation was the use of spherical harmonic function series for the ODF representation. An important simplification of the calculation scheme (and of calculation time and memory space) can be obtained if ODF is represented by a sum of a few Gauss-type functions. The quality of solutions in this new approach is still very correct. The above-mentioned improved GAM scheme was also used to find an optimal crystallographic texture that optimizes the elastic properties of material. By using this approach the Young modulus can be maximised or minimised along a given sample direction.     

基于车型相似度的装配线排序

通过总结混流装配线排序问题,提出了一种新的装配线排序模型.根据装配车型的关键件不同,引入车型相似度的概念,应用遗传算法解决以最大化相似度总和为目标的混流装配线优化排序问题.经实践中应用,关键件装配更换次数减少了70%.     

聚甲醛及其改性产品在汽车工业中的应用前景

介绍了聚甲醛及其改性产品的特性和在汽车工业中的应用领域,总结了汽车工业对聚甲醛产品的要求和聚甲醛改性研究方向,阐述了聚甲醛及其改性产品在汽车工业中的应用前景,展望了汽车工业用聚甲醛产品的研发中应注重的方向.